生物化学题库及答案大全

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1、生物化学题库生物化学题库习题一习题一 参考答案参考答案一、填空题一、填空题1 蛋白质中的苯丙氨酸、 酪氨酸和_色氨酸_3 种氨基酸具有紫外吸收特性，因而使蛋白质在280nm 处有最大吸收值。2 蛋白质的二级结构最基本的有两种类型，它们是_-螺旋结构_和_-折叠结构_。前者的螺距为0.54nm，每圈螺旋含_3.6_个氨基酸残基，每个氨基酸残基沿轴上升高度为 _0.15nm_。天然蛋白质中的该结构大都属于 右手螺旋。3氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成_蓝紫色_色化合物， 而脯氨酸与茚三酮反应生成黄色化合物。4当氨基酸溶液的 pH = pI 时，氨基酸以两性离子离子形式存在，当pH pI 时，

2、氨基酸以负离子形式存在。5维持 DNA 双螺旋结构的因素有：碱基堆积力；氢键；离子键6酶的活性中心包括结合部位 和催化部位两个功能部位，其中前者直接与底物结合，决定酶的专一性，后者是发生化学变化的部位，决定催化反应的性质。72个H+或e经过细胞内的NADH和FADH2呼吸链时， 各产生3个和2个ATP。81 分子葡萄糖转化为 2 分子乳酸净生成_2_分子 ATP。糖酵解过程中有 3 个不可逆的酶促反应，这些酶是己糖激酶；果糖磷酸激酶；丙酮酸激酶9。10 大肠杆菌 RNA 聚合酶全酶由2组成；核心酶的组成是2。参与识别起始信号的是因子。11 按溶解性将维生素分为水溶性和脂溶性性维生素， 其中前者

3、主要包括 VB1、 VB2、 VB6、VB12、VC，后者主要包括VA、VD、VE、VK（每种类型至少写出三种维生素。 ）12 蛋白质的生物合成是以 mRNA 作为模板， tRNA 作为运输氨基酸的工具， 蛋白质合成的场所是核糖体 。13 细胞内参与合成嘧啶碱基的氨基酸有：天冬氨酸 和 谷氨酰胺 。14 、原核生物蛋白质合成的延伸阶段， 氨基酸是以氨酰 tRNA 合成酶GTPEF-Tu 三元复合体的形式进位的。15 、脂肪酸的-氧化包括 氧化；水化；再氧化和硫解 4 步化学反应。二、选择题1、 ( E)反密码子 GUA，所识别的密码子是：ACAUBUGCCCGUDUACE都不对2、(C)下列哪

4、一项不是蛋白质的性质之一？A处于等电状态时溶解度最小B加入少量中性盐溶解度增加C变性蛋白质的溶解度增加D有紫外吸收特性3(B)竞争性抑制剂作用特点是：A与酶的底物竞争激活剂B与酶的底物竞争酶的活性中心C与酶的底物竞争酶的辅基D与酶的底物竞争酶的必需基团；E与酶的底物竞争酶的变构剂14(C)酶的竞争性可逆抑制剂可以使：AVmax 减小，Km 减小BVmax 增加，Km 增加CVmax 不变，Km 增加DVmax 不变，Km 减小EVmax 减小，Km 增加5. (E)构成多核苷酸链骨架的关键是：A23-磷酸二酯键B 24-磷酸二酯键C25-磷酸二酯键D 34-磷酸二酯键E35-磷酸二酯键6(A)

5、糖的有氧氧化的最终产物是：ACO2+H2O+ATPB乳酸C丙酮酸D乙酰 CoA7(E)参加 DNA 复制的酶类包括： （1）DNA 聚合酶； （2）解链酶； （3）DNA 聚合酶； （4）RNA聚合酶（引物酶） ； （5）DNA 连接酶。其作用顺序是：A （4） 、 （3） 、 （1） 、 （2） 、 （5）B （2） 、 （3） 、 （4） 、 （1） 、 （5）C （4） 、 （2） 、 （1） 、 （5） 、 （3）D （4） 、 （2） 、 （1） 、 （3） 、 （5）E （2） 、 （4） 、 （1） 、 （3） 、 （5）8(DE)下列关于 DNA 复制特点的叙述哪一项错误的：A

6、RNA 与 DNA 链共价相连B新生 DNA 链沿 53方向合成CDNA 链的合成是不连续的D复制总是定点双向进行的EDNA 在一条母链上沿 53方向合成，而在另一条母链上则沿35方向合成9( B)在蛋白质生物合成中 tRNA 的作用是：A将一个氨基酸连接到另一个氨基酸上B把氨基酸带到 mRNA 指定的位置上C增加氨基酸的有效浓度D将 mRNA 连接到核糖体上10( B)蛋白质的生物合成中肽链延伸的方向是：AC 端到 N 端B从 N 端到 C 端C定点双向进行DC 端和 N 端同时进行三 判断题，请在题前括号内画或(X)1、单糖和寡糖都是还原糖。(X)2、构成蛋白质的 20 种氨基酸都是必需氨

