《化学药物结构确证研究的技术要求与案例分析王玉成学习教案》由会员分享，可在线阅读，更多相关《化学药物结构确证研究的技术要求与案例分析王玉成学习教案（128页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、会计学1化学药物结构化学药物结构(jigu)确证研究的技术要确证研究的技术要求与案例分析王玉成求与案例分析王玉成第一页，共128页。目录目录(ml)o o( (一一一一) ) 结构确证研究的一般原则结构确证研究的一般原则结构确证研究的一般原则结构确证研究的一般原则(yunz)(yunz)和要求和要求和要求和要求o o( (二二二二) ) 对不同类别药品结构确证的要求对不同类别药品结构确证的要求对不同类别药品结构确证的要求对不同类别药品结构确证的要求o o( (三三三三) ) 对特殊化学结构药品结构确证的要求对特殊化学结构药品结构确证的要求对特殊化学结构药品结构确证的要求对特殊化学结构药品结构确
2、证的要求o o( (四四四四) ) 各项波谱和测试的技术要求各项波谱和测试的技术要求各项波谱和测试的技术要求各项波谱和测试的技术要求( (案例案例案例案例) )第1页/共127页第二页，共128页。 1. 结构确证研究的主要对象 2. 结构确证研究的基本(jbn)方法 3. 结构确证研究的主要内容 4. 结构确证研究的一般要求(一一) 结构结构(jigu)确证研究的一般原则确证研究的一般原则和要求和要求第2页/共127页第三页，共128页。1. 结构结构(jigu)确证研究的主要对象确证研究的主要对象 经化学全合成或半合成、微生物发酵以及(yj)从动、植物中提取的原料药,包括新药、进口药和已有
3、国家标准的药品.第3页/共127页第四页，共128页。n n按来源：按来源：按来源：按来源：n n 化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等化学合成、半合成、天然产物中提取、发酵等; ;n n按组分按组分按组分按组分(z(z fn)fn)：n n 单一组分单一组分单一组分单一组分(z(z fn)fn)、多组分、多组分、多组分、多组分(z(z fn)fn)混合物混合物混合物混合物; ;n n按分子量：按分子量：按分子量：按分子量：n n 小分子化合物、大分子化合物小分子化合物、大分子化合物小分子化合物、大分子化合物小
4、分子化合物、大分子化合物; ;n n按结构特点：按结构特点：按结构特点：按结构特点：n n 成成成成盐盐盐盐化化化化合合合合物物物物和和和和非非非非成成成成盐盐盐盐化化化化合合合合物物物物、手手手手性性性性化化化化合合合合物物物物和和和和非非非非手手手手性性性性化化化化合合合合物物物物、含含含含结结结结晶晶晶晶水水水水/ /溶剂和不含结晶水溶剂和不含结晶水溶剂和不含结晶水溶剂和不含结晶水/ /溶剂等溶剂等溶剂等溶剂等; ;第4页/共127页第五页，共128页。2.2.结构确证研究结构确证研究(ynji)(ynji)的基的基本方法本方法 化学方法：理化分析、元素分析、化学关联等化学方法：理化分析
5、、元素分析、化学关联等 物理方法：波谱方法、衍射技术物理方法：波谱方法、衍射技术 a. a. 射频波、微波与物质的相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等射频波、微波与物质的相互作用：核磁共振、电子顺磁共振等(ESP(ESP根据根据(gnj)(gnj)谱图中吸收峰的位置、谱线的积分强度、谱线的宽谱图中吸收峰的位置、谱线的积分强度、谱线的宽度及超精细结构等信息可以鉴定自由基和过滤金属离子等顺磁粒度及超精细结构等信息可以鉴定自由基和过滤金属离子等顺磁粒子的结构状态，检测它们的浓度（可检测到子的结构状态，检测它们的浓度（可检测到10-1410-14摩摩/ /升）。升）。) ) b. b. 红外、可见、紫外
6、光与物质的相互作用：红外光谱、紫外光红外、可见、紫外光与物质的相互作用：红外光谱、紫外光谱、拉曼光谱等谱、拉曼光谱等 c. X c. X射线与物质的相互作用：射线与物质的相互作用：X X射线衍射等射线衍射等 d. d. 电子与物质的相互作用：质谱、电镜等电子与物质的相互作用：质谱、电镜等 e. e. 其他：热分析、原子吸收、原子发射等其他：热分析、原子吸收、原子发射等第5页/共127页第六页，共128页。3.3.结构确证结构确证(qu zhn)(qu zhn)研究的研究的主要内容主要内容 骨架（平面）结构：骨架（平面）结构： 分子中各原子之间的连接顺序和方式分子中各原子之间的连接顺序和方式;
7、; 构型：构型： 分子中各原子之间的空间相对位置分子中各原子之间的空间相对位置; ; 结晶结晶(jijng)(jijng)水水/ /结晶结晶(jijng)(jijng)溶剂：溶剂： 与水、有机溶剂通过氢键等结合与水、有机溶剂通过氢键等结合; ; 晶型：晶型： 分子（或原子）在晶体中的排列方式分子（或原子）在晶体中的排列方式; ;第6页/共127页第七页，共128页。骨架（平面骨架（平面(pngmin)(pngmin)）结构）结构 例：氟吗西尼例：氟吗西尼第7页/共127页第八页，共128页。骨架（平面）结构的研究骨架（平面）结构的研究(ynji)(ynji)方法方法: : a. a. a. a
8、. 单晶单晶单晶单晶X X X X射线衍射射线衍射射线衍射射线衍射; ; ; ; b. b. b. b. 常常常常规规规规方方方方法法法法，如如如如元元元元素素素素分分分分析析析析（或或或或高高高高分分分分辨辨辨辨质质质质谱谱谱谱）、UVUVUVUV、IRIRIRIR、NMRNMRNMRNMR（包包包包括括括括二二二二维维维维谱谱谱谱）、MSMSMSMS等组合等组合等组合等组合; ; ; ; 应应应应根根根根据据据据化化化化合合合合物物物物骨骨骨骨架架架架结结结结构构构构(jigu)(jigu)(jigu)(jigu)的的的的特特特特点点点点及及及及其其其其复复复复杂杂杂杂程程程程度度度度、有
9、有有有无无无无对对对对照照照照品品品品及及及及参参参参考考考考文文文文献献献献，合理选用测试项目。合理选用测试项目。合理选用测试项目。合理选用测试项目。第8页/共127页第九页，共128页。 构构 型：型： 几何几何(j h)构型构型: 双键、环状化合物，双键、环状化合物，常用顺反（常用顺反（cistrans）或）或ZE表表示示 例：西尼地平例：西尼地平 （）-3-（2-甲氧基乙甲氧基乙基）基）-5-3-苯基苯基-2（E）-丙烯基丙烯基-2,6-二二甲基甲基-4-（3-硝基苯基）硝基苯基）-1,4-二氢二氢- 3,5-吡啶二甲酸酯吡啶二甲酸酯第9页/共127页第十页，共128页。 例：拉米夫定
10、例：拉米夫定例：拉米夫定例：拉米夫定 (2R-(2R-(2R-(2R-顺式顺式顺式顺式)-4-)-4-)-4-)-4-氨基氨基氨基氨基(nj)-1-(2-(nj)-1-(2-(nj)-1-(2-(nj)-1-(2-羟甲基羟甲基羟甲基羟甲基-1-1-1-1，3-3-3-3-氧氧氧氧硫杂环戊硫杂环戊硫杂环戊硫杂环戊-5-5-5-5-基基基基)-1H-)-1H-)-1H-)-1H-嘧啶嘧啶嘧啶嘧啶-2-2-2-2-酮酮酮酮第10页/共127页第十一页，共128页。几何几何(j h)构型的研究：构型的研究： 理化性质差别明显理化性质差别明显理化性质差别明显理化性质差别明显 a. a. 理化常数理化常数
11、理化常数理化常数(chngsh)(chngsh)，例如熔点等，例如熔点等，例如熔点等，例如熔点等; ; b. b. 氢谱、碳谱氢谱、碳谱氢谱、碳谱氢谱、碳谱; ; c. c. 红外光谱、紫外光谱等红外光谱、紫外光谱等红外光谱、紫外光谱等红外光谱、紫外光谱等; ;第11页/共127页第十二页，共128页。光学异构：由于分子的不对称性引起光学异构：由于分子的不对称性引起光学异构：由于分子的不对称性引起光学异构：由于分子的不对称性引起(ynq)(ynq)(ynq)(ynq)，常用常用常用常用D- LD- LD- LD- L或或或或R-SR-SR-SR-S表示。表示。表示。表示。 例：那格列奈例：那格
12、列奈例：那格列奈例：那格列奈 （）（）（）（）N-N-N-N-（反（反（反（反-4-4-4-4-异丙基环基甲异丙基环基甲异丙基环基甲异丙基环基甲酰基）酰基）酰基）酰基）-D-D-D-D-苯丙氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸苯丙氨酸第12页/共127页第十三页，共128页。 例：前列腺素例：前列腺素例：前列腺素例：前列腺素E1E1E1E1（1R1R1R1R，2R2R2R2R，3R3R3R3R）-3-3-3-3-羟基羟基羟基羟基(qingj)-2-(qingj)-2-(qingj)-2-(qingj)-2-（E E E E）- - - -（3S3S3S3S）-3-3-3-3-羟基羟基羟基羟基(qingj)-1
13、-(qingj)-1-(qingj)-1-(qingj)-1-辛烯基辛烯基辛烯基辛烯基-5-5-5-5-氧代环戊烷庚酸氧代环戊烷庚酸氧代环戊烷庚酸氧代环戊烷庚酸第13页/共127页第十四页，共128页。光学光学(gungxu)异构的研究：异构的研究： a. 比旋度测定比旋度测定 b. 手性柱色谱（手性柱色谱（HPLC、GC） c. 核磁共振（核磁共振（NMR） d. 单晶单晶X射线衍射射线衍射（SXRD） e. 旋光光谱（旋光光谱（ORD）(1. 决决定定(judng)化合物之绝对立体化合物之绝对立体构造。构造。 2. 决定决定(judng)蛋白质蛋白质2级与级与3级构造。级构造。 ) f.
