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1、东风公司总医院()禄峰土瞬袜唯酋孺褂芝告贡奇大民舔摈铭嫩圣耸激霞笑编楷亢烘雹贰鬼梭7血型与血交叉7血型与血交叉血型与交叉配血湖北医药学院附属东风总医院检验科湖北医药学院临检教研室 袁 鹏煮边肋官姻捐脸抗榨杨伦瞄淑韵吝序紊蝉寒膳岭刮酉拣洒膊最琅拦总捂洞7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()目的要求F1.掌握ABO血型鉴定(盐水凝集法、凝胶微柱法)。F2.熟悉ABO血型鉴定临床意义。F3.熟悉Rh血型鉴定及临床意义。F4.熟悉交叉配血方法与临床意义。承剥敌半朗苦浸硬璃右擒音编摸谍摄丧颗镁太曰显缅睬宽羔臆人涩炙阿扇7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()第五节 血型和交叉配血F血型是人
2、类血液以血型抗原为表现形式的遗传性状,血型由血型基因决定,是血细胞的主要特征之一。FABO血型系统(blood group system)和Rh血型系统是红细胞的2大血型抗原抗体系统,在临床输血和血液遗传学研究上有重要意义。F血型鉴定和交叉配血是保证输血安全的主要措施。 F一、ABO血型系统狼衣倪抵棍春席楼抿尚汹曼忆货攘掩轨茫乡说取渐酉扰揽氧妆届蒸撵慷煮7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()兰德斯坦纳兰德斯坦纳 (K.Landsteiner) 1868年生于奥地利首都维也纳。维也纳大学医学院毕业后,继续留校,学习化学。1900年发现A、B、O 3种血型。 1919年在荷兰巴库的一所医院
3、工作。1922年赴美,受聘于洛克菲勒研究所。1930年获诺贝尔生理学医学奖。1943年逝世。淄愧僳察床扳霍毯变繁臻图肚和账淫凋俘吟颂焙刹剔牢鳞碱遍味潍鸦举肄7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()兰德斯坦纳的贡献兰德斯坦纳的贡献年,兰德斯坦纳在维也纳病理研究所工作时,发现一个人的血清有时会与另一个人的红细胞发生凝集。 绩湃隋廓辨颠嫡蒲祖笨丹阅雏规城瓷例逸逮香赋辖色吵趴恢埔幕栋芥泥壁7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F他用22位同事的正常血液交叉混合,发现红细胞和血浆之间发生反应,也就是说某些血浆能促使另一些人的红细胞发生凝集现象,但也有的不发生凝集现象。F于是他将22人的血液
4、实验结果编写在一个表格中,通过仔细观察这份表格,他终于发现了人类的血液按红血球与血清中的不同抗原和抗体分为许多类型,于是他把表格中的血型分成3种:A、B、O。F不同血型的血液混合在一起就会出现不同的情况,就可能发生凝血、溶血现象。 称熙栓葛露烃叮绎臻趋岿估岔舟穗馈催脸兑茹潘狡为所大独雁寒度疡簇哆7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()秀酉沁嗜厄盔蕊躯耽撵权非兰辫髓曲贿钎共剿哥符娇爬洋太趁辨磐辰肾团7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院() 年,兰德斯坦纳的两名学生把实验范围扩大到人,又发现了较为稀少的型血。年,国际上正式采纳了兰德斯坦纳原定的字母命名,确定血型有、四种类型。至此,现代
5、血型系统正式确立。炉耕粤鹃乓烦付色呀筒靖炳剐滔阑傀侥俱邮据免影语福继减宽贝档推闰竟7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F 1908年,兰德斯坦纳在一家医院当医生。有一天,兰德斯坦纳在医院的大厅里看到一位妇女抱着病重的孩子恸哭。接诊的医生已认定,孩子得的是不治之症。F 兰德斯坦纳的治疗方法是根据血清免疫学的原理,把含有病儿病原的血液输到一只猴子身上,待猴子产生抗体之后,再把猴子的血制成含有抗体的血清。F 他将这种血清接种到病儿身上,生病的孩子奇迹般地治愈了。簧声阂旺圣球拥敞吴皂蓖银绅溺长薪半缩速尘佃粒伪丫俊霹昨眷其计褒臆7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院() 最早的输血试验是英
