《蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（98页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第二章第二章 蛋白质与非蛋白含氮蛋白质与非蛋白含氮 化合物的代谢紊乱化合物的代谢紊乱 退出退出 卫生部卫生部“十一五十一五” 规划教材规划教材 全国高等医药教材建设研究会规划教材全国高等医药教材建设研究会规划教材蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 主要内容 一、体液蛋白质及其代谢紊乱一、体液蛋白质及其代谢紊乱 二、氨基酸代谢紊乱二、氨基酸代谢紊乱 三、嘌呤核苷酸代谢紊乱三、嘌呤核苷酸代谢紊乱 四、蛋白质和氨基酸检测四、蛋白质和氨基酸检测 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 第一节第一节 体液蛋白质及其代谢紊乱体液蛋白质及其代谢紊乱 一、血浆蛋白质的功能和分类一、血浆蛋白质的功能和分类一
2、、血浆蛋白质的功能和分类一、血浆蛋白质的功能和分类 三、血浆蛋白质及其异常三、血浆蛋白质及其异常三、血浆蛋白质及其异常三、血浆蛋白质及其异常 四、其他体液蛋白质四、其他体液蛋白质四、其他体液蛋白质四、其他体液蛋白质 二、血清蛋白质电泳组分的临床分析二、血清蛋白质电泳组分的临床分析二、血清蛋白质电泳组分的临床分析二、血清蛋白质电泳组分的临床分析 返回章返回章 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件一、血浆蛋白质的功能和分类一、血浆蛋白质的功能和分类一、血浆蛋白质的功能和分类一、血浆蛋白质的功能和分类 营养作用营养作用维持血浆胶体渗透压维持血浆胶体渗透压作为运载蛋白作为运载蛋白组成血液组成血液pH
3、pH缓冲系统缓冲系统抑制组织蛋白酶抑制组织蛋白酶在血浆中起催化作用的酶在血浆中起催化作用的酶参与代谢调控作用的蛋白质和肽类激素参与代谢调控作用的蛋白质和肽类激素 参与凝血与纤维蛋白溶解参与凝血与纤维蛋白溶解组成体液免疫防御系统（组成体液免疫防御系统（IgIg与补体与补体 ）血浆蛋白质的功能血浆蛋白质的功能 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件血浆蛋白质的分类血浆蛋白质的分类 最简单最简单：分为清蛋白和球蛋白：分为清蛋白和球蛋白较实用较实用：由电泳获得血浆蛋白质概貌：由电泳获得血浆蛋白质概貌功能分类功能分类：比较复杂，但方便研究：比较复杂，但方便研究 返回节返回节 蛋白质与非蛋白
4、含氮化合物的代谢紊乱课件。 醋纤膜电泳或琼脂糖电泳：醋纤膜电泳或琼脂糖电泳： 清蛋白清蛋白 1 1球蛋白球蛋白 2 2球蛋白球蛋白 球蛋白球蛋白 球蛋白球蛋白 分辨率高时：分辨率高时： 可有可有1 1和和2 2 2 2中也可有两条中也可有两条如果采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，如果采用聚丙烯酰胺凝胶电泳，在适当条件下可以分出在适当条件下可以分出3030多个多个区带。区带。电泳分类法电泳分类法 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件功能分类法功能分类法 运输载体类运输载体类 血浆脂蛋白：包括血浆脂蛋白：包括CMCM、VLDLVLDL、LDLLDL、HDLHDL等等 前清蛋白与清蛋白前清蛋白
5、与清蛋白 甲状腺素结合球蛋白甲状腺素结合球蛋白 皮质素结合球蛋白皮质素结合球蛋白 类固醇激素结合球蛋白类固醇激素结合球蛋白 视黄醛结合蛋白视黄醛结合蛋白 转铁蛋白转铁蛋白 触珠蛋白触珠蛋白 血色素结合蛋白血色素结合蛋白 铜蓝蛋白铜蓝蛋白 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件蛋白酶抑制物蛋白酶抑制物：包括：包括1 1- -抗胰蛋白酶、抗胰蛋白酶、1 1- -抗糜蛋抗糜蛋 白酶、白酶、 2 2- -巨球蛋白等巨球蛋白等6 6种以上种以上 血清酶类：血清酶类： 血浆固有酶如血浆固有酶如LCATLCAT等等 组织细胞少量释放的细胞内酶组织细胞少量释放的细胞内酶 细胞破裂而进入血循环的细
6、胞内酶细胞破裂而进入血循环的细胞内酶蛋白类激素：蛋白类激素： 胰岛素、胰高血糖素、生长激素等胰岛素、胰高血糖素、生长激素等补体蛋白类补体蛋白类凝血蛋白类凝血蛋白类免疫球蛋白类免疫球蛋白类功能分类法功能分类法 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件影响血浆蛋白质浓度的因素影响血浆蛋白质浓度的因素 急性时相反应急性时相反应（APRAPR）：）： 对炎症和组织损伤的非特异性反应，血浆蛋白质对炎症和组织损伤的非特异性反应，血浆蛋白质如如1 1- -抗胰蛋白酶、抗胰蛋白酶、1 1- -酸性糖蛋白、结合珠蛋白、铜酸性糖蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、蓝蛋白、C4C4、C3C3、纤维蛋白原和纤维蛋
7、白原和C-C-反应蛋白等浓度显著反应蛋白等浓度显著升高或升高，而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度升高或升高，而血浆前清蛋白、清蛋白、转铁蛋白浓度则出现相应下降则出现相应下降这些血浆蛋白质统称为急性时相反这些血浆蛋白质统称为急性时相反应蛋白。应蛋白。增加的蛋白质称为正向增加的蛋白质称为正向APRsAPRs下降的蛋白质称为负向下降的蛋白质称为负向APRsAPRs 急性时相反应急性时相反应 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 APRAPR的机制的机制是对炎症的一般反应。是对炎症的一般反应。损伤部位释放的细胞因子，包括白介素、肿瘤坏死损伤部位释放的细胞因子，包括白介素、肿瘤坏死 因
8、子因子和和、干扰素以及血小板活化因子等，引发干扰素以及血小板活化因子等，引发 肝细胞中上述蛋白质合成量的改变。肝细胞中上述蛋白质合成量的改变。正向正向APPsAPPs是机体防御机制的一个部分，尤其是活化是机体防御机制的一个部分，尤其是活化 补体、蛋白酶抑制剂对酶活性的控制、触珠蛋白补体、蛋白酶抑制剂对酶活性的控制、触珠蛋白 对被破坏红细胞中释放对被破坏红细胞中释放HbHb的保护作用等。的保护作用等。作为营养蛋白的负向作为营养蛋白的负向APRsAPRs此时合成减少，可为合成此时合成减少，可为合成 正向正向APRsAPRs提供更多的氨基酸原料提供更多的氨基酸原料 。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含
9、氮化合物的代谢紊乱课件 APRAPR的时相的时相 C-C-反应蛋白首先升高反应蛋白首先升高 1212小时内小时内1 1- -酸性糖蛋白也升高酸性糖蛋白也升高 然后然后1 1- -抗胰蛋白酶、触珠蛋白、抗胰蛋白酶、触珠蛋白、C4C4和纤和纤 维蛋白原升高维蛋白原升高 最后是最后是C3C3和铜蓝蛋白升高和铜蓝蛋白升高 通常在通常在2 25 5天内这些天内这些APRsAPRs达到最高值达到最高值 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 APRAPR的临床应用的临床应用 帮助监测炎症发生及过程和观察治疗反应帮助监测炎症发生及过程和观察治疗反应 尤其是那些升高最早和最多的蛋白质尤其是那些升
10、高最早和最多的蛋白质 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件类固醇激素类固醇激素 疾病时血浆蛋白疾病时血浆蛋白质的浓度变化被体内质的浓度变化被体内类固醇激素的状态复类固醇激素的状态复杂化，包括类固醇激杂化，包括类固醇激素治疗、妊娠和口服素治疗、妊娠和口服避孕药。避孕药。类固醇激素对血浆蛋白质浓度的影响类固醇激素对血浆蛋白质浓度的影响蛋白质蛋白质皮质醇皮质醇雄激素雄激素雌激素雌激素前清蛋白前清蛋白清蛋白清蛋白N N1 1- -抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶N N1 1- -酸性糖蛋白酸性糖蛋白高密度脂蛋白高密度脂蛋白N N触珠蛋白触珠蛋白 铜蓝蛋白铜蓝蛋白N NN N 转铁蛋白转铁蛋白N N
11、低密度脂蛋白低密度脂蛋白 N NIgGIgGN N 注：为增加，为下降，注：为增加，为下降，N N无改变无改变 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件二、血清蛋白质电泳组分的临床分析二、血清蛋白质电泳组分的临床分析二、血清蛋白质电泳组分的临床分析二、血清蛋白质电泳组分的临床分析 醋纤膜电泳正常百分含量醋纤膜电泳正常百分含量清蛋白：清蛋白： 57 5768681 1球蛋白：球蛋白：1.01.05.75.72 2球蛋白：球蛋白：4.94.911.211.2 球蛋白：球蛋白： 7 71313球蛋白：球蛋白： 9.8 9.818.218.2 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊
12、乱课件各电泳区带的主要蛋白质及其含量各电泳区带的主要蛋白质及其含量前清蛋白前清蛋白 前清蛋白前清蛋白0.20.20.4g/L0.4g/L清蛋白清蛋白 清蛋白清蛋白353555551 1- -球蛋白球蛋白 1 1- -抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶 1 1- -酸性糖蛋白酸性糖蛋白 甲胎蛋白甲胎蛋白 高密度脂蛋白高密度脂蛋白0.90.92.0 2.0 0.50.51.51.53103105 51.71.73.253.252 2- -球蛋白球蛋白 触珠蛋白触珠蛋白 2 2- -巨球蛋白巨球蛋白 铜蓝蛋白铜蓝蛋白0.30.32.02.01.251.254.14.10.20.20.50.5-球蛋白球蛋白 转铁蛋
13、白转铁蛋白 低密度脂蛋白低密度脂蛋白 C4 C4 2 2- -微球蛋白微球蛋白 纤维蛋白原纤维蛋白原 C3 C32.02.03.53.50.60.61.551.550.0010.0010.0020.0022.02.04.04.00.70.71.51.5-球蛋白球蛋白 IgA IgA IgG IgG IgM IgM C- C-反应蛋白反应蛋白0.70.74.04.07.07.016160.40.42.32.30.0080.008蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件正常图谱正常图谱 肾病综合征肾病综合征 返回节返回节 肝硬化肝硬化肝硬化肝硬化(-桥桥) 肝硬化肝硬化(不典型不典型-桥桥) 蛋白质
14、与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤IgGIgG型型 多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤IgAIgA型型 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 其他异常区带其他异常区带高浓度的甲胎蛋白可表现为清蛋白与高浓度的甲胎蛋白可表现为清蛋白与1 1区带间一条清区带间一条清 晰的新带。晰的新带。C-C-反应蛋白异常增高可出现特殊界限的反应蛋白异常增高可出现特殊界限的区带。区带。单核细胞白血病可出现由于溶菌酶异常增多的单核细胞白血病可出现由于溶菌酶异常增多的后区带后区带 等。等。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件球蛋白增多与球蛋白增多与M
15、 M蛋白蛋白 多克隆性增多：多克隆性增多：区带呈弥散性升高。区带呈弥散性升高。 见于反复或慢性感染、自身免疫性疾病、肝细胞见于反复或慢性感染、自身免疫性疾病、肝细胞 疾病或寄生虫感染。疾病或寄生虫感染。 单克隆性增多单克隆性增多M M蛋白蛋白 浆细胞病、尤其是恶性浆浆细胞病、尤其是恶性浆 细胞病时，异常浆细胞克隆增殖，产生大量单克细胞病时，异常浆细胞克隆增殖，产生大量单克 隆免疫球蛋白或其轻链或重链片段，病人血清或隆免疫球蛋白或其轻链或重链片段，病人血清或 尿液中可出现结构单一的尿液中可出现结构单一的M M蛋白，在蛋白电泳时蛋白，在蛋白电泳时 呈现一个色泽深染的窄区带。呈现一个色泽深染的窄区带
16、。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件各种各种各种各种M M M M蛋白出现频率蛋白出现频率蛋白出现频率蛋白出现频率M M蛋白较多出现在蛋白较多出现在或或区，偶见于区，偶见于区。区。M M蛋白的电泳位置可大致反映出免疫球蛋白的类型，蛋白的电泳位置可大致反映出免疫球蛋白的类型， 如如IgAIgA位于位于区带后部或区带后部或和和区带之间，区带之间，IgGIgG位于位于 r r区带后部区带后部 。但确定但确定M M蛋白及其类型需采用特异性抗体做免疫固蛋白及其类型需采用特异性抗体做免疫固 定电泳或免疫电泳定电泳或免疫电泳 。IgG52IgG52 、IgA21IgA21、IgM12Ig
17、M12、IgD2IgD2、IgE0.01IgE0.01轻链（轻链（或或）1111，重链（，重链（、或或）1 1两种或多种克隆蛋白，占两种或多种克隆蛋白，占0.50.5 。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件三、血浆蛋白质及其异常三、血浆蛋白质及其异常三、血浆蛋白质及其异常三、血浆蛋白质及其异常 1. 1. 前清蛋白前清蛋白2. 2. 清蛋白清蛋白3. 3. 1 1- -抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶 4. 4. 1 1- -酸性糖蛋白酸性糖蛋白5. 5. 触珠蛋白触珠蛋白6. 6. 2 2- -巨球蛋白巨球蛋白7. 7. 铜蓝蛋白铜蓝蛋白8. 8. 转铁蛋白转铁蛋白9. C-9. C-
18、反应蛋白反应蛋白 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件生理功能生理功能 作为运载蛋白和组织修补材料。作为运载蛋白和组织修补材料。RBPRBP是转运视黄醇的蛋白质。是转运视黄醇的蛋白质。TTRTTR能转运能转运T T4 4，大约占结合大约占结合T T4 4的的1010甲状腺素结合甲状腺素结合 球蛋白约占结合甲状腺激素的球蛋白约占结合甲状腺激素的7575清蛋白结合甲清蛋白结合甲 状腺激素的其余部分。状腺激素的其余部分。在血浆中在血浆中RBPRBP与与TTRTTR以以1:11:1比例结合成复合物可避比例结合成复合物可避 免小分子免小分子RBPRBP从肾小球滤过，减少从肾小球滤过，减少
19、RBPRBP释放到非靶释放到非靶 细胞中。细胞中。 返回节返回节 前清蛋白前清蛋白（PAPA）在电泳中显示在清蛋白前方故而得名主要包括：在电泳中显示在清蛋白前方故而得名主要包括： 视黄醇结合蛋白（视黄醇结合蛋白（RBPRBP） 甲状腺素转运蛋白（甲状腺素转运蛋白（TTRTTR）蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件临床意义临床意义 作为营养不良的早期指标。作为营养不良的早期指标。作为肝功能不全的指标，下降早。作为肝功能不全的指标，下降早。是负性急性时相反应蛋白：在急性炎症、恶性是负性急性时相反应蛋白：在急性炎症、恶性 肿瘤、创伤等任何急需合成蛋白质的情况下，肿瘤、创伤等任何急需合成蛋白质的情况
20、下， 血清血清PAPA均迅速下降。均迅速下降。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件清蛋白清蛋白l不含糖，高度溶于水，每分子可以带有不含糖，高度溶于水，每分子可以带有200200个个 以上负电荷。以上负电荷。 lALBALB是血浆中含量最多的蛋白质，占血浆总蛋是血浆中含量最多的蛋白质，占血浆总蛋 白的白的57576868。l也是大部分细胞外液的主要蛋白成分，全身也是大部分细胞外液的主要蛋白成分，全身 大约大约6060的的ALBALB存在于细胞外液。存在于细胞外液。 返回节返回节 代谢代谢u肝细胞合成，每天肝细胞合成，每天111114.7g14.7gu肝脏合成储备能力很大，在肾病
21、综合征时肝脏合成储备能力很大，在肾病综合征时 合成速率可增高到正常的合成速率可增高到正常的300300以上以上u半寿期约半寿期约15151919天天u遗传性变异达遗传性变异达8080多种多种蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件临床意义临床意义 低低ALBALB血症见于下述许多疾病情况：血症见于下述许多疾病情况： （1 1）清蛋白合成不足：）清蛋白合成不足：急性或慢性肝脏疾病；急性或慢性肝脏疾病； 蛋白质营养不良或吸收不良蛋白质营养不良或吸收不良 （2 2）清蛋白丢失：）清蛋白丢失： 由尿中丢失；由尿中丢失；胃肠道丢胃肠道丢 失；失；皮肤丢失皮肤丢失（3 3）清蛋白分解代谢增加）清蛋白分解代谢
22、增加 （4 4）清蛋白的分布异常）清蛋白的分布异常 （5 5）无清蛋白血症）无清蛋白血症 返回节返回节 生理功能生理功能 （1 1）保持血浆胶体渗透压）保持血浆胶体渗透压（2 2）重要的营养蛋白）重要的营养蛋白（3 3）血浆中主要的载体蛋白）血浆中主要的载体蛋白（4 4）具有缓冲酸碱物质的能力）具有缓冲酸碱物质的能力蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件1 1- -抗胰蛋白酶抗胰蛋白酶(1 1-AT-AT或或AAT)AAT) 蛋白酶和抗蛋白酶蛋白酶和抗蛋白酶蛋白酶可清除病原微生物、坏死组织和衰老蛋白酶可清除病原微生物、坏死组织和衰老 的红细胞蛋白酶含量过高或活性过强可使正常的红细胞蛋白酶含量过
