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1、色谱法色谱法色谱法色谱法 第六章第六章色谱法色谱法 利用各组分在固定相和流动利用各组分在固定相和流动 相之间分配系数的差异得到相之间分配系数的差异得到 分离，再逐个进行分析分离，再逐个进行分析是分离、分析同时进行的一类分析方法是分离、分析同时进行的一类分析方法高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）气相色谱法气相色谱法（GC） 薄层色谱法薄层色谱法（TLC） 常用的色谱法常用的色谱法 1. 分配系数分配系数（K） 各组分在固定相和流动相之间各组分在固定相和流动相之间 达到平衡时的浓度之比达到平衡时的浓度之比 2. 容量因子容量因子（k） （质量分配系数）质量分配系数） 各组分在固定相和流动相之
2、间各组分在固定相和流动相之间 达到平衡时的质量之比达到平衡时的质量之比kkAkB 是分离的先决条件是分离的先决条件容量因子容量因子（k） （质量分配系数）质量分配系数） 不仅与被测组分、固定相、流动不仅与被测组分、固定相、流动相及温度有关，还与两相体积有关。相及温度有关，还与两相体积有关。容量因子比分配系数更易测定。容量因子比分配系数更易测定。 3. 色谱过程方程色谱过程方程 保留时间与分配系数的关系保留时间与分配系数的关系第一节第一节 薄层色谱法薄层色谱法 薄层色谱法薄层色谱法（TLC法）法） 将固定相涂布在玻璃、塑料或金将固定相涂布在玻璃、塑料或金 属板上形成薄层，在此薄层上进行色属板上形
3、成薄层，在此薄层上进行色 谱分离的方法谱分离的方法简便、快速、灵敏、高选择性、显色方便简便、快速、灵敏、高选择性、显色方便1. 吸附薄层色谱的分离原理吸附薄层色谱的分离原理 点在薄层板上的样品不断点在薄层板上的样品不断 地被吸附剂吸附和被展开剂溶解地被吸附剂吸附和被展开剂溶解 而解吸，并随展开剂向前移动，而解吸，并随展开剂向前移动， 从而产生差速迁移得到分离从而产生差速迁移得到分离一、基本原理一、基本原理2. 比移值比移值Rf 最佳范围最佳范围 0. 3 0. 5 可用范围可用范围 0. 2 0. 8 Oll03. 分离度分离度（分辨率）（分辨率）（R） 薄层板上薄层板上 两相邻斑点中心距离与
4、两相邻斑点中心距离与 两斑点平均宽度的比值两斑点平均宽度的比值 色谱图上色谱图上 两色谱峰顶尖距离与两两色谱峰顶尖距离与两 色谱峰的峰宽和之比色谱峰的峰宽和之比二、操作方法二、操作方法1. 吸附剂吸附剂活化活化 105110加热加热30 硅胶活性强弱与含水量有关，水硅胶活性强弱与含水量有关，水分越高活性越低，吸附力越小分越高活性越低，吸附力越小硅胶硅胶H、硅胶硅胶HF254硅胶硅胶G、硅胶硅胶GF254（一）吸附剂和展开剂的选择（一）吸附剂和展开剂的选择（1）硅胶）硅胶2. 氧化铝氧化铝 酸性、中性和碱性酸性、中性和碱性 活性与含水量有关活性与含水量有关3. 聚酰胺聚酰胺 表面有酰胺基，可与酚
5、、羧表面有酰胺基，可与酚、羧 酸、氨基酸等形成氢键酸、氨基酸等形成氢键 2. 展开剂展开剂极性较强组分极性较强组分 活性低的薄层板活性低的薄层板 极性较强的展开剂极性较强的展开剂极性较弱组分极性较弱组分 活性高的薄层板活性高的薄层板 极性较弱的展开剂极性较弱的展开剂（二）薄层板的制备（二）薄层板的制备（三）点样与展开（三）点样与展开（四）斑点的定位（四）斑点的定位普通板普通板 日光下（直接或显色）日光下（直接或显色） 紫外灯下（荧光）紫外灯下（荧光）荧光板荧光板 荧光淬灭荧光淬灭三、应用三、应用（一）鉴别（一）鉴别 对照品法对照品法 比较供试品与对照品的比较供试品与对照品的Rf值值 及颜色是否