7、基酸。(A)3、盐析法可使蛋白质沉淀，但不引起变性，故此法常用于蛋白质的分离制备。(A)4、Km 是酶的特征常数，只与酶的性质有关，与酶浓度无关(A)5、酶只能改变化学反应的活化能而不能改变化学反应的平衡常数。(X)6、核酸的紫外吸收与溶液的pH 值无关。(X)7、不饱和脂肪酸的碘值越大，则不饱和程度越低。(A)8、ATP是果糖磷酸激酶的变构抑制剂。(A)9、原核细胞 DNA 复制是在特定部位起始的，真核细胞则在多个位点同时起始进行复制。(A)10、所有的氨酰-tRNA 的合成都需要相应的氨酰-tRNA 合成酶的催化。四四 名词解释名词解释1、等电点等电点：指氨基酸的正离子浓度和负离子浓度相等

8、时的pH 值，用符号 pI 表示。、半保留复制半保留复制：DNA 复制所生成的子代 DNA 分子中一条链来自亲代，一条链是新合成的，所以称半保留复制。、酶的活性中心酶的活性中心：酶分子中直接与底物结合，并催化底物发生化学反应的部位，称为酶的活性中心。、糖异生糖异生：非糖物质（如丙酮酸、乳酸、甘油、生糖氨基酸等）转变为葡萄糖的过程。2、呼吸链呼吸链：一系列能可逆接受和释放氢离子或电子的物质在线粒体内膜上的相互关联的有序排列。、Reverse transcriptionReverse transcription： Temin和 Baltimore 各自发现在 RNA 肿瘤病毒中含有 RNA 指导的

9、 DNA 聚合酶，才证明发生逆向转录，即以RNA 为模板合成 DNA。、氧化磷酸化氧化磷酸化：代谢物的氧化（脱H）作用与 ADP 的磷酸化作用（生成ATP）相耦联的过程。、同工酶同工酶：指催化同一种化学反应，但其酶蛋白本身的分子结构组成却有所不同的一组酶。、GeneGene：能表达和产生基因产物的（蛋白质或RNA）的 DNA 序列。、遗传密码遗传密码：存在于信使 RNA 中可指导蛋白质中一个氨基酸合成的三个相邻的核苷酸。五五 简答计算题简答计算题1 1、简述蛋白质变性作用的机制、简述蛋白质变性作用的机制 。答：蛋白质变性作用是指在某些因素的影响下，蛋白质分子的空间构象被破坏，并导致其性质和生物

10、活性改变的现象。蛋白质变性后会发生以下几方面的变化：（1）生物活性丧失（2）理化性质的改变包括：溶解度降低，因为疏水侧链基团暴露；结晶能力丧失；分子形状改变，由球状分子变成松散结构，分子不对称性加大；粘度增加；光学性质发生改变，如旋光性、紫外吸收光谱等均有所改变。（3）生物化学性质的改变，分子结构伸展松散，易被蛋白酶分解。、简述原核生物转录的起始过程。、简述原核生物转录的起始过程。答： （1）亚基与核心酶形成全酶，沿 DNA 链移动，采取快速的尝试错误的方式寻找启动子。（2）起始识别当亚基发现启动子上的识别位点后，全酶就与-35 序列结合（初始结合） ，形成一个封闭的启动子复合物。（3）紧密结

11、合RNA 聚合酶分子很大，与-35 序列结合的同时，一端可以到达-10 序列，并且整个酶分子向-10 序列转移，二者牢固结合（操纵基因上必须没有阻遏蛋白） 。（4）开放性的启动子二元复合物的形成-10 序列及起始位点处发生局部解链，一般为12-17bp。形成由全酶和局部解链的启动子组成的开放性的启动子二元复合物。（5）第一个磷酸二酯键形成在开放性的启动子复合物中， RNA 聚合酶上的起始位点和延长位点被相应的核苷酸前体占据，嘌呤核苷三磷酸（rNTP）在亚基的催化下形成 RNA 的第一个磷酸二酯键。形成由 RNA 聚合酶、DNA 模板和新生的 RNA 链组成的三元复合物。（6）因子脱落三元复合物

12、形成后，因子就释放出去。从而核心酶就容易在链上移动合成RNA 链，同时由于存在一个三角结合关系（核心酶-DNA-RNA） ，使 RNA 聚合酶不会从模板上脱落下来。3、写出催化下列反应的酶的分类名称。、写出催化下列反应的酶的分类名称。答：合成酶类、氧化还原酶类、转移酶类、水解酶类、简述原核生物蛋白质合成的延伸过程。、简述原核生物蛋白质合成的延伸过程。答： （1）进位EF-Tu 先与 GTP 结合后，再与氨酰基-tRNA 结合形成三元复合物；三元复合物进入A位， 该过程只需GTP存在而不需水解； GTP水解， EF-Tu与GDP的二元复合物与氨酰基-tRNA解离而被释放出来。（2）转肽肽基转移酶

13、把位于P位的甲酰甲硫氨酰基或肽基转移到A位的氨酰基-tRNA的氨基上，从而形成第 1 个肽键或一个新的肽键。（3）移位肽键在 A 位形成后， 转位因子 EF-G 和 GTP 形成松驰的二元复合物， 结合到核糖体上。该结合只需 GTP 存在而不需其水解；GTP 水解，A 位的肽基 tRNA 转移到 P 位，实际是核糖体沿 mRNA 移动了一个密码子的距离；位于P 位点的空载的 tRNA 移到 E 位点，并离开核糖体；EF-G 和 GDP 从核糖体上释放出来，下一个氨酰 tRNA-EF-Tu-GTP 的三元复合物才能进入 A 位，开始另一轮的转肽和转位。、简述、简述 tRNAtRNA 分子的二级结