23、高或活性过强可使正常 组织和细胞受到破坏。组织和细胞受到破坏。抗蛋白酶系统：机体为对抗这些蛋白酶的异抗蛋白酶系统：机体为对抗这些蛋白酶的异 常作用而产生抗蛋白酶系统下降可导致某些常作用而产生抗蛋白酶系统下降可导致某些 疾病。疾病。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件AATAAT的多种遗传表型的多种遗传表型 已知的至少有已知的至少有7575种，表达的蛋白质有种，表达的蛋白质有M M型和型和Z Z型、型、S S型，型，PiMMPiMM型最多，占人群型最多，占人群95%95%以上。以上。 类型：类型：PiMMPiMM、PiMSPiMS、PiMZPiMZ、PiSSPiSS、PiSZP
24、iSZ、PiZZ PiZZ 活力：活力：100%100%、8080、6060、6060、3535、1515 返回节返回节 生理功能生理功能 占血清中抑制蛋白酶活力的占血清中抑制蛋白酶活力的9090左右多左右多形核白细胞起吞噬作用时释放溶酶体蛋白水形核白细胞起吞噬作用时释放溶酶体蛋白水解酶，解酶，AATAAT是这些酶的生理抑制物。是这些酶的生理抑制物。蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件临床意义临床意义 （1 1）AATAAT缺陷与肺气肿：缺陷与肺气肿：ZZZZ型、型、SSSS型甚至型甚至MSMS表型。表型。 当吸入尘埃和细菌，肺部多形核白细胞吞噬当吸入尘埃和细菌，肺部多形核白细胞吞噬 活跃，
25、溶酶体弹性蛋白酶释放，作用于肺泡活跃，溶酶体弹性蛋白酶释放，作用于肺泡 壁的弹性纤维。低血浆壁的弹性纤维。低血浆AATAAT还可发现于胎儿呼还可发现于胎儿呼 吸窘迫综合征。吸窘迫综合征。（2 2）AATAAT缺陷与肝损害：缺陷与肝损害：ZZZZ表型，表型，ZZZZ蛋白聚集在肝蛋白聚集在肝 细胞，可致肝硬化。细胞，可致肝硬化。ZZZZ表型的新生儿中表型的新生儿中1010 2020；ZZZZ表型的某些成人。表型的某些成人。（3 3）急性时相反应时）急性时相反应时AATAAT增加。增加。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件1 1- -酸性糖蛋白酸性糖蛋白 ( (1 1-AG-AG或
26、或AAG)AAG) 生理功能生理功能 主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时主要的急性时相反应蛋白，在急性炎症时 增高，与免疫防御功能有关。增高，与免疫防御功能有关。AAGAAG可以结合利多卡因和心得安等，在急可以结合利多卡因和心得安等，在急 性心肌梗死时，性心肌梗死时，AAGAAG作为一种急性时相反作为一种急性时相反 应蛋白升高后，使药物结合状态增加而游应蛋白升高后，使药物结合状态增加而游 离状态减少，因而需要增加药物剂量。离状态减少，因而需要增加药物剂量。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件临床意义临床意义 （1 1）主要作为急性时相反应的指标，在风湿病、）主要作为急性时相
27、反应的指标，在风湿病、 恶性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时一恶性肿瘤及心肌梗死等炎症或组织坏死时一 般增加般增加3 34 4倍。倍。（2 2）随糖皮质激素而增加，包括内源性的库欣）随糖皮质激素而增加，包括内源性的库欣 综合征和外源性强的松、地塞米松等药物综合征和外源性强的松、地塞米松等药物 治疗时；雌激素使其降低。治疗时；雌激素使其降低。（3 3）在营养不良、严重肝损害、肾病综合征以）在营养不良、严重肝损害、肾病综合征以 及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等情况下及胃肠道疾病致蛋白严重丢失等情况下AAGAAG 降低。降低。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件触珠蛋白触珠蛋白 2 2
28、2 2四聚体四聚体 链有链有1 1及及2 2两种，而两种，而1 1又有又有1F1F及及1s1s 两种遗传变异体两种遗传变异体 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件触珠蛋白的几种遗传表型触珠蛋白的几种遗传表型 表表 型型亚单位的结构亚单位的结构组组 成成Hp1-1Hp1-1(1F1F)2)22 21F1F1S1S 2 2(1S1S) 2 ) 2 2 2 分子量约为分子量约为80kD80kD，链含氨基链含氨基 酸残基酸残基8383个，个，链含氨基酸残链含氨基酸残 基基245245个个Hp2-1Hp2-1(1S1S2 2 2 2 )n )n(1F1F2 2 2 2)n)n 分子量为分
29、子量为120kD-200kD120kD-200kD的聚合的聚合 体，由于体，由于n n不同，可以在电泳不同，可以在电泳 中出现多条带中出现多条带Hp2-2Hp2-2(2 2)n )n N =3-8 N =3-8 分子量为分子量为160kD-400kD160kD-400kD，由于，由于n n 不同，可在电泳中出现多条带不同，可在电泳中出现多条带蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件生理意义生理意义 HpHp的主要功能是能与红细胞中释放出的游的主要功能是能与红细胞中释放出的游 离血红蛋白结合，每分子离血红蛋白结合，每分子HpHp可结合两分子可结合两分子 HbHb。HpHp可防止可防止HbHb从肾丢
30、失而为机体有效地从肾丢失而为机体有效地 保留铁，并能避免保留铁，并能避免HbHb对肾脏的损伤。对肾脏的损伤。HpHp不能重新被利用，溶血后其含量急剧降不能重新被利用，溶血后其含量急剧降 低，血浆低，血浆HpHp浓度多在一周内由再生而恢复。浓度多在一周内由再生而恢复。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件临床意义临床意义 （1 1）溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾时）溶血性疾病如溶血性贫血、输血反应、疟疾时 Hp Hp含量明显下降。连续观察溶血性疾病合适的含量明显下降。连续观察溶血性疾病合适的 组合试验：包括血浆组合试验：包括血浆HpHp、乳酸脱氢酶和游离血、乳酸脱氢酶和游
31、离血 红蛋白。血管外溶血不会使红蛋白。血管外溶血不会使HpHp发生变化。发生变化。（2 2）烧伤和肾病综合征引起大量清蛋白丢失，血）烧伤和肾病综合征引起大量清蛋白丢失，血HpHp 常明显增加，此时属于急性时相反应时的常明显增加，此时属于急性时相反应时的HpHp增增 加加 。（3 3）雌激素使）雌激素使HpHp减少，多数急慢性肝病包括急性病减少，多数急慢性肝病包括急性病 毒性肝炎和伴黄疸的肝硬化患者，由于雌激素毒性肝炎和伴黄疸的肝硬化患者，由于雌激素 分解代谢减少，其血清分解代谢减少，其血清HpHp降低降低 。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件2 2巨球蛋白巨球蛋白 ( (2
32、 2-M -M 或或AMG)AMG) 是血浆中分子量最大的蛋白质是血浆中分子量最大的蛋白质生理功能生理功能 蛋白酶抑制剂，能与蛋白水解酶如纤维蛋白酶抑制剂，能与蛋白水解酶如纤维蛋白溶酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶蛋白溶酶、胃蛋白酶、糜蛋白酶、胰蛋白酶及组织蛋白酶及组织蛋白酶D D结合而抑制这些酶的活性。结合而抑制这些酶的活性。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件临床意义临床意义 低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时，低清蛋白血症，尤其是肾病综合征时， 2 2-MG-MG含量可显著增高，可能系一种代含量可显著增高，可能系一种代 偿机制以保持血浆胶体渗透压。偿机制以保持血浆胶体渗透
33、压。2 2-MG-MG不属于急性时相反应蛋白。不属于急性时相反应蛋白。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件铜蓝蛋白铜蓝蛋白 含铜的含铜的2 2球蛋白，每分子含球蛋白，每分子含6 68 8个铜原子，个铜原子， 由于含铜而呈蓝色。由于含铜而呈蓝色。95%95%的血清铜存在于的血清铜存在于CpCp中，另中，另5%5%呈可扩散状呈可扩散状 态。血循环中态。血循环中CpCp为铜没有毒性的代谢库。为铜没有毒性的代谢库。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 生理功能生理功能 与氧化还原反应有关，既能起氧化作用又能与氧化还原反应有关，既能起氧化作用又能 起抗氧化作用。起抗氧
