专题八生物技术实践第讲酶的应用和生物技术在其他方面的应用

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1、高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳 (2011,15)下列有关下列有关酶酶的制的制备备和和应应用的叙述,正确的是用的叙述,正确的是()。 A酶酶解法和吸水解法和吸水涨涨破法常用于制破法常用于制备备微生物的胞内微生物的胞内酶酶 B透析、透析、电电泳和酸解等方法常用于泳和酸解等方法常用于酶酶的分离与的分离与纯纯化化 C棉棉织织物不能使用添加物不能使用添加纤维纤维素素酶酶的洗衣粉的洗衣粉进进行洗行洗涤涤 D多多酶酶片中的胃蛋白片中的胃蛋白酶酶位于片位于片剂剂的核心的核心层层利用酶解法和吸水涨破法使细胞解体,用于制备胞内酶;酶的纯化利用酶解法和吸水涨破法使细胞解体

2、,用于制备胞内酶;酶的纯化 和分离的方法有透析法、离心沉降法和电泳法;纤维素酶能去除棉纺织品和分离的方法有透析法、离心沉降法和电泳法;纤维素酶能去除棉纺织品 表面浮毛,平整织物表面,故可用添加纤维素酶的洗衣粉洗涤棉织物;多表面浮毛,平整织物表面,故可用添加纤维素酶的洗衣粉洗涤棉织物;多 酶片中的胃蛋白酶位于片剂的最外层,保持其他酶在胃中不被破坏。酶片中的胃蛋白酶位于片剂的最外层,保持其他酶在胃中不被破坏。 答案答案A第第2讲酶的应用和生物技术在其他方面的应用讲酶的应用和生物技术在其他方面的应用一、理解能力一、理解能力1.高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳2

3、(2011广东理综广东理综,5)以下关于猪血以下关于猪血红红蛋白提蛋白提纯纯的描述,不正确的是的描述,不正确的是 ()。 A洗洗涤红细涤红细胞胞时时,使用生理,使用生理盐盐水可防止水可防止红细红细胞破裂胞破裂 B猪成熟猪成熟红细红细胞中缺少胞中缺少细细胞器和胞器和细细胞核,提胞核,提纯时杂纯时杂蛋白蛋白较较少少 C血血红红蛋白的蛋白的颜颜色可用于凝胶色色可用于凝胶色谱谱法分离法分离过过程的程的监测监测 D在凝胶色在凝胶色谱谱法分离法分离过过程中,血程中,血红红蛋白比分子量蛋白比分子量较较小的小的杂杂蛋白移蛋白移动动慢慢 解析解析猪成熟红细胞中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,是猪成熟红细胞

4、中缺少细胞器和细胞核,提纯时杂蛋白较少,是 提提纯纯血血红红蛋白的理想材料。提蛋白的理想材料。提纯纯血血红红蛋白分四步:蛋白分四步:红细红细胞的洗胞的洗涤涤、血、血 红红蛋白的蛋白的释释放、分离血放、分离血红红蛋白溶液、透析,其中洗蛋白溶液、透析,其中洗涤红细涤红细胞胞时时,要用生,要用生 理理盐盐水反复洗水反复洗涤涤,既要将,既要将红细红细胞洗胞洗涤涤干干净净,又要不破坏,又要不破坏红细红细胞,然后再胞,然后再 用蒸用蒸馏馏水和甲苯使水和甲苯使红细红细胞破裂,胞破裂,释释放出血放出血红红蛋白。分离提蛋白。分离提纯纯血血红红蛋白蛋白时时 用凝胶色用凝胶色谱谱法,是根据相法,是根据相对对分子分子

5、质质量的大小来分离蛋白量的大小来分离蛋白质质,相,相对对分子分子质质 量大的蛋白量大的蛋白质质移移动动速度速度较较快;血快;血红红蛋白的蛋白的颜颜色可用于色可用于观观察察红红色区色区带带的移的移 动动情况,并据此判断分离效果。故情况,并据此判断分离效果。故D不正确。不正确。 答案答案D高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳3(2011江苏生物江苏生物,19)在利用在利用鸡鸡血血进进行行“DNA的粗提取与的粗提取与鉴鉴定定”的的实验实验 中,相关叙述正确的是中,相关叙述正确的是()。 A用蒸用蒸馏馏水将水将NaCl溶液溶液浓浓度度调调至至0.14 mol/L,滤

6、滤去析出物去析出物 B调节调节NaCl溶液溶液浓浓度或加入木瓜蛋白度或加入木瓜蛋白酶酶,都可以去除部分,都可以去除部分杂质杂质 C将将丝丝状物溶解在状物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺溶液中,加入二苯胺试剂试剂即呈即呈蓝蓝色色 D用菜花替代用菜花替代鸡鸡血作血作为实验为实验材料,其材料,其实验实验操作步操作步骤骤相同相同 解析解析用蒸馏水将用蒸馏水将NaCl溶液浓度调至溶液浓度调至0.14 mol/L时,滤取析出物;将时,滤取析出物;将 丝状物溶解在丝状物溶解在0.015 mol/L的的NaCl中,加入二苯胺试剂,需沸水浴加中,加入二苯胺试剂,需沸水浴加 热几分钟,才呈蓝色;用

