《3.2月季的花药培养课件冯惠坚》由会员分享，可在线阅读，更多相关《3.2月季的花药培养课件冯惠坚（14页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、被子植物的花粉发育被子植物的花粉发育雄蕊雄蕊：花丝花丝花药花药：囊状结构，内有很多花粉粒：囊状结构，内有很多花粉粒花粉花粉是小孢子母细胞经过是小孢子母细胞经过减数分裂减数分裂而形成而形成的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞的，因此，花粉是单倍体的生殖细胞。1 1 1 1个花个花个花个花粉母粉母粉母粉母细胞细胞细胞细胞4 4 4 4个个个个小小小小孢孢孢孢子子子子减数减数分裂分裂有丝有丝分裂分裂4 4 4 4个个个个花粉管细胞核花粉管细胞核花粉管细胞核花粉管细胞核4 4 4 4个个个个生殖细胞核生殖细胞核生殖细胞核生殖细胞核有丝分裂有丝分裂8 8 8 8个个个个精子精子精子精子减减数数分分裂裂有有丝
2、丝分分裂裂1.花粉是单倍体生殖细胞；花粉是单倍体生殖细胞；2.花粉的发育要经历不同的时期。花粉的发育要经历不同的时期。花粉的发育要经历花粉的发育要经历：四分体时期、单核期、双核期四分体时期、单核期、双核期两个精子和一个营养核的基因型相同两个精子和一个营养核的基因型相同两个精子和一个营养核的基因型相同两个精子和一个营养核的基因型相同(双选双选)关于被子植物花粉发育的说法，不正关于被子植物花粉发育的说法，不正确的是（确的是（）A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果果C、被子植物的花粉的发育要
3、经历四分体时期、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段单核期、双核期等阶段D、花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，花粉粒在发育过程中，核先位于细胞一侧，再移到细胞中央再移到细胞中央BD二、产生花粉植株的两条途径二、产生花粉植株的两条途径途径一：途径一：花粉通过胚状体阶段发育为植株；花粉通过胚状体阶段发育为植株；途径二：途径二：花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织，再将其诱导分化成植株。再将其诱导分化成植株。原因是什么？原因是什么？主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比主要取决于培养基中激素的种类及其浓度配比1.1.选材选材三、影响花药培养的
4、因素三、影响花药培养的因素选取适宜的材料和培养基组成选取适宜的材料和培养基组成是花粉植株诱导是花粉植株诱导成功的关键。成功的关键。2).选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功选择合适的花粉发育时期也是提高诱导成功率的重要因素。一般来说，在率的重要因素。一般来说，在单核期单核期，细胞核，细胞核由中央移向细胞一侧的时期，由中央移向细胞一侧的时期，花药培养成功率花药培养成功率最高。最高。1).花期早期时的花药花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植株。比后期的更容易产生花粉植株。3).3).完全未开放的花蕾，可挑选到单核期完全未开放的花蕾，可挑选到单核期的花药，菌少、易消毒的花药，菌少、易消毒2 2
5、、培养基：、培养基：花药培养基所采用的花药培养基所采用的培养基可能因植物的培养基可能因植物的不同而有所变化不同而有所变化. .（一）材料的选取（一）材料的选取选择花药时，一般通过选择花药时，一般通过镜检镜检来确定来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。其中的花粉是否处于适宜的发育期。最常用的方法有最常用的方法有醋酸洋红法醋酸洋红法。但是，某。但是，某些植物的花粉细胞核不易着色，需采用些植物的花粉细胞核不易着色，需采用焙花青焙花青-铬矾法铬矾法，这种方法能将花粉细胞，这种方法能将花粉细胞核染成核染成蓝黑色蓝黑色。实验操作实验操作（二）材料的消毒（二）材料的消毒1、花蕾用、花蕾用70%的酒精的酒精浸
6、泡浸泡30秒秒2、无菌水清洗、无菌水清洗3、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分、无菌吸水纸吸干花蕾表面的水分4、放入、放入质量分数为质量分数为0.1%的氯化汞的氯化汞溶液中溶液中24分钟分钟（也可（也可质量分数为质量分数为1%的次氯酸钙溶液或饱和漂的次氯酸钙溶液或饱和漂白粉溶液白粉溶液）5、无菌水冲洗、无菌水冲洗35次次用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的用于培养花药，实际上多数未熟，由于它的外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌外面有花萼、花瓣或颖片保护，通常处于无菌状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。状态，所以只要将整个花蕾或幼穗消毒即可。实验操作实验操作（三）接种和培养（三）接种和培养