14、圆二色谱（圆二色谱（CD）第14页/共127页第十五页，共128页。 g. 其他方法其他方法 对照品法对照品法根据对照品的构型推定根据对照品的构型推定 化学关联法化学关联法利用合成工艺分析利用合成工艺分析 例如，例如， 左旋西替利嗪的构型确证：左旋西替利嗪的构型确证： 手手性性柱柱色色谱谱定定位位（与与对对照照品品对对比比)、 比比旋旋度数据度数据(shj)、光学纯度分析、光学纯度分析第15页/共127页第十六页，共128页。晶型的研究晶型的研究(ynji):(ynji): 晶晶型型 是是化化合合物物一一个个重重要要特特性性; ;对对于于多多晶晶型型药药物物, ,因因晶晶格格结结构构不不同同,
15、 ,某某些些理理化化性性质质( (如如熔熔点点、溶溶解解度度、稳稳定定性性) )可可能能不不同同; ;而而且且在在不不同同条条件件下下, ,同同一一化化合合物物的的各各晶晶型型之之间间可可能能会会发发生生相相互互转转化化。对对于于难难溶溶性性固固体体口口服服制制剂剂, ,其其原原料料药药晶晶型型可可能能影影响响药药物物的的溶溶解解度度、稳稳定定性性、药药代代动动力力学学性性质质进进而而( (j j n n r r) )可可能能影影响响药药效效。所所以以对对于于已已有有文文献献报报道道的的多多晶晶型型化化合合物物应应明明确确其其晶晶型型, ,晶晶型型的的一一致致性性; ;对对于于创创新新药药也也
16、应应注注意意积积累累相相关关研研究究资资料料观观察察有有无无多多晶晶型型现现象象。第16页/共127页第十七页，共128页。晶型的研究晶型的研究晶型的研究晶型的研究(ynji):(ynji):(ynji):(ynji): a. a. a. a. 粉末粉末粉末粉末X-X-X-X-射线衍射射线衍射射线衍射射线衍射(ynsh)(ynsh)(ynsh)(ynsh)法法法法 b. b. b. b. 红外光谱法、拉曼光谱法红外光谱法、拉曼光谱法红外光谱法、拉曼光谱法红外光谱法、拉曼光谱法 c. c. c. c. 熔点法熔点法熔点法熔点法 d. d. d. d. 热分析热分析热分析热分析 e. e. e.
17、e. 光学显微镜法光学显微镜法光学显微镜法光学显微镜法 第17页/共127页第十八页，共128页。无对照品和文献无对照品和文献无对照品和文献无对照品和文献(wnxin)(wnxin)(wnxin)(wnxin)报道：报道：报道：报道： 考考考考察察察察不不不不同同同同结结结结晶晶晶晶条条条条件件件件下下下下（溶溶溶溶剂剂剂剂、温温温温度度度度、结结结结晶晶晶晶速速速速率率率率等等等等）制制制制备样品的熔点、红外光谱、粉末备样品的熔点、红外光谱、粉末备样品的熔点、红外光谱、粉末备样品的熔点、红外光谱、粉末X X X X射线衍射等射线衍射等射线衍射等射线衍射等; ; ; ; 有对照品有对照品有对照
18、品有对照品: : : : 对对对对比比比比自自自自制制制制药药药药物物物物与与与与已已已已上上上上市市市市药药药药物物物物的的的的熔熔熔熔点点点点、红红红红外外外外光光光光谱谱谱谱图图图图、粉末粉末粉末粉末X X X X射线衍射图谱等射线衍射图谱等射线衍射图谱等射线衍射图谱等; ; ; ; 有文献有文献有文献有文献(wnxin)(wnxin)(wnxin)(wnxin)报道报道报道报道: : : : 对对对对文文文文献献献献(wnxin)(wnxin)(wnxin)(wnxin)资资资资料料料料进进进进行行行行分分分分析析析析，选选选选取取取取能能能能够够够够准准准准确确确确反反反反映产品晶型
19、的测试项目映产品晶型的测试项目映产品晶型的测试项目映产品晶型的测试项目; ; ; ;第18页/共127页第十九页，共128页。结晶结晶(jijng)(jijng)水水/ /结晶结晶(jijng)(jijng)溶剂的研究溶剂的研究: : 药物分子药物分子药物分子药物分子(fnz)(fnz)(fnz)(fnz)通过氢键等和水、有机溶通过氢键等和水、有机溶通过氢键等和水、有机溶通过氢键等和水、有机溶剂结合形成水合物剂结合形成水合物剂结合形成水合物剂结合形成水合物/ / / /溶剂化物溶剂化物溶剂化物溶剂化物, , , ,含有不同数量结含有不同数量结含有不同数量结含有不同数量结晶水晶水晶水晶水/ /
20、/ /结晶溶剂的化合物可能具有不同的物理结晶溶剂的化合物可能具有不同的物理结晶溶剂的化合物可能具有不同的物理结晶溶剂的化合物可能具有不同的物理性质性质性质性质, , , ,进而可能影响药物的生物利用度进而可能影响药物的生物利用度进而可能影响药物的生物利用度进而可能影响药物的生物利用度, , , ,因此对因此对因此对因此对于原料药应明确其所含的结晶水于原料药应明确其所含的结晶水于原料药应明确其所含的结晶水于原料药应明确其所含的结晶水/ / / /溶剂的情况。溶剂的情况。溶剂的情况。溶剂的情况。第19页/共127页第二十页，共128页。结晶水结晶水/ /结晶溶剂结晶溶剂(rngj)(rngj)的研
21、究的研究: : a. a. a. a.元素分析元素分析元素分析元素分析(fnx)(fnx)(fnx)(fnx) b. b. b. b.热分析热分析热分析热分析(fnx)(fnx)(fnx)(fnx) c. c. c. c.干燥失重、水分检查干燥失重、水分检查干燥失重、水分检查干燥失重、水分检查 d. d. d. d.单晶单晶单晶单晶X-X-X-X-射线衍射射线衍射射线衍射射线衍射第20页/共127页第二十一页，共128页。 创新药：创新药：创新药：创新药： 在在在在干干干干燥燥燥燥失失失失重重重重、水水水水分分分分测测测测定定定定研研研研究究究究的的的的基基基基础础础础上上上上，通通通通过过过
22、过热热热热分分分分析析析析、元元元元素素素素(yun (yun (yun (yun s)s)s)s)分分分分析等确证样品分子中结晶水析等确证样品分子中结晶水析等确证样品分子中结晶水析等确证样品分子中结晶水/ / / /结晶溶剂的数量结晶溶剂的数量结晶溶剂的数量结晶溶剂的数量; ; ; ; 已上市的药品：已上市的药品：已上市的药品：已上市的药品： 采采采采取取取取合合合合适适适适的的的的分分分分析析析析方方方方法法法法对对对对样样样样品品品品进进进进行行行行分分分分析析析析，以以以以确确确确证证证证其其其其结结结结晶晶晶晶水水水水/ / / /结结结结晶晶晶晶溶溶溶溶剂剂剂剂的的的的情情情情况与
23、已上市产品一致况与已上市产品一致况与已上市产品一致况与已上市产品一致; ; ; ;第21页/共127页第二十二页，共128页。小结小结(xioji)： 在审评过程中专家评价的关注点一般包括在审评过程中专家评价的关注点一般包括: :结构确证方案设计的合理性结构确证方案设计的合理性, ,是否对化合物所有要素进行了考虑是否对化合物所有要素进行了考虑; ;研究内容研究内容(nirng)(nirng)设置的全面性设置的全面性, ,所所有的结构特征是否已被确证有的结构特征是否已被确证; ;分析方法选择的正确性分析方法选择的正确性, ,所用方法能否针对所用方法能否针对性地解决结构问题。性地解决结构问题。 研
24、发者在进行结构确证研究时研发者在进行结构确证研究时, ,测试项目的选择要依据化合物结构特点、测试项目的选择要依据化合物结构特点、需要解决的结构问题、各种方法所能解决的结构问题等综合考虑。需要解决的结构问题、各种方法所能解决的结构问题等综合考虑。第22页/共127页第二十三页，共128页。 对测试样品和对照对测试样品和对照(duzho)样样品的要求：品的要求：测试样品: a. 精制(jngzh)方法 测试样品要采用和原料药制备工艺中相同的精制(jngzh)方法、工艺条件进行精制(jngzh)；对于进行晶型分析、结晶水/结晶溶剂分析时尤其需要注意，因为不同的精制(jngzh)方法和工艺条件可能产生