7、菜花替代鸡血为实验材料,需要对材料的热几分钟,才呈蓝色;用菜花替代鸡血为实验材料,需要对材料的 细胞壁进行处理。调节细胞壁进行处理。调节NaCl溶液浓度改变不同物质在其中的溶解溶液浓度改变不同物质在其中的溶解 度,加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质,故度,加入木瓜蛋白酶分解蛋白质都可以去除部分杂质,故B正确。正确。 答案答案B高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳4(2010江苏生物江苏生物,25)(多多选选)图图1表示制表示制备备固定化酵母固定化酵母细细胞的有关操胞的有关操 作,作,图图2是利用固定化酵母是利用固定化酵母细细胞胞进进行酒精行酒精发发酵

8、的示意酵的示意图图,下列叙述正,下列叙述正 确的是确的是 () A刚刚溶化的海藻酸溶化的海藻酸钠应钠应迅速与活化的酵母菌混合制迅速与活化的酵母菌混合制备备混合液混合液 B图图1中中X溶液溶液为为CaCl2溶液,其作用是使海藻酸溶液,其作用是使海藻酸钠钠形成凝胶珠形成凝胶珠 C图图2发发酵酵过过程中程中搅搅拌的目的是拌的目的是为为了使培养液与酵母菌充分接触了使培养液与酵母菌充分接触 D图图1中制中制备备的凝胶珠用蒸的凝胶珠用蒸馏馏水洗水洗涤涤后再后再转转移到移到图图2装置中装置中二、获取信息的能力二、获取信息的能力高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳解析解析溶

9、化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合,溶化的海藻酸钠应冷却至室温后与活化的酵母菌混合,A项错误。项错误。海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入海藻酸钠与酵母菌混合液应滴入CaCl2溶液中,以制备凝胶珠;凝胶珠用溶液中,以制备凝胶珠;凝胶珠用蒸馏水冲洗蒸馏水冲洗23次后,可转移到发酵装置中;搅拌可使酵母菌与培养液次后,可转移到发酵装置中;搅拌可使酵母菌与培养液充分接触,有利于发酵的顺利进行,故充分接触,有利于发酵的顺利进行,故B、C、D三个选项正确。三个选项正确。答案答案BCD高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳5(2010江苏生物江苏生物,32)某生物某生物兴

10、兴趣小趣小组组开展开展DNA粗提取的相关探究活粗提取的相关探究活 动动,具体步,具体步骤骤如下:如下: 材料材料处处理:称取新理:称取新鲜鲜的花菜、辣椒和蒜黄各的花菜、辣椒和蒜黄各2份,每份份,每份10 g。剪碎后。剪碎后 分成两分成两组组,一,一组组置于置于20 、另一、另一组组置于置于20 条件下保存条件下保存24 h。 DNA粗提取:粗提取: 第一步:将上述材料分第一步:将上述材料分别别放入研放入研钵钵中,各加入中,各加入15 mL研磨液,充分研研磨液,充分研 磨。用两磨。用两层纱层纱布布过滤过滤,取,取滤滤液液备备用。用。 第二步:先向第二步:先向6只小只小烧烧杯中分杯中分别别注入注入

11、10 mL滤滤液,再加入液,再加入20 mL体体积积分分 数数为为95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒的冷酒精溶液,然后用玻璃棒缓缓缓缓地向一个方向地向一个方向搅搅拌,使絮拌,使絮 状物状物缠绕缠绕在玻璃棒上。在玻璃棒上。 第三步:取第三步:取6支支试试管,分管,分别别加入等量的加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮溶液溶解上述絮 状物。状物。三、实验与探究能力三、实验与探究能力高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳DNA检测检测:在上述:在上述试试管中各加入管中各加入4 mL二苯胺二苯胺试剂试剂,混合均匀后,置于沸,混合均匀后,置于沸水中加水中加热热5

12、 min,待,待试试管冷却后比管冷却后比较较溶液的溶液的颜颜色深浅,色深浅,结结果如下表。果如下表。 (注:注:“”越多表示越多表示蓝蓝色越深色越深)分析上述分析上述实验过实验过程,回答下列程,回答下列问题问题:(1)该该探究性探究性实验课题实验课题名称是名称是_。(2)第二步中第二步中“缓缓缓缓地地”搅搅拌,拌,这这是是为为了减少了减少_。(3)根据根据实验结实验结果,得出果,得出结论结论并分析。并分析。结论结论1:与:与20 相比,相同相比,相同实验实验材料在材料在20 条件下保存,条件下保存,DNA的提的提取量取量较较多。多。结论结论2:_。材料保存温度材料保存温度花菜花菜辣椒辣椒蒜黄蒜

13、黄20 20 高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳针对结论针对结论1,请请提出合理的解提出合理的解释释:_。(4)氯氯仿密度大于水,能使蛋白仿密度大于水,能使蛋白质变质变性沉淀,与水和性沉淀,与水和DNA均不相溶,且均不相溶,且对对DNA影影响极小。响极小。为为了了进进一步提高一步提高DNA纯纯度,依据度,依据氯氯仿的特性,在仿的特性,在DNA粗提取第三步的粗提取第三步的基基础础上上继续继续操作的步操作的步骤骤是:是:_,然后用体,然后用体积积分数分数为为95%的冷酒精溶液使的冷酒精溶液使DNA析出。析出。解析解析(1)(1)该实验中把不同的材料在不同条件该

14、实验中把不同的材料在不同条件( (温度温度) )下处理,目的是探究不同材下处理,目的是探究不同材料和不同保存温度对料和不同保存温度对DNADNA提取量的影响。提取量的影响。(2)(2)“缓缓地缓缓地”搅拌是为了减少搅拌是为了减少DNADNA断裂。断裂。(3)(3)分析表格可得出结论:分析表格可得出结论:相同材料在相同材料在20 20 条件下保存,条件下保存,DNADNA的提取量较多。的提取量较多。原因可能是低温抑制了原因可能是低温抑制了DNADNA酶的活性,酶的活性,DNADNA降解速度慢。降解速度慢。等质量的不同实验材等质量的不同实验材料,在相同保存温度下,从蒜黄中提取的料,在相同保存温度下