7、灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼灭菌后花蕾，要在无菌条件下除去萼片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。片和花瓣，并立即将花药接种到培养基上。通常每瓶接种花药通常每瓶接种花药7-10个，温度控制在个，温度控制在25左右，不需要光照。幼小植株形成后才需左右，不需要光照。幼小植株形成后才需要光照。要光照。实验操作实验操作比较项目比较项目菊花茎的组织培养菊花茎的组织培养月季的花药培养月季的花药培养理论依据理论依据细胞的全能性细胞的全能性基本过程基本过程脱分化、再分化脱分化、再分化影响因素影响因素选材、营养、激素、选材、营养、激素、pHpH、温度、光照等、温度、光照等 选材、营养、激素、选材、营养、激素
8、、pHpH、温、温度等度等 比比较较材料材料选取生长旺盛的嫩枝选取生长旺盛的嫩枝单核靠边期的花粉单核靠边期的花粉pHpH5.85.85.85.8温度温度181822222525光照光照每日光照每日光照12h12h开始时不需要光照，幼小植开始时不需要光照，幼小植株形成后才光照株形成后才光照操作流程操作流程制备培养基制备培养基外植体消外植体消毒毒接种接种培养培养移栽移栽栽培栽培 选材选材材料消毒材料消毒接种和培接种和培养养筛选和诱导筛选和诱导移栽移栽栽栽培选育培选育 （09广州综合测试）下图是月季花药离广州综合测试）下图是月季花药离体培养产生花粉植株的两种途径，请据图回答有关问体培养产生花粉植株的
9、两种途径，请据图回答有关问题：题：（1）选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的）选用的材料合适与否是成功诱导出花粉植株的重要因素，一般来说选用重要因素，一般来说选用 期的花粉可提高成期的花粉可提高成功率。选择花粉时，一般要通过功率。选择花粉时，一般要通过 来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要来确定花粉是否处于合适的发育期，这时需要对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是对花粉的细胞核进行染色，常用的染色剂是 。单核单核镜检（显微镜观察）镜检（显微镜观察）醋酸洋红醋酸洋红（2）上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织）上图中花药经脱分化产生胚状体还是愈伤组织主要取决于培养基中主要取决于培养基
10、中 。（3）胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈）胚状体与愈伤组织在结构上的主要区别在于愈伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度伤组织的细胞排列疏松无规则，是一种高度 的薄壁细胞，胚状体与的薄壁细胞，胚状体与 发发育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚育形成的胚有类似的结构，即具有胚芽、胚轴和胚根。根。（4）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因）无菌技术也是成功诱导出花粉植株的重要因素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。素，请说明下列各项需要消毒，还是需要灭菌。培养基，培养基，培养皿，培养皿，接种环，接种环，花蕾，花蕾，实验实验操作者的双手，操作者的双手，三角锥形瓶。三角锥形瓶
11、。 （填编号）（填编号）需要灭菌，需要灭菌， （填编号）需要消毒。（填编号）需要消毒。激素的种类及其浓度配比激素的种类及其浓度配比液泡化液泡化正常受精卵（或受精卵）正常受精卵（或受精卵）(08(08年海南高考年海南高考) )某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答：（1）图中）图中表示的是该花粉培养过程中的表示的是该花粉培养过程中的_过程，过程，表表示的是示的是_过程，过程，X代表的是代表的是_，表示的是表示的是_过过程，程，表示的是诱导表示的是诱导_过程。过程。（2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中一条途径主要取决于培养基成分中_的种类及其浓度的种类及其浓度配比，最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为配比，最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为_植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明为成熟植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明为成熟花粉具有花粉具有_。脱分化脱分化再分化再分化胚状体胚状体分化分化生根生根激素激素单倍体单倍体细胞全能性细胞全能性