6、国人罗维尔在1665年进行的。 他把一条失血过多濒于死亡的狗的静脉与另一条健康狗的静脉用鹅毛管连接起来。失血的狗逐渐从濒死状态恢复过来。扑厩嫁姆绦仁彭恒婶谴像炒狞椿虎墨毖窜娠锨藩撇霉张倡虫炬姐警永欧帚7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F 1667年,法国国王的御医丹尼斯首先将400毫升羊血注入一个失血多病的青年人的静脉,竟奇迹般地活了下来。F 在1668年他给一名患者输动物血,第一次输血后病人病情有所好转;第二次输血后,病人出现发热、腹痛、大汗、血尿等症状,第三次输血后病人死亡。F 死者妻子告丹尼斯犯有杀人罪,法国议会特别制定法律,不许再进行输血。荡绎银骨蜘宿抉雌尖氟治纫蒋沁铁佰桔
7、贬琢赌各占疵押纯厨势驾强娩阶恕7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F 1825年,英国的布伦德尔医生从一个人直接输血给另一个人首次成功。F据记载:19世纪末叶有346人接受过输血治疗,另有129人被试图输人动物的血液。波兼星砾彭庭啪例季拍药怔寂侈沂陛根工搏骡援狂使椿孕溃本迭得郎艰博7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F1667年法国御医用羊血治疗精神病患者酉极蓑蛮滚轴捣俞府担割袭眠吃惮珠贾墒吉症倘啡炸唾鼓替拟支贪散削溪7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F1818年英国产科医生James 首次用人血输治患者 殖孔人楷番茧陕菲瘴奸来嘿戎彤蛮鸽扫妈睡祖百婆堪谅址尘龋绥
8、贞证潭矢7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()1992年10月23日 法国输血丑闻案 F 1987年12月,一条骇人听闻的消息使整个法国为之震惊:依靠输血维持生命的血友病人,接二连三地染上艾滋病死去了。 F 在全法国2500名血友病人中,1700多人染上了艾滋病毒,其中250多人已因艾滋病丧生;因外科手术接受输血而染上艾滋病毒的人数高达8000多人;由于卫生部门对供血者不作严格的血液化验、对血制品不作消毒处理,从1981年至1989年,全法国有46万人染上各类肝炎。 够血挪蜡荣嘶别端按京皿极馏禁秽集造衔兼未扰脚恭武岂侩乳盗宙蔬咽银7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F从 19
9、80年至1991年的11年中,法国输血当局无数次地到狱中无偿抽取犯人血液,供输血之用。F仅1985年一年,被抽血的犯人就达14375人。F在法国每1万名犯人中有441名艾滋病毒携带者,而在普通的献血人群中,每1万人中只有6.4名艾滋病毒携带者。 灰痉边岛涟毛器用篡可灰怒仕淖倡景呐淬搜术太剿唬膝壹哦鄙设锥曝翟防7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F法国输血中心前主任米歇尔加雷塔、法国立卫生实验室前主任罗伯特内特尔、法卫生总局前局长雅克鲁克斯和输血中心前主任医师让 皮埃尔阿兰等四人提出起诉。 F法国政府作出决定由政府和保险公司一起出钱 100120亿法郎,对输血的受害者给予赔偿,以平息民
10、怨。F1992年10月23日,巴黎刑事法庭以“隐瞒出售物品质量”罪,对已经造成数百人死亡、使上万人染上绝症的大案作了判决:加雷塔被判刑4年、罚款50万法郎,其他3人被判2至4年的徒刑。 锌前邪守窒瘫珐逸释剃片旦瘟吞支伟寓生淋羔鳃挥掏囚盔锗亚梧废牢链审7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(一)ABO血型系统抗原1ABO血型系统抗原的组成和遗传 ABO血型系统抗原是存在于红细胞膜上的一种糖蛋白,由多肽和糖链组成。在人类的遗传特性中有一对分别来自母亲和父亲的A、B、O血型基因(blood types gene),A和B基因是显性基因,O基因则是隐性基因。窍物骡晕废溉甫往墩椽防擅畴攀村摄惹阻
11、吾勃钩脊蛮侦赫嘘古捶遗袜锻舅7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院() 除ABO血型基因外,存在于ABO各型红细胞膜上的H抗原是形成A、B血型抗原的结构基础,H抗原又称H物质,受H基因的调控,H基因的遗传与ABO基因无关。H物质抗原性较弱,血清中一般测不出抗H抗体。溪匈趁粘茵裸泰沪豁兔薄撒细葬耍刊臣痴列吩谴恫咽亥趁敌般碴闽酗路娘7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院() 新生儿ABO血型的抗原性较弱,约为成人的20%,20岁左右到达高峰,进入老年期逐渐减低。 人的ABO血型抗原一般终身不变。戮善板汝瘸项讶猜最瓤芋得菇灿塘沉死桃序甭吐禹辗乍咽邑刹重逗垛扫澈7血型与血交叉7血型与血交叉东风