15、,从蒜黄中提取的DNADNA最多。最多。(4)(4)依据氯仿的特性,可在依据氯仿的特性,可在第三步得到的溶液中加入氯仿,使蛋白质变性。第三步得到的溶液中加入氯仿,使蛋白质变性。答案答案(1)探究不同材料和不同保存温度探究不同材料和不同保存温度对对DNA提取量的影响提取量的影响(2)DNA断裂断裂(3)等等质质量的不同量的不同实验实验材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的材料,在相同的保存温度下,从蒜黄提取的DNA量最多量最多低温抑制了相关低温抑制了相关酶酶的活性,的活性,DNA降解速度慢降解速度慢(4)将第三步将第三步获获得的溶液与等量得的溶液与等量的的氯氯仿充分混合,静置一段仿充分混合,静置

16、一段时间时间,吸取上清液,吸取上清液高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳6(2011上海生物上海生物,(五五)回答下列关于微生物和回答下列关于微生物和酶酶的的问题问题。 环环境境污污染物多聚染物多聚联联苯苯难难以降解,研究以降解,研究发现联发现联苯降解菌内的苯降解菌内的联联苯水解苯水解酶酶是催化多是催化多 聚聚联联苯降解的关苯降解的关键键酶酶。 下列培养基中能有效分离下列培养基中能有效分离联联苯降解菌的是苯降解菌的是_,原因是,原因是 _。 A培养基培养基(g/L):某生:某生长长因子因子2.0,(NH4)2SO4 2.0,K2HPO4 3.0,MgSO4

17、1.0, pH7.4,多聚,多聚联联苯苯50 mL B培养基培养基(g/L):牛肉膏:牛肉膏10.0,蛋白,蛋白胨胨20.0,葡萄糖,葡萄糖20.0,NaCl 5.0,pH 7.4 C培养基培养基(g/L):某生:某生长长因子因子2.0,淀粉,淀粉20.0,NH4NO3 2.5,MgCl2 0.5, K2HPO43.0,多聚,多聚联联苯苯50 mL,pH 7.4 进进一步研究一步研究发现发现,不同的金属离子,不同的金属离子对联对联苯水解苯水解酶酶的活性有一定影响,的活性有一定影响,结结果果见见下下 表:表:四、综合运用能力四、综合运用能力高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合

18、归纳核心整合归纳(1)依据表中依据表中结结果,金属离子果,金属离子_对该对该酶酶的活性有一定的促的活性有一定的促进进作用。金属离子作用。金属离子对对酶酶的活性有促的活性有促进进或抑制作用,可能的原因是或抑制作用,可能的原因是_ _。(2)通通过过酶酶工程可将工程可将联联苯水解苯水解酶酶用于生用于生产实产实践。践。酶酶工程通常包括工程通常包括酶酶的生的生产产、_、酶酶的固定化和的固定化和酶酶的的应应用等方面。用等方面。酶酶固定化的好固定化的好处处是是_ _。(3)下下图实线图实线表示表示联联苯水解苯水解酶酶催化的反催化的反应应速度与速度与酶酶浓浓度的关系,虚度的关系,虚线线表示在其他条件表示在其

19、他条件不不变变的情况下,底物的情况下,底物浓浓度增加一倍,反度增加一倍,反应应速度与速度与酶酶浓浓度的关系,能正确表示两者关度的关系,能正确表示两者关系的是系的是_。金属离子金属离子/mmolL1相相对对活性活性/%对对照照组组100Mn2123Co279Mg274高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳(4)红红球菌和假球菌和假单孢单孢菌都能降解多聚菌都能降解多聚联联苯,但研究苯,但研究发现发现以每克菌体以每克菌体计计算,算,两种菌降解多聚两种菌降解多聚联联苯的能力有所不同,苯的能力有所不同,对对此此现现象合理的假象合理的假设设是是_或或_。解析解析(1)A培

20、养基中只有多聚联苯一种碳源,只有联苯降解菌可以利用培养基中只有多聚联苯一种碳源,只有联苯降解菌可以利用这一种碳源而生存。因此,这一种碳源而生存。因此,A培养基可以作为分离联苯降解菌的选择培培养基可以作为分离联苯降解菌的选择培养基。养基。高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳(2)根据表格数据,当培养基中添加根据表格数据,当培养基中添加Mn2时,能使联苯水解酶的活性升高。金属离时,能使联苯水解酶的活性升高。金属离子是通过与酶结合后,改变酶的空间结构来影响酶活性的。子是通过与酶结合后,改变酶的空间结构来影响酶活性的。(3)酶具有专一性、高效性,酶催化后,酶分子结构

21、不改变,如果能利用酶工程将酶酶具有专一性、高效性,酶催化后,酶分子结构不改变,如果能利用酶工程将酶固定下来,便可以重复利用,使酶的催化反应连续进行。酶工程的操作包括酶的生固定下来,便可以重复利用,使酶的催化反应连续进行。酶工程的操作包括酶的生产、酶的分离纯化、酶的固定化和酶的应用等几个方面。产、酶的分离纯化、酶的固定化和酶的应用等几个方面。(4)影响酶促反应速度的因素有酶浓度、底物浓度和温度、影响酶促反应速度的因素有酶浓度、底物浓度和温度、pH等反应条件。在反应等反应条件。在反应条件适宜,酶量不足的情况下,增加底物量,酶促反应速度不增加,此时酶促反应条件适宜,酶量不足的情况下,增加底物量,酶促

