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1、 绪绪 论论 IntroductionIntroduction主要内容主要内容w发展史发展史w组织学与胚胎学基本规律组织学与胚胎学基本规律w研究方法研究方法w学习方法学习方法 u同步练习同步练习忠告： 你想学好这门科学吗？ 你先了解它的历史吧！ Lvshaowen 你要研究生命吗？ 你首先研究细胞吧！ MG.Schleiden 一、组织胚胎学发展史 上的重大事件公元前，古希腊，亚里士多德（Aristotle)最 早对胚胎发育进行唯物的观察，改变 了神造万物的迷信观。1590，荷兰，Hans父子发明了显微镜（10倍）。1609，意大利，伽利略（Galileo)发明望远镜。1651，英国，哈维（H
2、arvey)及Redi观察到胚胎 发育源于卵，发表了论动物的生殖。1661，意大利，马尔裴基（Malpighi).用放大 镜观察了动、植的微细结构，发现了蛭 的毛细血管和血液循环。1665，马尔裴基和英国的虎克（Hooker) 研制了新型显微镜，虎克观察软木 塞，发现了“Cell”。1668，Hedi提出了“一切生命来自卵”。1672，荷兰，格拉夫（Graaf)发现卵子。 Bonnet,Malpighi等主张“卵源说”。1677，荷兰，列文胡克（Leeuwenhoek)发 现精子。主张“精源说”。 Spallanzani进行了人工受精实验， 揭示了胚胎始于受精卵之迷。1745，Bonnet发现
3、蚜虫的孤雌生殖，成为“先成 论”的主流。1768，德国，沃尔夫（Wollff)首次提出“胚层” 的概念，发表了“渐成论”。1801，法国，比沙（Bichat)首用法文 Tissu 编织物（21种）Tissue组织。1819，德国，迈尔（Mayer)创用希腊文 Histo(组织，8种）+logy组织学。1828，德国（爱沙尼亚），贝尔（Baer)创立了 比较胚胎学，提出了胚层学说和贝尔法 则。（各种动物胚胎演变、发育愈早愈 相似）。1831，布朗（Brown)发现了细胞核。1838-1839，德国，施莱登（Schleiden) 和施万(Schwann，雪旺)创立了细 胞学说，被誉为十九世纪三大发
4、现 之一。（守恒定律，进化论）1841，瑞士，柯立克（Kolliker)阐明精 子也是一种细胞。1844，柯立克进一步认为卵也是细胞，通 过分裂发育成个体。1855，德国，雷马克（Remark)提出三胚 层学说。 1856，德国，魏尔啸（Virchow)提出细胞 是一切疾病的基础，建立了细胞病 理学。1859，英国，达尔文（Darwin)发表物 种起源，称贝尔法则正是种与种 间亲缘关系和物种进化的路线特征。1860，德国，穆勒（M ller)和海克尔 （Haeckel)提出“重演律”。1870，德国，阿伯（Abbe)提出显微镜理论。1873，意大利，Golgi法创立（镀银显示整个神 经元）。1
5、892，德国，Nissl法创立。发现Nissl体。1903，西班牙，Cajal法创立（镀染神经纤维， 胞体轴突和神经原纤维）。1906，Golgi和 Cajal获诺贝尔奖。1932，德国，科诺尔（Knols)和卢斯卡（Ruska) 发明了电子显微镜。1935，德国，斯佩曼（Spemann)提出诱导学说， 发展了实验胚胎学，获诺贝尔奖。1985，Knols和 Ruska因发明电镜获诺贝尔奖。1986，Binnig和Rohrer因发明扫描隧道显 微镜，获诺贝尔奖。1978，英国诞生了第一例“试管婴儿”，成 为体外受精技术走向成熟的划时代 事件。鉴于我国学者张觉民对生殖 生物学的杰出贡献，当选为美国
6、科 学院院士。1997，用成体细胞核移植成功的克隆羊 “多莉”，在英国爱丁堡诞生。轰动 世界。 组织组织结构结构 发生发生两性细胞形成两性细胞形成 细胞细胞 器官器官 功能功能 受精卵受精卵 系统系统 人体人体 分裂、分化分裂、分化 组织学（组织学（HistologyHistology） 研究机体微细结构及其相关功能的科学。研究机体微细结构及其相关功能的科学。 胚胎学（胚胎学（EmbryologyEmbryology） 研究个体发生和生长及其发育机理的科学。研究个体发生和生长及其发育机理的科学。二、组织学与胚胎学基本规律二、组织学与胚胎学基本规律 1. 1. 细胞细胞 概念概念 细胞是机体形态
