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1、欢迎您阅读并下载本文档，本文档来源于互联网整理，如有侵权请联系删除!我们将竭诚为您提供优质的文档！ 高三生物“一轮”复习教学案 【课 题】DNA 的粗提取与鉴定 【考点要求】 1. 掌握 DNA 粗提取与鉴定的原理 2. 能够掌握提取 DNA 的实验操作中的主要步骤 3. 熟练进行实验操作，掌握实验方法 4. 根据实验目的和要求进行实验设计 【基础梳理】1提取 DNA 的方法 提取生物大分子的基本思路是 。对于 DNA 的粗提取而言，就是要利用 、 等在物理和化学性质方面的差异，提取 DNA，去除其他成分。 1 ） DNA 的溶解性 DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 中溶解度不同， 利用
2、这一特点，选择适当的盐浓度就能使 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反， 以达到分离目的。 在什么浓度下，DNA 的溶解度最小？DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度是如何变化的？ 如何通过控制 NaCl 溶液的浓度使 DNA 在盐溶液中溶解或析出？ 此外，DNA 不溶于 溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原 理，可以将 DNA 与蛋白质进一步的分离。 2 ） DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解 ，但是对 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 6080oC 的高温，而 DNA 在 以上才会变性。洗涤剂能够瓦解 ，但对 DNA 没有影响。 3 ） DNA 的鉴定 在 条件下，DN
3、A 遇 会被染成 色， 因此二苯胺可以作为鉴定 DNA 的试剂。 2. 实验设计 1 ） 实验材料的选取 凡是含有 的生物材料都可以考虑， 但是使用的生物组织，成功的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的实验材料： 鱼卵、猪肝、菜花（花椰菜）、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、 菠菜、在液体培养基的大肠杆菌 思考： 哺乳动物的红细胞的特点？ 2） 破碎细胞，获取含 DNA 的滤液 动物细胞的破碎比较容易，以鸡血细胞为例，在鸡血细胞液中加入一定量的 ，同时用 搅拌，过滤后收集滤液即可。如果实验材料是植物细胞，需要先用 溶解细胞膜。例如，提取洋葱的 DNA 时，在切碎的洋葱中加入
4、一定的 和 ，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。 思考： 1 欢迎您阅读并下载本文档，本文档来源于互联网整理，如有侵权请联系删除!我们将竭诚为您提供优质的文档！ 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？ 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响? 此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？ 3） 去除滤液中的杂质思考： 为什么反复地溶解与析出 DNA，能够去除杂质？ 4） DNA 的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积 、冷却的 ， 静置 ，溶液中会出现 ，这就是粗提取的 DNA。用玻璃棒搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸取上面的水分。 取两支 20ml
5、 的试管，各加入物质的量浓度为 的 NaCl 溶液 5ml，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入 4ml 的 。混合均匀后，将试管置于 中加热 5min，待试管冷却后，比较两支试管溶液颜色的变化，看看溶解有 DNA 的溶液是否变 。 3. 操作提示 以血液为实验材料时，每 100ml 血液中需要加入 3g ，防止 。 加入洗涤剂后，动作要 、 ，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤地操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要 ，以免 ，导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀。 二苯胺试剂要 ，否则会影响鉴定的效果。 【典例分析】 本实验中有三次过滤： 过滤
6、用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 过滤含粘稠物的 0.14mol/LNaCl 溶液 过滤溶解有 DNA 的 2mol/LNaCl 溶液以上三次过滤分别为了获得（ ） A 含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含 DNA 的滤液 B 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、含 DNA 的滤液C 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、纱布上的 DNA D 含较纯的 DNA 滤液、纱布上的粘稠物、含 DNA 的滤液 2 欢迎您阅读并下载本文档，本文档来源于互联网整理，如有侵权请联系删除!我们将竭诚为您提供优质的文档！ DNA 粗提取和鉴定反馈练习 1. 在研究 DNA 的基因样本前，采集来的血样需要蛋白水解酶
7、处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。用蛋白水解酶处理血样的目的是（ ） A.除去血浆中的蛋白质 B.除去染色体上的蛋白质C.除去血细胞表面的蛋白质 D.除去血细胞中的所有的蛋白质，使 DNA 释放，便于进一步提纯 2. 与析出 DNA 粘稠物有关的叙述，不正确的是（ ） A. 操作时缓缓滴加蒸馏水，降低 DNA 的溶解度 B. 在操作 A 时，用玻璃棒轻缓搅拌，以保证 DNA 分子完整 C. 加蒸馏水可同时降低 DNA 和蛋白质的溶解度，两者均可析出 D. 当丝状粘稠物不再增加时，此时 NaCl 的浓度相当于 0.14mol/L 3洗涤剂能够瓦解（ ） ，但对 DNA 没有影响。 A.细胞壁 B.