6、一致及颜色是否一致 （二）检查（二）检查供试品供试品供试品溶液供试品溶液 杂质对照品杂质对照品对照品溶液对照品溶液 1. 杂质对照品法杂质对照品法 供供试试品品对对照照品品优点优点：同一物质，同一同一物质，同一Rf值比较，值比较， 准确度高、直观性强准确度高、直观性强缺点缺点：需要杂质对照品需要杂质对照品 2、高低浓度对比法、高低浓度对比法 以供试品溶液的稀溶液作为对照液以供试品溶液的稀溶液作为对照液A、供试品所显杂质斑点与对照液供试品所显杂质斑点与对照液 主斑点比较，不得更深主斑点比较，不得更深B、规定供试品杂质斑点的个数规定供试品杂质斑点的个数供供试试品品对对照照品品缺点缺点：不同物质，不
7、同不同物质，不同Rf值的比较，值的比较， 准确度差、直观性差准确度差、直观性差优点优点：以供试品的稀溶液作为对照液，以供试品的稀溶液作为对照液， 不需要杂质对照品，简单、价不需要杂质对照品，简单、价 廉，还可配成几种限量的对照廉，还可配成几种限量的对照 溶液溶液01：79. 以硅胶为固定相的薄层色谱以硅胶为固定相的薄层色谱 按作用机制属于按作用机制属于 A. 吸附色谱吸附色谱 B. 离子交换色谱离子交换色谱 C. 胶束色谱胶束色谱 D. 分子排阻色谱分子排阻色谱 E. 亲合色谱亲合色谱例例1、TLC法中，各分离组分的法中，各分离组分的Rf值值 最佳范围是最佳范围是 A、 0.20.8 B、 0
8、.30.5 C、 0.30.8 D、 0.50.8 E、 0.20.3第二节第二节 气相色谱法和高效液相色谱法气相色谱法和高效液相色谱法 一、气相色谱法一、气相色谱法（GC法）法） 以气体为流动相的色谱法以气体为流动相的色谱法 （一）基本原理（一）基本原理 各组分在固定相与载气之间由各组分在固定相与载气之间由 于分配系数不同而按不同顺序被带于分配系数不同而按不同顺序被带 出，分配系数小的组分先流出，分出，分配系数小的组分先流出，分 配系数大的后流出配系数大的后流出优点优点 灵敏度高、样品用量少灵敏度高、样品用量少 分离效能高，分离速度快分离效能高，分离速度快缺点缺点 受样品蒸气压的限制受样品蒸
9、气压的限制 不适于难气化和热稳定性差不适于难气化和热稳定性差 的药物的药物1. 基本概念基本概念峰高峰高峰面积峰面积峰位（保留值）峰位（保留值）用于定性用于定性峰宽峰宽 用于衡量柱效用于衡量柱效用于定量用于定量保留值保留值 可用时间或体积表示可用时间或体积表示（1）保留时间）保留时间（tR）（2）死时间）死时间（t0）（3）调整保留时间）调整保留时间（tR）（4）相对保留值）相对保留值（r）tR1 / tR2色谱区域宽度色谱区域宽度（1）标准差）标准差（） 0.607h的的W/2（2）半峰宽）半峰宽（Wh/2）（3）峰宽）峰宽（W）2. 塔板理论塔板理论基本假设基本假设 色谱柱中有无数塔板，色
10、谱柱中有无数塔板， 样品在每个塔板内的样品在每个塔板内的 气、液两相进行分配气、液两相进行分配理论塔板数理论塔板数塔板数越多，塔板高度越小，柱效越高塔板数越多，塔板高度越小，柱效越高3. 速率理论速率理论 Van Deemter方程方程塔板高度塔板高度涡流扩散涡流扩散纵向扩散纵向扩散载气速度载气速度传质阻抗传质阻抗（二）气相色谱法分类（二）气相色谱法分类填充柱色谱法填充柱色谱法（粗）（粗）毛细管柱色谱法毛细管柱色谱法（细）（细）分离机制分离机制吸附色谱吸附色谱分配色谱分配色谱气气 固色谱法固色谱法（吸附柱）（吸附柱）气气 液色谱法液色谱法（分配柱）（分配柱）（三）常用固定液与载体（三）常用固定