22、反应速度不增加,此时酶促反应速度的限制因子是酶浓度。随着酶浓度的增加,当酶浓度不是酶促反应速度的限制速度的限制因子是酶浓度。随着酶浓度的增加,当酶浓度不是酶促反应速度的限制因子时,底物量增加,酶促反应速度增加。因子时,底物量增加,酶促反应速度增加。(5)红球菌和假单孢菌降解多聚联苯的能力不同的原因可能是两种菌内酶量不同,或红球菌和假单孢菌降解多聚联苯的能力不同的原因可能是两种菌内酶量不同,或者是两种菌内酶结构的不同致使酶活性不同。者是两种菌内酶结构的不同致使酶活性不同。答案答案A该该培养基中多聚培养基中多聚联联苯苯为为唯一碳源唯一碳源(1)Mn2金属离子与金属离子与酶酶结结合可以改合可以改变变

23、酶酶的空的空间结间结构构(尤其是活性部位的尤其是活性部位的结结构构)(2)酶酶的分离的分离纯纯化便于重复利用,能化便于重复利用,能连续连续进进行反行反应应(3)B(4)两种菌内两种菌内酶酶量不同两种菌内量不同两种菌内酶酶基因的基因的结结构构(酶酶结结构构)不同不同高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳 (1)酶酶活力活力测测定的一般原理和方法;定的一般原理和方法;(2)酶酶在食品制造和洗在食品制造和洗涤涤等方面的等方面的应应用;用;(3)植物的植物的组织组织培养;培养;(4)蛋白蛋白质质的提取和分离;的提取和分离;(5)PCR技技术术的基本操作和的基本操作和应

24、应用。用。进行本讲复习应从如下角度展开进行本讲复习应从如下角度展开 (1)从从实验实验的角度剖析每的角度剖析每项项技技术术,把握其原理、材料与器材、操作流程及注,把握其原理、材料与器材、操作流程及注意事意事项项等;等;(2)用用对对比的方法区分一些重要概念和方法;比的方法区分一些重要概念和方法;(3)用用联联系的系的观观点看点看待不同的技待不同的技术术,如固定化酵母,如固定化酵母细细胞等内容。胞等内容。专家箴言通过以上高考体验,可以归纳总结:高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳固定化酶和固定化细胞技术的比较固定化酶和固定化细胞技术的比较( (见下表见下表)

25、)更清晰考点一酶的研究与应用考试说明考试说明(1)酶在食品制造和洗涤等方面的应用酶在食品制造和洗涤等方面的应用/(2)制备和应用固定化酶制备和应用固定化酶类类型型固定固定酶酶的种的种类类适用方法适用方法优优点及不足点及不足实实例例固定固定化化酶酶_种种化学化学结结合法、合法、物理吸附法物理吸附法可反复利用,但可反复利用,但只催化只催化_或或_化学化学反反应应固定化葡萄糖固定化葡萄糖异构异构酶酶固定化固定化细细胞胞一系列一系列_成本低、操作容成本低、操作容易,但反易,但反应应效果效果_固定化酵母固定化酵母细细胞胞一一一种一种一一类类包埋法包埋法下降下降高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范

26、训练核心整合归纳核心整合归纳1 1酶活性酶活性( (酶活力酶活力) )测定的一般原理和方法测定的一般原理和方法 (1)酶酶活性活性(酶酶活力活力)的含的含义义:酶酶的活性的活性(酶酶活力活力)是指是指酶酶催化一定化学反催化一定化学反应应的能的能 力。力。 (2)酶酶活性活性(酶酶活力活力)测测定的一般原理和方法:定的一般原理和方法:酶酶的活性的活性(酶酶活力活力)通常以通常以单单位位时时 间间内底物的消耗量或者在内底物的消耗量或者在单单位位时间时间内内产产物的生成量来表示。物的生成量来表示。2影响酶活性的因素、酶的用量及应用实验探究时注意的问题影响酶活性的因素、酶的用量及应用实验探究时注意的问

27、题 (1)实验设计时实验设计时要遵循要遵循单单一一变变量原量原则则和和对对照原照原则则,严严格控制无关格控制无关变变量。量。 (2)探究不同温度探究不同温度(或或pH)对对酶酶活性的影响活性的影响时时,温度,温度(或或pH)作作为为自自变变量,通常通量,通常通 过设过设置合理的梯度来确定最适置合理的梯度来确定最适值值。最适。最适值值是通是通过过比比较较相同相同时间时间内内获获得的得的产产量量 或效果来确定的。或效果来确定的。 心堂亮 高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳温度和温度和pH在很大程度上在很大程度上对对酶酶的构象会的构象会产产生巨大的影响,温生巨大

28、的影响,温度度过过高或高或pH过过高或高或过过低都会使其失去活性,其曲低都会使其失去活性,其曲线线如如图图。(3)探究最适温度探究最适温度时时,pH为为无关无关变变量,探究最适量,探究最适pH时时,温,温度最好度最好为为最适温度。最适温度。(4)探究果胶探究果胶酶酶的最适用量的最适用量时时,所,所测测出的最适用量指在本出的最适用量指在本实验实验的温度、的温度、pH等条件下等条件下测测出的,因而果胶出的,因而果胶酶酶的最适用量的最适用量应标应标明温度和明温度和pH。(5)探究加探究加酶酶洗衣粉的最适温度要根据生活中的洗衣粉的最适温度要根据生活中的实际实际情况,合理情况,合理设设置温度置温度梯度。