14、构及各部分的功能。分子的二级结构及各部分的功能。答：氨基酸接受臂：3 端为-CCA；携带氨基酸。TC 臂和噜噗：核糖体识别和结合部位。反密码子臂（三联反密码子）和噜噗：与mRNA 上的密码子识别和配对；二氢尿嘧啶臂（D 臂）和噜噗：氨酰 tRNA 合成酶的结合部位；附加臂：是维持 tRNA 的三级结构。、某酶的、某酶的 Km=4.7Km=4.71010-3-3 mol/l mol/l，Vmax=2.2Vmax=2.21010-6-6 mol/min mol/min，S=2.0S=2.01010-4-4 mol/l mol/l，计算在竞争性抑制剂存在的，计算在竞争性抑制剂存在的情况下情况下, ,

15、酶促反应的速度为多少酶促反应的速度为多少?(?(抑制剂浓度是抑制剂浓度是 5.05.01010-4-4mol/l, Kmol/l, Ki i = 3.0 = 3.01010-3-3 mol/l) mol/l)答：v = 7.6(7.7) 10-7mol/min1Km I 111vV maxKiSV max六六 推导题推导题用下列实验数据推导某肽链的一级结构：（1）完全酸水解后产生的aa 组成为：Ala、Arg、2Ser、Lys、Phe、Met、Pro；（2）用 DNFB 处理并水解得到 DNP-Ala（3）羧肽酶 A 和 B 都对此肽不作用（4）用 CNBr 处理获得 2 个片段，其中一个片段

16、含有Pro、Trp、Ser（5）用糜蛋白酶作用产生3 个片段，1 个含有 Pro、Ser；另 1 个含有 Met、Trp；最后一个含有 Phe、Lys、Ser、Ala、Arg（6）用胰蛋白酶处理产生3 个片段，1 个含有 Ala、Arg；另 1 个含有 Lys、Ser；最后一个含有 Phe、Trp、Met、Ser、ProAla-Arg-Ser-Lys-Phe-Met-Trp-Ser-Pro4生物化学习题二生物化学习题二 参考答案参考答案一、填空题一、填空题1、 大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为 16 %， 如测得 1 克样品含氮量为 10mg, 则蛋白质含量为6.25 %。2、 加入低浓度

17、的中性盐可使蛋白质溶解度_增加_， 这种现象称为盐溶_， 而加入高浓度的中性盐，当达到一定的盐饱和度时，可使蛋白质的溶解度_减小_并_沉淀析出_, 这种现象称为盐析_, 蛋白质的这种性质常用于_蛋白质分离_。3、 谷氨酸的 pK1(-COOH)2.19, pK2 (-NH+3 ) = 9.67, pKR(R 基)= 4.25, 谷氨酸的等电点为_3.22_。4、 按溶解性将维生素分为水溶 性和 脂溶性性维生素，其中前者主要包括VB1、VB2、VB6、VB12、VC，后者主要包括VA、VD、VE、VK（每种类型至少写出三种维生素。 ）5、蛋白酶的辅助因子包括、酶酶和辅基。其中辅基 与酶蛋白结合紧

18、密，不能用透析方法 除去，辅酶与酶蛋白结合疏松，可以用 透析方法 除去。6、 真核细胞内的 2 条呼吸链（电子传递链）是 NADH呼吸链和FADH2呼吸链。7、 调节三羧酸循环最主要的酶是_己糖激酶；果糖磷酸激酶；丙酮酸激酶。8、 蛋白质合成的终止遗传密码为UAA；UAG；UGA9、 基因有两条链，作为模板指导转录的那条链称 模板链或无意义链链。10、以 RNA 为模板合成 DNA 称 逆转录 ，由逆转录酶酶催化。11、DNA 复制是定点双向进行的，前导链股合成的是 5-3 ，并且合成方向和复制叉移动方向相同； 后滞链股合成的是 5-3，合成方向与复制叉移动的方向相反。每个冈崎片段是借助于连在

19、它的 5 末端上的一小段RNA而合成的；所有冈崎片段链的增长都是按5-3 方向进行。12、蛋白质合成的延伸过程以3 个步骤为 1 个循环： 进位；转肽；移位。二 选择题1、( B )酶的活性中心是指：A酶分子上含有必需基团的肽段 B酶分子与底物结合的部位C酶分子与辅酶结合的部位 D酶分子发挥催化作用的关键性结构区E酶分子有丝氨酸残基、二硫键存在的区域2、( B )酶催化作用对能量的影响在于：A增加产物能量水平 B降低活化能 C降低反应物能量水平D降低反应的自由能 E增加活化能3、( A )竞争性可逆抑制剂抑制程度与下列那种因素无关：A作用时间 B抑制剂浓度 C底物浓度D酶与抑制剂的亲和力的大小