25、不同的晶型、结晶水/溶剂。 b. 纯度要求 大于99.0%，杂质含量应小于0.5%； 对于手性药物，应增加对对映体、非对映体纯度要求，一般 不低于99.5%。第23页/共127页第二十四页，共128页。n n注意点：n n仿制药物：相关(xinggun)物质大于或等于0.1%，要进行结构确证（注意响应因子）n n创新药物：除了与仿制药物一样之外，尽可能多的罗列所有可能杂质，要与中间体关联，特别注意手性问题！第24页/共127页第二十五页，共128页。 对照品对照品: : a. a. 合法来源证明合法来源证明 购得的标准品购得的标准品( (已有国家标准的药品已有国家标准的药品) ) 市售原料药市
26、售原料药 市售制剂中提取得到的原料药市售制剂中提取得到的原料药 从正规试剂公司购得的试剂等从正规试剂公司购得的试剂等（有有的的申申报报资资料料中中，未未选选择择(xu(xu nz)nz)上上市市原原料料药药或或其其他他合合法法对对照照品品，而而是是采采用用自自己己单单位位精精制制的的产产品品，这种这种“ “自身自身” ”对照的数据和图谱对于结构确证没有任何帮助。对照的数据和图谱对于结构确证没有任何帮助。 ） 第25页/共127页第二十六页，共128页。 b b. . 精精精精制制制制方方方方法法法法： 对对对对于于于于用用用用于于于于晶晶晶晶型型型型、结结结结晶晶晶晶水水水水等等等等信信信信息
27、息息息确确确确证证证证( (q qu u z zh h n n ) )的的的的对对对对照照照照品品品品，不不不不应应应应采采采采用用用用处处处处理理理理后后后后原原原原料料料料药药药药或或或或制制制制剂剂剂剂中中中中提提提提取取取取物物物物作作作作为为为为对对对对照照照照品品品品，因因因因为为为为原原原原料料料料药药药药和和和和制制制制剂剂剂剂在在在在不不不不同同同同溶溶溶溶媒媒媒媒处处处处理理理理后后后后，会会会会对对对对样样样样品品品品真真真真实实实实的的的的晶晶晶晶型型型型和和和和结结结结晶晶晶晶水水水水产产产产生生生生影影影影响响响响，造造造造成成成成误误误误判判判判。 c c. .
28、纯纯纯纯度度度度检检检检查查查查： 对对对对照照照照品品品品的的的的纯纯纯纯度度度度检检检检查查查查：申申申申报报报报资资资资料料料料中中中中应应应应提提提提供供供供对对对对照照照照品品品品的的的的纯纯纯纯度度度度检检检检查查查查结结结结果果果果。一一一一般般般般来来来来说说说说，对对对对照照照照品品品品纯纯纯纯度度度度应应应应不不不不低低低低于于于于精精精精制制制制品品品品纯纯纯纯度度度度，以以以以保保保保证证证证对对对对照照照照品品品品对对对对药药药药物物物物结结结结构构构构确确确确证证证证( (q qu u z zh h n n ) )的的的的支支支支持持持持力力力力度度度度。第26页/
29、共127页第二十七页，共128页。4. 4. 结构确证结构确证结构确证结构确证(qu zhn)(qu zhn)研究的一般要求研究的一般要求研究的一般要求研究的一般要求第27页/共127页第二十八页，共128页。对图谱对图谱(tp)、数据的要求、数据的要求 附图应为原图的复印件或照片; 图谱及图谱上的标记、数据应清晰，并有完整的检测日期(rq)、各项参数、测试条件、仪器型号及样品编号等记录。 各项检测数据应按规定列表说明，注明其顺序。有对照品的应将测试品和对照品同一波谱的数据在一个表中对比列出。如有可作参照的文献数据，也可列在同一表中。质谱应附离子裂解图。第28页/共127页第二十九页，共128
30、页。( (二二二二) ) 对不同类别药品结构对不同类别药品结构对不同类别药品结构对不同类别药品结构(jigu)(jigu)确证的要求确证的要求确证的要求确证的要求n n未知结构(jigu)的化合物：推论结构(jigu)n n已知结构(jigu)的化合物：验证结构(jigu)第29页/共127页第三十页，共128页。 未在国内外上市未在国内外上市(shng sh)销售的原料药销售的原料药 按按全全新新化化学学单单体体要要求：推论结构求：推论结构 a.完完成成必必要要的的各各项项测试测试; b.应应提提供供(tgng)充充分的试验图谱和数据分的试验图谱和数据; c. 按按新新化化合合物物要要求求进
31、进行行图图谱谱解解析析和和综综合合解析解析; 如如有有参参考考文文献献资资料料，可可提提供供(tgng)作作参考。参考。第30页/共127页第三十一页，共128页。 已在国外上市已在国外上市已在国外上市已在国外上市(shng sh)(shng sh)销售但尚未销售但尚未销售但尚未销售但尚未在国内销售的原料药或已有国家标准的在国内销售的原料药或已有国家标准的在国内销售的原料药或已有国家标准的在国内销售的原料药或已有国家标准的原料药原料药原料药原料药 按已知化学(huxu)结构的药物：验证结构 可以使用对照品 可以参考文献 第31页/共127页第三十二页，共128页。 a. 有合格对照品的化合物：
32、 提供测试样品和对照品在完全相同条件和同一仪器上测得的各项图谱和数据，完成所需的各项目测试，若二者完全相同，并对重要(zhngyo)的波谱讯号和测试数据进行了正确解析，即可得出二者化学结构一致的结论。 第32页/共127页第三十三页，共128页。 b. b. 有详细有详细有详细有详细(xingx)(xingx)文献数据的化合物：文献数据的化合物：文献数据的化合物：文献数据的化合物： 可可可可对对对对结结结结构构构构确确确确证证证证研研研研究究究究的的的的内内内内容容容容、方方方方法法法法提提提提供供供供线线线线索索索索，并并并并为为为为解解解解析析析析提提提提供供供供参参参参考考考考，但但但但
33、是是是是不不不不能能能能作作作作为为为为结结结结构构构构确确确确证证证证研研研研究究究究的的的的充充充充分分分分证证证证据据据据，仍仍仍仍需需需需要要要要进进进进行行行行较较较较为为为为详详详详尽尽尽尽的的的的图图图图谱谱谱谱解解解解析析析析和和和和综合解析。综合解析。综合解析。综合解析。 第33页/共127页第三十四页，共128页。 c. c. 无对照品和文献数据的化合物：无对照品和文献数据的化合物：无对照品和文献数据的化合物：无对照品和文献数据的化合物： 除除除除了了了了目目目目标标标标化化化化合合合合物物物物的的的的结结结结构构构构(jigu)(jigu)外外外外，缺缺缺缺乏乏乏乏其其其
34、其他他他他支支支支持持持持性性性性资资资资料料料料，因因因因此此此此原原原原则则则则上上上上应应应应按按按按全全全全新新新新化化化化学学学学单单单单体体体体要要要要求求求求进进进进行行行行全全全全面面面面的的的的研研研研究究究究，提提提提供供供供充充充充分分分分的的的的试试试试验验验验图图图图谱谱谱谱和和和和数数数数据据据据，可可可可结结结结合合合合其其其其它它它它研研研研究究究究工工工工作作作作（例例例例如如如如合合合合成成成成工工工工艺艺艺艺路路路路线线线线的的的的确确确确定定定定）以以以以进进进进一一一一步步步步推推推推论论论论化合物的结构化合物的结构化合物的结构化合物的结构(jigu)
35、(jigu)。第34页/共127页第三十五页，共128页。( (三三三三) ) 对特殊化学结构对特殊化学结构对特殊化学结构对特殊化学结构(jigu)(jigu)药品结构药品结构药品结构药品结构(jigu)(jigu)确证的要求确证的要求确证的要求确证的要求 第35页/共127页第三十六页，共128页。1. 1. 立体立体立体立体(lt(lt ) )异构体药物异构体药物异构体药物异构体药物 立体(lt)异构体： 光学异构体 a. 对映异构体 b. 非对映异构体 几何异构体（顺、反异构体）第36页/共127页第三十七页，共128页。 手性药物手性药物-绝对构型和相对构型绝对构型和相对构型 a. 单
36、一对映体单一对映体-绝对构型绝对构型 比旋度测定比旋度测定 手性柱色谱手性柱色谱 (手性手性HPLC和和GC) 核磁共振核磁共振 单晶单晶X-衍射衍射(ynsh) 圆二色谱圆二色谱 旋光光谱旋光光谱第37页/共127页第三十八页，共128页。 b. 消旋体-有多个手性中心时要求(yoqi)确定相对构型; c. 立体异构混合物-确定异构体的组成和比例;第38页/共127页第三十九页，共128页。“手性药物申报手性药物申报(shnbo)资料及审评要点资料及审评要点” (药审中心药审中心) 应应注注意意确确证证产产品品的的立立体体构构型型。可可根根据据手手性性中中心心的的多多少少、文文献献数数据据是