29、梯度。(6)在使用加在使用加酶酶洗衣粉洗衣粉时时不但要考不但要考虑虑最佳洗最佳洗涤涤效果条件,效果条件,还还要考要考虑虑到到酶酶的的专专一性和洗一性和洗涤涤成本的成本的问题问题。高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳 .果胶果胶酶酶能能够够分解植物分解植物细细胞之胞之间间的果胶,使榨取果汁的果胶,使榨取果汁变变得更容易,果胶得更容易,果胶被分解后,被分解后,浑浊浑浊的果汁会的果汁会变变得澄清。得澄清。现现有磨有磨浆浆机、机、质质量分数量分数为为2%的果胶的果胶酶酶溶液、蒸溶液、蒸馏馏水、一定水、一定浓浓度的度的盐盐酸和酸和氢氢氧化氧化钠钠溶液等溶液等实验实验材

30、料,下表是某小材料,下表是某小组组利用上述材料利用上述材料进进行的有关行的有关实验实验(“/”表示不加表示不加)。强信心 【例例1】编编号号项项目目试试管管甲甲乙乙丙丙丁丁1在在试试管中加管中加入苹果泥入苹果泥2 mL2 mL2 mL2 mL22 mL/2 mL2 mL3加入不同的加入不同的液体液体2 mL蒸蒸馏馏水水2 mL蒸蒸馏馏水水2 mL盐盐酸酸2 mL氢氢氧化氧化钠钠溶液溶液4摇摇匀,恒温匀,恒温处处理理15 min15 min15 min15 min高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳请请回答下列回答下列问题问题。(1)表中表中处处的内容是的内容

31、是_。(2)若要若要验证验证果胶果胶酶酶的作用,的作用,应应把把_两个两个试试管同管同时时取出并取出并过滤过滤相同相同时间时间,观观察并比察并比较较,预预期的期的实验现实验现象与象与结结果是果是_。(3)比比较试较试管甲、丙、丁可知,其管甲、丙、丁可知,其实验实验目的是目的是_ _。为为确保确保实验实验成功,成功,请请将表中的将表中的编编号正确排序:号正确排序:_。.在日常洗在日常洗涤涤中,普通洗衣粉已中,普通洗衣粉已经经逐逐渐渐被加被加酶酶洗衣粉所代替,加洗衣粉所代替,加酶酶洗衣粉中的碱洗衣粉中的碱性蛋白性蛋白酶酶、纤维纤维素素酶酶、脂肪、脂肪酶酶、淀粉、淀粉酶酶等可以将粘附在衣物上的奶等可

32、以将粘附在衣物上的奶渍渍、汗、汗渍渍、血、血渍渍等快速、等快速、彻彻底地清除掉,因此非常受人底地清除掉,因此非常受人们们的的欢欢迎。迎。(1)某班同学某班同学为为探究某复合加探究某复合加酶酶洗衣粉的最佳洗洗衣粉的最佳洗涤涤温度,温度,设计设计了一个探究了一个探究实验实验,该该实验实验的自的自变变量量应为应为_。实验过实验过程中,不同的小程中,不同的小组选组选用了含不同用了含不同污污染物的衣染物的衣物作物作为实验为实验材料,最材料,最终结终结果果汇总汇总如下表:如下表:高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳不同温度下除去不同不同温度下除去不同污渍污渍所需的所需的

33、时间时间/min由上表可知,在洗由上表可知,在洗涤涤含不同含不同污污染物的衣物染物的衣物时时要要_。(2)从生物体中提取出的从生物体中提取出的酶酶首先要首先要检测检测_,以便更好地将,以便更好地将酶酶应应用于用于实实践。践。(3)加加酶酶洗衣粉中的洗衣粉中的酶酶是用特殊的化学物是用特殊的化学物质质包裹的,遇水后包裹包裹的,遇水后包裹层层很快溶解,很快溶解,释释放出来的放出来的酶酶迅速迅速发挥发挥催化作用,催化作用,请说请说明明这这是否运用了是否运用了酶酶的固定化技的固定化技术术及其理由。及其理由。_。水温水温/51525354555657585植物油植物油2251109878493522461

34、09牛奶牛奶200103704211344991100浆浆糊糊1439965312163497148高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳审题关键审题关键“盐盐酸酸”“氢氢氧化氧化钠钠”“果胶果胶酶酶”“最佳洗最佳洗涤涤温度温度”“复合复合酶酶”“包裹包裹”。命题来源命题来源pH对果胶酶的影响、温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响、酶的固定对果胶酶的影响、温度对加酶洗衣粉洗涤效果的影响、酶的固定化。化。思路分析思路分析.从题干中的表格上看,甲、乙试管是探究果胶酶的催化作用;甲、从题干中的表格上看,甲、乙试管是探究果胶酶的催化作用;甲、丙、丁三个试管是探究丙、丁三个试

35、管是探究pH对酶活性的影响;操作时,先将酶分别放在不同的对酶活性的影响;操作时,先将酶分别放在不同的环境条件下,然后再加入底物,操作顺序若改变,会影响实验结果。环境条件下,然后再加入底物,操作顺序若改变,会影响实验结果。.(1)探究温度对酶活性的影响时,自变量应为温度。由表格可知,清除不同污探究温度对酶活性的影响时,自变量应为温度。由表格可知,清除不同污染物时所需的最适温度不同,因此洗涤含不同污染物的衣物时应选用不同温度染物时所需的最适温度不同,因此洗涤含不同污染物的衣物时应选用不同温度的水。的水。(2)只有酶具有活性才能将酶应用于实践。只有酶具有活性才能将酶应用于实践。(3)固定化酶需要把酶