7、结构、生理功能和生长细胞是机体形态结构、生理功能和生长 发育的基本单位。发育的基本单位。 结构结构 细胞膜细胞膜 细胞质细胞质 RiRi、RERRER SER SER、Mi Mi Go Go、Ly Ly Mt Mt、 Mf Mf、Mb Mb 细胞核细胞核细胞超微结构模式图细胞超微结构模式图w核糖体（Ri.)：合成蛋白质。w粗面内质网（RER):合成蛋白质。w高尔基复合体（Go.):浓缩、加工、包装。形成糖蛋白类分泌物及溶酶体。w滑面内质网（SER):合成类固醇激素， 参与糖、脂代谢，灭活激素，解毒， 调节离子交流。 线粒体（Mi.):产生ATP，供给能量。w溶酶体（Ly.):消化分解细胞内异物
8、。w微管（Mt.):参与支架，运输，变形运动。w微丝（Mf.):参与支持，变形运动，胞 质流动。w微体（Mb.过氧化物体):氧化多种有毒 物质，解毒。w染色质（Chromatin):由DNA与蛋白质组 成。w染色体（Chromosome):细胞分裂时染色质的细丝螺旋盘曲。w常染色质：分裂后子细胞染色体部分解螺旋，电子密度高。w异染色质：未解螺旋的染色体。 2 2细胞外基质细胞外基质 概念概念 细胞产生的非细胞物质。细胞产生的非细胞物质。 组成组成 纤维纤维 基质基质 体液（血浆、淋巴、组织液）体液（血浆、淋巴、组织液） 功能功能；参与构成细胞生存的微环境，对细胞起参与构成细胞生存的微环境，对细
9、胞起 支持、联系、营养、保护作用支持、联系、营养、保护作用 对细胞的分化、运动、信息沟通有重要影响对细胞的分化、运动、信息沟通有重要影响。3 3组织组织 概念概念 细胞群和细胞外基质组成。细胞群和细胞外基质组成。 基本组织基本组织 上皮组织上皮组织 结缔组织结缔组织 肌组织肌组织 神经组织神经组织1. 1. 光学显微镜和电子显微镜技术光学显微镜和电子显微镜技术 （1 1）标本制备标本制备 LMLM TEM TEM取材取材(3-5)(3-5)mmmm3 3 1mm 1mm3 3固定固定甲醛、酒精、甲醛、酒精、 戊二醛、四氧化鋨、戊二醛、四氧化鋨、 苦味酸苦味酸 多聚甲醛多聚甲醛包埋包埋石蜡、火棉
10、胶石蜡、火棉胶 树脂树脂切片切片石蜡、石蜡、 超薄切片超薄切片50-8050-80nmnm 冰冻切片冰冻切片5-105-10mm染色染色HEHE 重金属电子染色重金属电子染色结果结果嗜碱性物质嗜碱性物质- -蓝色蓝色 电子密度高电子密度高- -黑色黑色 嗜酸性物质嗜酸性物质- -红色红色 电子密度低电子密度低- -色浅色浅三、三、 研究方法研究方法（2 2）分辨率分辨率 LM: 0.2LM: 0.2m m EM: 0.2 nmEM: 0.2 nm（3 3）计量单位计量单位 1 1m =1/1000mm m =1/1000mm 1 nm =1/1000 1 nm =1/1000m m （4 4）
11、HEHE染色染色 概念：概念：H H（HematoxylinHematoxylin，苏木精）碱性染料苏木精）碱性染料 E E（EosinEosin，伊红）酸性染料伊红）酸性染料 原理：电耦合现象原理：电耦合现象 H H+ +XX- -盐盐蓝色蓝色 （胞核）（胞核）= =嗜碱性嗜碱性 E E- -YY+ +盐盐红色红色 （胞质）（胞质）= =嗜酸性嗜酸性 与两者亲和力都不强与两者亲和力都不强 = =中中 性性 组织或细胞内的成分被某些碱性染料染色后呈紫红色，组织或细胞内的成分被某些碱性染料染色后呈紫红色，称异染性。称异染性。 （5 5）重金属电子染色）重金属电子染色 概念概念 利用重金属（醋酸铀
12、，柠檬酸铅）浸染利用重金属（醋酸铀，柠檬酸铅）浸染 超薄切片的染色方法。超薄切片的染色方法。 正染色正染色 当电子束当电子束密度大，吸附重金属多的密度大，吸附重金属多的结构结构电子散射多电子散射多射落到荧光屏的电子少射落到荧光屏的电子少成暗像（黑色）称电子密度高。成暗像（黑色）称电子密度高。 反之，浅染的部分称电子密度低。反之，浅染的部分称电子密度低。 负染色负染色 若被染结构着色浅淡，而其周围部分染若被染结构着色浅淡，而其周围部分染成黑色，则为负染色。成黑色，则为负染色。2组织化学和细胞化学术组织化学和细胞化学术（1 1）概念）概念 通通过过化化学学或或物物理理反反应应原原理理显显示示组组织