8、细胞膜 C.细胞核 D.细胞质 4. 在沸水浴的条件下，DNA 遇（ ）会被染成蓝色。 A.斐林试剂 B.苏丹染液 C.双缩脲试剂 D.二苯胺 5. 在 DNA 提取过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是（ ） A.不易破碎 B.减少提取过程中 DNA 的损失 C.增加 DNA 的含量 D.容易洗刷6下列操作中，对 DNA 的提取量影响最小的是（ ） A. 使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，放出 DNA 等核物质 B. 搅拌时，要使用玻璃棒沿一个方向轻缓搅拌 C. 在“析出 DNA 粘稠物”时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增加 D. 在用酒精沉淀 DNA 时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放
9、入冰箱中冷却 E 在 DNA 的溶解和再溶解时，要充分搅拌 7DNA 的粗提取中，将与滤液体积相等的、冷却的（ ） ，静置 23min，溶液中会出现白色丝状物。 A.09%的 NaCl B.0.14mol/L 的 NaCl 溶液 C.质量分数 15%的 HCl D.体积分数为 95%的酒精溶液8.以血液为实验材料时，需要向血液中加入（ ） ，防止血液凝固。 A.醋酸钠 B.龙胆紫 C.柠檬酸钠 D.醋酸洋红 9. 在向溶解 DNA 的 NaCl 溶液中，不断加入蒸馏水的目的是（ ） A. 加快溶解 DNA 的速度 B. 加快溶解杂质的速度 C. 减少 DNA 的溶解度，加快 DNA 析出 D.
10、 减小杂质的溶解度，加快杂质的析出 10. 去除滤液中的杂质时，直接在滤液中加入嫩肉粉，利用嫩肉粉中的（ ）分解蛋白质。 A.胃蛋白酶 B.胰蛋白酶 C.木瓜蛋白酶 D.肠肽酶 3 欢迎您阅读并下载本文档，本文档来源于互联网整理，如有侵权请联系删除!我们将竭诚为您提供优质的文档！ 二、非选择题 1. 提取鸡血中 DNA 时，要除去血液中的上清液，这是因为什么？ 2. 填写本实验完成下列实验操作时所用试剂。 提取鸡血细胞中核物质 溶解核内 DNA： 析出 2mol/LNaCl 溶液中的 DNA DNA 粘稠物的再溶解 提取杂质较少的 DNA 白色乳状丝状物 DNA 的鉴定 3. 关于 DNA 粗
11、提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题： 鸡血细胞中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中 细胞树木较多，可以提供丰富的 。 实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是 。 生活在牧区的人们，采集牛、 羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后， 结果是 ，这是因为这些动物和人一样， 成熟的红细胞中 ， 但若改用动物肝脏做实验材料， 实验能顺利进行。 这是因为 。 若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 程序，使组织细胞更易分离。 4、以花椰菜为实验材料进行 DNA 的粗提取实验：
12、（1） 准备材料：将新鲜的花椰菜和体积分数为 95的酒精溶液放入冰箱冷却 24h。 （2） 研磨细胞，获取含 DNA 的滤液：将花椰菜中加入一定的洗涤剂和食盐，进行成分的搅拌和研磨，过滤后收集滤液 1 加入洗涤剂的作用是什么？ 2 加入食盐的作用是什么？ 3 这一步是实验成功与否的关键，如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？ 4 此步骤获得的滤液中可能会有哪些细胞成分？ （3） 去除溶液中的杂质，也就是 DNA 的纯化 1 DNA 的纯化利用了 DNA 的哪些特性？ 2 根据实际情况，写出你去除杂质的设计方案并写出方案依据的原理？ （4） DNA 的析出与鉴定：DNA 鉴定的方法有哪些？ 4
