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1、微生物分离与纯化技术微生物分离与纯化技术一、实验目的一、实验目的 掌握从土壤中分离培养掌握从土壤中分离培养微生物微生物的方法，从而获的方法，从而获得若干种得若干种微生物微生物纯培养技能。纯培养技能。平板制作的平板制作的操作注意：操作注意：融化培养基时不要融化培养基时不要溢出溢出烧瓶或烧瓶或糊底糊底无菌操作无菌操作下，下，打开打开培养皿的操作培养皿的操作一根一根mL移液管多次移液移液管多次移液先先移移低低浓度悬浊液，再移浓度悬浊液，再移高高浓度悬浊液。浓度悬浊液。移液管可以用稀释悬浊液的那根在移液管可以用稀释悬浊液的那根在无菌操作无菌操作下接着做，也可另取一根无菌的。下接着做，也可另取一根无菌的
2、。为什么培养皿要为什么培养皿要倒置倒置培养培养(二二)平板划线分离法（以分离细菌为例）平板划线分离法（以分离细菌为例）每组准备两套无菌培养皿每组准备两套无菌培养皿,在在皿底皿底菌名、班级、组别。菌名、班级、组别。融化培养基，在融化培养基，在45-50恒温水浴锅中备用恒温水浴锅中备用制备平板：制备平板：无菌操作无菌操作下，下，打开打开培养皿，倒入培养皿，倒入45-50融化的融化的细菌培养基约细菌培养基约1/4-1/3培养皿高度。培养皿平放在桌上，培养培养皿高度。培养皿平放在桌上，培养基冷凝后即成基冷凝后即成平板平板。平板划线平板划线:无菌操作无菌操作下下,用用接种环接种环挑取一环挑取一环10-1
3、土壤悬浊液土壤悬浊液,在平板上轻轻划线在平板上轻轻划线(切勿划破培养基切勿划破培养基)划线的方式可取下图划线的方式可取下图恒温培养恒温培养:平板平板倒置倒置于于28-30恒温箱中恒温箱中,培养培养-天后观察天后观察细菌菌落形态。细菌菌落形态。转接纯化转接纯化:挑取单个挑取单个菌落菌落,接种到新鲜平板上接种到新鲜平板上,培养观察培养观察,直至直至纯化纯化平板划线的平板划线的操作注意：操作注意：接种换环的使用接种换环的使用分区域划线，划完第一个区域，烧掉接种环上的剩余物，分区域划线，划完第一个区域，烧掉接种环上的剩余物，接种环冷却后，通过第一次划线部分，做第二次划线，依接种环冷却后，通过第一次划线部分，做第二次划线，依次类推，目的是稀释微生物浓度，使长成单个菌落。次类推，目的是稀释微生物浓度，使长成单个菌落。结束语结束语谢谢大家聆听！谢谢大家聆听！14