34、化作用。具有铁氧化酶作用，能将具有铁氧化酶作用，能将FeFe2+2+氧化为氧化为FeFe3+3+， FeFe3+3+再结合到转铁蛋白上，使铁不具毒性。再结合到转铁蛋白上，使铁不具毒性。还有抑制膜脂质氧化的作用。还有抑制膜脂质氧化的作用。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 临床意义临床意义 （1 1）协助诊断）协助诊断WilsonWilson病病 血浆血浆CpCp减少，血浆游离铜增加，铜沉积在肝可减少，血浆游离铜增加，铜沉积在肝可引起肝硬化，沉积在脑基底节的豆状核则导致豆引起肝硬化，沉积在脑基底节的豆状核则导致豆状核变性。状核变性。 小部分患者小部分患者CpCp水平正常，可能
35、是铜掺入水平正常，可能是铜掺入CpCp时所时所需的携带蛋白减少。需的携带蛋白减少。80%80%肝受损者中血清肝受损者中血清CpCp低于低于100mg/L100mg/L，而，而20%20%肝受损者肝受损者Cp Cp 不低于不低于300mg/L300mg/L。 患者其他指标变化：血清总铜降低、游离铜增患者其他指标变化：血清总铜降低、游离铜增加和尿铜排出增加。加和尿铜排出增加。 （2 2）为弱和迟发反应的）为弱和迟发反应的APPAPP；在营养不良、严重；在营养不良、严重肝病及肾病综合征时往往下降。肝病及肾病综合征时往往下降。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件转铁蛋白转铁蛋白 生理
36、功能生理功能 从小肠进入血液的从小肠进入血液的FeFe2+2+在血液中被铜兰蛋在血液中被铜兰蛋 白氧化为白氧化为FeFe3+3+，再被再被TRFTRF的载体蛋白结合。的载体蛋白结合。每种细胞表面都有每种细胞表面都有TRFTRF受体，此受体对受体，此受体对 TRF-FeTRF-Fe3+3+复合物比对复合物比对TRFTRF的载体蛋白亲和的载体蛋白亲和 力高得多，与受体结合后，力高得多，与受体结合后，TRF-FeTRF-Fe3+3+被摄被摄 入细胞。入细胞。TRF-FeTRF-Fe3+3+复合物可将大部分复合物可将大部分FeFe3+3+运输到骨运输到骨 髓，用于髓，用于HbHb合成，小部分则运输到各
37、组合成，小部分则运输到各组 织细胞，用于形成铁蛋白，以及合成肌织细胞，用于形成铁蛋白，以及合成肌 红蛋白、细胞色素等。红蛋白、细胞色素等。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件临床意义临床意义 （1 1）用于贫血的鉴别诊断）用于贫血的鉴别诊断在缺铁性的低血色素贫血中，在缺铁性的低血色素贫血中，TRFTRF代偿性合成增代偿性合成增加，但血浆铁含量低，结合铁的加，但血浆铁含量低，结合铁的TRFTRF少，所以铁饱少，所以铁饱和度很低（正常值在和度很低（正常值在30% 30% 38%38%）。）。再生障碍性贫血时，血浆中再生障碍性贫血时，血浆中TRFTRF正常或低下，由正常或低下，由于
38、红细胞对铁的利用障碍，使铁饱和度增高。在铁于红细胞对铁的利用障碍，使铁饱和度增高。在铁负荷过量时，负荷过量时，TRFTRF水平正常，而饱和度可超过水平正常，而饱和度可超过50%50%，甚至达甚至达90%90%。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（2 2）负性急性时相反应蛋白）负性急性时相反应蛋白 炎症、恶性病变时常随着清蛋白、清蛋白炎症、恶性病变时常随着清蛋白、清蛋白 同时下降。同时下降。（3 3）营养状态指标）营养状态指标 在营养不良及慢性肝脏疾病时下降与清蛋在营养不良及慢性肝脏疾病时下降与清蛋 白相比，体内转铁蛋白总量较少、生物半寿白相比，体内转铁蛋白总量较少、生物半寿
39、 期较短，故能及时地反映脏器蛋白的急剧变期较短，故能及时地反映脏器蛋白的急剧变 化。在高蛋白膳食治疗时，血浆中浓度上升化。在高蛋白膳食治疗时，血浆中浓度上升 快，是判断治疗效果的良好指标。快，是判断治疗效果的良好指标。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件总铁结合力（总铁结合力（TIBCTIBC）铁饱和度铁饱和度所有所有TRFTRF上结合的铁量为上结合的铁量为TIBCTIBC。从。从TIBCTIBC可间接计算可间接计算 TRFTRF含量及含量及TRFTRF的铁饱和度：的铁饱和度： TRFTRF（mg/Lmg/L）=TIBC(g/L)0.70=TIBC(g/L)0.70 铁饱和度
40、（）血清铁铁饱和度（）血清铁/TIBC/TIBC。 由于假设所有血浆铁都结合到由于假设所有血浆铁都结合到TRFTRF上，所以由上上，所以由上式估计的式估计的TRFTRF浓度比真实值高出浓度比真实值高出16162020。 而当而当TRFTRF结合铁到半饱和时，部分铁会结合到结合铁到半饱和时，部分铁会结合到其他蛋白如清蛋白上。其他蛋白如清蛋白上。目前目前TRFTRF的免疫比浊测定法已在许多实验室使用，的免疫比浊测定法已在许多实验室使用，因而已在很大程度上代替了因而已在很大程度上代替了TIBCTIBC的测定。的测定。 TIBC(g/L) = TRFTIBC(g/L) = TRF（mg/Lmg/L）1
41、.431.43 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 生理功能生理功能 CRP CRP不仅结合多种细胞、真菌及原虫等体内不仅结合多种细胞、真菌及原虫等体内的多糖物质，在钙离子存在下，还可以结合卵磷的多糖物质，在钙离子存在下，还可以结合卵磷脂和核酸。脂和核酸。CRPCRP可以引发对侵入细胞的免疫调理可以引发对侵入细胞的免疫调理作用和吞噬作用，结合后的复合体具有对补体系作用和吞噬作用，结合后的复合体具有对补体系统的激活作用，表现炎症反应。统的激活作用，表现炎症反应。 返回节返回节 C-C-反应蛋白反应蛋白 因在急性炎症病人血清中出现的可以结合因在急性炎症病人血清中出现的可以结合肺炎
42、球菌细胞壁肺炎球菌细胞壁C-C-多糖的蛋白质而命名。多糖的蛋白质而命名。 CRP CRP由肝细胞所合成，电泳分布在慢由肝细胞所合成，电泳分布在慢区带，区带，有时可以延伸到有时可以延伸到区带。区带。 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件临床意义临床意义 CRPCRP是第一个被认识的急性时相反应蛋白，是极是第一个被认识的急性时相反应蛋白，是极 灵敏的指标，血浆中灵敏的指标，血浆中CRPCRP浓度在急性心肌梗死、浓度在急性心肌梗死、 创伤、感染、炎症、外科手术、肿癌浸润时迅速创伤、感染、炎症、外科手术、肿癌浸润时迅速 显著地增高，可达正常水平的显著地增高，可达正常水平的20002000倍。倍。CR
43、PCRP是非特异性指标，主要用于结合临床病史监测是非特异性指标，主要用于结合临床病史监测 疾病：如评估炎症性疾病的活动度；监测系统性红疾病：如评估炎症性疾病的活动度；监测系统性红 斑狼疮、白血病和外科手术后并发的感染；监测肾斑狼疮、白血病和外科手术后并发的感染；监测肾 移植后的排斥反应等。移植后的排斥反应等。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件四、其他体液蛋白质四、其他体液蛋白质四、其他体液蛋白质四、其他体液蛋白质 包括尿液、脑脊液、胸腹水、羊水、唾液和包括尿液、脑脊液、胸腹水、羊水、唾液和粪便中的蛋白质粪便中的蛋白质 。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件
44、尿液蛋白质尿液蛋白质 正常尿总蛋白仅正常尿总蛋白仅2020150mg, 150mg, 其中其中ALBALB约占约占3030，总量，总量通常小于通常小于10mg10mg， 其次是由肾小管分泌的其次是由肾小管分泌的Tamm-HorsfallTamm-Horsfall蛋白约占蛋白约占2121。ALBALB增多是肾小球基底膜通透性增加的信号。增多是肾小球基底膜通透性增加的信号。大分子蛋白质如大分子蛋白质如IgGIgG、IgMIgM、AMGAMG增多是基底膜选择性或增多是基底膜选择性或 筛网功能丧失的表现。筛网功能丧失的表现。小分子蛋白质如小分子蛋白质如2 2- -微球蛋白、微球蛋白、1 1- -微球蛋
45、白微球蛋白 RBPRBP增多增多是肾小管重吸收功能下降的表现。是肾小管重吸收功能下降的表现。溢出性蛋白尿包括血红蛋白、肌红蛋白和溢出性蛋白尿包括血红蛋白、肌红蛋白和IgIg轻链等。轻链等。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（二）脑脊液蛋白质（二）脑脊液蛋白质 脑脊液总蛋白浓度为脑脊液总蛋白浓度为0.150.150.45g/L0.45g/L。正常成分：分子量较小的蛋白质如正常成分：分子量较小的蛋白质如ALBALB、TRFTRF 和和TTRTTR，未见到分子量大于未见到分子量大于IgGIgG的蛋白质。的蛋白质。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 脑脊液总蛋白