11、液与载体1. 固定液固定液 鲨鱼烷、鲨鱼烷、SE-30、OV-17、 聚乙二醇聚乙二醇2. 载体载体 硅藻土型载体硅藻土型载体（红色、白色）（红色、白色） 3. 毛细管色谱柱毛细管色谱柱 开管型毛细管柱开管型毛细管柱（WCOT、SCOT） 填充型毛细管柱填充型毛细管柱（四）气相色谱仪（四）气相色谱仪 气源气源 进样及气化系统进样及气化系统 色谱柱和柱温箱色谱柱和柱温箱 检测器检测器 热导检测器热导检测器 氢火焰离子化检测器氢火焰离子化检测器 电子捕获检测器电子捕获检测器ChP（2000）对气相色谱仪的一般要求对气相色谱仪的一般要求 色谱柱色谱柱 填充柱或毛细管柱（空心柱填充柱或毛细管柱（空心柱
12、) 固定液固定液 高沸点液体高沸点液体 载气载气 氮气氮气 检测器检测器 氢火焰离子化检测器氢火焰离子化检测器（FID） 检测温度高于柱温检测温度高于柱温 一般一般 250 35096：128、在气相色谱法中，与含量成、在气相色谱法中，与含量成 正比的是色谱峰的正比的是色谱峰的 A、保留体积保留体积 B、保留时间保留时间 C、相对保留值相对保留值 D、峰高峰高 E、峰面积峰面积00：75. 在色谱分离中，组分达到平衡时，在色谱分离中，组分达到平衡时，在固定相中的质量为在固定相中的质量为Ws，浓度为浓度为Cs，在在流动相中的质量为流动相中的质量为Wm，浓度为，浓度为Cm，则则此组分的容量因子为此
13、组分的容量因子为 A、Cs/Cm B、Cm/Ws C、Ws/Wm D、Wm/Ws E、WsCs/WmCm例例1、气相色谱法可测定的药物为、气相色谱法可测定的药物为 A、沸点低于沸点低于450 B、沸点低于沸点低于550 C、沸点在沸点在450以上以上 D、无机药物无机药物 E、热不稳定药物热不稳定药物例例2、气相色谱仪组成部分应有、气相色谱仪组成部分应有 A、气路系统气路系统 B、进样系统进样系统 C、分离系统分离系统 D、检测系统检测系统 E、记录系统记录系统 二、高效液相色谱法二、高效液相色谱法（HPLC法）法） 以液体为流动相的色谱法以液体为流动相的色谱法（一）（一）HPLC的速率理论的
14、速率理论 与气相色谱法的差别与气相色谱法的差别 GC法法 高温高温（ChP 50 265） 纵向扩散项大纵向扩散项大（B/u） HPLC法法 室温室温 传质阻抗项大传质阻抗项大（Cu）1. 液液-固吸附色谱法固吸附色谱法 固定相固定相 常用硅胶常用硅胶 流动相流动相 烷烃烷烃+极性调整剂极性调整剂（二）各类二）各类HPLC法法2. 液液-液分配色谱法液分配色谱法 固定相固定相 目前大多是用化学方法将目前大多是用化学方法将 固定液键合在载体（硅胶）上所形固定液键合在载体（硅胶）上所形 成，即成，即化学键合相化学键合相（1）正相色谱法）正相色谱法 流动相极性固定相极性流动相极性固定相极性 分析亲脂
15、性的极性及中等极分析亲脂性的极性及中等极 性的分子型药物性的分子型药物 极性弱的组分先流出色谱柱极性弱的组分先流出色谱柱（2）反相色谱法）反相色谱法（RP-HPLC） 流动相极性固定相极性流动相极性固定相极性 分析非极性、中等极性药物分析非极性、中等极性药物 极性强的组分先流出色谱柱极性强的组分先流出色谱柱 固定相固定相 ODS（C18） 辛烷基（辛烷基（C8） 流动相流动相 甲醇甲醇-水，乙腈水，乙腈-水水（3）反相离子对色谱法）反相离子对色谱法（PIC） 如样品在极性流动相中可解离如样品在极性流动相中可解离 为离子，若将离子对试剂加入流动为离子，若将离子对试剂加入流动 相，相， 与被分析离