37、是否否充充足足、对对照照品品的的有有无无来来选选择择合合适适的的确确证证的的方方法法(fngf(fngf ) )，必要时可采用单晶，必要时可采用单晶X X射线衍射进行确证。射线衍射进行确证。 比比旋旋度度是是必必须须的的检检测测项项目目之之一一，已已知知的的起起始始原原料料的的构构型型和和化化学学合合成成方方法法(fngf(fngf ) )的的立立体体选选择择性性也也可可作作为为依依据据之之一。一。第39页/共127页第四十页，共128页。2. 具有具有(jyu)多晶型的药物多晶型的药物 晶型晶型: 是指结晶物质晶格内分子的排列形式。是指结晶物质晶格内分子的排列形式。 多晶型物质晶格内部分子间
38、力的差异可能引多晶型物质晶格内部分子间力的差异可能引起药物各种理化性质的变化，起药物各种理化性质的变化， 主要主要(zhyo)对熔点、溶解度及溶出速率、稳定性、有效对熔点、溶解度及溶出速率、稳定性、有效性的影响。性的影响。第40页/共127页第四十一页，共128页。 重点：重点： 以适宜的方法获得药物晶型的数据。以适宜的方法获得药物晶型的数据。 常用常用(chn(chn yn yn ) )方法：方法： 粉末粉末X-X-衍射法衍射法 红外吸收光谱法红外吸收光谱法 熔点熔点 热分析热分析 光学显微镜光学显微镜第41页/共127页第四十二页，共128页。 创新药物 a. 不同(b tn)结晶条件下（
39、溶剂、温度、结晶速率等）晶型的一致性； b. 不同(b tn)晶型是否影响药物活性和毒性等;第42页/共127页第四十三页，共128页。 结构已知的仿制药品结构已知的仿制药品 a. 力求与被仿制品保持一致；力求与被仿制品保持一致； 特特别别是是被被仿仿制制药药为为晶晶型型选选择择性性药药物物，且且各各晶晶型型的的理理化化性性质质(xngzh)及及生生物物药药剂剂学学性性质质(xngzh)有有明明显显差差异异的的仿仿制制药药品品，要要重重点点确确定定与与被被仿仿制制品品种种晶晶型型的的完完全全一一致致性性（熔熔点点、红红外外吸吸收收光光谱谱、粉粉末末X射射线线衍衍射射图图等等)。 b. 重点关注
40、难溶性固体口服制剂晶型的研究；重点关注难溶性固体口服制剂晶型的研究；第43页/共127页第四十四页，共128页。3. 合成合成(hchng)多肽类药物多肽类药物 氨基酸分析（证明多肽的组成是否正确）；氨基酸分析（证明多肽的组成是否正确）； 质谱测定（提供相对分子质量及序列的信息质谱测定（提供相对分子质量及序列的信息(xnx)(xnx)）；）； 序列分析以及肽图测绘等；序列分析以及肽图测绘等； 紫外：对具有生色团结构的小肽有一定的测试意义；紫外：对具有生色团结构的小肽有一定的测试意义； 红外：适用于小肽（含三个氨基酸的肽）、拟肽等；红外：适用于小肽（含三个氨基酸的肽）、拟肽等； 核磁共振：可对小
41、肽的结构提供部分信息核磁共振：可对小肽的结构提供部分信息(xnx)(xnx)； 其他方法：其他方法： HPLC HPLC、比旋度测定等。、比旋度测定等。第44页/共127页第四十五页，共128页。 药物结构中有半胱氨酸，应明确(mngqu)其状态（氧化态或还原态）； 药物结构中存在二硫键，应明确(mngqu)二硫键的正确连接点； 结合合成工艺对中间体的研究，对终产品的结构进行确证。第45页/共127页第四十六页，共128页。4. 多糖类药物多糖类药物(yow)多糖结构多糖结构(jigu)的描述包括的描述包括:多糖的分子量范围；多糖的分子量范围；多糖的单糖组分；多糖的单糖组分；单糖的连接点类型；
42、单糖的连接点类型；单糖和糖苷键的构型；单糖和糖苷键的构型；重复单位重复单位; 第46页/共127页第四十七页，共128页。n n确证方法：确证方法：n n 单糖单糖(dn tn)的分离、鉴定：纸色谱法、的分离、鉴定：纸色谱法、TLC、HPLC、气、气-质联用技术等；质联用技术等；n n 多糖的相对分子量及分子量分布测定：凝多糖的相对分子量及分子量分布测定：凝胶色谱法；胶色谱法；n n 糖苷键的连接方式及糖苷键的位置：红外、糖苷键的连接方式及糖苷键的位置：红外、核磁共振、化学反应后产物的分析等；核磁共振、化学反应后产物的分析等；第47页/共127页第四十八页，共128页。5. 5. 多组分药物多
43、组分药物多组分药物多组分药物(yow)(yow) 明明确确各各组组分分的的组组成成比比例例，对对影影响响药药效效和和毒毒性性(d xn(d xn ) )的主要成分进行结构确证。的主要成分进行结构确证。 可可使使用用经经典典的的提提取取方方法法或或其其它它分分离离技技术术，如如制制备备色色谱谱（TLCTLC，HPLCHPLC），分分离离得得到到主主要要药药效效成成分分单单体体，按按单单体体项项目目要要求求进进行行化化学学结结构确证。构确证。 在在组组分分多多，含含量量少少，难难于于得得到到单单体体时时，可可使使用用联联机机分分析析技技术术，如如气气一一质质联联用用（GCGCMSMS），液液质质联
44、联用用（LCMSLCMS），气气付付利利叶叶 红红 外外 联联 用用 （ GCFTIRGCFTIR） ， 质质 质质 联联 用用（MSMSMSMS），辅辅助助组组分分结结构构的的验验证证及及定定量量分分析。析。第48页/共127页第四十九页，共128页。6. 不含金属元素的有机不含金属元素的有机(yuj)盐类或盐类或复合物复合物 应同时提供成盐前后的两套波谱和试验数据。 对于某些波谱测定有困难(kn nn)或不易说明其结构的盐或复合物，可测定药物酸根或碱基的波谱，并结合其他试验项目进行确证。第49页/共127页第五十页，共128页。7. 7. 金属金属金属金属(jnsh(jnsh ) )盐类和
45、络合物盐类和络合物盐类和络合物盐类和络合物 除通常要求的各项测试外，还应提供确证分子中金属元素的种类、存在形式和含量的有关图谱和分析数据。 不适于或不能测试金属盐本身(bnshn)的项目，可以用成盐前的酸分子或配位体的相应测试结果进行佐证。第50页/共127页第五十一页，共128页。8. 8. 半合成半合成半合成半合成(hchng)(hchng)化合物化合物化合物化合物 分分子子母母核核的的结结构构为为已已知知并并可可以以确确证证其其原原分分子子母母核核结结构构在在合合成成(hchng)(hchng)过过程程中中未未发发生生改改变变的的，可可适适当当简简化化对对母母核核部部分分结结构构的的确确
46、证证工工作作。重重点点对对新新引引入入基基团团进进行行结结构构确确证证，可可以以结结合合原原料料结结构和合成构和合成(hchng)(hchng)路线进行论证和说明。路线进行论证和说明。 如如涉涉及及构构型型确确证证，若若母母核核手手性性中中心心构构型型没没有有改改变变时时，重重点点在在于于侧侧链链和和取取代代基基中中新新引引入入手手性性中心的构型确定。中心的构型确定。第51页/共127页第五十二页，共128页。n n综合(zngh)解析举例第52页/共127页第五十三页，共128页。第53页/共127页第五十四页，共128页。FABMS22 muM+HM+Na第54页/共127页第五十五页，共
47、128页。第55页/共127页第五十六页，共128页。123645789101112131415第56页/共127页第五十七页，共128页。1236457891011121314CHCH2OCH3第57页/共127页第五十八页，共128页。123645789101112131412a2b345910111314786第58页/共127页第五十九页，共128页。12a2b34591011131478612a386452b9711101413第59页/共127页第六十页，共128页。12364578910111213141512a2b345910111314786第60页/共127页第六十一页，共