46、增多脑脊液总蛋白增多 （1 1）血脑屏障的通透性增加，如脑炎、脊髓灰质炎、）血脑屏障的通透性增加，如脑炎、脊髓灰质炎、 细菌性脑膜炎、隐球菌性脑膜炎、病毒性脑膜炎等。细菌性脑膜炎、隐球菌性脑膜炎、病毒性脑膜炎等。（2 2）引起脑脊液循环梗阻的疾病如脊髓肿瘤。）引起脑脊液循环梗阻的疾病如脊髓肿瘤。（3 3）脑出血。）脑出血。（4 4）脑软化、脑退行性疾病、神经性病变等。）脑软化、脑退行性疾病、神经性病变等。脑脊髓膜合成免疫球蛋白增多见于神经性梅毒、多发脑脊髓膜合成免疫球蛋白增多见于神经性梅毒、多发性硬化等。性硬化等。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件CSFCSF普通蛋白电泳特
47、征普通蛋白电泳特征 PAPA增高：脑萎缩、脑积水及中枢神经变性病。增高：脑萎缩、脑积水及中枢神经变性病。ALBALB增加：脑血管病变、椎管阻塞。增加：脑血管病变、椎管阻塞。、球蛋白增加：脑膜炎、脑肿瘤，球蛋白增加：脑膜炎、脑肿瘤，球蛋白增加球蛋白增加 可见于动脉硬化、脑血栓等疾病。可见于动脉硬化、脑血栓等疾病。球蛋白明显增高见于脑肿瘤。球蛋白明显增高见于脑肿瘤。多发性硬化症为中枢神经系统脱髓鞘疾病，多发性硬化症为中枢神经系统脱髓鞘疾病，区可见区可见 稀疏的稀疏的IgGIgG寡克隆带。寡克隆带。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 第二节第二节 氨基酸代谢紊乱氨基酸代谢紊乱 一
48、、氨基酸代谢紊乱的种类一、氨基酸代谢紊乱的种类一、氨基酸代谢紊乱的种类一、氨基酸代谢紊乱的种类 二、苯丙酮酸尿症二、苯丙酮酸尿症二、苯丙酮酸尿症二、苯丙酮酸尿症 三、酪氨酸血症三、酪氨酸血症三、酪氨酸血症三、酪氨酸血症 四、含硫氨基酸代谢紊乱四、含硫氨基酸代谢紊乱四、含硫氨基酸代谢紊乱四、含硫氨基酸代谢紊乱 返回章返回章 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 由参与氨基酸代谢的酶或其他蛋白因子缺由参与氨基酸代谢的酶或其他蛋白因子缺乏引起乏引起 ，为相关基因突变所致，至今已发现，为相关基因突变所致，至今已发现7070余种。余种。一、氨基酸代谢紊乱的种类一、氨基酸代谢紊乱的种类一、氨基酸代谢紊乱
49、的种类一、氨基酸代谢紊乱的种类 遗传性氨基酸代谢紊乱遗传性氨基酸代谢紊乱 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件氨基酸血症氨基酸血症氨基酸血症氨基酸血症 氨基酸尿症氨基酸尿症氨基酸尿症氨基酸尿症 氨基酸血症：当酶缺陷出现在代谢途径的起点时，氨基酸血症：当酶缺陷出现在代谢途径的起点时，其催化的氨基酸将在血循环中增加。其催化的氨基酸将在血循环中增加。氨基酸尿症：血中增加的氨基酸从尿中排出。氨基酸尿症：血中增加的氨基酸从尿中排出。中间代谢产物血尿浓度增加：当酶的缺陷出现在中间代谢产物血尿浓度增加：当酶的缺陷出现在 代谢途径的中间时，则此酶催化反应前的中间代代谢途径的中间时，则此酶催化反
50、应前的中间代 谢产物便在体内堆积。谢产物便在体内堆积。另外代谢途径的产物（血尿中）增加：由于正常另外代谢途径的产物（血尿中）增加：由于正常 降解途径受阻，氨基酸可通过另外的途径代谢。降解途径受阻，氨基酸可通过另外的途径代谢。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件遗传性氨基酸代谢紊乱的缺陷酶遗传性氨基酸代谢紊乱的缺陷酶遗传性氨基酸代谢紊乱的缺陷酶遗传性氨基酸代谢紊乱的缺陷酶 及其血中增高的成分及其血中增高的成分及其血中增高的成分及其血中增高的成分 疾病名称疾病名称 缺乏的酶缺乏的酶 血浆中增高的成分血浆中增高的成分苯丙酮酸尿症苯丙酮酸尿症 苯丙氨酸羟化酶苯丙氨酸羟化酶 苯丙氨酸、
51、苯丙酮酸苯丙氨酸、苯丙酮酸I I型酪氨酸血症型酪氨酸血症 延胡索酸乙酰乙酸酶延胡索酸乙酰乙酸酶 酪氨酸、甲硫氨酸酪氨酸、甲硫氨酸尿黑酸尿症尿黑酸尿症 尿黑酸氧化酶尿黑酸氧化酶 尿黑酸（轻度）尿黑酸（轻度）同型胱氨酸尿症同型胱氨酸尿症 胱硫醚合成酶胱硫醚合成酶 甲硫氨酸、同型胱氨酸甲硫氨酸、同型胱氨酸组氨酸血症组氨酸血症 组氨酸酶组氨酸酶 组氨酸、丙氨酸组氨酸、丙氨酸甘氨酸血症甘氨酸血症 甘氨酸氧化酶甘氨酸氧化酶 甘氨酸甘氨酸支链酮酸尿症支链酮酸尿症 支链酮酸氧化酶支链酮酸氧化酶 缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸等胱硫醚尿症胱硫醚尿症 胱硫醚酶胱硫醚酶 胱硫醚胱硫醚型高脯氨酸血
52、症型高脯氨酸血症 脯氨酸氧化酶脯氨酸氧化酶 脯氨酸脯氨酸精氨酸琥珀酸尿症精氨酸琥珀酸尿症 精氨酸琥珀酸酶精氨酸琥珀酸酶 谷氨酰胺、脯氨酸、甘氨酸等谷氨酰胺、脯氨酸、甘氨酸等精氨酸血症精氨酸血症 精氨酸酶精氨酸酶 精氨酸精氨酸蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件二、苯丙酮酸尿症二、苯丙酮酸尿症二、苯丙酮酸尿症二、苯丙酮酸尿症 主要由苯丙氨酸羟化酶缺乏引起的常染色体隐性遗传病。主要由苯丙氨酸羟化酶缺乏引起的常染色体隐性遗传病。 少数少数PKUPKU二氢蝶呤还原酶缺陷引起。二氢蝶呤还原酶缺陷引起。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件三、酪氨酸血症三、酪氨酸血症三、酪氨酸血症三、酪
53、氨酸血症 延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性延胡索酰乙酰乙酸水解酶活性低对低对- -羟苯丙酮酸氧化酶活性也下降羟苯丙酮酸氧化酶活性也下降酪氨酸在血尿中增加，甲硫氨酸酪氨酸在血尿中增加，甲硫氨酸血浓度也增加。血浓度也增加。 延胡索酰乙酰乙酸可还原生成延胡索酰乙酰乙酸可还原生成琥珀酰乙酰乙酸，后者如再脱羧琥珀酰乙酰乙酸，后者如再脱羧则成为琥珀酰丙酮。琥珀酰丙酮则成为琥珀酰丙酮。琥珀酰丙酮可损害肝与肾的功能。可损害肝与肾的功能。 酪氨酸分解代谢酪氨酸分解代谢 I I型酪氨酸血症型酪氨酸血症 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件四、含硫氨基酸代谢紊乱四、含硫氨基酸代谢紊乱四、含硫氨基酸代谢紊乱
54、四、含硫氨基酸代谢紊乱 含硫氨基酸包括甲硫氨酸、半胱氨酸和胱氨酸，含硫氨基酸包括甲硫氨酸、半胱氨酸和胱氨酸，胱氨酸是两个半胱氨酸脱氢后以二硫键结合形成。胱氨酸是两个半胱氨酸脱氢后以二硫键结合形成。同型半胱氨酸比半胱氨酸多一个次甲基（同型半胱氨酸比半胱氨酸多一个次甲基（-CH-CH2 2），），是甲硫氨酸代谢的中间产物。是甲硫氨酸代谢的中间产物。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件同型半胱氨酸同型半胱氨酸同型半胱氨酸同型半胱氨酸同型半胱氨酸不稳定，易氧化成同型胱同型半胱氨酸不稳定，易氧化成同型胱 氨酸或同型半胱氨酸氨酸或同型半胱氨酸- -半
55、胱氨酸二硫化合半胱氨酸二硫化合 物，仅少量以还原型同型半胱氨酸存在于物，仅少量以还原型同型半胱氨酸存在于 血浆。血浆。这些含硫化合物在血浆中大部分与蛋白质这些含硫化合物在血浆中大部分与蛋白质 结合。我们通常所指的同型半胱氨酸包括结合。我们通常所指的同型半胱氨酸包括 所有这些结合和游离的含同型半胱氨酸的所有这些结合和游离的含同型半胱氨酸的 化合物。化合物。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 第三节第三节 嘌呤核苷酸代谢紊乱嘌呤核苷酸代谢紊乱 一、嘌呤核苷酸代谢一、嘌呤核苷酸代谢一、嘌呤核苷酸代谢一、嘌呤核苷酸代谢 二、高尿酸血症二、高尿酸血症二、高尿酸血症二、高尿酸血症 三、
56、高尿酸血症与痛风三、高尿酸血症与痛风三、高尿酸血症与痛风三、高尿酸血症与痛风 返回章返回章 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 嘌呤核苷酸的合成：从头合成途径、补救途径嘌呤核苷酸的合成：从头合成途径、补救途径 嘌呤核苷酸的分解：终产物是尿酸嘌呤核苷酸的分解：终产物是尿酸 一、嘌呤核苷酸代谢一、嘌呤核苷酸代谢一、嘌呤核苷酸代谢一、嘌呤核苷酸代谢 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件嘌嘌呤呤核核苷苷酸酸合合成成代代谢谢蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件二、高尿酸血症二、高尿酸血症二、高尿酸血症二、高尿酸血症 由嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄障碍