16、子生成中性离子，与被分析离子生成中性离子， 即可增大样品在非极性固定相中的即可增大样品在非极性固定相中的 溶解度溶解度（4）离子抑制色谱法）离子抑制色谱法（ISC） 测定弱酸、弱碱类药物时，通测定弱酸、弱碱类药物时，通 过调整流动相过调整流动相pH值，抑制样品的解值，抑制样品的解 离，以增大样品在非极性固定相中离，以增大样品在非极性固定相中 的溶解度的溶解度 适用于弱酸（适用于弱酸（3.0pKa7.0） 弱碱（弱碱（7.0pKb8.0） （三）常用固定相（三）常用固定相1. 硅胶硅胶 用于吸附色谱用于吸附色谱2. 化学键合相化学键合相 非极性非极性 ODS（十八烷基键合相）十八烷基键合相） 极
17、性极性 氨基、氰基键合相氨基、氰基键合相3. 键合型离子交换剂键合型离子交换剂（四）高效液相色谱仪（四）高效液相色谱仪 高压输液泵高压输液泵 色谱柱色谱柱 柱管柱管+固定相固定相 进样阀进样阀 六通阀（有定量环）六通阀（有定量环） 检测器检测器 紫外吸收检测器紫外吸收检测器 荧光检测器荧光检测器 差示折光检测器差示折光检测器 电化学检测器电化学检测器中国药典规定中国药典规定正文各品种项下的正文各品种项下的HPLC条件条件不得任意改变不得任意改变 固定相种类、固定相种类、 流动相组分、检测器类型流动相组分、检测器类型可适当改变可适当改变 色谱柱内径、长度、色谱柱内径、长度、固定相牌号、载体粒度、
18、流动相流速固定相牌号、载体粒度、流动相流速和比例、柱温、进样量、灵敏度和比例、柱温、进样量、灵敏度三、系统适用性试验三、系统适用性试验 ChP 每次检测前，应对仪器进每次检测前，应对仪器进适用性试验，应达到规定要求适用性试验，应达到规定要求 理论板数理论板数（n） 分离度分离度（R） 重复性重复性（RSD） 拖尾因子拖尾因子（T）（一）理论板数（一）理论板数（n） 如测得如测得n低于规定，应改变柱长低于规定，应改变柱长 或载体性能、重填色谱柱等以求达到或载体性能、重填色谱柱等以求达到（二）分离度（二）分离度（R） 除另有规定外，除另有规定外，R1.5（三）重复性（三）重复性（RSD） 15 3
19、3RSD2.0%（四）拖尾因子（四）拖尾因子（T） 除另有规定外，除另有规定外，T应应0.95 1.05四、四、GC和和HPLC在药品检验中的应用在药品检验中的应用 1. 鉴别鉴别 在相同的色谱条件下，分别取在相同的色谱条件下，分别取 供试品溶液和对照品溶液进样，记供试品溶液和对照品溶液进样，记 录色谱图，供试品溶液主峰的保留录色谱图，供试品溶液主峰的保留 时间应与对照品溶液一致时间应与对照品溶液一致2. 杂质检查杂质检查 内标法内标法（加校正因子）（加校正因子） 外标法外标法 主成分自身对照法主成分自身对照法（加校正因子）（加校正因子） 主成分自身对照法主成分自身对照法（无校正因子）（无校正
20、因子） 面积归一化法面积归一化法（1）内标法）内标法 + 校正因子校正因子内标内标+杂质对照品杂质对照品计算校正因子计算校正因子 内标内标+样品样品计算杂质含量计算杂质含量 优点优点 准确准确内标物内标物+杂质对照品杂质对照品校正因子校正因子内标物内标物+样品样品杂质含量杂质含量（2）外标法）外标法供试品供试品供试品溶液供试品溶液 杂质对照品杂质对照品对照品溶液对照品溶液缺点缺点 不易控制进样量不易控制进样量 宜用定量环宜用定量环（3）加校正因子的主成分自身对照法）加校正因子的主成分自身对照法待测成份对照品待测成份对照品+杂质对照品杂质对照品 计算校正因子计算校正因子 供试品供试品供试品溶液供