48、128页。第61页/共127页第六十二页，共128页。申报资料的格式申报资料的格式(g shi)和内容和内容n n 一一一一. . 新药的化学结构式、分子式及分子量新药的化学结构式、分子式及分子量新药的化学结构式、分子式及分子量新药的化学结构式、分子式及分子量n n 二二二二. . 供确认化学结构用供试品的纯度及检查纯度的方法供确认化学结构用供试品的纯度及检查纯度的方法供确认化学结构用供试品的纯度及检查纯度的方法供确认化学结构用供试品的纯度及检查纯度的方法n n 三三三三. . 确证化学结构的方法确证化学结构的方法确证化学结构的方法确证化学结构的方法n n 理化常数理化常数理化常数理化常数n
49、n 元素分析元素分析元素分析元素分析n n 四四四四. . 各项波谱和测试的技术要求各项波谱和测试的技术要求各项波谱和测试的技术要求各项波谱和测试的技术要求(yoqi)(yoqi)n n 紫外吸收光谱紫外吸收光谱紫外吸收光谱紫外吸收光谱n n 红外吸收光谱红外吸收光谱红外吸收光谱红外吸收光谱n n 核磁共振氢谱核磁共振氢谱核磁共振氢谱核磁共振氢谱n n 核磁共振碳谱核磁共振碳谱核磁共振碳谱核磁共振碳谱n n 质谱质谱质谱质谱n n 差热分析差热分析差热分析差热分析n n X- X-射线衍射谱射线衍射谱射线衍射谱射线衍射谱n n 综合解析综合解析综合解析综合解析n n 五五五五. . 参考文献参
50、考文献参考文献参考文献n n 第62页/共127页第六十三页，共128页。一一一一. . 新药新药新药新药(xn yo)(xn yo)的化学结构式、分子式及分子量的化学结构式、分子式及分子量的化学结构式、分子式及分子量的化学结构式、分子式及分子量第63页/共127页第六十四页，共128页。n n二二. 供确认化学结构用供试品的纯度及检查供确认化学结构用供试品的纯度及检查(jinch)纯度的方法纯度的方法第64页/共127页第六十五页，共128页。三三. 确证化学结构确证化学结构(jigu)的方的方法法第65页/共127页第六十六页，共128页。2 元素元素(yun s)分析分析 主要应用：主要
51、应用：主要应用：主要应用： 确定元素组成、分子式确定元素组成、分子式确定元素组成、分子式确定元素组成、分子式; ; 除氧元素外，其余各种元素一般均能准确测定其含量。除氧元素外，其余各种元素一般均能准确测定其含量。除氧元素外，其余各种元素一般均能准确测定其含量。除氧元素外，其余各种元素一般均能准确测定其含量。 可以反映结晶水可以反映结晶水可以反映结晶水可以反映结晶水/ /结晶溶剂、成盐化合物的酸根结晶溶剂、成盐化合物的酸根结晶溶剂、成盐化合物的酸根结晶溶剂、成盐化合物的酸根(sungn)(sungn)和碱基等。和碱基等。和碱基等。和碱基等。 C C、HH、NN元素可采用自动元素分析仪测定，其他元
52、素可采用适宜的物理元素可采用自动元素分析仪测定，其他元素可采用适宜的物理元素可采用自动元素分析仪测定，其他元素可采用适宜的物理元素可采用自动元素分析仪测定，其他元素可采用适宜的物理或化学方法测定。或化学方法测定。或化学方法测定。或化学方法测定。 第66页/共127页第六十七页，共128页。 技术要求：技术要求：技术要求：技术要求： a. a. 应应应应详详详详细细细细说说说说明明明明使使使使用用用用仪仪仪仪器器器器、测测测测定定定定方方方方法法法法及及及及条条条条件件件件。特特特特别别别别是是是是对对对对测测测测试样品的预处理方法、条件。试样品的预处理方法、条件。试样品的预处理方法、条件。试样
53、品的预处理方法、条件。 b. b. 同同同同一一一一样样样样品品品品测测测测定定定定两两两两次次次次，两两两两次次次次实实实实验验验验数数数数据据据据同同同同时时时时列列列列出出出出，不不不不取取取取平平平平均值。均值。均值。均值。 c. c. 应应应应给给给给出出出出计计计计算算算算理理理理论论论论值值值值所所所所依依依依据据据据的的的的分分分分子子子子式式式式，包包包包括括括括结结结结晶晶晶晶水水水水（或或或或结结结结晶晶晶晶溶溶溶溶剂剂剂剂(rngj) (rngj) 。列列列列表表表表比比比比较较较较实实实实测测测测值值值值与与与与理理理理论论论论值值值值（一一一一般般般般要要要要求求求
54、求误误误误差差差差不不不不超超超超过过过过），初初初初步步步步判判判判定定定定供供供供试试试试品品品品与与与与目目目目标标标标化化化化合合合合物物物物的的的的分分分分子子子子组组组组成是否一致。成是否一致。成是否一致。成是否一致。 d. d. 附测试报告单的复印件。附测试报告单的复印件。附测试报告单的复印件。附测试报告单的复印件。第67页/共127页第六十八页，共128页。n n仪器型号与测定条件仪器型号与测定条件n n仪器：仪器：Carlo-Erba 1106Carlo-Erba 1106元素分析仪元素分析仪( (意大利意大利) )n n测定条件：测定条件：10501050催化燃烧催化燃烧
55、载气：载气：N2 N2 n n 氧瓶法测定氧瓶法测定n n测定结果与解析测定结果与解析n n测定结果：样品测定结果与对照品测定结果见附表测定结果：样品测定结果与对照品测定结果见附表1 1。n n结果解析：样品与对照品的实测值同理论计算值基本相符结果解析：样品与对照品的实测值同理论计算值基本相符(xingf)(xingf)，C C、HH、NN、的误差均在千、的误差均在千分之五以内，同含分之五以内，同含5 5个结晶水的盐酸大观霉素分子式个结晶水的盐酸大观霉素分子式C14H24ClN2O72HCl5H2OC14H24ClN2O72HCl5H2O符合。符合。n n表表1 1 样品（样品（0207080
56、20708）与对照品（）与对照品（DJSDJS）的元素分析数据）的元素分析数据第68页/共127页第六十九页，共128页。n n CHN样品（020708）(%)33.667.285.6433.767.375.67对照品（DJS）(%)33.657.305.6733.627.295.68理论计算值(%)33.957.335.66第69页/共127页第七十页，共128页。(四四)各项波谱和测试各项波谱和测试(csh)的技术要的技术要求求第70页/共127页第七十一页，共128页。1. 1. 红外吸收光谱红外吸收光谱(x shu un (x shu un p)(IR)p)(IR) 基本原理：基本原
57、理： 分子中化学键振动能级的跃迁。分子中化学键振动能级的跃迁。主要应用：主要应用： a. a.鉴定化合物的结构鉴定化合物的结构(jigu)(jigu) 有对照品、标准图谱有对照品、标准图谱 b. b.推测化合物的结构推测化合物的结构(jigu) (jigu) 确定特征官能团、区分晶型等确定特征官能团、区分晶型等第71页/共127页第七十二页，共128页。 技术要求：技术要求：技术要求：技术要求： a. a. 按药典规定方法校正和检定仪器；按药典规定方法校正和检定仪器；按药典规定方法校正和检定仪器；按药典规定方法校正和检定仪器； b. b. 正确选择测试方法和条件正确选择测试方法和条件正确选择测
58、试方法和条件正确选择测试方法和条件 固体样品首选溴化钾压片法；固体样品首选溴化钾压片法；固体样品首选溴化钾压片法；固体样品首选溴化钾压片法； 离子交换离子交换离子交换离子交换-氯化钾压片；氯化钾压片；氯化钾压片；氯化钾压片； 晶型变化晶型变化晶型变化晶型变化-糊法；糊法；糊法；糊法； c. c. 准确、合理、充分的图谱准确、合理、充分的图谱准确、合理、充分的图谱准确、合理、充分的图谱(tp(tp ) )解析解析解析解析; ; d. d. 按要求格式列表和撰写资料按要求格式列表和撰写资料按要求格式列表和撰写资料按要求格式列表和撰写资料; ; 第72页/共127页第七十三页，共128页。仪器型号与