57、引起。由嘌呤代谢紊乱或尿酸排泄障碍引起。嘌呤的合成、吸收和分解代谢发生紊乱，将嘌呤的合成、吸收和分解代谢发生紊乱，将出现尿酸生成过多而导致高尿酸血症。人和猿出现尿酸生成过多而导致高尿酸血症。人和猿类体内缺乏尿酸酶，不能将尿酸分解成尿囊素，类体内缺乏尿酸酶，不能将尿酸分解成尿囊素，进一步再分解成进一步再分解成NHNH3 3、COCO2 2和和H H2 2O O，人体内尿酸通人体内尿酸通过肾脏排出体外。过肾脏排出体外。若尿酸排泄出现障碍，可导致高尿酸血。若尿酸排泄出现障碍，可导致高尿酸血。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（一）尿酸排泄障碍（一）尿酸排泄障碍 当肾小球滤过率下降
58、，或近端肾小管对尿当肾小球滤过率下降，或近端肾小管对尿酸的重吸收增加或（和）分泌功能减退时，便酸的重吸收增加或（和）分泌功能减退时，便导致高尿酸血症。导致高尿酸血症。 原发性高尿酸血症，机制不明的多基因性原发性高尿酸血症，机制不明的多基因性遗传缺陷、慢性肾疾患等引起。遗传缺陷、慢性肾疾患等引起。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（二）尿酸生成过多（二）尿酸生成过多 1. 1. 嘌呤合成代谢紊乱嘌呤合成代谢紊乱体内体内80%80%尿酸来源于嘌呤的生物合成，尿酸来源于嘌呤的生物合成， 嘌呤合成代谢紊乱可致高尿酸血症。嘌呤合成代谢紊乱可致高尿酸血症。其中大多数属多基因遗传缺陷，机
59、制其中大多数属多基因遗传缺陷，机制 不明。由酶缺陷引起者仅占少不明。由酶缺陷引起者仅占少数数 。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件酶缺陷酶缺陷 （1 1）次黄嘌呤）次黄嘌呤- -鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（HGPRTHGPRT）缺）缺乏乏 。；。； （2 2）PRPPPRPP合成酶亢进。合成酶亢进。 （3 3）葡萄糖）葡萄糖-6-6-磷酸酶（磷酸酶（G6paseG6pase）缺乏，引起葡萄）缺乏，引起葡萄糖糖-6-6-磷酸增多，并沿磷酸戊糖代谢途径转化成较多的磷酸增多，并沿磷酸戊糖代谢途径转化成较多的PRPPPRPP，使嘌呤合成增多。，使嘌呤合成增多。 （4
60、 4）腺嘌呤磷酸核糖转移酶（）腺嘌呤磷酸核糖转移酶（APRTAPRT）缺乏，腺嘌呤）缺乏，腺嘌呤不能经补救途径合成腺苷酸而出现堆积，腺嘌呤的代不能经补救途径合成腺苷酸而出现堆积，腺嘌呤的代谢产物谢产物2 2，8-8-二羟腺嘌呤由尿排出增加，可产生肾结石。二羟腺嘌呤由尿排出增加，可产生肾结石。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件2. 2. 嘌呤吸收增多嘌呤吸收增多 体内体内20%20%尿酸来源于食物中的嘌呤，尿酸来源于食物中的嘌呤， 摄入富含嘌呤食物过多可诱发痛风发摄入富含嘌呤食物过多可诱发痛风发 作，但不是发生高尿酸血症的原因。作，但不是发生高尿酸血症的原因。3. 3. 嘌呤
61、分解增加嘌呤分解增加 在骨髓增殖性疾病等，有旺盛的细胞在骨髓增殖性疾病等，有旺盛的细胞 合成和分解，从而出现核酸分解亢进，合成和分解，从而出现核酸分解亢进， 嘌呤和尿酸生成增多。嘌呤和尿酸生成增多。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 高尿酸血症的原因也可归纳为原发性和继发高尿酸血症的原因也可归纳为原发性和继发性两方面，原发性包括原发性肾脏排泄尿酸障碍性两方面，原发性包括原发性肾脏排泄尿酸障碍和原发性尿酸产生过多，继发性包括各种肾脏疾和原发性尿酸产生过多，继发性包括各种肾脏疾病以及引起嘌呤分解过多的疾病。病以及引起嘌呤分解过多的疾病。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的
62、代谢紊乱课件三、高尿酸血症与痛风三、高尿酸血症与痛风三、高尿酸血症与痛风三、高尿酸血症与痛风 痛风（痛风（goutgout）的概念）的概念 由于遗传性和（或）获得性的尿酸排泄减由于遗传性和（或）获得性的尿酸排泄减 少和（或）嘌呤代谢障碍，导致高尿酸血症，少和（或）嘌呤代谢障碍，导致高尿酸血症， 当出现尿酸盐结晶形成和沉积，并引起特征当出现尿酸盐结晶形成和沉积，并引起特征 性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎、尿酸性急性关节炎、痛风石、间质性肾炎、尿酸 性尿路结石时，即为痛风，严重者有关节畸性尿路结石时，即为痛风，严重者有关节畸 形及功能障碍。形及功能障碍。痛风是一组疾病，高尿酸血症中痛风是一组疾病
63、，高尿酸血症中10102020 发生痛风。发生痛风。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件尿酸钠结晶形成尿酸钠结晶形成 血浆中尿酸盐以单钠尿酸盐形式存在，其溶血浆中尿酸盐以单钠尿酸盐形式存在，其溶解度很低。解度很低。当血液当血液pHpH为为7.47.4时，尿酸钠的溶解度约为时，尿酸钠的溶解度约为0.42mmol/L0.42mmol/L，0.42mmol/L 0.42mmol/L 时已成过饱和状态。时已成过饱和状态。当浓度当浓度0.48mmol/L 0.48mmol/L 持久不降，如遇有下列情况持久不降，如遇有下列情况即可使尿酸钠呈微小结晶析出：即可使尿酸钠呈微小结晶析出： 血浆
64、清蛋白及血浆清蛋白及1 12 2球蛋白减少。球蛋白减少。 局部局部pHpH降低。降低。 局部温度降低。局部温度降低。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 尿酸钠沉淀与炎症反应尿酸钠沉淀与炎症反应结结晶晶易易沉沉淀淀在在血血管管较较少少、粘粘多多糖糖含含量量较较丰丰富富的的结结缔缔组组织织、软骨和关节腔内。软骨和关节腔内。运运动动、饮饮酒酒、应应激激、局局部部损损伤伤等等都都可可诱诱发发这这些些部部位位急急性性 炎症发作。炎症发作。如如运运动动时时这这些些组组织织容容易易发发生生缺缺氧氧，于于是是出出现现糖糖酵酵解解加加速速和和乳酸产生增多，引起乳酸产生增多，引起pHpH降低，
65、导致局部尿酸钠结晶析出。降低，导致局部尿酸钠结晶析出。微微小小的的尿尿酸酸钠钠结结晶晶表表面面可可吸吸附附IgGIgG，并并在在补补体体参参与与下下诱诱发发多多型型核核白白细细胞胞的的吞吞噬噬作作用用。结结晶晶被被吞吞噬噬后后可可促促使使白白细细胞胞膜膜破破裂裂，释释放放出出各各种种炎炎症症介介质质，如如趋趋化化因因子子，溶溶酶酶体体和和胞胞浆浆内内的各种酶，导致组织发生炎症反应。的各种酶，导致组织发生炎症反应。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件第四节第四节 蛋白质和氨基酸检测蛋白质和氨基酸检测 一、一、一、一、 体液总蛋白测定体液总蛋白测定体液总蛋白测定体液总蛋白测定 二
66、、二、二、二、 体液清蛋白测定体液清蛋白测定体液清蛋白测定体液清蛋白测定 三、三、三、三、 蛋白质电泳技术蛋白质电泳技术蛋白质电泳技术蛋白质电泳技术 四、四、四、四、 蛋白质免疫化学法测定蛋白质免疫化学法测定蛋白质免疫化学法测定蛋白质免疫化学法测定 五、五、五、五、 氨基酸检测氨基酸检测氨基酸检测氨基酸检测 返回章返回章 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件一、血清总蛋白测定一、血清总蛋白测定一、血清总蛋白测定一、血清总蛋白测定 血清总蛋白包括数量众多的各种蛋白质，定量血清总蛋白包括数量众多的各种蛋白质，定量测定时作了如下假定：测定时作了如下假定：（1 1）所有血浆蛋白是单纯的多肽链，糖脂类
67、和金）所有血浆蛋白是单纯的多肽链，糖脂类和金属有机物等均不计在内，其含氮量平均为属有机物等均不计在内，其含氮量平均为1616；（2 2）几百种血浆蛋白理化性质虽不同，但与化学）几百种血浆蛋白理化性质虽不同，但与化学试剂的反应性（如呈色、沉淀）一致。试剂的反应性（如呈色、沉淀）一致。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（一）凯氏定氮法（一）凯氏定氮法 1883 1883年建立，是经典的蛋白质测定方法。根据蛋年建立，是经典的蛋白质测定方法。根据蛋白质平均含氮量白质平均含氮量1616计算蛋白浓度。该法结果准确性计算蛋白浓度。该法结果准确性好，精密度高，灵敏度高，是公认的参考方法，目