36、固定在固定化酶需要把酶固定在一定载体上,使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,可以反复利用,本题一定载体上,使酶既能与反应物接触,又能与产物分离,可以反复利用,本题中未运用固定化酶技术。中未运用固定化酶技术。答案答案.(1)质质量分数量分数为为2%的果胶的果胶酶酶溶液溶液(2)甲与乙甲果汁比乙澄清度高甲与乙甲果汁比乙澄清度高(3)探究探究pH对对果胶果胶酶酶活性的影响活性的影响2、3、1、4.(1)温度使用不同温度的水温度使用不同温度的水(2)酶酶的活性的活性(3)未运用未运用酶酶的固定化技的固定化技术术,因,因为为酶酶未固定在不溶于水的未固定在不溶于水的载载体上,也不能重复利用体上,也不能重

37、复利用高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳1植物茎的组织培养与花药植株的产生的比较植物茎的组织培养与花药植株的产生的比较(见下表见下表)更清晰考点二植物的组织培养技术考试说明考试说明植物的组织培养植物的组织培养全能性全能性再分化再分化光照光照高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳2.植物组织培养技术、微生物培养技术和无土栽培技术的比较植物组织培养技术、微生物培养技术和无土栽培技术的比较(见下表见下表) 三种技三种技术术中均需要一定的中均需要一定的营营养物养物质质,但,但营营养物养物质质的划分的划分标标准不同。准不同。离体离体

38、植物激素植物激素无菌无菌高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳原理:细胞的全能性原理:细胞的全能性(1)植物体内已分化的植物体内已分化的细细胞,在离体状胞,在离体状态态和一定的条件下,可以和一定的条件下,可以发发育成育成完整的植株,其完整的植株,其过过程如下:程如下:(2)影响植物影响植物组织组织培养的因素培养的因素a内因:植物的种内因:植物的种类类,同一种植物材料的年,同一种植物材料的年龄龄、保存、保存时间时间的的长长短、部短、部位等。位等。b外因:外因:MS培养基中的培养基中的营营养物养物质质和和pH、温度、光照等、温度、光照等环环境条件。境条件。c植物激

39、素:生植物激素:生长长素用量素用量/细细胞分裂素用量影响胞分裂素用量影响细细胞分裂、分化,胞分裂、分化,该该比比值较值较高高时时,有利于根的分化、抑制芽的形成;,有利于根的分化、抑制芽的形成;该该比比值较值较低低时时,有利于芽,有利于芽的分化、抑制根的形成;的分化、抑制根的形成;该该比比值值适中适中时时,促,促进进愈愈伤组织伤组织的形成。的形成。 心堂亮 高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳 (2011广州综合测试广州综合测试)下下图图是月季花是月季花药药离体培养离体培养产产生花粉植株的两种途生花粉植株的两种途径,径,请请据据图图回答下面有关回答下面有关问题

40、问题。(1)选选用的材料合适与否是成功用的材料合适与否是成功诱导诱导出花粉植株的重要因素,一般来出花粉植株的重要因素,一般来说选说选用用_期的花粉可提高成功率。期的花粉可提高成功率。选择选择花粉花粉时时,一般要通,一般要通过过_来确来确定花粉是否定花粉是否处处于合适的于合适的发发育期,育期,这时这时需要需要对对花粉的花粉的细细胞核胞核进进行染色,常用行染色,常用的染色的染色剂剂是是_。(2)上上图图中花中花药经药经脱分化脱分化产产生胚状体生胚状体还还是愈是愈伤组织伤组织主要取决于培养基中主要取决于培养基中_。强信心 【例例2】高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合

41、归纳(3)胚状体与愈胚状体与愈伤组织伤组织在在结结构上的主要区构上的主要区别别在于愈在于愈伤组织伤组织的的细细胞排列疏松胞排列疏松无无规则规则,是一种高度,是一种高度_的薄壁的薄壁细细胞,胚状体与胞,胚状体与_发发育形成的胚有育形成的胚有类类似的似的结结构,即具有胚芽、胚构,即具有胚芽、胚轴轴和胚根。和胚根。(4)无菌技无菌技术术也是成功也是成功诱导诱导出花粉植株的重要因素,出花粉植株的重要因素,请说请说明下列各明下列各项项需要需要消毒,消毒,还还是需要是需要灭灭菌。菌。培养基培养基培养皿培养皿接种接种环环花蕾花蕾实验实验操作者的双手操作者的双手三三角角锥锥形瓶。形瓶。_(填填编编号号)需要需

42、要灭灭菌,菌,_(填填编编号号)需要消毒。需要消毒。(5)试试管苗移栽到土壤前,通常要管苗移栽到土壤前,通常要进进行壮苗行壮苗处处理,理,应应如何壮苗?如何壮苗?_。高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳审题关键审题关键“花花药药”、“愈愈伤组织伤组织”、“消毒消毒”、“灭灭菌菌”、“壮苗壮苗”。命题来源命题来源月季花药离体培养过程月季花药离体培养过程。思路分析思路分析(1)单核期花粉对离体刺激敏感,选用该期花粉可提高培养的单核期花粉对离体刺激敏感,选用该期花粉可提高培养的成功率,选择花粉时可用显微镜观察、筛选;对花粉细胞核染色应该选成功率,选择花粉时可用显微