20、 E酶与底物的亲和力的大小4、 ( E )反密码子 GA，所识别的密码子是：ACAU BUGC CCGU DUAC E都不对5、 ( C )丙酮酸激酶是何途径的关键酶：A磷酸戊糖途径 B糖异生C糖的有氧氧化 D糖原合成与分解 E糖酵解6、( C )下面哪种酶在糖酵解和糖异生中都起作用：A丙酮酸激酶 B丙酮酸羧化酶C3-磷酸甘油醛脱氢酶 D己糖激酶 E果糖 1，6-二磷酸酯酶57、( C )关于密码子的下列描述，其中错误的是：A每个密码子由三个碱基组成 B每一密码子代表一种氨基酸C每种氨基酸只有一个密码子 D有些密码子不代表任何氨基酸8、( A )核糖体上 A 位点的作用是：A接受新的氨基酰-t

21、RNA 到位 B含有肽机转移酶活性，催化肽键的形成C可水解肽酰 tRNA、释放多肽链 D是合成多肽链的起始点9、( D )蛋白质的终止信号是由：AtRNA 识别 B转肽酶识别C延长因子识别 D以上都不能识别10、( B )蛋白质的生物合成中肽链延伸的方向是：AC 端到 N 端 B从 N 端到 C 端C定点双向进行 DC 端和 N 端同时进行三 判断题，请在题前括号内画或( )1、氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色化合物。( )2、Km 是酶的特征常数，在任何条件下，Km 是常数。( )3、一种酶有几种底物就有几种Km 值。( )4、DNA 是生物遗传物质，RNA 则不是。( )5、脱氧核糖核苷中的

22、糖环3位没有羟基。( )6、逆转录酶催化 RNA 指导的 DNA 合成不需要 RNA 引物。( )7、生物体的不同组织中的DNA，其碱基组成也不同。( )8、因为 DNA 两条链是反向平行的，在双向复制中一条链按53的方向合成，另一条链按 35的方向合成。( )9、在蛋白质生物合成中所有的氨酰-tRNA 都是首先进入核糖体的 A 部位。( )10、所有的蛋白质都有酶活性。四四 名词解释名词解释1、盐析盐析：在蛋白质溶液中加入一定量的高浓度中性盐（如硫酸氨） ，使蛋白质溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析。2、蛋白质复性蛋白质复性：指在一定条件下，变性的蛋白质分子恢复其原有的天然构象并恢复生物活性

23、的现象。3、多酶体系多酶体系：由几个酶彼此嵌合形成的复合体称为多酶体系。 多酶复合体有利于细胞中一系列反应的连续进行，以提高酶的催化效率，同时便于机体对酶的调控。多酶复合体的分子量都在几百万以上。4、反密码子反密码子：tRNA 分子的反密码子环上的三联体核苷酸残基序列。在翻译期间，反密码子与mRNA中的互补密码子结合。5、增色效应增色效应：当双螺旋 DNA 熔解（解链）时，260nm 处紫外吸收增加的现象。6、糖异生糖异生：非糖物质（如丙酮酸、乳酸、甘油、生糖氨基酸等）转变为葡萄糖的过程。7、半保留复制半保留复制：DNA 复制所生成的子代 DNA 分子中一条链来自亲代， 一条链是新合成的， 所

24、以称半保留复制。68、逆转录逆转录：Temin和 Baltimore 各自发现在 RNA 肿瘤病毒中含有 RNA 指导的 DNA 聚合酶，才证明发生逆向转录，即以 RNA 为模板合成 DNA。9、Okazaki fragmentOkazaki fragment：冈崎片段。相对比较短的DNA 链（大约1000 核苷酸残基） ，是在DNA 的滞后链的不连续合成期间生成的片段。10、GeneGene：基因。能表达和产生产物的（蛋白质或RNA）的 DNA 序列。五五 简答计算题简答计算题1 1、简述中心法则、简述中心法则 。答：蛋白质蛋白质、什么是蛋白质的变性作用和复性作用？蛋白质变性后哪些性质发生改

25、变。、什么是蛋白质的变性作用和复性作用？蛋白质变性后哪些性质发生改变。答：蛋白质变性作用是指在某些因素的影响下，蛋白质分子的空间构象被破坏，并导致其性质和生物活性改变的现象。蛋白质的复性作用指在一定条件下，变性的蛋白质分子恢复其原有的天然构象并恢复生物活性的现象。蛋白质变性后会发生以下几方面的变化：（1）生物活性丧失；（2）理化性质的改变，包括：溶解度降低，因为疏水侧链基团暴露；结晶能力丧失；分子形状改变，由球状分子变成松散结构，分子不对称性加大；粘度增加；光学性质发生改变，如旋光性、紫外吸收光谱等均有所改变。（3）生物化学性质的改变，分子结构伸展松散，易被蛋白酶分解。、试述原核生物、试述原核