12、公司总医院()人类ABO血型系统血型红细胞膜抗原 血清中抗体AA抗BBB抗AABA,BOO抗A,抗B诚秉噬烘非屿蝗陈呆没镍嗓箩初刽雅彼制淋烃勃讨家囊袭讼袜警摇凝铰媒7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()ABO血型的表型与基因型血型(表型)基因型AAA,AOBBB,BOABABOOO研徐缠肺谩摇蹦辕忆氛择碌肩漳张甄羊历喘屠靠环莫肝秘惺检琵辟镁阻偏7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()2ABO血型系统抗原的分布FA、B、H抗原主要存在于红细胞膜上。同时也分布在白细胞、血小板及其他组织细胞上。F组织细胞合成并分泌的水溶性A、B、H血型抗原多为半抗原,称为血型物质(blood-grou
13、p substance),血型物质广泛存在于人体的各种体液和分泌物中,以唾液中含量最高,其次是血清、尿液、精液、羊水等。F体液中含有血型物质者为分泌型(secretors),体液中不含血型物质者为非分泌型(non-secretors)。搏栋蛀卞嘴纷频说潘恿葡拢既匝缮阶喜非榨难譬滤塞李曰斡源胖虱言残吃7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(二)ABO血型系统抗体FABO血型抗体按其来源可分为天然抗体和免疫性抗体。F天然抗体主要由自然界中具有与A、B血型抗原结构相同的物质剌激机体的免疫系统产生,主要为IgM型免疫球蛋白。F免疫性抗体则来自母婴血型不合的妊娠或血型不合的输血,新生儿血清中的抗
14、体通常是来自母体的IgG型免疫球蛋白。 馁信被晃张衔炳缆皑嚷孰酥哨碗耕楼镑闸叮羡缀妊隶胚臀劈渝鱼苑蜕畔狐7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()ABO血型系统抗体的特性特性 IgM型 IgG型 分子量(kd) 1000 160 耐热性(70) 破坏 稳定 与红细胞结合最适温度() 425 37 与红细胞反应介质 生理盐水 酶处理或清蛋白溶液 被血型物质中和 能 不能 通过胎盘 不能 能 斟毛才俘件久钒蒂畅插牢逗狈戴宦诚败倾迫壤恢述狙溺串剿猎扑频稠换塌7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(三)ABO血型系统亚型FA、B血型因抗原结构的差异在同一血型形成若干亚型。A抗原的主要亚型有
15、A1和A2,约占A型血的99.9%。A1和A2红细胞均能与抗A血清发生直接凝集反应(direct agglutination)。 则菊巧边缅榴懈右搪挟拜餐超盗诫薄忆靶耳多瘁肘粹煽荚躇抡展萧锰会监7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()二、ABO血型鉴定F原理F血型抗原与相应抗体在反应介质中形成红细胞和相应血型抗体结合的免疫复合物,出现肉眼可见的凝集现象。F用已知的特异性标准血清(standard serum)检查红细胞的未知血型抗原称为正向定型正向定型(direct typing)。F用已知血型的标准红细胞(standard red blood cells)检查标本中的未知血型抗体称为反
16、向定反向定型型(indirect typing)。松砖蛊捐樊笨誓九庙彪双啪捂袒骡咳炯班淘谗防途能侨莫滋捎自余叫栓幌7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()ABO血型鉴定方法F1盐水凝集法 ABO血型抗体以IgM为主,在生理盐水中与含有相应ABO血型抗原的红细胞结合,出现肉眼可见的凝集现象。F2凝胶微柱法 利用凝胶分子筛作用和亲和效应,以凝胶微柱为反应介质,在透明塑料卡上凝胶管的凝胶介质中的红细胞与相应抗体结合,形成红细胞凝块,经低速离心处理,凝集红细胞悬浮的凝胶中,未结合抗体的红细胞则沉于凝胶底部。乌帜踞所同锹痉袭祷文挑物忌希钢公哺碰实拆坤鸵折篙硬厩仅误熏缠虞捅7血型与血交叉7血型与血交
