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1、病原性球菌与肠道杆菌病原性球菌与肠道杆菌一、实验目的一、实验目的1.1.掌握葡萄球菌、链球菌的形态特征和染色特性。掌握葡萄球菌、链球菌的形态特征和染色特性。掌握葡萄球菌、链球菌的形态特征和染色特性。掌握葡萄球菌、链球菌的形态特征和染色特性。2.2.熟悉肠道杆菌培养特征、生化反应及动力学等特性。熟悉肠道杆菌培养特征、生化反应及动力学等特性。熟悉肠道杆菌培养特征、生化反应及动力学等特性。熟悉肠道杆菌培养特征、生化反应及动力学等特性。3.3.了解三种葡萄球菌产生的色素。了解三种葡萄球菌产生的色素。了解三种葡萄球菌产生的色素。了解三种葡萄球菌产生的色素。4.4.了解甲、乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的
2、菌落特点及了解甲、乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的菌落特点及了解甲、乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的菌落特点及了解甲、乙型溶血型链球菌在血琼脂平板上的菌落特点及溶血性。溶血性。溶血性。溶血性。5.5.了解大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在了解大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在了解大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在了解大肠埃希菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌在SSSS平板上平板上平板上平板上菌落特点。菌落特点。菌落特点。菌落特点。二、实验内容二、实验内容1.示教观察葡萄球菌、链球菌的形态示教观察葡萄球菌、链球菌的形态2.观察肠道杆菌在观察肠道杆菌在SS培养基的生长情况及菌落特培养基的生长情况及菌
3、落特征，以及肠道杆菌的双糖发酵征，以及肠道杆菌的双糖发酵3.化脓性球菌的鉴定化脓性球菌的鉴定 三种葡萄球菌的色素观察三种葡萄球菌的色素观察 甲、乙型链球菌的溶血现象观察甲、乙型链球菌的溶血现象观察4.甘露醇发酵实验甘露醇发酵实验5.血浆凝固酶实验血浆凝固酶实验1. 葡萄球菌、链球菌的培养物葡萄球菌、链球菌的培养物示教示教示教示教 普通琼脂平板普通琼脂平板 血平板血平板 菌落形状菌落形状 色素色素 溶血性溶血性 金葡金葡 圆形凸起光滑中等大小圆形凸起光滑中等大小 金黄色金黄色 + +柠葡柠葡 同上同上 柠檬色柠檬色 - - 白葡白葡 同上同上 白色白色 - - 表表1葡萄球菌分类葡萄球菌分类按照
4、色素不同按照色素不同金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌（金黄色金黄色）表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌（白色）白色）腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌（柠檬色柠檬色）三种葡萄球菌的主要性状性状性状金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌表皮葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素菌落色素 金黄色金黄色 白色白色白色或柠檬色白色或柠檬色血浆凝固酶血浆凝固酶 + + -甘露醇甘露醇 + + - -溶血性溶血性 溶血 - -SPA + + -耐热核酸酶耐热核酸酶+ +-致病性致病性 强强 弱弱 无无 血平板血平板甲型链球菌甲型链球菌 针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环针尖小菌落、草绿色狭窄溶血环 ( (溶血即不完全溶血）溶血即不
5、完全溶血）乙型链球菌乙型链球菌 针尖小菌落、透明宽大溶血环针尖小菌落、透明宽大溶血环 （溶血即完全溶血）溶血即完全溶血） 巧克力血平板巧克力血平板脑膜炎双球菌脑膜炎双球菌 菌落透明似露滴状菌落透明似露滴状 表表2 表表3草绿色链球菌草绿色链球菌不溶血链球菌不溶血链球菌溶血性链球菌溶血性链球菌多为条件致病菌多为条件致病菌致病力强致病力强无致病性无致病性溶血溶血(狭窄草绿色溶血环狭窄草绿色溶血环 )溶血溶血（宽大透明溶血环）（宽大透明溶血环）乙型溶血性链球菌溶血环大肠杆菌痢疾杆菌Salmonella -Shigella Mediun主要成分主要成分 基础营养基础营养 乳糖乳糖 指示剂指示剂 抑制剂
6、抑制剂分解乳糖分解乳糖不分解乳糖不分解乳糖产酸产酸PH指示剂变红色指示剂变红色红色大菌落红色大菌落大肠杆菌等大肠杆菌等无无明显变化明显变化无色半透明小菌落无色半透明小菌落志贺菌等志贺菌等甘露醇发酵试验（示教）甘露醇发酵试验（示教）分别取金葡、白葡菌落接种分别取金葡、白葡菌落接种分别取金葡、白葡菌落接种分别取金葡、白葡菌落接种到甘露醇发酵培养基到甘露醇发酵培养基到甘露醇发酵培养基到甘露醇发酵培养基中，置中，置中，置中，置 37373737培养箱，培养箱，培养箱，培养箱，培养培养培养培养24h24h24h24h。金黄色葡。金黄色葡。金黄色葡。金黄色葡萄球菌应能发酵甘露萄球菌应能发酵甘露萄球菌应能发
7、酵甘露萄球菌应能发酵甘露醇产酸。醇产酸。醇产酸。醇产酸。血浆凝固酶试验血浆凝固酶试验-玻片法玻片法（操作，（操作，1人人/组）组）原理：能产生血浆凝固酶的菌株倾入机体后使原理：能产生血浆凝固酶的菌株倾入机体后使血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白导致血浆凝血浆中的纤维蛋白原变成纤维蛋白导致血浆凝固（致病性葡萄球菌产生血浆凝固酶）固（致病性葡萄球菌产生血浆凝固酶）方法：方法： 兔血浆兔血浆 兔血浆兔血浆 12金葡金葡 白葡白葡 + + + + 凝集颗粒（凝集颗粒（+） 不凝集（不凝集（-）4、血浆凝固酶试验（试管法）、血浆凝固酶试验（试管法） 金葡菌金葡菌 白葡菌白葡菌 + + + 兔血浆兔血浆 兔血浆兔血浆 37303730水浴观察水浴观察 凝凝集集为为阳阳性性（胶胶冻冻样样凝凝 固固状状态态）不不凝凝集集为为阴阴性性示教示教示教示教凝固酶实验凝固酶实验（试管法）（试管法）