43、镜观察、筛选;对花粉细胞核染色应该选择碱性染料,常用醋酸洋红。择碱性染料,常用醋酸洋红。(2)细胞培养成植株的两条途径取决于植物细胞培养成植株的两条途径取决于植物激素的种类及比例,尤其是生长素和细胞分裂素。激素的种类及比例,尤其是生长素和细胞分裂素。(3)愈伤组织细胞的特愈伤组织细胞的特点是细胞排列疏松、无规则、高度液泡化;胚状体是具有与胚相似的结点是细胞排列疏松、无规则、高度液泡化;胚状体是具有与胚相似的结构,即具有胚芽、胚轴和胚根。构,即具有胚芽、胚轴和胚根。(4)灭菌对象为培养基和实验器材,消毒灭菌对象为培养基和实验器材,消毒对象为要保持活性的材料和实验者自身。对象为要保持活性的材料和实

44、验者自身。(5)壮苗就是使试管苗逐步适应壮苗就是使试管苗逐步适应外界环境的做法。外界环境的做法。答案答案(1)单单核核镜检镜检(显显微微镜观镜观察察)醋酸洋醋酸洋红红(2)激素的种激素的种类类及其及其浓浓度度配比配比(3)液泡化正常受精卵液泡化正常受精卵(或受精卵或受精卵)(4)(5)将将试试管苗移栽到管苗移栽到经经消毒消毒过过的培养基中生活一段的培养基中生活一段时时间间,等幼苗,等幼苗长长壮后再移栽到土壤中壮后再移栽到土壤中高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳1 1细胞内细胞内DNADNA复制与体外复制与体外DNADNA扩增扩增(PCR(PCR技术技术)

45、)的比较的比较( (见下表见下表) )更清晰考点三DNA和蛋白质技术考试说明考试说明(1)蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离/(2)PCR技术的基本操作和应用技术的基本操作和应用DNA聚合聚合酶酶不加不加DNA脱氧核苷酸脱氧核苷酸53高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳2.2.蛋白质的提取和分离蛋白质的提取和分离( (见下表见下表) )步步 骤骤操操 作作样样品品处处理理通通过红细过红细胞的洗胞的洗涤涤、血、血红红蛋白的蛋白的释释放、分离血放、分离血红红蛋白溶液蛋白溶液等操作收集到血等操作收集到血红红蛋白溶液蛋白溶液粗分离粗分离通通过过_去除血去除血红红蛋

46、白溶液中的相蛋白溶液中的相对对分子分子质质量量较较小小的的杂质杂质纯纯化化通通过过_分离相分离相对对分子分子质质量不同的蛋白量不同的蛋白质质纯纯度度鉴鉴定定 SDS聚丙聚丙烯酰烯酰胺凝胶胺凝胶电电泳判断泳判断纯纯化的蛋白化的蛋白质质是否达到要求是否达到要求透析法透析法凝胶色凝胶色谱谱法法高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳1人和哺乳人和哺乳动动物成熟的物成熟的红细红细胞中不含胞中不含细细胞核,也没有胞核,也没有DNA,不适于作,不适于作 为为DNA提取的材料,但却是提取血提取的材料,但却是提取血红红蛋白的理想材料。蛋白的理想材料。2凝胶色凝胶色谱谱柱的直径大

47、小不影响分离效果,但直径柱的直径大小不影响分离效果,但直径过过大造成洗脱液体大造成洗脱液体 积积大,大,样样品稀品稀释释度大;凝胶色度大;凝胶色谱谱柱的高度与分离度有关。柱的高度与分离度有关。3红细红细胞洗胞洗涤过涤过程中,洗程中,洗涤涤三次后,上清液仍有黄色,可增加洗三次后,上清液仍有黄色,可增加洗涤涤次次 数,否数,否则则无法除去血无法除去血浆浆蛋白;离心蛋白;离心时转时转速要低,速要低,时间时间要短,否要短,否则则白白 细细胞等会一同沉淀,达不到分离效果。胞等会一同沉淀,达不到分离效果。4血血红红蛋白蛋白释释放放过过程中,蒸程中,蒸馏馏水的作用是水的作用是涨涨破破红细红细胞,甲苯的作用主

48、胞,甲苯的作用主 要是溶解要是溶解细细胞膜。胞膜。 心堂亮 高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳 .某生物某生物兴兴趣小趣小组组在学在学习习完完“蛋白蛋白质质的提取和分离的提取和分离”后,后,联联系相关系相关实验实验,准准备备从猪肝从猪肝脏脏研磨液中初步提取研磨液中初步提取过过氧化氧化氢氢酶酶,设计设计的的“过过氧化氧化氢氢酶酶提取、分离提取、分离流程流程”(如下如下图图)。请请据据图图回答下列有关回答下列有关问题问题。(1)向肝向肝细细胞胞悬悬液中加入一定量的液中加入一定量的pH7.0的的缓缓冲液并充分冲液并充分搅搅拌,可以破碎肝拌,可以破碎肝细细胞,破碎

49、胞,破碎细细胞的原理是胞的原理是_ _。强信心 【例例3】高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳与使用蒸与使用蒸馏馏水相比,使用水相比,使用缓缓冲液的冲液的优优点是点是_ _。(2)蛋白蛋白质质粗分离粗分离阶阶段透析的目的是段透析的目的是_ _。(3)电电泳利用了待分离泳利用了待分离样样品中各种分子的品中各种分子的_等的差异,而等的差异,而产产生不同迁移速度,生不同迁移速度,实现实现各种分子的分各种分子的分离。离。高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳(4)实验实验小小组组以以3%过过氧化氧化氢氢溶液和溶液和获获得得的的过过氧