21、试品溶液 供试品的稀释液供试品的稀释液对照品溶液对照品溶液 测量供试品溶液色谱图上各杂质测量供试品溶液色谱图上各杂质的峰面积，分别乘以相应的校正因子的峰面积，分别乘以相应的校正因子后与对照溶液主成分的峰面积比较，后与对照溶液主成分的峰面积比较，依法计算各杂质含量依法计算各杂质含量优点优点 准确度高准确度高（4）不加校正因子主成分自身对照法）不加校正因子主成分自身对照法供试品供试品供试品溶液供试品溶液 供试品的稀释液供试品的稀释液对照品溶液对照品溶液 测定供试品溶液中各杂质峰面积，测定供试品溶液中各杂质峰面积，与对照溶液主成分峰面积比较，控制与对照溶液主成分峰面积比较，控制杂质的量杂质的量缺点缺
22、点 检测波长处，各杂质和药物的检测波长处，各杂质和药物的 吸收强度可能有差异，准确度吸收强度可能有差异，准确度 差差 优点优点 不需杂质对照品，可同时控制不需杂质对照品，可同时控制 各个杂质及其总量限度各个杂质及其总量限度 （5）面积归一化法）面积归一化法 取一定量供试品溶液进样，测取一定量供试品溶液进样，测定各杂质的峰面积和色谱图上除溶定各杂质的峰面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各剂峰以外的总色谱峰面积，计算各杂质峰面积占总峰面积的百分率，杂质峰面积占总峰面积的百分率，应符合规定。应符合规定。优点优点 不需杂质对照品，简便易行不需杂质对照品，简便易行 缺点缺点 检测波长处，各杂
23、质和药物检测波长处，各杂质和药物 的吸收强度可能有差异，控制的吸收强度可能有差异，控制 杂质峰面积百分率不一定就是杂质峰面积百分率不一定就是 杂质限量，准确度差杂质限量，准确度差 3. 在含量测定中的应用在含量测定中的应用（1）外标法）外标法（2）内标法）内标法96：75、测得两色谱峰的保留时间、测得两色谱峰的保留时间 tR1=6.5min，tR2=8.3min，峰宽峰宽 W1=1.0min，W2=1.4min，则两则两 峰分离度峰分离度R为为 A、0.22 B、1.2 C、2.5 D、0.75 E、1.599：135、HPLC法与法与GC法用于药物法用于药物 复方制剂的分析时，其系统适用复方
24、制剂的分析时，其系统适用 性试验系指性试验系指 A、测定拖尾因子测定拖尾因子 B、测定回收率测定回收率 C、测定保留体积测定保留体积 D、测定分离度测定分离度 E、测定柱的理论板数测定柱的理论板数 99m:91-95相关方法为相关方法为 A、紫外分光光度法紫外分光光度法 B、红外分光光度法红外分光光度法 C、气相色谱法气相色谱法 D、高效液相色谱法高效液相色谱法 E、荧光分光光度法荧光分光光度法91、由第一电子激发态的最低能级跃迁回基态的、由第一电子激发态的最低能级跃迁回基态的 各个不同振动能级各个不同振动能级92、低能级的价电子吸收一定的能量后，跃迁到、低能级的价电子吸收一定的能量后，跃迁到
25、 较高能级较高能级93、使用氢火焰离子化检测器、使用氢火焰离子化检测器94、分子中振动和转动能级的跃迁、分子中振动和转动能级的跃迁95、可以忽略流动相中的纵向扩散项、可以忽略流动相中的纵向扩散项EACBD00：132、中国药典（、中国药典（2000年版）规定年版）规定 系统适用性试验应包括系统适用性试验应包括 A、色谱柱的理论塔板数色谱柱的理论塔板数 B、分离度分离度 C、重复性重复性 D、中间精密度中间精密度 E、拖尾拖尾因子因子00：133. 中国药典（中国药典（2000年版）正文各年版）正文各 品种项下规定的品种项下规定的HPLC条件中，条件中， 不得任意改变的是不得任意改变的是 A.
