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1、 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialACEA BIO开拓进取开拓进取 继往开来继往开来淋巴细胞亚群在儿科中的应用淋巴细胞亚群在儿科中的应用 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群在临床中的应用淋巴细胞亚群在临床中的应用始于上世纪80年代,AIDS患者检测CD4淋巴细胞亚群,用于AIDS的诊断和治疗。 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群都包括哪些细胞?三类细胞:T、B、NK细胞,简称“TBNK”,T细胞可以进一步再细分为CD4和
2、CD8细胞类别作用(1)T细胞(CD3细胞)CD4细胞特异性免疫应答的“司令官”,指挥、调度CD8细胞特异性免疫应答的“杀手”,消灭感染细胞(2)B细胞(CD19细胞)体液免疫的主要力量,产生“抗体”(3)NK细胞(CD16/CD56细胞)非特异性免疫应答的“杀手”,抗感染、抗肿瘤 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialACEA BIO免疫功能降低的后果是什么?AIDS4 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床意义?细胞临床意义T细胞-CD4减少,见于病毒感染、恶性肿瘤、原发性免疫
3、缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂-CD8增多,见于传单急性期、SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等-CD4/CD8降低,见于传单、骨髓移植恢复期、病毒感染等;增高见于RA、I型糖尿病、器官移植排斥反应等B细胞-B增多,见于急淋、慢淋、MM、SLE、烧伤等;降低见于原发性免疫缺陷病等NK细胞-NK增多,见于宿主抗移植物反应;降低见于血液肿瘤、实体瘤、免疫缺陷病、艾滋病和某些病毒感染等 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科原发性免疫缺陷病由于免疫系统先天性发育障碍所致的一组综合征。由于免疫功能缺陷,患者临床
4、常表现为抗感染功能低下、反复发生严重的感染、过敏症、恶性肿瘤等。每年新生儿约为2500万,发病率约为0.01%,高于白血病的0.003%。 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科原发性免疫缺陷病的诊断T细胞和B细胞检测是原发性免疫缺陷病的实验室诊断指标型别型别筛查项目筛查项目B细胞免疫缺陷免疫球蛋白定量(IgG/A/M)同凝集素、嗜异凝集素特异性抗体反应B细胞亚群计数(CD19)B细胞Ig亚型T细胞免疫缺陷淋巴细胞计数迟发型超敏试验胸部胸腺影X线片T细胞亚群计数(CD4、CD8)细胞因子测定 2016 ACEA BIO
5、 Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例男,9个月,因反复出现皮肤出血点3个月、右腋下肿物伴面色苍白1个半月入院。之前,当地医院考虑化脓性淋巴结炎,予抗感染治疗未见明显好转。后因肿大的淋巴结有波动感,行外科切开引流,见多量黄色干酪样物质。查血白细胞73.8109/L,淋巴细胞36%,中性粒细胞51%,血红蛋白101g/L,血小板40109/L,疑似白血病转院。患儿生后6个月内无反复感染史,但卡介苗接种处溃疡,经久不愈查体:体温38.9,意识清,轻度贫血貌,全身皮肤粘膜散在陈旧性出血点,无黄染;右腋下有两处切开引流口未愈合;双颌下、颈部及腹股沟
6、区可扪及数个黄豆大小淋巴结;心肺检查未见异常;肝脾肿大 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例实验室检查:骨髓穿刺涂片检查示增生极度活跃,原始粒细胞+早幼粒细胞4%,晚幼粒细胞+杆状细胞17.5%,红细胞系增生减低;X线胸片未见异常;结核菌素(PPD)试验(-),抗结核抗体(-);肝功能正常;巨细胞病毒(CMV)-IgM(+);IgG25.5g/L、IgA0.55g/L、IgM4.32g/L;CD36.38%,CD42.55%,CD83.45%,CD4/CD8比值0.739;白细胞(1050)109/L,淋巴细胞5
7、0%60%,中性粒细胞30%40%,血红蛋白7090g/L,血小板(4050)109/L。诊断:原发性免疫缺陷病+结核感染治疗:经抗结核及胸腺肽、丙种球蛋白、转移因子、输血等治疗,患儿体温恢复正常,浅表淋巴结缩小,肝脾明显回缩,病情好转出院 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例小结-淋巴细胞亚群检测是B细胞、T细胞和T/B细胞联合免疫缺陷病诊断和鉴别诊断的重要依据 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科反复呼吸道感染反复呼吸道感染是小儿常