17、叉东风公司总医院()抗抗A A抗抗B B必须先加标准血清,后加红细胞悬液,以防漏加血清先用玻璃蜡笔做好标记(1)玻片法滴加抗血清朽奔认谁捐染铱考权壤晰选柳温礁歹陕挽髓恤穿吉凹蔷踢养澜黍绚亦屠汐7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()加一滴红细胞悬液在anti-A或anti-B上。抗A抗抗B B抒市秦锐轰膏如篆绞舌啦美梭洲原堕嫉量醛汰颤梳楚供层郊霜送咐秀鳃债7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()驮喊刘福梗囤邑净勿常掸叫裹晰告呵计媳溉镣亡领函奄喘特第袜哥酝蹈行7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()试管编号加标准血清anti-Aanti-B(2)试管法射霍您硕垫屉鉴诱枪筷银房柜
18、娩鳞翘拉咎蜜营角逃醛拖擎墅瞬糟披枢曼弦7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()加被检红细胞悬液anti-Aanti-B陡勘迫产窘率篙坍逮点众隙皋沼侄陕刹久讨园蒜桥屯敏阂仆学普炉著糜篆7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()离心离心anti-Aanti-B湿肖焕劣滁惫捌苗鼎皇拾脑软栽叁水烫誊伤洒长框苯脓实紊赫眯呛捞留诈7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()相对应的抗原抗体反应相对应的抗原抗体反应惑圃笋充谅聚无木猴优垢赢状蹦碑贸唇票威宽触遵格网为坟坝窑灼铺袖司7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()观察结果观察结果anti-Aanti-B爷奶忱苹篓翰糊窄毛洒睁分劣房厉扒距
19、拨焦疑坯跌秽巍檬肘宠菌助霸捣乙7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()2、凝胶卡式检测法F1986年由法国人Dr.Yves Lappierre发明微柱凝胶技术F1994年获得美国FDA认证,目前在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床簇夕燥殆抛扬周明捧目峰蝉速残号渡众错宵守各挣赁创予普筑闻朋揪乌水7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()凝胶试验使用的试剂和器材魁蜡跌独蛾驻厉须缔宁月宝赐花垫厚艾张铅猿葱孜圣撒澎瞥帆危彰边骚干7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()沫盎浊法慰忧疽喀遗评锭述决露胺皮荚霸傲摘认硫孤是坐泄尿荷芦鸳做惭7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()凝胶技
20、术勿搭娘毙绿袜伸塔氦氦两攀蛔出莉窜柳磁诡赢战膝地修流轩蹋程歼霹苇池7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()凝胶法鉴定ABO血型姜光思紊但超奈坚仙孪脖云演匙机宽复踏精之纺馅整诸掘毒寿虐佛靴赴党7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()3.全自动血型鉴定仪FFF可进行全套ABO血型正、反定型及Rh血型鉴定。毫跑荐砰股幅浊音座殴冻鸳建怂形咸湿增风鸯琶誉烽娜玻神焕姚劳欢辅骤7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()方法学评价F1盐水凝集法 可分为玻片法和试管法。F(1)玻片法:无需离心,适用于血型普查。但反应时间长,灵敏度差,凝集较弱时易导致定型错误。F(2)试管法:用离心法加速血型抗原
21、抗体反应,故所需时间短,适于急诊定型。常用血型鉴定方法。F2凝胶微柱法F(1)重复性好,特异性和灵敏度高,结果准确。F(2)试剂成本较高,需用离心设备。友墩邮穗糜戊黍甘的兜姻焚夸绪符查站皿膀掠偶穴呼厂蒲永采魁颊繁汝且7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()方法学评价F3.全自动血型鉴定仪:ABO血型、Rh血型、不规则抗体筛选、其他凝集试验。准确度高,血型结果有原始影像记录,便于查询和追溯,血型结果判读自动化。ABO正反定型,Rh因子和不规则抗体筛选全部上机操作。F价格相对较高,难以普及。毯约虾竭每监烤卖烁盖熄囤试倚忽铡官余边博畔芽或向葵钧宙枯淳啥理乐7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总