50、化氧化氢氢酶酶为为材料材料进进行温度行温度对对酶酶催化催化活性影响的探究,得到右活性影响的探究,得到右图图所示的所示的结结果,果,根据根据实验结实验结果得出果得出“过过氧化氧化氢氢酶酶能耐受能耐受100 高温高温”的的结论结论,请问这请问这一一结论结论是是否可靠?否可靠?为为什么?什么?_。.多聚多聚酶酶链链式反式反应应(PCR)是一种体外迅速是一种体外迅速扩扩增增DNA片段的技片段的技术术。请请回答下列回答下列有关有关PCR技技术术的基本原理及的基本原理及应应用用问题问题。(1)DNA的两条的两条链链是反向平行的,通常将是反向平行的,通常将_的末端称的末端称为为5端,当引物与端,当引物与DN

51、A母母链链通通过过碱基互碱基互补补配配对结对结合后,合后,DNA聚合聚合酶酶就能从引物的就能从引物的_开始延伸开始延伸DNA链链。高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳(2)PCR利用了利用了DNA的的热变热变性原理解决了打开性原理解决了打开DNA双双链链的的问题问题,但又,但又导导致了致了DNA聚合聚合酶酶失活的新失活的新问题问题。到。到20世世纪纪80年代,科学家从一种年代,科学家从一种Taq细细菌中分离到菌中分离到_,它的它的发现发现和和应应用解决了上述用解决了上述问题问题;要将;要将Taq细细菌从其他普通的微生物中分离出来,所菌从其他普通的微生物中分离

52、出来,所用的培养基叫用的培养基叫_。(3)PCR的每次循的每次循环环可以分可以分为为_三步。假三步。假设设在在PCR反反应应中,只有一个中,只有一个DNA片段作片段作为为模板,模板,请计请计算在算在5次循次循环环后,反后,反应应物中大物中大约约有有_个个这样这样的的DNA片片段。段。(4)请请用用简图简图表示出一个表示出一个DNA片段片段PCR反反应应中第二中第二轮轮的的产产物。物。(5)简简述述PCR技技术术的主要的主要应应用。用。_(要求要求3项项以上以上)。高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳审题关键审题关键“过过氧化氧化氢氢酶酶”、“缓缓冲液冲液”、

53、“透析透析”、“PCR”、“反向平行反向平行”、“DNA片片段段”。命题来源命题来源蛋白质的提取与分离、蛋白质的提取与分离、PCR技术技术。思路分析思路分析.(1)酶的活性受酸碱度、温度等条件的影响。使用缓冲溶液达到细酶的活性受酸碱度、温度等条件的影响。使用缓冲溶液达到细胞因吸水而涨破的目的,又不会因溶液酸碱度不适宜而影响酶的活性。胞因吸水而涨破的目的,又不会因溶液酸碱度不适宜而影响酶的活性。(2)透析透析是去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离。是去除分子量较小的杂质,即样品的粗分离。(3)电泳技术就是在电场的作用下,电泳技术就是在电场的作用下,利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小

54、、形状等性质的差异,利用待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形状等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目使带电分子产生不同的迁移速度,从而达到对样品进行分离、鉴定或提纯的目的。的。(4)在该实验中温度应是实验变量,所以为了确保实验结果的可靠性,应该在该实验中温度应是实验变量,所以为了确保实验结果的可靠性,应该排除其他能导致过氧化氢分解的因素。排除其他能导致过氧化氢分解的因素。.(1)DNA聚合酶工作时必须要有一个引聚合酶工作时必须要有一个引物,它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的物,它只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3羟基上,与羟基上,

55、与DNA母链结合的母链结合的RNA引物就提供这个羟基。引物就提供这个羟基。(2)因因PCR利用了利用了DNA的热变性原理解决了打开的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,所以用于催化双链的问题,所以用于催化DNA复制过程的复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将性。用选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。细菌从其他普通的微生物中分离出来。(3)DNA复制复制的两条链均作为模板,进行半保留复制,所以复制的两条链均作为模板,进行半保留复制,所以复制5次后得到的子代次后得到的子代DNA分子分子数为数为2532个。个。(4)新合成的新合成的DNA

56、链带有引物,而最初的模板链带有引物,而最初的模板DNA的两条链不带的两条链不带有引物。有引物。(5)PCR技术可以对技术可以对DNA分子进行扩增,所以可用于遗传疾病的诊断、分子进行扩增,所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。序列测定等方面。高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳答案答案.(1)渗透原理渗透原理(当外界溶液当外界溶液浓浓度低于度低于动动物物细细胞内液胞内液浓浓度度时时,细细胞吸水胞吸水涨涨破破)可以保可以保证证酶酶溶液溶液pH基本基本稳稳定,避免因定,避免因pH变变化影响化影响过过氧化氧化氢氢酶酶活性活性(2)除去小分子化合物除去小分子化合物(杂质杂质)(3)带电带电性性质质、分子大小、形状、分子大小、形状(4)不可靠,高温也能使不可靠,高温也能使过过氧化氧化氢氢分解分解.(1)磷酸基磷酸基团团3端端(2)耐高温的耐高温的TaqDNA聚合聚合酶酶选择选择培养基培养基(3)变变性、复性和延伸性、复性和延伸32(4)(5)遗传遗传疾病的疾病的诊诊断、刑断、刑侦侦破案、古生物学、基因克隆和破案、古生物学、基因克隆和DNA序列序列测测定定高考真题体验高考真题体验限时规范训练限时规范训练核心整合归纳核心整合归纳单击此处进入 限时规范训练

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