26、生物 RNARNA 聚合酶的亚基构成及各亚基的功能。聚合酶的亚基构成及各亚基的功能。答：参与全酶与启动子的牢固结合，与双螺旋的揭开和恢复有关；：与底物结合并催化磷酸二酯键的形成（底物包括前体、已经形成的RNA 链） ； ：与有义链结合；：识别启动子（R 位点） ；、试述原核生物蛋白质合成的起始过程。、试述原核生物蛋白质合成的起始过程。答： （1）IF3 促使 70S 核糖体解离，并与 30S 亚基结合。（2）结合有 IF3 的 30S 小亚基与 mRNA 结合。（3）起始因子 IF2 与起始 tRNA 结合后，再与 30S 亚基结合（或许 IF2 先与 30S 亚基结合，再识别起始 tRNA）

27、 。这样便使起始 tRNA 进入 30S 亚基的部分 P 位。（4） IF2 与起始 tRNA 的二元复合物结合到 30S 亚基后， GTP 分子立即与 30S 亚基结合，起始复合物完全形成。7（5） 50S 亚基结合起始复合物上， GTP 水解， 其释放的能量使大小亚基的构象发生变化，促使 70S 核糖体的形成。（6）同时 IF2 和 IF3 被释放，IF1 的作用促使 IF2 的释放。这时的核糖体位功能性核糖体，其P 位被起始 tRNA 占据，而A 位正准备接受能与第二密码子配对的氨酰 tRNA。、某酶的、某酶的 Km=4.7Km=4.71010-3-3 mol/l mol/l，Vmax=

28、2.2Vmax=2.21010-6-6 mol/min mol/min，S=2.0S=2.01010-4-4 mol/l mol/l，计算在竞争，计算在竞争性抑制剂存在的情况下性抑制剂存在的情况下, ,酶促反应的速度为多少酶促反应的速度为多少? ?( (抑制剂浓度是抑制剂浓度是 5.05.01010-4-4mol/l, Kmol/l, Ki i = 3.0 = 3.01010-3-3 mol/l) mol/l)答：1Km I 11v1V maxKiSV maxv = 7.6(7.7) 10-7mol/min6 6、称取、称取 25mg25mg 蛋白酶配成蛋白酶配成 25ml25ml 溶液，取溶

29、液，取 2ml2ml 溶液测得含蛋白氮溶液测得含蛋白氮 0.2mg0.2mg，另取，另取 0.1ml0.1ml 溶液测酶活力，结果溶液测酶活力，结果每小时可以水解酪蛋白产生每小时可以水解酪蛋白产生 1500ug1500ug 酪氨酸，假定酪氨酸，假定 1 1 个酶活力单位定义为每分钟产生个酶活力单位定义为每分钟产生 1ug1ug 酪氨酸的酶量，酪氨酸的酶量，请计算：请计算： （1 1）酶溶液的蛋白浓度及比活力；）酶溶液的蛋白浓度及比活力； （2 2）每克酶制剂的总蛋白含量及总活力。）每克酶制剂的总蛋白含量及总活力。答：答：蛋白浓度=0.26.25mg/2ml=0.625mg/ml比活力=(150

30、0/60 1ml/0.1ml)/0.625mg/ml = 400U/mg总蛋白 = 0.625 1000 = 625mg总活力 = 625mg 400U/mg = 250000U7 7、试述真核细胞内的糖酵解和三羧酸循环过程。、试述真核细胞内的糖酵解和三羧酸循环过程。答： （1）糖酵解途径：8CH2OHO葡萄糖（Glc）AT P己糖激酶 POCH2OADP6-磷酸葡萄糖（G-6-P）磷酸己糖异构酶 P OCH2OCH2OH6-磷酸果糖（F-6-P ）AT P磷酸果糖激酶（PFK ）ADP1,6- 二磷酸果糖（FDP ）缩醛酶（裂解）CH2OpCOCHO磷酸二羟丙酮磷酸丙糖异构酶3-磷酸甘油醛p

31、HCOHCH2O pCH2OHNAD+磷酸甘油醛脱氢酶NADH+H+1,3- 二磷酸甘油酸ADP磷酸甘油酸激酶ATP3-磷酸甘油酸磷酸甘油酸异构酶2-磷酸甘油酸烯醇化酶2-磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）ADP丙酮酸激酶COOHCOATP9丙酮酸（Pyr）CH3三羧酸循环：8. 8.苹果酸脱氢酶苹果酸脱氢酶乙酰辅酶乙酰辅酶A A草酰乙酸草酰乙酸1. 1.柠檬酸合成酶柠檬酸合成酶苹果酸苹果酸异柠檬酸异柠檬酸3. 3.异柠檬酸脱氢酶异柠檬酸脱氢酶柠檬酸柠檬酸2. 2.顺乌头酸酶顺乌头酸酶7. 7.延胡索酸酶延胡索酸酶延胡索酸延胡索酸5. 5.琥珀酸硫激酶琥珀酸硫激酶a-a-酮戊二酸酮戊二酸琥琥珀珀酸酸辅

32、辅琥珀酸琥珀酸6. 6.琥珀酸脱氢酶琥珀酸脱氢酶酶酶A A4. 4. 酮戊二酸脱氢酶酮戊二酸脱氢酶习题三答案一、填空题1. 核酸的基本结构单位是 核苷酸，蛋白质的基本组成单位是氨基酸。2. tRNA 二级结构为 三叶草型，接收活化氨基酸的是氨基酸臂，识别 mRNA 上密码子的是 反密码子环。tRNA 的三级结构模型为倒 L型。3. 1 分子葡萄糖完全氧化CO2和 H2O 时，净生成_38_分子 ATP。4. 大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为_16 _%，如测得 1 克样品含氮量为 10mg，则蛋白质含量为_6.25_%。5. WatsanCrick 提出的双螺旋结构中，糖和磷酸 处于分子外