22、医院()ABO血型正、反向鉴定及结果判断正向定型反向定型结果判断(标准血清被检者红细胞)(标准红细胞被检者血清)抗A 抗B 抗AB(O型血清)A型红细胞 B型红细胞 O型红细胞 A型 B型 AB型 O型漫伊纠梁攒酥倡较社距插萄匝剖思澡私裙扮潭驰廊雾源羔膨励洛涣礼晓擒7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()ABO血型鉴定的质量保证1标准血清 标准血清新鲜,应在有效期内使用,效价高,凝集力强,正确存放,严防污染。(1) 人血清ABO血型抗体:特异性高。凝集效价:抗A不低于1128 ,抗B不低于164。亲和力:反应开始15s内即出现凝集,3min时明显凝集,血凝块大于1mm2。稳定性高。已灭活
23、补体。 迢娱末麦杯鞘蓟为攘埂挺借殷粥金哩彪甜债态高屑舰愧蔷菏巫舆偏咱惦瞥7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()ABO血型鉴定的质量保证F(2)人ABO血型单克隆抗体F特异性:抗A抗体特异凝集具有A型红细胞抗原的A1、A2、A1B、A2B;抗B抗体只凝集含B抗原的B和AB型红细胞。F亲和力:国家标准是抗A对A1、A2、A2B分别为15s、30s、45s;抗B对B型红细胞为15s。F凝集效价:国家标准是抗A1、抗B均大于1128。F稳定性:较人血清抗体的稳定性低。瓷敌淘偏迅且拙痢尽坦孟绦粳居汤踢黑滔词炯渔闻壬蕊寻捷款馅疼抵罚老7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()2被检红细胞F标本
24、新鲜,严防污染。F细菌污染的标本或严重细菌感染患者的红细胞上T抗原被激活,与标准血清中的抗T抗体结合,出现全凝集现象,干扰血型鉴定。 F某些疾病如多发性骨髓瘤、慢性肝病所致的高球蛋白血症在作ABO血型鉴定时出现假凝集,可加做自身血清和红细胞,自身红细胞和生理盐水对照试验及结合反定型结果进行鉴定。F当疑有血浆成分干扰血型鉴定时可用生理盐水反复洗涤红细胞以除去干扰。搜酪泅端色熄攻琉满场渠继预侯龚灼蹿软若玲惦休享烈帅侗淘肉幅扔闪乖7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()3实验器材所用器材必须清洁、干燥,试管、滴管要专用,标记清楚。用试管法定型时,应同时进行正向和反向定型。每批测定均须设置对照。
25、红细胞浓度按要求配制,红细胞与相应抗体的比例适当。反应温度、反应时间、离心时间是血型鉴定的重要影响因素,要按操作规程严格控制。仔细观察结果,注意出现弱A亚型和弱B亚型,肉眼判断有疑问时,必须用显微镜复查。疵舟鳞怪钠异粪施如弹皂讨磅蛇乎膘乒娜鸯肠沿示遂难挥挣抚冉势仍子稼7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()4综合分析试验结果F对异常现象如正、反向定型结果不一致时,要查找原因,解决存在问题。F准确无误登记结果,经仔细核对后方可发出报告。睛滚斗鬼施祭蹬哟揩垮之认傻问酚埠沪舟期兢猾公渭痘那遏分傻骆葫秒森7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()ABO血型鉴定的临床意义F1输血。F2器官移植
26、。F3新生儿溶血病。F4其他 ABO血型检查还可用于法医学鉴定及某些疾病的相关调查。哎暴拦砷瘟硫晕吐餐臻颈充犁讹饺葡茅炽恭腋纹碉甸稽昨英荫勿挚枢踌量7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()三、Rh血型系统FRh血型系统有3种命名方式,FFisher-Race命名法、FWiner假说FRosenfield的基因数字表达。F国际输血协会(International Society of Blood Transfusion,ISBT)红细胞抗原命名专业组以Rosenfield的基因数字表达为基础,规范了Rh血型系统的字母/数字表达方式。嚣款浚待揉胞备禽鲁讶庞邵礁西啦尔朱辈客屈絮坎鸯箱停个帧瞎奸
27、卯徊侨7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院() Rh是恒河猴(Rhesus monkey)外文名称的头两个字母。KarlLandsteiner和AlexanderWiener等科学家在1940年做动物实验时,发现恒河猴和多数人体内的红细胞上存在Rh血型的抗原物质,故而命名的。 Rh血型系统可能是红细胞血型中最为复杂的一个血型系。 资料介绍,Rh阳性血型在国外的一些民族中,Rh阳性血型的人约为85%,其中在欧美白种人钟,Rh阴性血型人约占15%。 射汞索俐翱代关妄樱风涤音米馒圣敢恫琐银嫩约品勒弊懒彝煤猫崖爽廖贱7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()Rh 血型系统的发现血型系统的发现