8、见病,发病率达20%左右,以26岁最常见。多为先天性因素、机体免疫功能低下等多种因素综合作用的结果-反复呼吸道患儿常呈现CD4+细胞百分比以及CD4/CD8比值降低,发病机制可能与免疫功能降低相关。-如果患儿淋巴细胞亚群降低,说明存在免疫功能缺陷,在治疗感染的同时,还应考虑是否使用免疫调节剂 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例患儿,7个月,因“反复发热伴咳嗽”入院。之前曾在当地多次入院,但治疗后反复发作查体:神志清;皮肤未见异常;咽部充血,双肺呼吸音粗,可闻痰鸣音;心脏、肝脾、四肢无异常辅助检查:白细胞升高17
9、.0109/L,红细胞4.11012/L,血小板517109/L,淋巴细胞百分比40.7,中性粒细胞百分比48.7%,C反应蛋白8.0mgL;IgG降低2.2gL,IgA降低0.1gL;CD4细胞百分比下降20.1%,CD4/CD8降低0.5;胸部X线未见异常 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例诊断:支气管炎免疫功能低下治疗:抗感染治疗(阿莫西林),免疫调节治疗(匹多莫德)。治疗后一年未再复发 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例
10、小结-很多儿科疾病的发病,都与免疫功能降低相关。针对这些疾病的治疗,除了抗感染之外,还要考虑免疫调节治疗-淋巴细胞亚群检测,可以帮助临床及时发现免疫功能低下的患者,指导临床尽早采取免疫调节治疗 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科传染性单核细胞增多症传染性单核细胞增多症是一种单核-巨噬细胞系统急性增生性传染病。本病多见于学龄前与学龄儿童,主要由飞沫与唾液经呼吸道传播,其次经密切接触传播。6岁以下患儿表现为轻症或隐性感染,病后可获得持久性免疫。-血象中异型淋巴细胞增多,常大于10%,且多为T淋巴细胞,并以CD8+细胞为
11、主-淋巴细胞亚群检测,常表现为CD8细胞明显升高,可以辅助传单的诊断,免疫功能降低或升高也会影响患者的预后 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例9岁儿童,因“间断发热伴咽痛”入院。查体:体温39.0,伴鼻塞、声音嘶哑,偶有头痛,无咳嗽、流涕等不适;全身皮肤粘膜未见黄染皮疹及出血点。颈部可触及淋巴结,略有压痛,可移动。口唇红润,咽充血,双扁II度肿大,双侧扁桃体可见较多白色分泌物附着。辅助检查:白细胞16.0x109/L,中性粒细胞18.5%,淋巴细胞72.7%,血红蛋白113g/L,血小板165x109/L,异常
12、淋巴细胞21%,CD8细胞增高70.0%,CD4/CD8比值倒置;EB病毒抗体阳性。 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例诊断:传染性单核细胞增多症治疗:主要是对症治疗,必要时采取抗感染、抗病毒治疗预后:免疫功能低下者易发淋巴瘤,应长期跟踪、积极进行免疫调节治疗 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例小结-淋巴细胞亚群检测可以作为传单等感染性疾病的辅助诊断依据-淋巴细胞亚群检测可以作为监控传单病人免疫功能的工具,对于免疫功能低下的患者
13、,临床应进行免疫调节干预,以预防淋巴瘤的发生。 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科血液病的治疗监测白血病、淋巴瘤等血液肿瘤,常采用化疗或骨髓干细胞移植进行治疗。由于治疗会对人体免疫功能造成损害,因此治疗后需要严密监测免疫功能恢复和重建过程。淋巴细胞亚群检测是主要的监控工具,可用于:-监控细胞重建过程正常与否-是否发生感染和移植物抗宿主病:发生排斥反应时CD4/CD8比值升高-预后判定:CD4细胞恢复越早,预后越好 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialACEA BIO淋
14、巴细胞亚群检测的临床应用儿科( British Journal of Haematology. 2010, 152: 201210.)肿瘤的治疗监测肿瘤的治疗监测1.血液肿瘤的患儿经化疗后,CD4+细胞在6个月左右恢复正常,CD8+细胞在3个月恢复正常2.CD4+T细胞和CD8+T细胞是监测化疗后免疫功能重建的重要指标。特别是CD4+细胞的恢复常被看做是免疫功能重建成功的标志。 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialLeukemia (2000) 14, 931934淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例患儿,男,20个月,急性白血病后,接受脐带血移植