26、固定相种类固定相种类 B. 固定相牌号固定相牌号 C. 流动相组成流动相组成 D. 混合流动相各组分的比例混合流动相各组分的比例 E. 检测器类型检测器类型01：80. 用用HPLC测得两组分的测得两组分的保留时间保留时间 分别为分别为8.0和和10.0min，峰宽分别为峰宽分别为2.8和和 3.2mm，记录纸速为记录纸速为5.0mm/min，则两则两 峰的分离度为峰的分离度为 A. 3.4 B. 3.3 C. 4.0 D. 0.7 E. 6.801：121-125以下情况所适用的方法以下情况所适用的方法 A. 高效液相色谱法高效液相色谱法 B. 气相色谱法气相色谱法 C. 两者均可两者均可
27、D. 两者均不可两者均不可121. 可用于测定药物的含量可用于测定药物的含量122. 以气体为流动相以气体为流动相123. 以液体为流动相以液体为流动相124. 使用氢火焰离子化检测器使用氢火焰离子化检测器125. 不适用于热不稳定化合物的分析不适用于热不稳定化合物的分析CBABB01：140. 色谱系统适用性试验的项目有色谱系统适用性试验的项目有 A、拖尾因子拖尾因子 B、理论板数理论板数 C、检测限检测限 D、定量限定量限 E、分离度分离度例例1、色谱法定量测定的方法有、色谱法定量测定的方法有 A、面积归一化法面积归一化法 B、主成分自身对照法主成分自身对照法 C、内标法内标法 D、外标法
28、外标法 E、反相法反相法例例2、色谱系统适用性试验一般包括、色谱系统适用性试验一般包括 A、测试色谱柱理论塔板数（测试色谱柱理论塔板数（n） B、测量峰高测量峰高 C、测试分离度（测试分离度（R） D、测试拖尾因子（测试拖尾因子（T） E、测定保留体积测定保留体积例例3、色谱系统适用性试验要求分离度、色谱系统适用性试验要求分离度 A、应大于应大于1.5 B、应小于应小于1.5 C、应大于应大于2.5 D、应小于应小于2.5 E、应大于应大于3.0例例4、中国药典（、中国药典（2000年版）规定，除年版）规定，除 另有规定外，色谱系统适用性试另有规定外，色谱系统适用性试 验中的拖尾因子（验中的拖
29、尾因子（T）应在应在 A、0.506.5 B、6.57.5 C、7.508.50 D、8.509.50 E、0.951.05例例5、色谱法鉴别被分离物各组分时，、色谱法鉴别被分离物各组分时， 应该用应该用 A、峰高峰高 B、峰宽峰宽 C、保留值保留值 D、分配系数分配系数 E、塔板数塔板数例例6、衡量色谱系统好坏的参数是、衡量色谱系统好坏的参数是 A、分散度分散度 B、Rf 值值 C、分离度分离度 D、保留时间保留时间 E、斑点面积斑点面积例例7、衡量色谱峰是否正常的参数应是、衡量色谱峰是否正常的参数应是 A、校正因子校正因子 B、峰宽峰宽 C、峰高峰高 D、拖尾因子拖尾因子 E、拖尾峰拖尾峰
30、例例8、RP-HPLC固定相与流动相极性固定相与流动相极性 关系是关系是 A、两者极性相同两者极性相同 B、前者极性大于后者前者极性大于后者 C、后者极性大于前者后者极性大于前者 D、两者是同一液体两者是同一液体 E、两者均为惰性两者均为惰性例例9、色谱峰高（或面积）可用于、色谱峰高（或面积）可用于 A、鉴别鉴别 B、计算保留值计算保留值 C、含量测定含量测定 D、测试被分离物的疗效测试被分离物的疗效 E、判定被分离物组成判定被分离物组成例例10. HPLC检查药物中杂质的方法有检查药物中杂质的方法有A面积归一化法面积归一化法B加校正因子的主成分自身对照法加校正因子的主成分自身对照法C不加校正