13、织或或细细胞胞内内某某种种（糖糖、脂脂、酶酶、核核酸酸）化化学学成成分分，进进行行定定位位、定定量量及及其其与与功功能能相相关关的的研究。研究。（2 2）PASPAS反应反应显示多糖和蛋白多糖的一种组织化学方法。显示多糖和蛋白多糖的一种组织化学方法。 多糖多糖+ +HIOHIO4多醛多醛+ +schiffschiff剂剂紫红色紫红色 3. 3. 其它研究方法其它研究方法（1 1）免疫组织化学术）免疫组织化学术 应用抗原抗体特异性结合的原理，应用抗原抗体特异性结合的原理， 检测组织、细胞内肽类、蛋白质及膜检测组织、细胞内肽类、蛋白质及膜 表面抗原和受体的技术。表面抗原和受体的技术。（2 2）原位
14、杂交）原位杂交 是一种核酸分子杂交技术，根据碱基是一种核酸分子杂交技术，根据碱基配对的原则，利用已知碱基序列的核酸配对的原则，利用已知碱基序列的核酸探针，与待测的核酸进行特异性原位结探针，与待测的核酸进行特异性原位结合。对核酸进行定位定量检测。合。对核酸进行定位定量检测。（3 3）放射自显影）放射自显影 通过活细胞对放射性物质的特异性摄入，以显示通过活细胞对放射性物质的特异性摄入，以显示该细胞的功能状态，或该物质在组织和细胞内的代该细胞的功能状态，或该物质在组织和细胞内的代谢过程。谢过程。（4 4）图像分析术）图像分析术 可定义为：从一幅图像中提取特定数据的定量处可定义为：从一幅图像中提取特定
15、数据的定量处理技术。是在计算机技术、体视学理论等基础上发理技术。是在计算机技术、体视学理论等基础上发展起来的。展起来的。 形态计量学形态计量学是定量分析生物组织宏观或微观水平是定量分析生物组织宏观或微观水平的二维或三维结构的科学，包括平面测量学和体视的二维或三维结构的科学，包括平面测量学和体视学。学。 平面测量学平面测量学是反映二维图像特征的理论和方法，是反映二维图像特征的理论和方法，是体视学推论的基础。是体视学推论的基础。 体视学体视学是研究二维与三维相互转换的理论与技术是研究二维与三维相互转换的理论与技术的科学。的科学。（5 5）细胞培养术）细胞培养术 模拟体内条件，对细胞、组织、器模拟体
16、内条件，对细胞、组织、器官进行体外培养。研究其代谢、增殖、官进行体外培养。研究其代谢、增殖、分化、形态和功能，以及各种理化因子分化、形态和功能，以及各种理化因子对活细胞的直接影响。对活细胞的直接影响。 （6 6）组织工程）组织工程 利用细胞培养术，在体外模拟构建利用细胞培养术，在体外模拟构建组织或器官的技术。（皮肤、软骨、骨组织或器官的技术。（皮肤、软骨、骨肌腱、骨骼肌、血管和角膜等）肌腱、骨骼肌、血管和角膜等）四、学习方法四、学习方法 1 1结构与功能结构与功能 2 2局部与整体局部与整体 3 3理论与实践理论与实践 4 4静态与动态静态与动态 5 5平面与立体平面与立体 6. 6. 组织学
17、研究的四个水平组织学研究的四个水平 组组 织织 细胞细胞 细胞外基质细胞外基质 细细 胞胞 分布分布 形态形态 亚细胞亚细胞 结构结构 （细胞生物学）（细胞生物学） 分分 子子 功能功能 （分子生物学）（分子生物学）同同 步步 练练 习习一、填空一、填空1.组织是由组织是由_和和_构成。构成。2组织切片的常用染色方法为染色，其中组织切片的常用染色方法为染色，其中代表代表_，代表，代表_。可将细。可将细胞核染成胞核染成_色，可将细胞质染成色，可将细胞质染成_色。色。 细细 胞胞 细胞外基质细胞外基质 苏木精苏木精 伊红伊红 紫紫 蓝蓝 红红 同同 步步 练练 习习二、单项选择二、单项选择1. 用
18、光镜观察的组织切片厚度一般为（用光镜观察的组织切片厚度一般为（ ） A.50-80nm B.50-80m C.5-10m D.5-10nm E.5-10mm 2. 用电镜观察的组织切片厚度一般为（用电镜观察的组织切片厚度一般为（ ） A.50-80nm B.50-80m C.5-10m D.5-10nm E.5-10mm CA同同 步步 练练 习习二、单项选择二、单项选择3. 光镜的分辨率可达（光镜的分辨率可达（ ） A.0.2nm B.0.2m B.2nm D.2m E.2mm 4. 电镜的分辨率可达（电镜的分辨率可达（ ） A.0.2nm B.0.2m C.2nm D.2m E.2mm BA同同 步步 练练 习习 答案：答案： HE染色是采用苏木精染色是采用苏木精(hematoxylin)和伊红和伊红(eosin)对组织对组织切片进行染色的最常用的染色方法。切片进行染色的最常用的染色方法。苏木精是一种碱性染液苏木精是一种碱性染液, 将细胞核染成将细胞核染成蓝色；配制后的伊红是一种酸性染液蓝色；配制后的伊红是一种酸性染液, 将细胞质染成红色。将细胞质染成红色。三、名词解释三、名词解释: HE染色染色