15、。移植后发现NK、B细胞较早恢复,但CD4CD8比值恢复较慢,14个月仍然处于上升期,说明免疫功能恢复较慢 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科血液病的治疗监测再生障碍性贫血(AA)的发病机制包括造血干细胞缺陷、造血微环境/造血因子异常、免疫功能异常以及遗传学因素等。按照CD4/CD8比值的变化可以将AA患者分为:比值正常型:发病可能与造血干细胞缺陷相关,采用干细胞移植效果可能更好比值异常型:发病可能与免疫功能异常相关,采用免疫抑制治疗较好 2016 ACEA BIO Proprietary and Confiden
16、tialACEA BIOTBNK检测的临床应用儿科病例患儿,男,12岁。因皮肤瘀斑和瘀点多日,伴发热、咽痛入院。查体:体温39度,神清,贫血貌,全身皮肤瘀斑、瘀点,咽部充血,肝脾未触及辅助检查:WBC1.1109L,中性粒5.1%,淋巴细胞91.4%;RBC2.41012/L,Hb80g/L,PLT5109L,网织红细胞0.001;尿常规正常;肝功正常;铁蛋白增高,维生素B12、叶酸正常;CD4细胞31.7%,CD8细胞55.4%,CD4/CD80.57,CD55/CD59正常;骨髓象显示增生极度低下,粒系、红系、巨核系细胞增生明显减低 2016 ACEA BIO Proprietary an
17、d ConfidentialACEA BIOTBNK检测的临床应用儿科病例细胞亚群治疗前治疗1年后CD4细胞31.7%44.3%CD8细胞55.4%40.1%CD4/CD80.571.10诊断:重症再生障碍性贫血治疗:纠正贫血、出血、抗感染,免疫抑制疗法(ATG+CsA)。治疗一年后,贫血、出血症状消失,Hb、WBC、PLT恢复正常,免疫功能异常(CD4/CD8下降)被纠正,随访一年后未复发 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例小结-淋巴细胞亚群检测是监控肿瘤患者免疫功能重建以及预后判定的重要工具。对于放化疗以及
18、骨髓干细胞移植后免疫功能持续低下的患者,临床应进行提升免疫功能的治疗-淋巴细胞亚群检测可以为临床选择合适的AA治疗方案提供依据,并可用于监测治疗效果 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科重症感染的诊断和治疗对于一些临床重症感染患者,几乎都会存在严重的免疫功能抑制情况。淋巴细胞亚群检测可以用于检测患者免疫功能,协助临床-及时发现危重情况-监测治疗效果 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialACEA BIOTBNK检测的临床应用儿科病例患儿,男,5岁。发热、咳嗽2月余,伴肝、
19、脾、颈淋巴结肿大查体:体温39度,神清,重度贫血貌,头面部有皮损,部分溃疡结痂,颈下可触及大小淋巴结,呼吸促,双侧呼吸音增粗辅助检查:WBC为11.4109L,淋巴细胞分类0.21;CD3细胞21%、CD4细胞9%(123个L),CD8细胞11%;皮损组织培养发现隐球菌,脑脊液、尿、痰涂片、淋巴结节活检发现隐球菌;HIV抗体(-)(中华儿科杂志.2005,43:60-61) 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialACEA BIOTBNK检测的临床应用儿科病例(中华儿科杂志.2005,43:60-61)细胞亚群治疗前治疗3月后CD3细胞21.0%(2
20、87个L)68.0%CD4细胞9.0%(123个L)40.0%CD8细胞11.0(150个L)25.0%诊断:全身播散性隐球菌病,特发性CD4+T淋巴细胞减少症治疗:抗真菌治疗,免疫调节治疗(胸腺肽) 2016 ACEA BIO Proprietary and Confidential淋巴细胞亚群检测的临床应用儿科病例小结-淋巴细胞亚群检测可以帮助临床及时发现特发性CD4+T淋巴细胞减少症等免疫功能低下等患者,指导临床及早采取合理的治疗措施,为预防重症感染患者的疾病恶化甚至死亡赢得宝贵时间 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialACEA BIOTB
21、NK检测的临床应用儿科激素治疗的监测激素治疗的监测淋巴细胞亚群可以作为观察NS激素治疗效果的参考指标1.未经治疗的激素敏感型NS,发生复发者CD3、CD4细胞计数与健康者相似,B细胞计数略降低;病情缓解者CD3、CD4较健康者低,B细胞计数低于复发者。2.经治疗的激素敏感型NS,发生复发者CD3、CD4细胞计数略高于病情缓解者。3.与治疗前相比,NS治疗后CD3、CD4细胞计数降低,B细胞计数升高4.与复发者相比,病情缓解者CD3、CD4细胞计数降低,B细胞计数升高(AmJNephrol2005;25:132137.) 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialACEA BIOTBNK检测的临床应用儿科激素治疗的监测激素治疗的监测(AmericanJournalofKidneyDiseases,2002,39:958-965.) 2016 ACEA BIO Proprietary and ConfidentialACEA BIO小结淋巴细胞亚群在儿科疾病中的应用1.疾病诊断:免疫缺陷病2.治疗监控:免疫缺陷病、感染、血液病3.预后判定:骨髓干细胞移植、病毒感染4.易感人群免疫功能评价:复发性疾病、危重症、慢性病(中华儿科杂志.2005,43:60-61)