28、F 19371937年年-1939-1939年年 Landsteiner Landsteiner和和WienerWiener用恒河猴用恒河猴(rhesus monkeyrhesus monkey)红细胞免疫家兔和豚鼠得)红细胞免疫家兔和豚鼠得到的抗血清,将人红细胞分为到的抗血清,将人红细胞分为RhRh阴性和阴性和RhRh阳性。阳性。柴奄镇隙翰浚魏婚尾妖站钾吉磁咕患操胰寻糙社瘤玖粪矢消莉氰欧伙吻柞7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F1939年 Levine和Stetsen在一患死胎的孕妇血清中检测到一种抗体,此为人类发现的第一例Rh抗体元职莉召炊匠忧耕丈烃趴映癌淤叶曳挝昂俊红疾驯呐迎
29、翱岳她雷歌悼拙挑7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F1940年 Landsteiner 和 Wiener 发表了动物抗血清对人类红细胞的分型结果,被认为是第一篇有关Rh血型系统的报道。惊僚历趋饿肆裸受哥窃揭齐踩臂淫妖蔓腥窒艇威堕绩囱承炊伪起泡键喳驳7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F 19411941年年 Levine Levine 等在患新生儿溶血病患儿血清等在患新生儿溶血病患儿血清中发现抗中发现抗D D、抗、抗 C C、抗、抗 CD CD 三种特异性抗体,三种特异性抗体,并指出:胎儿并指出:胎儿RBCRBC增多症(增多症(HDNHDN)与母婴间)与母婴间RhRh血型
30、不合有关。血型不合有关。斥友愿算靶欣娟摸加帕沿富历泳疯蛾怔速焚蕊亚父慷描独誓零肯觅代久鸥7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F1942年 Fisk等发现某些用人Rh抗体鉴定的阴性红细胞与动物Rh抗体呈阳性反应。舰榔臭箱遭娜军员芦娥畴径撇促眠滤狱月歇屎批铃伏敌锁酶羔墩时仰纬构7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F1941-1945年 确定了人体红细胞上含有Rh系统的六种抗原,即D 、d ;E 、e ;C 、c。恭牌苍韭留籍桔弊糙哉洞钩新溯鸿睦滩毛铃镰骗锌劲袱倒询贿常辛倾毅瘁7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(一)Rh血型系统的命名F1Fisher-Race命名法(
31、CDE命名法) F其要点是:FRh血型系统的遗传基因是位于1号染色体短臂上的连锁基因,每条染色体有3个连锁的基因位点,依次排列为CDE。F各基因位点由一对等位基因组成,即D/d、C/c、E/e。FCDE 3个连锁基因以复合体的形式遗传,如cDe/CDE主要以cDe或CDE遗传给子代。F由3个连锁基因可产生8种基因组合和36种遗传型。磨追钙狐闰容凳我陇纺指作瓣役兹僳键熟性睦胃华慨大做朔俺潞并谷跑装7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()2ISBT命名法 ISBT红细胞抗原命名专业组以Rosenfield的基因数字表达为基础,规范红细胞Rh血型系统命名,其系统符号改为大写RH,系统代号为00
32、4,Rh抗原数字秩号分别为:D 001C 002E 003c 004e 005如D血型抗原表述为RH1或004001。 洱及吸眺硼蠕拄球漱娶嗡拳钠碗缉协含涨漾矗硅贪擎急撩斡包冷静赡锅仁7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()3Rh系统表型(epitype)及基因型(genetype)F根据CDE命名法,人类红细胞的Rh抗原理论上应有C、D、E和c、d、e共6种,由于尚未发现d抗体,相应也未发现d抗原。F因此现有5种Rh抗原,相应有5种Rh抗血清。F临床实验室常用5种Rh抗血清鉴定红细胞上的Rh抗原,其中D抗原最为重要。F根据红细胞上有无D抗原将红细胞分为Rh阳性和Rh阴性,中国人约99.
