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1、医学微生物学实验五Stillwatersrundeep.流静水深流静水深,人静心深人静心深Wherethereislife,thereishope。有生命必有希望。有生命必有希望实验五实验五其他细菌、真菌、病毒学试验其他细菌、真菌、病毒学试验主要内容：1、上次试验结果观察2、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法3、螺旋体形态观察4、真菌的形态与培养5、病毒学试验6、分枝杆菌与抗酸染色一、上次试验结果观察1、双糖铁基培养基结果观察 乳糖 H2S 葡萄糖 动力伤寒杆菌 + +痢疾杆菌 + 大肠杆菌 + + 2、血清学试验（示教） 选取沙门氏菌或痢疾杆菌属的诊断血清，与双糖铁基斜面上的菌苔作玻片凝集反应。二、厌
2、氧芽胞梭菌与厌氧培养法二、厌氧芽胞梭菌与厌氧培养法 1 1、形态观察、形态观察 破伤风梭菌破伤风梭菌 产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌 破伤风梭菌 破伤风梭菌（芽胞） 破伤风梭菌（鞭毛）产气荚膜梭菌产气荚膜梭菌2、厌氧培养法 用于专性厌氧菌的培养用于专性厌氧菌的培养方法：1)1)将普通培养基置于无氧环境中培养将普通培养基置于无氧环境中培养 如如: :焦性没食子酸法焦性没食子酸法2)2)厌氧培养基厌氧培养基: :在培养基中加氧化还原剂在培养基中加氧化还原剂 如如: :庖肉培养基庖肉培养基 a. 原理：焦性没食子酸在碱性溶液中能迅速吸收氧气，生成深棕色焦性没食子橙，利用此法可除去试管或平皿等容器中的氧气。
3、（1）焦性没食子酸法焦性没食子酸培养基焦性没食子酸培养基示意图血平板纱布石蜡b.培养结果观察产气荚膜梭菌血平板厌氧培养产气荚膜梭菌血平板厌氧培养（2）疱肉培养基 不饱和脂肪酸a.原理 动物组织耗氧法 还原型氨基酸 谷胱甘肽谷胱甘肽 凡士林凡士林破破伤伤风风梭梭菌菌产产气气荚荚膜膜梭梭菌菌正正常常对对照照1 1、形态特点：、形态特点：三、螺旋体 2 2、分类：、分类： 根根据据抗抗原原性性、螺螺旋旋的的数目、大数目、大 小小、规规则则程程度度、螺螺旋旋间间距距分分类。类。 原核细胞型微生物原核细胞型微生物 菌菌体体细细长长柔柔软软，弯弯曲曲呈呈螺旋状，螺旋状， 运动活泼运动活泼与疾病有关的：与疾
4、病有关的：疏螺旋体属 如 伯氏疏螺旋体密螺旋体属 如 梅毒螺旋体钩端螺旋体属 如 钩端螺旋体回归热疏螺旋体梅毒螺旋体 钩端螺旋体 钩端螺旋体 钩端螺旋体（镀银染色）3、暗视野显微镜 普通光学显微镜上安装一个特制的集光器暗视野集光器，其中央为不透光的黑板，视野背景是暗的，标本上的光线弥散反射 1 1、形态形态: : 单细胞单细胞酵母菌酵母菌 如白色念如白色念 珠菌珠菌 新型隐球菌新型隐球菌 多细胞多细胞丝状菌丝状菌四、真菌的形态与培养白色念珠菌白色念珠菌新型隐球菌（墨汁染色）2 2、培养特性、培养特性: : 沙保培养基沙保培养基成份： 蛋白胨 1g 琼脂 2g 葡萄糖 4g 蒸馏水 100ml
5、pH 45左右菌落特征菌落特征: : 酵母型菌落酵母型菌落 酵母样菌落酵母样菌落 丝状菌落丝状菌落单细胞多细胞白色念珠菌新型隐球菌 酵母型菌落酵母样菌落酵母样菌落酵母型菌落五、病毒学试验1、病毒包涵体形态 2、病毒感染的细胞病变（录像） 病病毒毒感感染染细细胞胞后后，在在胞胞浆浆或或胞胞核核内内出出现现嗜嗜酸酸或或嗜嗜碱碱性性的的圆圆形形、椭圆形、不规则形斑块结构。椭圆形、不规则形斑块结构。 什么是包涵体？狂犬病病毒包涵体（内基小体）巨细胞病毒包涵体六、分枝杆菌与抗酸染色1、 形态2、结构特点3、抗酸染色 结核杆菌（抗酸染色）结核杆菌（抗酸染色）2、结构特点： 细胞壁含有大量脂质，主要是分枝菌酸 ，一般不易着色，如果经加温或延长染色时间而着色后能抵抗强脱色剂盐酸酒精的脱色，所以又称抗酸抗酸杆菌杆菌。3 3、抗酸染色、抗酸染色 （1 1）温温染染：石石炭炭酸酸复复红红溶溶液液 5 5 minmin （2 2）脱脱色色：3%3%盐盐酸酸酒酒精精溶溶液液 0.5-1 0.5-1 minmin （3 3）复复染染：碱碱性性美美兰兰 溶溶液液 0.5 0.5 minmin