33、侧，碱基处于分子中央，螺旋每上升一圈 bp 数为10。1 06. 直链淀粉由葡萄糖通过-1，4-糖苷键连接而成。而支链淀粉除含此键外，还含有-1，6 -糖苷键 。7. DNA 后随链是以不连续 方式合成的，因此DNA 复制过程还需要 DNA 连接酶酶。8. 大肠杆菌 RNA 聚合酶全酶由_组成，核心酶组成是_，参予识别起始信号的是_ _ _ _。二、选择题二、选择题1. 糖异生途径中哪一种酶代替糖酵解的己糖激酶？（C）A、丙酮酸羧化酶B、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶C、葡萄糖-6-磷酸酯酶D、磷酸化酶2. 天然蛋白质中不存在的氨基酸是（B）A 半胱氨酸B 瓜氨酸C 丝氨酸D 甲硫氨酸3. 关于温度对

34、酶活性的影响，以下哪项不对？（A）A 酶都有一个最适温度，是酶的特征常数之一B 在一定的温度范围内温度升高可加速酶促反应C 高温能使大多数酶变性D 低温保存酶制剂不破坏酶活性4. DNA 碱基配对主要靠（C） 。A 范德华力B 疏水作用C 氢键D 盐键5. 当蛋白质处于等电点时，可使蛋白质分子的（D）A、稳定性增加B、表面净电荷不变C、表面净电荷增加D、溶解度最小6. 哪个是符合密码子 5-GUA-3的反密码子（C） 。A5-CAU -3B5-UCT -3C5-UAC-3D5-AUG-37. 酶的竞争性抑制剂将有下列哪一种动力学效应？（A）AKm 值增加，Vmax 不变BKm 值减小，Vmax

35、 不变CKm 值不变，Vmax 增大DKm 值不变，Vmax 减小EKm 值和 Vmax 都减小8. 煤气中毒主要是因为煤气中的一氧化碳 (C)A 抑制了巯基酶的活性，使巯基酶失活B 抑制了胆碱酯酶的活性，使乙酰胆碱累积，引起神经中毒的症状C 和血红蛋白结合后，血红蛋白失去了运输氧的能力，使患者因缺氧而死亡；D 抑制了体内所有酶的活性，使代谢反应不能正常进行；E以上说法都不对9. 为获得不变性的蛋白质，常用的方法为（D）A 用三氯乙酸沉淀B 用苦味酸沉淀C 用重金属盐沉淀D 低温盐析E 常温醇沉淀10. 核酸变性后，可发生哪种效应？（B）二、A、减色效应B、增色效应名词解释1. 必须氨基酸必须

36、氨基酸：指人（或其它脊椎动物）自己不能合成，需要从食物中获得的氨基酸。2. 冈崎片断冈崎片断：一组短的 DNA 片段，是在 DNA 复制的起始阶段产生的，随后又被连接酶连接形成较长的片段。3. 翻译翻译：以 mRNA 为模板合成蛋白质的过程。4. 密码子密码子：存在于信使 RNA 中的三个相邻的核苷酸顺序，是蛋白质合成中某一特定氨基酸的密码单位。5. 蛋白质变性蛋白质变性：生物大分子的天然构象遭到破坏导致其生物活性丧失的现象。6. 酶酶：具有特异性的高效催化剂。7. 糖酵解糖酵解：葡萄糖经无氧分解生成乳酸的过程成为糖酵解作用。8. 编码链编码链：双链DNA 中，不能进行转录的那一条DNA 链，

37、该链的核苷酸序列与转录生成的RNA 的序列一致（在 RNA 中是以 U 取代了 DNA 中的 T） 。三、简答计算1.可转化的葡萄糖质量为：5000*40%*90%=1800kg1 1得葡萄糖的摩尔数：1800*104/180=104mol一分子葡萄糖经酵解转化为乙醇的总反应为：一分子葡萄糖经酵解转化为乙醇的总反应为：葡萄糖葡萄糖2Pi2Pi2ADP2ADP2H2H2 2 乙醇乙醇2CO22CO22ATP2ATP2H2O2H2O由于 1mol 葡萄糖经生醇发酵可生成2mol 乙醇，因此得乙醇的摩尔数为2*104mol乙醇体积为 2*104*46/0.789=1.166*106cm3=1166L

38、酵母菌获得的能量为2*104mol ATP。2.6.02-阳3.22-阳9.74+阴3.5GUAGGACAAUGGGUGAAGUGA3（N）ValGlyGluTryValLys （C）4.米氏方程为：v VmaxS，其中 Km 为米氏常数。KmSES的形成速度：dES/dt k1EtESSES的分解速度： dES/dt k2ESk3ESk2k3ES推导过程：E S K1K3 ES E PK2反应体系处于稳态时，ES 的生成和分解速度相等，即k1EtESSk2 k3ESEtESS/ESk2 k3/k1令k2 k3/k1 KmESEtS/Km S反应即时速度v k3ES k3EtS/Km SA 式