59、测试仪器：Nicolet Impact-400型红外分光光度计仪器测试：用聚苯乙烯膜仪器的测定条件(tiojin)测定条件(tiojin)：样品测定用溴化钾压片法测定图谱：图1、2附图3： 聚苯乙烯膜红外吸收光谱。第73页/共127页第七十四页，共128页。 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试条件测试条件 仪器校正仪器校正(jiozhng)和检定和检定 数据表数据表 解析解析吸收峰(cm-1) 强 度振动类型基 团第74页/共127页第七十五页，共128页。第75页/共127页第七十六页，共128页。第76页/共127页第七十七页，共128页。第77页/共127页第七十八页，共128页。
60、 2. 2. 紫外吸收光谱紫外吸收光谱(x shu un p)(UV)(x shu un p)(UV) 基本原理：电子跃迁基本原理：电子跃迁 主主要要应应用用：推推测测共共轭轭体体系系的的骨骨架架结结构构(jigu)(jigu)（发色团、助色团）（发色团、助色团） 紫外光谱紫外光谱定性定性 吸收系数吸收系数定量定量第78页/共127页第七十九页，共128页。n n技术要求技术要求n n a. 按药典规定方法校正和检定仪器；按药典规定方法校正和检定仪器；n n b. 通常要求三种溶剂：中性、通常要求三种溶剂：中性、0.1N HCl 、0.1N NaOH；n n c. 要求定量，准确计算摩尔吸收系
61、数；要求定量，准确计算摩尔吸收系数；n n d. 归属主要归属主要(zhyo)吸收谱带；吸收谱带；n n e. 数据列表说明；数据列表说明；第79页/共127页第八十页，共128页。第80页/共127页第八十一页，共128页。n n 资料撰写格式资料撰写格式n n 仪器仪器n n 测试条件测试条件n n 仪器校正和检定仪器校正和检定(jindng)n n 数据表数据表n n 解析解析 溶 剂 max 值基团和吸收带第81页/共127页第八十二页，共128页。溶 剂max nmAbs水194.80200.00210,002.06232.28060.82090.1mol/L盐酸200.00204.
62、00210.002.05892.26251.2121三乙胺198.00203.00210.002.00952.27111.3316第82页/共127页第八十三页，共128页。3.3.核磁共振核磁共振(h c n zhn)(h c n zhn)氢谱氢谱(1H-NMR)(1H-NMR) 基本原理：基本原理：基本原理：基本原理： 利利利利用用用用原原原原子子子子核核核核的的的的核核核核自自自自旋旋旋旋现现现现象象象象，通通通通过过过过一一一一定定定定振振振振动动动动频频频频率率率率的的的的电电电电磁磁磁磁波波波波照照照照射射射射时时时时，原原原原子子子子核核核核吸吸吸吸收收收收电磁波从低能态向高能态
63、跃迁，即核磁共振。电磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。电磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。电磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。主要应用主要应用主要应用主要应用 可提供供试品中氢原子数目可提供供试品中氢原子数目可提供供试品中氢原子数目可提供供试品中氢原子数目(shm)(shm)(shm)(shm)、周围化学、周围化学、周围化学、周围化学环境、相互间关系、空间排列等信息。环境、相互间关系、空间排列等信息。环境、相互间关系、空间排列等信息。环境、相互间关系、空间排列等信息。 第83页/共127页第八十四页，共128页。技术要求技术要求技术要求技术要求 a. a. 应使用应使用应使用应使用
64、200MHz200MHz以上高分辨以上高分辨以上高分辨以上高分辨NMRNMR仪。仪。仪。仪。 b. b. 对对对对各各各各项项项项测测测测试试试试条条条条件件件件应应应应有有有有明明明明确确确确、详详详详尽尽尽尽的的的的说说说说明明明明，如如如如仪仪仪仪器器器器型型型型号号号号、规格、溶剂、内标。规格、溶剂、内标。规格、溶剂、内标。规格、溶剂、内标。 c. c. 对分子对分子对分子对分子(fnz(fnz ) )中全部中全部中全部中全部HH原子均要有明确的解析和归属。原子均要有明确的解析和归属。原子均要有明确的解析和归属。原子均要有明确的解析和归属。 d. d. 对对对对复复复复杂杂杂杂结结结结
65、构构构构化化化化合合合合物物物物，应应应应考考考考虑虑虑虑采采采采用用用用合合合合适适适适的的的的其其其其它它它它技技技技术术术术加加加加以以以以佐佐佐佐证。证。证。证。 第84页/共127页第八十五页，共128页。第85页/共127页第八十六页，共128页。 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 溶剂、内标溶剂、内标 给出原子编号的分子结构式给出原子编号的分子结构式 数据表数据表 (如有对照如有对照(duzho)品或文献数据可以对品或文献数据可以对比列入表中比列入表中) 解析解析原子序号化学位移质子数多重性 J 值相应质子第86页/共127页第八十七页，共128页。4.4.4.4.核磁共振核磁
66、共振核磁共振核磁共振(h c n zhn)(h c n zhn)(h c n zhn)(h c n zhn)碳谱碳谱碳谱碳谱(13C-NMR)(13C-NMR)(13C-NMR)(13C-NMR) 基本原理：基本原理：基本原理：基本原理： 利用原子核的核自旋现象，通过一定利用原子核的核自旋现象，通过一定利用原子核的核自旋现象，通过一定利用原子核的核自旋现象，通过一定 振动频率的电磁波照射时，原子核吸收电振动频率的电磁波照射时，原子核吸收电振动频率的电磁波照射时，原子核吸收电振动频率的电磁波照射时，原子核吸收电 磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。磁波从低
67、能态向高能态跃迁，即核磁共振。磁波从低能态向高能态跃迁，即核磁共振。 主要应用主要应用主要应用主要应用: : 可提供供试品中碳原子的数目、所处的可提供供试品中碳原子的数目、所处的可提供供试品中碳原子的数目、所处的可提供供试品中碳原子的数目、所处的不同化学不同化学不同化学不同化学(huxu)(huxu)环境信息。环境信息。环境信息。环境信息。 第87页/共127页第八十八页，共128页。技术技术技术技术(jsh)(jsh)要求要求要求要求 a. a. 对对对对各各各各项项项项测测测测试试试试条条条条件件件件应应应应有有有有明明明明确确确确、详详详详尽尽尽尽的的的的说说说说明明明明，如如如如仪仪仪
68、仪器器器器型型型型号号号号、规规规规格格格格、溶剂、内标。溶剂、内标。溶剂、内标。溶剂、内标。 b. b. 在在在在图图图图谱谱谱谱复复复复杂杂杂杂时时时时，应应应应使使使使用用用用质质质质子子子子噪噪噪噪声声声声去去去去偶偶偶偶或或或或偏偏偏偏共共共共振振振振去去去去偶偶偶偶技技技技术术术术(jsh)(jsh)，使图谱简化。，使图谱简化。，使图谱简化。，使图谱简化。 c. c. 对分子中全部对分子中全部对分子中全部对分子中全部C C原子均要有明确的解析和归属。原子均要有明确的解析和归属。原子均要有明确的解析和归属。原子均要有明确的解析和归属。 d. d. 对对对对复复复复杂杂杂杂结结结结构构
69、构构化化化化合合合合物物物物，可可可可与与与与类类类类似似似似结结结结构构构构化化化化合合合合物物物物的的的的化化化化学学学学位位位位移移移移进进进进行行行行计计计计算比较，确定合理结构。算比较，确定合理结构。算比较，确定合理结构。算比较，确定合理结构。第88页/共127页第八十九页，共128页。 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 溶剂溶剂 给出碳原子编号的分子结构式给出碳原子编号的分子结构式 数据表数据表 (如有对照品或文献数据可以如有对照品或文献数据可以(ky)对比列入对比列入表中表中) 解析解析 碳原子序号 化学位移 碳原子类型第89页/共127页第九十页，共128页。5. 其他其他(
