高中生物 专题1 基因工程 1.2 基因工程的基本操作程序课件 新人教版选修3

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1、专题专题1 基因工程基因工程1.2 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序方法方法基因文库的构建基因文库的构建PCR技术扩增技术扩增人工合成人工合成基因组文库基因组文库部分基因文库部分基因文库(如如cDNA文库文库)优点优点操作简单操作简单专一性专一性可在短时间内大可在短时间内大量扩增目的基因量扩增目的基因专一性强,可产专一性强,可产生自然界中不存生自然界中不存在的新基因在的新基因缺点缺点工作量大、盲目性工作量大、盲目性大、专一性差大、专一性差操作过程较烦琐,技操作过程较烦琐,技术要求过高术要求过高需要严格控制温需要严格控制温度,技术要求高度,技术要求高适用范围小适用范围小比较项比较项D

2、NA复制复制PCR技术技术区别区别解旋方式解旋方式解旋酶催化解旋酶催化DNA在高温作用下变性在高温作用下变性解旋解旋场所场所细胞内细胞内(主要在细胞核内主要在细胞核内)细胞外细胞外(主要在主要在PCR扩增扩增仪内仪内)区别区别酶酶DNA解旋酶、普通的解旋酶、普通的DNA聚合酶等聚合酶等耐热的耐热的DNA聚合酶聚合酶(Taq聚合酶聚合酶)温度条件温度条件细胞内温和条件细胞内温和条件需控制温度,在较高温需控制温度,在较高温度下进行度下进行合成的对象合成的对象DNA分子分子DNA片段或基因片段或基因联系联系模板:均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质模板:均需要脱氧核苷酸链作为模板进行物质合成;合成;原

3、料:均为四种脱氧核苷酸;原料:均为四种脱氧核苷酸;酶:均需要酶:均需要DNA聚合酶进行催化;聚合酶进行催化;引物:均需要引物,使引物:均需要引物,使DNA聚合酶从引物的聚合酶从引物的3端开始连接脱氧核苷酸端开始连接脱氧核苷酸受体细胞受体细胞方法方法植物细胞植物细胞(体体细胞细胞)农杆菌转化法:目的基因插入农杆菌转化法:目的基因插入Ti质粒的质粒的T-DNA农杆菌农杆菌导入植物细胞导入植物细胞稳定维持和稳定维持和表达表达基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基基因枪法:是单子叶植物中常用的一种基因转化方法,但是成本较高因转化方法,但是成本较高花粉管通道法:这是我国科学家独创的一花粉管通道法:这是我国

4、科学家独创的一种方法,是一种十分简便经济的方法种方法,是一种十分简便经济的方法动物细胞动物细胞(受精卵受精卵)显微注射法:含有目的基因的表达载体提纯显微注射法:含有目的基因的表达载体提纯取卵取卵(受精卵受精卵)显微注射显微注射受精卵发育受精卵发育获得具有新性状的动物获得具有新性状的动物微生物细胞微生物细胞(原核细胞原核细胞)Ca2处理细胞处理细胞感受态细胞感受态细胞表达载体与表达载体与感受态细胞混合感受态细胞混合感受态细胞吸收感受态细胞吸收DNA分分子子目的基因随受体细胞的繁殖而复制目的基因随受体细胞的繁殖而复制比较比较起始起始(终止终止)密码子密码子启动启动(终止终止)子子本质本质三个相邻碱基三个相邻碱基DNA片段片段位置位置位于位于mRNA上上位于位于DNA上上作用作用启动启动(终止终止)翻译翻译启动启动(终止终止)转录转录

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