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1、实验实验 3 液泡系的超活染色与观察液泡系的超活染色与观察一、实验目的一、实验目的1 观察植物活细胞内液泡系的形态、发育和分布;观察植物活细胞内液泡系的形态、发育和分布;2 掌握掌握细胞和细胞器的超活染色技术细胞和细胞器的超活染色技术 2024/7/231二、实验原理二、实验原理活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着活体染色是指对生活有机体的细胞或组织能着色但又无毒害的一种染色方法。其目的是显示色但又无毒害的一种染色方法。其目的是显示生活细胞内的某些结构,而不影响细胞的生命生活细胞内的某些结构,而不影响细胞的生命活动和产生任何理化变化以致引起细胞死亡。活动和产生任何理化变化以致引起细胞死亡。
2、活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结活染技术可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。构和生理、病理状态。2024/7/232二、实验原理二、实验原理低浓度的中性红染液是对植物细胞液泡进行低浓度的中性红染液是对植物细胞液泡进行超活染色的最重要也最常用的弱碱性染料。超活染色的最重要也最常用的弱碱性染料。中性红对液泡系的染色具有专一性,中性红对液泡系的染色具有专一性,只能只能将将活细胞中的液泡系染成红色。活细胞中的液泡系染成红色。2024/7/233三、实验用品三、实验用品1 器材:显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、器材:显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙
3、签、吸水纸解剖刀、载玻片、盖玻片、吸管、牙签、吸水纸2 试剂:试剂: Ringer液,液,0.3%中性红中性红3 材料:洋葱幼根根尖材料:洋葱幼根根尖2024/7/234四、实验四、实验步骤步骤初生根尖(初生根尖(12cm,纵切面切片纵切面切片)置于载玻)置于载玻片上片上,0.3%中性红溶液滴染色中性红溶液滴染色1015 min吸去多余染液,滴一滴吸去多余染液,滴一滴Ringer液,液,盖上盖玻盖上盖玻片片,用拇指垂直,用拇指垂直压压盖玻片,使盖玻片,使根尖根尖压扁压扁显微镜下观察显微镜下观察。 2024/7/235五、实验结果五、实验结果注意观察液泡的形态、数目、体积及染注意观察液泡的形态、
4、数目、体积及染色色深浅渐变深浅渐变 根尖分生区细胞的细胞质中散步很多根尖分生区细胞的细胞质中散步很多大小不等的圆形小泡,即初生的幼小大小不等的圆形小泡,即初生的幼小液泡液泡伸长区的液泡染色较浅,体积增大,伸长区的液泡染色较浅,体积增大,数目变少数目变少成熟区细胞中央一般可见一个淡红色成熟区细胞中央一般可见一个淡红色的大液泡的大液泡2024/7/236五、实验结果五、实验结果2024/7/237六、讨论与思考题六、讨论与思考题绘绘制洋葱制洋葱根尖根尖示意图,示细胞中示意图,示细胞中液泡系的液泡系的动动态变化(每个区绘态变化(每个区绘3个以上细胞)个以上细胞)。简述从根尖的生长点到成熟区,根尖细胞中简述从根尖的生长点到成熟区,根尖细胞中的液泡发生了哪些变化?的液泡发生了哪些变化?2024/7/238