39、V max k3ES k3EtB 式A 式/ B 式得v V maxS/Km S5.组成：DNA-T; 脱氧核糖；RNA-U，核糖，有稀有碱基；结构：DNA-由两反向平行的多核苷酸构成双螺旋, 碱基配对严格；RNA-单链，碱基配对不严格，局部形成双螺旋。这种结构可以形象地称为“发夹型”结构功能：DNA-遗传信息的携带；RNA-蛋白质表达。根据 RNA 的功能，可以分为 mRNA、tRNA 和 rRNA 三种。mRNA 是蛋白质合成的直接模板；tRNA 识别密码子，将正确的氨基酸转运至蛋白质合成位点；rRNA 是蛋白质合成机器核蛋白体的组成成分。生成方式：DNA 的复制是半保留、半不连续复制，两

40、条链都可以作为模板，需要一段 RNA 作为引物，且 DNA聚合酶具有较正功能； RNA 的转录是不对称转录， 合成是连续的， 不需要引物， 且 RNA 聚合酶没有校正改错功能。习题四答案1 2一、填空题1.葡萄糖，-1,4 糖苷键，-1,6 糖苷键2.280, Tyr, Trp, Phe3.4.5105 nm, 1.53106 nm4.16， 6.255.GC6.三叶草、倒”L”8.米氏常数 / Km9.蓝紫，脯氨酸 / Pro10. 211. 后随13. 反密码子，密码子二、选择题CABCCEBDAB一、填空题一、填空题、直链淀粉由通过连接而成。而支链淀粉除含此键外，还含有。、蛋白质在波长为

41、nm 的紫外光中有明显的吸收峰， 这是由、和三种氨基酸残基所引起的。、大肠杆菌 DNA 分子量 2.78109，设核苷酸残基的平均分子量为309，该 DNA 含有圈螺旋，其长度为。、大多数蛋白质中氮的含量较恒定，平均为_ _%，如测得 1 克样品含氮量为 10mg，则蛋白质含量为_%。、双链 DNA 中若碱基对含量高，则 Tm 值高。、tRNA 的二级结构呈形状，三级结构呈形状。、是酶的特征常数，表征酶的催化效率。、氨基酸与茚三酮发生氧化脱羧脱氨反应生成_ _色化合物，而_与茚三酮反应生成黄色化合物。、1分子葡萄糖转化为2分子乳酸净生成_分子ATP， 彻底氧化为CO2和H2O生成分子 ATP。

42、、DNA 复制时，不连续合成的链称为_链。、氨酰tRNA 分子中的_ _能与 mRNA 的_配对。二、选择题5.关于酶的叙述哪项是正确的？（）A所有的酶都含有辅基或辅酶B只能在体内起催化作用C大多数酶的化学本质是蛋白质D能改变化学反应的平衡点加速反应的进行E都具有立体异构专一性（特异性）6.酶的竞争性抑制剂将有下列哪一种动力学效应？（）AKm 值增加，Vmax 不变BKm 值减小，Vmax 不变CKm 值不变，Vmax 增大DKm 值不变，Vmax 减小EKm 值和 Vmax 都减小1 37.如果有一酶促方反应，S=1/2Km，v 等于多少 Vmax? （）A0.25B0.33C0.50D0.

43、75E18.下列化合物中除哪一种外都含高能磷酸键？（）AADTB 磷酸肌酸C6-磷酸葡萄糖D磷酸稀醇式丙酮酸9.在核酸分子中核苷酸之间连接的方式是（）A2-3磷酸二酯键B2-5磷酸二酯键C3-5磷酸二酯键D 肽键E糖苷键10. 参加 DNA 复制的酶类包括：(1) DNA 聚合酶；(2) 解链酶；(3) DNA 聚合酶；(4) RNA 聚合酶（引物酶） ；(5) DNA 连接酶。其作用顺序是： （）A(4)、(3)、(1)、(2)、(5)B(2)、(3)、(4)、(1)、(5)C(4)、(2)、(1)、(5)、(3)D(4)、(2)、(1)、(3)、(5)E(2)、(4)、(1)、(3)、(5

44、)11. 蛋白质变性是由于（）A、一级结构改变B、空间构象破坏C、辅基脱落D、蛋白质水解12. DNA 复制和转录过程具有许多异同点。下列关于DNA 复制和转录的描述中哪项是错误的？（）A在体内以一条 DNA 链为模板转录，而以两条DNA 链为模板复制B在这两个过程中合成方向都为53C复制的产物通常情况下大于转录的产物D两过程均需 RNA 引物EDNA 聚合酶和 RNA 聚合酶都需要 Mg2+13. 某双链 DNA 纯样品含 15的 A，该样品中 G 的含量为（）A35B15C30D2014. 核酸分子中储存、传递遗传信息的关键部分为（）A核苷酸B碱基序列C磷酸戊糖D磷酸戊糖骨架三，名词解释1