68、前好，精密度高，灵敏度高，是公认的参考方法，目前用于标准蛋白质的定值和校正其他方法等，并可适用用于标准蛋白质的定值和校正其他方法等，并可适用于一切形态（固体和液体）样品。操作复杂、费时，于一切形态（固体和液体）样品。操作复杂、费时，不适合血清总蛋白等常规测定，而且血清等样品中各不适合血清总蛋白等常规测定，而且血清等样品中各种蛋白质含氮量有少许差异，尤其在疾病状态差异可种蛋白质含氮量有少许差异，尤其在疾病状态差异可能更大。能更大。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（二）双缩脲法（二）双缩脲法 蛋白质中的肽键（蛋白质中的肽键（-CONH-CONH-）在碱性溶液中能在碱性溶液中能
69、 与与CuCu2+2+作用产生紫红色络合物，因至少含作用产生紫红色络合物，因至少含 2 2个个-CONH-CONH-基团才能与基团才能与CuCu2+2+络合，故三肽以络合，故三肽以 上才能反应，在体液中小分子肽含量极低。上才能反应，在体液中小分子肽含量极低。该法对各种蛋白质呈色基本相同，特异性和该法对各种蛋白质呈色基本相同，特异性和 准确度好，精密度好；显色稳定性好，试剂准确度好，精密度好；显色稳定性好，试剂 单一，方法简便；灵敏度虽不高，但对血清单一，方法简便；灵敏度虽不高，但对血清 总蛋白定量较为适用。对蛋白质含量很低的总蛋白定量较为适用。对蛋白质含量很低的 其他体液如脑脊液、胸腹水和尿液
70、等不合适。其他体液如脑脊液、胸腹水和尿液等不合适。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（三）酚试剂法（三）酚试剂法 蛋白质中酪氨酸和色氨酸能还原磷钨酸磷蛋白质中酪氨酸和色氨酸能还原磷钨酸磷钼酸试剂起蓝色反应。钼酸试剂起蓝色反应。LowryLowry酚试剂改良法：先酚试剂改良法：先用碱性铜溶液与蛋白质反应，再加入酚试剂，用碱性铜溶液与蛋白质反应，再加入酚试剂，则铜则铜- -肽键络合物中的酪氨酸和色氨酸使磷钨肽键络合物中的酪氨酸和色氨酸使磷钨酸和磷钼酸还原为钨蓝和钼蓝，使呈色灵敏度酸和磷钼酸还原为钨蓝和钼蓝，使呈色灵敏度达到双缩脲法的达到双缩脲法的100100倍左右。倍左右。 本
71、法灵敏度高。各种蛋白质中酪氨酸和色氨本法灵敏度高。各种蛋白质中酪氨酸和色氨酸的含量不同，如清蛋白含色氨酸酸的含量不同，如清蛋白含色氨酸0.2%0.2%，而球，而球蛋白含色氨酸蛋白含色氨酸2%2%3%3%。因此，本法测定纯单一。因此，本法测定纯单一蛋白质较合适。本法易受还原性化合物的干扰，蛋白质较合适。本法易受还原性化合物的干扰，如带如带-SH-SH的化合物、糖类、酚类等的化合物、糖类、酚类等 。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（四）紫外分光光度法（四）紫外分光光度法 芳香族氨基酸在芳香族氨基酸在280nm280nm处有吸收峰。处有吸收峰。方法的准确性受该种氨基酸的含量影响
72、甚大。方法的准确性受该种氨基酸的含量影响甚大。尿酸和胆红素在尿酸和胆红素在280nm280nm附近有干扰，所以不适附近有干扰，所以不适 合血清等。常用于较纯的酶、免疫球蛋白等蛋合血清等。常用于较纯的酶、免疫球蛋白等蛋 白质测定。白质测定。可保留蛋白质制剂的生物活性。可保留蛋白质制剂的生物活性。核酸最大吸收峰为核酸最大吸收峰为260nm260nm，在，在280nm280nm也有较强也有较强 的光吸收，因而测定蛋白质可采用两个波长的的光吸收，因而测定蛋白质可采用两个波长的 吸光度予以校正，即蛋白质浓度（吸光度予以校正，即蛋白质浓度（g/Lg/L） 1.45A2801.45A2800.74A260n
73、m0.74A260nm。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（五）染料结合法（五）染料结合法 在酸性环境蛋白质分子可解离带上正电荷在酸性环境蛋白质分子可解离带上正电荷-NH-NH3+3+，与染料阴离子产生颜色反应。常用的，与染料阴离子产生颜色反应。常用的染料有氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯染料有氨基黑、丽春红、考马斯亮蓝、邻苯三酚红钼等。前两种常作为血清蛋白醋酸纤三酚红钼等。前两种常作为血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳或琼脂糖凝胶电泳的染料。维素薄膜电泳或琼脂糖凝胶电泳的染料。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 考马斯亮蓝：常用于需更高呈色灵敏度的考马斯亮蓝：
74、常用于需更高呈色灵敏度的 蛋白电泳中，也可用于测定尿液、脑脊液等蛋白电泳中，也可用于测定尿液、脑脊液等 的蛋白质，优点是简便、快速、灵敏，缺点的蛋白质，优点是简便、快速、灵敏，缺点 是不同蛋白质与染料的结合力不一致，且试是不同蛋白质与染料的结合力不一致，且试 剂对比色杯有吸附作用。不实用。剂对比色杯有吸附作用。不实用。邻苯三酚红钼法邻苯三酚红钼法 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（六）比浊法（六）比浊法 基于某些酸如三氯醋酸、磺基水杨酸等能与蛋白基于某些酸如三氯醋酸、磺基水杨酸等能与蛋白 质结合而产生微细沉淀，测定悬浮液的浊度大小质结合而产生微细沉淀，测定悬浮液的浊度大小
75、与蛋白质的浓度成正比。与蛋白质的浓度成正比。该法优点是操作简便、灵敏度高。该法优点是操作简便、灵敏度高。缺点是影响浊度大小的因素较多，包括加入试剂缺点是影响浊度大小的因素较多，包括加入试剂 的手法、混匀技术、反应温度等，故精密度差；的手法、混匀技术、反应温度等，故精密度差； 且各种蛋白质形成的浊度亦有较大的差别。一般且各种蛋白质形成的浊度亦有较大的差别。一般 用于测定尿液、脑脊液等蛋白质浓度较低的样品，用于测定尿液、脑脊液等蛋白质浓度较低的样品， 其标准品推荐使用含正常白其标准品推荐使用含正常白/ /球蛋白比值的血清标球蛋白比值的血清标 准品作适当稀释。准品作适当稀释。 返回节返回节 蛋白质与
76、非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件二、血清清蛋白测定二、血清清蛋白测定二、血清清蛋白测定二、血清清蛋白测定 清蛋白是血清内含量最多的一种蛋白质，清蛋白是血清内含量最多的一种蛋白质， 以前用硫酸铵盐析法沉淀球蛋白，再用以前用硫酸铵盐析法沉淀球蛋白，再用 总蛋白测定方法测定上清液中的清蛋白。总蛋白测定方法测定上清液中的清蛋白。 目前测定清蛋白的方法有电泳法、免疫目前测定清蛋白的方法有电泳法、免疫 法和染料结合法。法和染料结合法。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件溴甲酚绿法（溴甲酚绿法（溴甲酚绿法（溴甲酚绿法（BCGBCGBCGBCG） 溴甲酚紫法（溴甲酚紫法（溴甲酚紫法（溴甲酚紫法
77、（BCPBCPBCPBCP） 在酸性环境清蛋白具有与阴离子染料在酸性环境清蛋白具有与阴离子染料BCGBCG和和BCPBCP 结合的特性，而球蛋白基本不结合这些染料。结合的特性，而球蛋白基本不结合这些染料。 BCG BCG 法和法和BCPBCP法灵敏度高、操作简便、重复性好，法灵敏度高、操作简便、重复性好， 能自动化。能自动化。BCGBCG法最常用，虽然法最常用，虽然和和球蛋白与球蛋白与BCGBCG也能起也能起 慢反应，但缩短反应时间即能去除此非特异性慢反应，但缩短反应时间即能去除此非特异性 反应，自动化分析仪的普遍应用使比色能在反反应，自动化分析仪的普遍应用使比色能在反 应应10103030秒
78、后立即进行，因而使该法变得很实用。秒后立即进行，因而使该法变得很实用。 BCPBCP法无球蛋白的非特异性干扰，但与牛、猪法无球蛋白的非特异性干扰，但与牛、猪 等动物血清清蛋白的反应性比与人的反应性低，等动物血清清蛋白的反应性比与人的反应性低， 质控血清往往是动物血清，故其应用受限。质控血清往往是动物血清，故其应用受限。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件三、蛋白质电泳技术三、蛋白质电泳技术三、蛋白质电泳技术三、蛋白质电泳技术 返回节返回节 电泳技术广泛应用于临床实验室检测血清、电泳技术广泛应用于临床实验室检测血清、尿液和脑脊液等体液蛋白质，醋酸纤维素薄膜尿液和脑脊液等体液蛋白
79、质，醋酸纤维素薄膜（CAMCAM）和琼脂糖凝胶等是采用最广的凝胶介）和琼脂糖凝胶等是采用最广的凝胶介质，其次还有毛细管电泳和一些专门的电泳技质，其次还有毛细管电泳和一些专门的电泳技术，如蛋白质印迹、免疫固定和双向电泳等。术，如蛋白质印迹、免疫固定和双向电泳等。蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（一）血清蛋白电泳（一）血清蛋白电泳 SPESPE通常采用通常采用CAMCAM或琼脂糖凝胶，在或琼脂糖凝胶，在pH8.6pH8.6的缓冲液中，血清中各种蛋白质都电离成负的缓冲液中，血清中各种蛋白质都电离成负离子，在电场中向正极移动；因各种蛋白质离子，在电场中向正极移动；因各种蛋白质pIpI不同，在相同