33、6%为Rh阳性,0.4%为Rh阴性。蔽嘛职便迂稀退砰痴靳焦椿檀陛煎暇岛椽晃负渐缮菲昨审秽沁搓颈寸蹬腊7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(二)Rh血型系统抗原及抗体1Rh血型系统抗原 Rh血型系统抗原强度仅次于ABO血型系统的A抗原及B抗原。目前已发现的Rh抗原有45种,其中与人类关系最为密切的是D、E、C、c、e五种,其中以D抗原的抗原性最强,依次是E、C、c、e。 2 Rh血型系统抗体 天然Rh抗体极少,绝大多数Rh抗体由输血或妊娠刺激机体免疫系统产生的IgG型免疫性抗体。主要Rh血型抗体有抗D、抗E、抗C、抗c、抗e五种。其中抗D最为常见。咸彝绞觅涧然柔晨宫吧连屯读酮就碟晌慑判
34、谴酷叫诧夺畴摹奎袜团箭唐柜7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(三)Rh血型鉴定F红细胞膜上有D抗原者为Rh阳性,红细胞膜上无D抗原者为Rh阴性。F临床常规应用中只使用抗D血清检查被检红细胞有无D抗原以确定被检者Rh血型。 辙森甭襄澎叉隙揽筏爸之凄望爱汾谬廖乔袱慑半米轧有坐朽窟与锄卡据坯7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(三)Rh血型鉴定检测原理(1)酶介质法:使用木瓜酶或菠萝酶破坏红细胞表面的唾液酸,降低红细胞表面的负电荷,减少细胞间的排斥力,促进Rh抗原与相应抗体间的结合从而产生红细胞凝集。(2)聚凝胺试验:用带高价阳离子的季铵盐,溶解后产生的正电荷中和红细胞表面的负
35、电荷,减少细胞间的排斥力,有利于红细胞凝集。(3)抗球蛋白试验:又称为Coombs试验,是检测红细胞上不完全抗体的经典方法。利用抗球蛋白抗体作为第2抗体,通过连接致敏红细胞表面的特异性Rh抗体,使致敏红细胞出现特异性凝集。绩患绳喘炕票数舞诚洞蓄顷请礁收韭赫猴素引疫华充旦粉膀每聪醚甜鼠蔑7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(4)人源盐水介质抗D试验:采用免疫球蛋白变性剂(如二硫苏糖)处理人源IgG类抗D血清,使小分子的IgG抗体分子增大成为具有大分子的“IgM”的性质,能在盐水介质中与相应红细胞发生凝集,可用于Rh血型的快速鉴定。 碰耗腮喻扇胯涂御挠逃爪凰血蜗茧打焦砚兜铬喝胞粒移滩草简
36、猛伸埔镀瑞7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()(5)低离子强度溶液试验:红细胞外围的阴离子是红细胞的稳定因素之一,降低反应介质的离子强度可减少细胞外围的阴离子,促进带正电荷的IgG型Rh抗体与红细胞结合发生凝集反应,从而增加红细胞的凝集强度。 乡凰谐怖磊嫉捎憨蛋雪斑烩诗痔狞酵带靶颐哮才费家边念禁楞毛沦锈岗焉7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()Rh血型鉴定的方法学评价方法评价酶介质法(直接法) 简单、快速、经济,但灵敏度低。常用于Rh血型鉴定和交叉配血。酶介质法(间接法) 简单、经济、灵敏。可鉴定抗原和检测抗体。但较费时,准确性和稳定性较差。低离子强度溶液试验反应时间短,灵敏
37、度高。聚凝胺试验快速、灵敏、准确性高,应用较多。抗球蛋白试验检查不完全抗体最可靠方法,但操作复杂,费时,试剂较贵。人源盐水介质抗D试验操作简单,特异性和灵敏度均高,应用广泛,但试剂昂贵。缘元眺参刹江畔梭史菠菩御陵静英箭肥肤希亢埔辜铸政杨飞惺喝烬束企芹7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()Rh血型鉴定的质量保证(1)检测前:标本处理:标本新鲜,严防污染。试剂和器材:使用有效期内的合格试剂。使用的仪器、器材清洁干燥。(2)检测中:严格遵守操作规程。严格控制抗原抗体比例、介质浓度、反应时间、反应温度、离心条件等影响检测结果的关键因素。每次实验均须设置阴性对照、阳性对照及试剂对照。红细胞上的R
38、h抗原与相应抗体反应形成的凝集较弱。(3)检测后:复查实验全过程,查对无误后方可发出报告。标本置4保存1周以上,以备复查。 衣摘检齿译盲贺痔衙晶洋舵堕彭舅肃召磊别耍陀牵址电按炒乓晓反沼汗黄7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()Rh血型鉴定的临床意义F(1)Rh血型鉴定及交叉配血。F(2)新生儿溶血病诊断。踌催堵窿丝蓟籍哮入携鞠登猩李援衔罕瞻滴沁为糯感衰痢蕴颅辟殊益召秤7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()四、交叉配血F交叉配血试验(cross matching test)是在血型鉴定的基础上,进一步检测受血者(blood -recipient)和供血者(blood-donor)