70、qt)核磁共振核磁共振谱谱 DEPT DEPT谱谱: :可区分碳原子的类型可区分碳原子的类型; ;1H1H1Hcosy: 1Hcosy: 可以显示相隔可以显示相隔2 23 3键相互之间存在偶合的质子键相互之间存在偶合的质子对信息对信息; ;C- Hcosy (HMQC ,C- Hcosy (HMQC ,异核多量子相异核多量子相关谱关谱): ): 可以了解分子中可以了解分子中C-HC-H联联结结(linji)(linji)情况情况; ; 第90页/共127页第九十一页，共128页。HSQC (HSQC (异核单量子相关异核单量子相关(xinggun)(xinggun)谱谱):):用于测定用于测定
71、1H-1H-13C13C相关相关(xinggun)(xinggun)信息，可以信息，可以直接明确直接明确C C、H H之间的连接关系之间的连接关系; ; HMBC ( HMBC (异核多重键相关异核多重键相关(xinggun)(xinggun)谱谱):):可以显示可以显示1H1H、13C 13C 之间远程偶合的信息，即相之间远程偶合的信息，即相隔二键和三键的隔二键和三键的1H1H、13C13C之间相之间相关关(xinggun)(xinggun)信号信号; ;解析化合物解析化合物中存在的结构单元，推测化合物中存在的结构单元，推测化合物中各官能团、结构单元之间的连中各官能团、结构单元之间的连接关系
72、接关系; ;19F19F、31P31P等等: :可提供相应元素的种可提供相应元素的种类及数目、在分子中所处的化学类及数目、在分子中所处的化学环境等信息环境等信息; ; 第91页/共127页第九十二页，共128页。n n常用的二维核磁共振测试包括常用的二维核磁共振测试包括H-HcosyH-Hcosy（H-H Correlated H-H Correlated spectroscopyspectroscopy）、）、HMBCHMBC（1H-detected multiple-bond heteronuclear 1H-detected multiple-bond heteronuclear mul
73、tiple-quantum coherencemultiple-quantum coherence）、）、HMQCHMQC（1H-detected heteronuclear 1H-detected heteronuclear multiple-quantum coherencemultiple-quantum coherence）等，对于结构）等，对于结构(jigu)(jigu)复杂或用一般复杂或用一般NMRNMR方法难以进行结构方法难以进行结构(jigu)(jigu)确证的化合物，进行二维谱测试确证的化合物，进行二维谱测试可更有效地确证药物的结构可更有效地确证药物的结构(jigu)(jig
74、u)。第92页/共127页第九十三页，共128页。第93页/共127页第九十四页，共128页。第94页/共127页第九十五页，共128页。第95页/共127页第九十六页，共128页。第96页/共127页第九十七页，共128页。第97页/共127页第九十八页，共128页。第98页/共127页第九十九页，共128页。第99页/共127页第一百页，共128页。碳谱注意碳谱注意(zh y)点：点：n n1. 碳信号数目比实际(shj)的少，原因可能为信号重叠，或有些季碳信号弱，或隐藏在溶剂信号内；n n2. 碳信号数目比实际(shj)的多，原因可能是某些化合物存在构象异构。第100页/共127页第一百
75、零一页，共128页。n n分子式：C44H69NO12.H2O 第101页/共127页第一百零二页，共128页。第102页/共127页第一百零三页，共128页。n n结构式为C44H69NO12，在其13C全去偶谱中应显示44个峰，但实际(shj)显示多达83个峰，这是因为在溶剂中有两种构像,一种为优势一种为劣势，（文献报道在氯仿中比例为3:1） 第103页/共127页第一百零四页，共128页。6. 6. 质谱质谱(MS) 基本原理：基本原理： 将将气气体体分分子子经经电电子子流流轰轰击击,使使分分子子中中的的电电子子成成为为带带正正电电荷荷的的分分子子离离子子,而而后后裂裂解解成成一一系系列
76、列的的 碎碎 片片 离离 子子 ,再再 通通 过过 磁磁 场场(cchng)使使不不同同质质荷荷比比的的正正离离子子分分离离并并记记录录其其相相对对强强度度,画画出质谱图。出质谱图。 第104页/共127页第一百零五页，共128页。 主要应用：主要应用：主要应用：主要应用： 提提提提供供供供分分分分子子子子离离离离子子子子峰峰峰峰、碎碎碎碎片片片片峰峰峰峰、丰丰丰丰度度度度等等等等信信信信息息息息，可可可可以以以以确确确确定分子量、分子式以及推测部分结构单元。定分子量、分子式以及推测部分结构单元。定分子量、分子式以及推测部分结构单元。定分子量、分子式以及推测部分结构单元。 对对对对含含含含有有
77、有有同同同同位位位位素素素素元元元元素素素素( ( ( (如如如如ClClClCl、BrBrBrBr等等等等) ) ) )的的的的药药药药物物物物, , , ,利利利利用用用用同同同同位位位位素素素素簇簇簇簇的的的的丰丰丰丰度度度度比比比比，可可可可推推推推断断断断药药药药物物物物中中中中部部部部分分分分元元元元素素素素的的的的种种种种类类类类、数量，乃至分子式、裂解数量，乃至分子式、裂解数量，乃至分子式、裂解数量，乃至分子式、裂解(li ji)(li ji)(li ji)(li ji)方式等。方式等。方式等。方式等。第105页/共127页第一百零六页，共128页。技术要求技术要求: a. 应
78、应尽尽量量设设法法获获得得化化合合物物分分子子离离子子峰峰。当当用用EI法法不不能能出出现现分分子子离离子子峰峰时时，可可试试用用其其它它电电离离源源，如如CI，FAB，FI，FD，ESI等。等。 b. 所所获获数数据据(shj)按按规规定定列列表表，并并对对重重要要的的碎碎片片离离子子峰峰的的产产生生进行解释，提供离子裂解图。进行解释，提供离子裂解图。 c. 高高分分辨辨质质谱谱不不能能反反映映药药品品的的纯纯度度和和结结晶晶水水，结结晶晶溶溶剂剂，残残留溶剂的情况。留溶剂的情况。第106页/共127页第一百零七页，共128页。 资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器 测试测试(csh)条件条件
79、 数据表数据表 裂解图裂解图 解析解析 M/ Z 相对丰度相对丰度 碎片离子碎片离子第107页/共127页第一百零八页，共128页。第108页/共127页第一百零九页，共128页。第109页/共127页第一百一十页，共128页。7. 7. 热分析热分析热分析热分析(fnx)(fnx) 基本原理：基本原理： 采用程序控温下，精确记录采用程序控温下，精确记录待测物质理化待测物质理化(lhu)性质与温性质与温度的关系，研究其受热过程中度的关系，研究其受热过程中晶型转变、熔融、升华等物理晶型转变、熔融、升华等物理变化和脱水、热分解、氧化、变化和脱水、热分解、氧化、还原等化学变化。还原等化学变化。 第1
80、10页/共127页第一百一十一页，共128页。 主要应用：主要应用： 差示扫描量热法差示扫描量热法（DSC): 测定熔点、结晶测定熔点、结晶水水/结晶溶剂、考察结晶溶剂、考察(koch)晶型等。晶型等。 热重法（热重法（TGA): 测定结测定结晶水、吸附水和结晶溶剂、晶水、吸附水和结晶溶剂、分解温度等。分解温度等。第111页/共127页第一百一十二页，共128页。 技术要求：技术要求：技术要求：技术要求： a. a. 应应应应说说说说明明明明使使使使用用用用仪仪仪仪器器器器型型型型号号号号、参参参参数数数数设设设设定定定定值值值值，包包包包括括括括升升升升温温温温度度度度速速速速度度度度、样品