80、不同，在相同pHpH下带电荷量有差异，同时下带电荷量有差异，同时各蛋白质的分子大小与分子形状也不相同，各蛋白质的分子大小与分子形状也不相同，因此在同一电场中泳动速度不同；带电荷多因此在同一电场中泳动速度不同；带电荷多，分子量小者，泳动较快，反之则较慢。，分子量小者，泳动较快，反之则较慢。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件 1.1.1.1.尿蛋白普通电泳尿蛋白普通电泳尿蛋白普通电泳尿蛋白普通电泳 采用采用CAMCAM或琼脂糖凝胶，常需浓缩尿液和或琼脂糖凝胶，常需浓缩尿液和采用高灵敏度的染色方法如金染或银染。采用高灵敏度的染色方法如金染或银染。一些自动电泳仪采用反复多次在琼脂糖
81、凝一些自动电泳仪采用反复多次在琼脂糖凝胶上加样，也可不需浓缩尿液，电泳后以考胶上加样，也可不需浓缩尿液，电泳后以考马斯亮蓝染色，分离结果可呈现马斯亮蓝染色，分离结果可呈现ALBALB、1 1、2 2、1 1、2 2和和球蛋白六个区带甚至七个球蛋白六个区带甚至七个区带（两个区带（两个2 2区带）；这种电泳能得到尿蛋区带）；这种电泳能得到尿蛋白的全貌，对许多尿蛋白能做出初步的分类白的全貌，对许多尿蛋白能做出初步的分类判断，但因为并非按分子量分离蛋白质，一判断，但因为并非按分子量分离蛋白质，一般只作为过筛试验。般只作为过筛试验。 返回节返回节 （二）尿蛋白电泳（二）尿蛋白电泳 蛋白质与非蛋白含氮化合
82、物的代谢紊乱课件尿蛋白普通电泳图谱尿蛋白普通电泳图谱尿蛋白普通电泳图谱尿蛋白普通电泳图谱 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件尿蛋白普通电泳各类图谱尿蛋白普通电泳各类图谱尿蛋白普通电泳各类图谱尿蛋白普通电泳各类图谱A.A.清蛋白尿清蛋白尿清蛋白尿清蛋白尿B.B.选择性肾小球性清蛋白尿选择性肾小球性清蛋白尿选择性肾小球性清蛋白尿选择性肾小球性清蛋白尿C.C.非迭择性蛋白尿非迭择性蛋白尿非迭择性蛋白尿非迭择性蛋白尿D.D.混合性蛋白尿混合性蛋白尿混合性蛋白尿混合性蛋白尿E.E.肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿肾小管性蛋白尿F.F.溢出性清蛋白尿溢出性清蛋白尿溢出性清蛋白尿
83、溢出性清蛋白尿蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件2.SDS2.SDS2.SDS2.SDS凝胶电泳凝胶电泳凝胶电泳凝胶电泳 SDS-AGE SDS-AGE或或SDS-PAGESDS-PAGE，电泳后蛋白区带经考马，电泳后蛋白区带经考马斯亮蓝染色，则能将尿蛋白按分子量大小进行分离，斯亮蓝染色，则能将尿蛋白按分子量大小进行分离，从而判断为肾小球性蛋白尿及其选择性和非选择性、从而判断为肾小球性蛋白尿及其选择性和非选择性、肾小管性蛋白尿、混合性蛋白尿、溢出性蛋白尿等。肾小管性蛋白尿、混合性蛋白尿、溢出性蛋白尿等。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件SDS-PAGESDS-PAGES
84、DS-PAGESDS-PAGE图谱图谱图谱图谱 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（三）脑脊液蛋白电泳（三）脑脊液蛋白电泳 经充分浓缩后，脑脊液蛋白可以采用与普通血经充分浓缩后，脑脊液蛋白可以采用与普通血清蛋白电泳相似的方法进行检测，琼脂糖凝胶，清蛋白电泳相似的方法进行检测，琼脂糖凝胶，考马斯亮蓝染色；银染能增加灵敏度因而无需浓考马斯亮蓝染色；银染能增加灵敏度因而无需浓缩样品。缩样品。可分为可分为PAPA、ALBALB、1 1、2 2、球蛋白球蛋白6 6个组个组分，通常还有分，通常还有1 1和和2 2。浓缩标本或银染能清楚地发现浓缩标本或银染能清楚地发现IgGIgG区带。区带。 IgGIg
85、G寡克隆区带：出现两条或多条稀疏的寡克隆区带：出现两条或多条稀疏的IgGIgG区区带，且比同一病人同时的血清蛋白电泳中带，且比同一病人同时的血清蛋白电泳中区带区带致密，等电聚焦联合免疫印迹法能提高致密，等电聚焦联合免疫印迹法能提高IgGIgG寡克隆寡克隆带的检测灵敏度和特异性。带的检测灵敏度和特异性。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件脑脊液蛋白电泳图谱脑脊液蛋白电泳图谱脑脊液蛋白电泳图谱脑脊液蛋白电泳图谱 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件（四）免疫固定电泳（四）免疫固定电泳 能确定蛋白质的单克隆属性，从而诊断浆细能确定蛋白质的单克隆属性，从而诊断浆细 胞
86、病等。胞病等。在在1 1张琼脂糖凝胶上对张琼脂糖凝胶上对1 1个样品重复做个样品重复做6 6份电泳，份电泳， 1 1份为普通电泳，其他份为普通电泳，其他5 5份经普通电泳分离蛋白份经普通电泳分离蛋白 后分别加入羊抗人后分别加入羊抗人IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM、链和链和 链单克隆抗血清，被分离出的免疫球蛋白或轻链单克隆抗血清，被分离出的免疫球蛋白或轻 链与其相应抗体发生反应而沉淀，未反应蛋白链与其相应抗体发生反应而沉淀，未反应蛋白 被清洗掉，抗原抗体反应物经染色后形成可见被清洗掉，抗原抗体反应物经染色后形成可见 条带，比较普通电泳条带与免疫固定后的沉淀条带，比较普通电泳条带与免疫固
87、定后的沉淀 带，可对结果作出定性解释。带，可对结果作出定性解释。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件免疫固定电泳图谱免疫固定电泳图谱免疫固定电泳图谱免疫固定电泳图谱 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件四、蛋白质免疫化学法测定四、蛋白质免疫化学法测定四、蛋白质免疫化学法测定四、蛋白质免疫化学法测定 蛋白质都由氨基酸组成，性质相似，故除清蛋白蛋白质都由氨基酸组成，性质相似，故除清蛋白等少数蛋白质有某种特性可利用，因而能使用染等少数蛋白质有某种特性可利用，因而能使用染料结合法等方法测定外，其他都需制备特异的抗料结合法等方法测定外，其他都需制备特异的抗血清，采用免疫
88、化学方法测定。血清，采用免疫化学方法测定。包括免疫比浊法、免疫扩散法（包括免疫比浊法、免疫扩散法（RIDRID）、放射免）、放射免 疫法（疫法（RIARIA）、酶免疫法（）、酶免疫法（EIAEIA）和化学发光法。）和化学发光法。免疫比浊法和免疫扩散法适用于血清蛋白质，放免疫比浊法和免疫扩散法适用于血清蛋白质，放射免疫法、酶免疫法和化学发光法更灵敏，适用射免疫法、酶免疫法和化学发光法更灵敏，适用于测定低至每毫升纳克水平的蛋白质。免疫比浊于测定低至每毫升纳克水平的蛋白质。免疫比浊法由于简单快速，故应用最广泛。法由于简单快速，故应用最广泛。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件141
89、41414种蛋白质有国际公认的标准参考物质种蛋白质有国际公认的标准参考物质种蛋白质有国际公认的标准参考物质种蛋白质有国际公认的标准参考物质 ALBALB、PAPA、AATAAT、AAGAAG、HAPHAP、AMGAMG、CERCER、 TRF TRF、CRPCRP、IgGIgG、IgMIgM、IgAIgA、C3C3、C4C4。此外，免疫球蛋白轻链此外，免疫球蛋白轻链和和、甲胎蛋白、甲胎蛋白 （AFPAFP）、）、2 2微球蛋白等血液和尿液蛋白质也微球蛋白等血液和尿液蛋白质也 可用上述方法测定。可用上述方法测定。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件五、氨基酸检测五、氨基酸检测五
90、、氨基酸检测五、氨基酸检测 l遗传性氨基酸代谢紊乱可以从三个水平上诊断：遗传性氨基酸代谢紊乱可以从三个水平上诊断： 异常的异常的DNADNA检测检测。 产前筛查和产后检测酶缺陷产前筛查和产后检测酶缺陷。 这些缺陷导致的血尿氨基酸增多。这些缺陷导致的血尿氨基酸增多。l检测氨基酸的方法主要有：检测氨基酸的方法主要有： 过筛试验过筛试验，包括薄层层析、尿液颜色试验和，包括薄层层析、尿液颜色试验和 GuthrieGuthrie微生物试验。微生物试验。 定量测定氨基酸，定量测定氨基酸，以监测治疗或确定初步诊断。以监测治疗或确定初步诊断。 返回节返回节 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件谢谢 谢！谢！ 退出退出 蛋白质与非蛋白含氮化合物的代谢紊乱课件