31、因子的主成分自身对照法不加校正因子的主成分自身对照法D外标法外标法E内标法加校正因子测定法内标法加校正因子测定法例例1115 A、Vis B、IR C、UV D、pH E、HPLC 14、红外分光光度法红外分光光度法 15、可见分光光度法、可见分光光度法 13、高效液相色谱法、高效液相色谱法 14、紫外分光光度法、紫外分光光度法 15、溶液酸碱度表示法、溶液酸碱度表示法BAECD第三节第三节 电泳法电泳法 一、基本原理和方法一、基本原理和方法 在电场的作用下，带电颗粒向在电场的作用下，带电颗粒向 其所带电荷相反的电极方向移动，其所带电荷相反的电极方向移动， 根据各组分淌度的不同而得到分离根据各
32、组分淌度的不同而得到分离 的方法的方法电渗的产生电渗的产生 在电场的作用下，带正电的在电场的作用下，带正电的 缓冲液整体向负极移动缓冲液整体向负极移动(-)(+)+ (-)(+)+(-)(+) +- -淌度淌度（） 单位电场强度下的电泳速度单位电场强度下的电泳速度电泳速度电泳速度（） 带电颗粒在电场中的迁移带电颗粒在电场中的迁移速度速度E = 电场强度电场强度各类电泳法各类电泳法纸电泳法纸电泳法醋酸纤维素电泳法醋酸纤维素电泳法琼脂糖凝胶电泳法琼脂糖凝胶电泳法聚丙烯酰胺凝胶电泳法聚丙烯酰胺凝胶电泳法SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法聚丙烯酰胺凝胶电泳法二、毛细管电泳法二、毛细管电泳法 以弹性石英毛细管为
33、分离通道，以弹性石英毛细管为分离通道，高压直流电场为驱动力，依据样品高压直流电场为驱动力，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的中各组分之间淌度和分配行为上的差异实现分离的分析方法差异实现分离的分析方法毛细管电泳装置示意图毛细管电泳装置示意图高压电源高压电源毛细管恒温系统毛细管恒温系统检测器检测器数数据据处处理理缓冲液缓冲液/样品样品缓冲液缓冲液 (+) (-)毛细管电泳分离模式毛细管电泳分离模式 毛细管区带电泳毛细管区带电泳（CZE） 毛细管凝胶电泳毛细管凝胶电泳（CGE） 胶速电动毛细管色谱胶速电动毛细管色谱（MEKC） 亲和毛细管电泳亲和毛细管电泳（ACE） 毛细管电色谱毛细管电色谱（CEC） 毛细管等电聚焦电泳毛细管等电聚焦电泳（CIEF） 毛细管等速电泳毛细管等速电泳（CITP）96：72、电泳法是、电泳法是 A. 在电场下测量电流的一种分析方法在电场下测量电流的一种分析方法 B. 在电场下测量电导的一种分析方法在电场下测量电导的一种分析方法 C. 在电场下测量电量的一种分析方法在电场下测量电量的一种分析方法 D. 在电场下分离供试品中不带电荷组在电场下分离供试品中不带电荷组 分的一种方法分的一种方法 E. 在电场下分离供试品中带电荷组分在电场下分离供试品中带电荷组分 的一种方法的一种方法