81、重量、温度范围。样品重量、温度范围。样品重量、温度范围。样品重量、温度范围。 b. b. 供试品与对照品应在同一仪器、相同条件下测定。供试品与对照品应在同一仪器、相同条件下测定。供试品与对照品应在同一仪器、相同条件下测定。供试品与对照品应在同一仪器、相同条件下测定。 c. c. 差差差差热热热热分分分分析析析析曲曲曲曲线线线线表表表表达达达达：纵纵纵纵坐坐坐坐标标标标为为为为热热热热流流流流率率率率（dp/dtdp/dt），横横横横坐坐坐坐标标标标为为为为温温温温度度度度（）。气气气气体体体体(qt(qt ) )一一一一般般般般为为为为氮氮氮氮气气气气，流流流流速速速速为为为为40ml/min
82、40ml/min。 热热热热重重重重分分分分析析析析曲曲曲曲线线线线表表表表达达达达：纵纵纵纵坐坐坐坐标标标标为为为为重重重重量量量量（mgmg）或或或或重重重重量量量量百百百百分分分分数数数数，横横横横坐坐坐坐标标标标为为为为温温温温度度度度（），气气气气体体体体(qt(qt ) )一一一一般般般般为为为为氮氮氮氮气气气气，流流流流速为速为速为速为40ml/min40ml/min。 第112页/共127页第一百一十三页，共128页。 资料撰写格式资料撰写格式资料撰写格式资料撰写格式 仪器仪器仪器仪器(yq)(yq) 测试条件测试条件测试条件测试条件 测试结果和讨论测试结果和讨论测试结果和讨论
83、测试结果和讨论第113页/共127页第一百一十四页，共128页。第114页/共127页第一百一十五页，共128页。第115页/共127页第一百一十六页，共128页。射线射线(shxin)(shxin)衍射衍射 粉末粉末X-X-射线衍射射线衍射 主要应用主要应用: : a. a. 固体状态下单一固体状态下单一(dny)(dny)化合物的鉴别化合物的鉴别 b. b. 晶型确定晶型确定 c. c. 晶态与非晶态物质晶态与非晶态物质的判断等的判断等 第116页/共127页第一百一十七页，共128页。 单晶单晶X射线衍射射线衍射 主要应用主要应用: a. 化合物的骨架结构信息化合物的骨架结构信息(xnx
84、) b. 化合物的相对或绝对构型化合物的相对或绝对构型 c. 构象及差向异构构象及差向异构 d. 盐键及配位键盐键及配位键 f. 结晶水结晶水/溶剂溶剂第117页/共127页第一百一十八页，共128页。 资料撰写格式 仪器 测试条件 结构解析(ji x) 晶体学参数 结构测定方法 结构数据 结构图 结论第118页/共127页第一百一十九页，共128页。第119页/共127页第一百二十页，共128页。9. 9. 综合综合(zngh)(zngh)解析解析n n 在结构确证申报资料中存在的问在结构确证申报资料中存在的问在结构确证申报资料中存在的问在结构确证申报资料中存在的问题主要体现在解析不充分题主
85、要体现在解析不充分题主要体现在解析不充分题主要体现在解析不充分, , , ,未对各项研究提未对各项研究提未对各项研究提未对各项研究提供的数据和信息进行供的数据和信息进行供的数据和信息进行供的数据和信息进行(jnxng)(jnxng)(jnxng)(jnxng)有机、深入、有机、深入、有机、深入、有机、深入、合理地综合分析合理地综合分析合理地综合分析合理地综合分析, , , ,仅是机械式地罗列测试数仅是机械式地罗列测试数仅是机械式地罗列测试数仅是机械式地罗列测试数据和图谱据和图谱据和图谱据和图谱, , , ,没有综合解析过程没有综合解析过程没有综合解析过程没有综合解析过程, , , ,割裂了各种
86、测割裂了各种测割裂了各种测割裂了各种测试数据的联系试数据的联系试数据的联系试数据的联系, , , ,以致未达到对药物结构进行以致未达到对药物结构进行以致未达到对药物结构进行以致未达到对药物结构进行(jnxng)(jnxng)(jnxng)(jnxng)准确认识的目的准确认识的目的准确认识的目的准确认识的目的, , , ,特别是在药物结特别是在药物结特别是在药物结特别是在药物结构中的某些信息需多种方法相互结合才能作构中的某些信息需多种方法相互结合才能作构中的某些信息需多种方法相互结合才能作构中的某些信息需多种方法相互结合才能作出准确判断或多种方法相互结合方可进一步出准确判断或多种方法相互结合方可
87、进一步出准确判断或多种方法相互结合方可进一步出准确判断或多种方法相互结合方可进一步深入了解药物结构信息的情况下深入了解药物结构信息的情况下深入了解药物结构信息的情况下深入了解药物结构信息的情况下, , , ,该现象表该现象表该现象表该现象表现得尤为明显。现得尤为明显。现得尤为明显。现得尤为明显。第120页/共127页第一百二十一页，共128页。n n 综合解析的一般过程综合解析的一般过程综合解析的一般过程综合解析的一般过程(guchng):(guchng):(guchng):(guchng):n na. a. a. a. 确定化合物的分子式确定化合物的分子式确定化合物的分子式确定化合物的分子式
88、n n 元素分析元素分析元素分析元素分析n n 质谱法（尤其是高分辨质谱）质谱法（尤其是高分辨质谱）质谱法（尤其是高分辨质谱）质谱法（尤其是高分辨质谱）n n 综合各种谱图提供的碳、氢等原子数综合各种谱图提供的碳、氢等原子数综合各种谱图提供的碳、氢等原子数综合各种谱图提供的碳、氢等原子数n nb. b. b. b. 根据分子式计算不饱和度根据分子式计算不饱和度根据分子式计算不饱和度根据分子式计算不饱和度n nc. c. c. c. 确定分子中存在的主要官能团和结构单元确定分子中存在的主要官能团和结构单元确定分子中存在的主要官能团和结构单元确定分子中存在的主要官能团和结构单元n nd. d. d
89、. d. 明确各官能团、结构单元的连接方式明确各官能团、结构单元的连接方式明确各官能团、结构单元的连接方式明确各官能团、结构单元的连接方式n ne. e. e. e. 对构型、晶型、结晶水对构型、晶型、结晶水对构型、晶型、结晶水对构型、晶型、结晶水/ / / /结晶溶剂进行分析结晶溶剂进行分析结晶溶剂进行分析结晶溶剂进行分析第121页/共127页第一百二十二页，共128页。 技术要求：技术要求： a. a. 有对照品有对照品 样品和对照品的测试样品和对照品的测试结果是否一致结果是否一致 波谱信号的归属波谱信号的归属 b. b. 无对照品无对照品 详细的解析、正确的详细的解析、正确的归属归属 参
90、考文献可以作为参考文献可以作为(zuwi)(zuwi)重要的参考资料重要的参考资料第122页/共127页第一百二十三页，共128页。 资料撰写要求：资料撰写要求： 简明扼要简明扼要 有机有机(yuj) 合理合理 深入深入 第123页/共127页第一百二十四页，共128页。第124页/共127页第一百二十五页，共128页。 药物的结构确证研究是药物研发的基础药物的结构确证研究是药物研发的基础, ,不论是新药还是不论是新药还是仿制药仿制药, ,都必需先明确其结构。由于原料药的结构确证存都必需先明确其结构。由于原料药的结构确证存在很多特殊情况和不断出现更为在很多特殊情况和不断出现更为( ( nn w
91、i) wi)先进的分析方先进的分析方法法, ,在实际工作中在实际工作中, ,应根据药物本身的特点应根据药物本身的特点, ,选择合适的结选择合适的结构确证方法或手段构确证方法或手段, ,科学、合理地将药物的结构进行严密科学、合理地将药物的结构进行严密地阐述地阐述, ,而不能机械地照搬照抄指导原则的方法。而不能机械地照搬照抄指导原则的方法。第125页/共127页第一百二十六页，共128页。第126页/共127页第一百二十七页，共128页。内容(nirng)总结会计学。2. 决定蛋白质2级与3级构造。测试样品要采用和原料药制备工艺中相同的精制方法、工艺条件进行精制。 几何异构体（顺、反异构体）。手性药物-绝对构型和相对构型。红外：适用(shyng)于小肽（含三个氨基酸的肽）、拟肽等。多糖的相对分子量及分子量分布测定：凝胶色谱法。除氧元素外，其余各种元素一般均能准确测定其含量。列表比较实测值与理论值（一般要求误差不超过），初步判定供试品与目标化合物的分子组成是否一致。深入第一百二十八页，共128页。