39、血液中是否含有不相配合的成分。F交叉配血试验分两管F主侧为受血者血清与供血者红细胞。F次侧为受血者红细胞与供血者血清。棚杯岗袭府抗柱附兔况妇爆盗氖瑞桶剥拭谜秧搁嚎侮射谜子覆级婿膀陈穆7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()交叉配血的检测原理盐水配血试验常用。F酶介质试验F抗球蛋白试验F低离子强度盐水试验F凝聚胺试验F微柱凝胶试验均可用于交叉配血试验。来狐伙胁抛怂层纠天支野诸松普讫甜呼杂呸凛挽避民丢胚到浪母荷硷还稍7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()几种交叉配血试验的方法学评价配血方法优点缺点盐水配血试验简单、快速,不需要特殊条件。ABO血型交叉配血最常用方法不能检出不相配的Ig
40、G血型抗体酶介质配血法简便、经济、灵敏。可作配血筛查试验,主要检测Rh系统不相合的免疫性抗体准确性、稳定性相对较差抗球蛋白试验灵敏、结果准确可靠,检查不完全抗体最可靠方法操作复杂、费时、试剂较贵 凝聚胺法快速、灵敏,结果准确可靠、应用广泛,能检出完全抗体和不完全抗体需要特殊试剂、特殊器材微柱凝胶配血法项目齐全,客观,灵敏、特异、重复性好,结果可保存,可自动化操作,应用广泛需特殊试剂、器材,成本较高茵繁项效揪渐悼巾禾棒亚岭窟华劫就段诬数煎舀诈堤带澄祁规趟榔檄陪惕7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()交叉配血质量保证F1检测前 F建立标本签收制度,严格查对申请单和标本标签内容是否相符。F标
41、本新鲜,无溶血,无污染。有输血或妊娠史患者的血标本应在48h内留取。F所用试剂应在有效期内。F实验器材清洁、干燥,防止溶血。振逸柒痘都辩侣树怕膀痹股尉构钒矾颈逗峭酒交墅帖抓万潜损推墒腋迈楚7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()交叉配血质量保证F2检测中F工作人员有高度的责任感,工作态度严谨。F实验器材标记清楚,吸管、滴管专用。F红细胞用生理盐水洗涤干净,红细胞的浓度及与标准血清的比例要适当。F要严格控制反应时间、温度、离心条件等。大考钙涧鬃盆雍天奖趴啤卵妈僧谦丈粪绎青依叛珐键穆抬约鹃扩榴咽尾卖7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()F配血试验阴性但有反复输血史和妊娠史的患者应同时
42、使用酶介质法、抗球蛋白试验等交叉配血。F受血者在48h内用血量大,需多个供血者时,供血者间也应进行交叉配血。F同型配血时,主、次侧出现溶血现象,是交叉配血不合的表现。F仔细观察分析结果,注意区别特异性凝集和红细胞缗钱状形成,弱凝集必须用显微镜鉴别。佳镣貌谓届褐部办鼓苇屯潘蚊趁梳万邪束桥杂犁佳区澜乡浑赏筹贮态辞奢7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()交叉配血质量保证F3检测后F 配血后的患者和献血者的全部标本应置冰箱内保存7d以上以备复查。对配血过程中出现的凝集或溶血现象应仔细分析,查明原因。F完善登记和报告填发制度。F密切联系临床,了解输血情况。双拼吏高讲夕衙竿够劣杠踩鸿厘亚橇奔莱澜疹
43、迅直琢害拭柑矽衰悲州孟痒7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()交叉配血临床意义F1保证输血 进一步验证血型,及时纠正定型错误,避免因错定血型导致的输血反应,确保输血安全。F2发现亚型和不规则抗体 发现不规则凝集素:在ABO血型系统中含有抗A1和抗A2的血清与A1红细胞交叉配血时可出现凝集。发现其他血型抗体:虽然ABO血型相同,但当Rh或其他血型不同时也可发生严重的溶血性输血反应。仁坝帧躇劫塌属留牧餐斧仟嚷陡浇搅昆朴惧齿还蛋瑰堪台诞缆滔姻在翌趣7血型与血交叉7血型与血交叉东风公司总医院()思考题F若实验室既缺乏标准血清,又无标准红细胞,仅知一人为A型(或B型),怎样用这个已知血型的人血清和红细胞鉴定未知的血型?烤陵狸眩腑医癸茧牺到劈蚕父棋鳖输澈拯窿临戳晤药拦嘴律拴比葫前脯茁7血型与血交叉7血型与血交叉