45、.酶的活性中心：酶分子中直接与底物相结合，并和酶催化作用直接有关的部位。2.必需氨基酸：人和哺乳动物不可缺少但又不能合成的氨基酸。3.糖酵解：葡萄糖经无氧分解生成乳酸的过程。4.核酸的 Tm 值：加热使一半 DNA 解链时的温度。5.竞争性抑制：与底物竞争性的结合酶的活性中心，它的结构与底物的结构相似，这种抑制可以通过提高底物的浓度来消除。6.半保留复制：双链 DNA 的复制方式，其中亲代链分离，每一子代DNA 分子由一条亲代链和一条新合成的链组成。7.冈崎片段：一组短的DNA 片段，是在 DNA 复制的起始阶段产生的，随后又被连接酶连接形成较长的片段。8.转录：以 DNA 为模版合成 RNA

46、 的过程。四、 简答计算1.米氏方程为：v 级级学学号号姓姓名名装装订订纸纸VmaxS，其中 Km 为米氏常数。KmS推导过程：E S K1K3 ES E PK21 4ES的形成速度：dES/dt k1EtESSES的分解速度： dES/dt k2ES k3ESk2 k3ES反应体系处于稳态时，ES 的生成和分解速度相等，即k1EtESSk2 k3ESEtESS/ESk2 k3/k1令k2 k3/k1 KmESEtS/Km S反应即时速度v k3ES k3EtS/Km SA 式V max k3ES k3EtB 式A 式/ B 式得v V maxS/Km S2.v VmaxSS 0.8 S 4K

47、 0.8VmaxmKmSKmS3.6.02-阳3.22-阳9.74+阴4.DNA 分子是由 2 条互相缠绕的多聚脱氧核苷酸链组成（简称 2 条 DNA 单链） ，反向平行（一条链为 5 3，另一条链为 35） ，空间走向为右手螺旋，有一个假想的螺旋轴（见自制模型，手指） 。P1572 条链靠链间的 H 键结合，H 键的产生符合碱基配对原则：AT，GC，P157，由电镜照片为证。右手螺旋的维持力主要是碱基堆积力，其次是氢键。DNA 的骨架为磷酸和脱氧核糖，在分子外面，戊糖平面螺旋轴，DNA 的侧链基团是碱基，在分子内部，碱基平面螺旋轴。螺距 34，直径 20，10bp/圈。分子背部有一条宽沟称为

48、大沟，分子腹部有一条窄沟叫小沟，复制和转录的有关酶就是付在大沟之处的。遗传信息储存在 DNA 分子的 bp 序中。意义：能够解释 DNA 的一切物理化学性质；实现了 DNA 的结构与生物功能之间的统一：精确的自我复制。5.蛋白质的一级结构：多肽链中氨基酸的排列顺序。主要化学键：肽键，有些蛋白质还包括二硫键。蛋白质的二级结构：多肽链本身的折叠和盘绕方式，并不涉及氨基酸侧链R 基团的构象。维持二级结构的力量：氢键和R 基团的影响。蛋白质的三级结构：即蛋白质的三维结构、构象，指其中所有原子的空间排布，是结构域再经过卷曲和折叠后形成的。由非共价键二硫键和次级键维持。蛋白质的四级结构：多条肽链通过非共价

49、键形成的聚合体的结构。习题五参考答案习题五参考答案一、选择题一、选择题( B )1.下列关于 -螺旋结构的叙述中哪个是错误的？A为右手螺旋 B肽平面围绕多个轴旋转1 5C螺旋一周为 3.6 个氨基酸残基 D 肽链内形成氢键( C )2.如果反密码子是 UGA，它可识别下列哪个密码子？A ACU B CUA C UCA D UAC( B )3.血浆蛋白质 pI 大多在 56 之间，它们在血液中的主要存在形式是：A.带正电荷 B. 带负电荷C兼性离子D非极性离子 E疏水分子( C )4. 下列关于原核和真核生物DNA复制的描述中哪一项是不正确的?A 以复制叉定点复制,通常为双向等速复制 B 复制方

50、向为53C 前导链和随从链都是不连续复制 D 必有冈崎片断,必须切去引物E 最后由 DNA 连接酶连接( E )5. 关于 酶的 性质 哪一 种说法 不对 ？ A 高效催 化性 B 专一性 C 反应 条件 温和 D 可调节 控制E可使 反应 平衡 向有 利于 产物 方向移 动( B )6.下列哪种试剂可使蛋白质的二硫键打开?A溴化氰 B -巯基乙醇 C碘乙酸 D2,4-二硝基氟苯( C )7.氨基酸顺序测定仪是根据哪种方法建立的？（A）2,4-二硝基氟苯法 (B)丹磺酰氯法 (C)苯异硫氰酸酯法 (D)酶水解法( B )8. DNA 复制需要解链酶引物酶DNA 聚合酶拓扑异构酶DNA 连接酶。

51、 其作用的顺序A ， B ，C ， D ，E ，( C )9. 下列关 于酶 活性 中心 的描述 哪个 是正 确的 ？A酶分子 上的 几个 必需 基团 B酶分 子与 底物 的结 合部 位 C 酶分子 结合 底物 并发 挥催化 作用 的三 维结 构区 域 D 酶分子 催化 底物 转化 的部 位( C )10.DNA 中含有18.4% 的A时，其 碱基C+G% 总含量 为多 少？ A36.8 B37.2 C 63.2 D 55.2;( E )11.mRNA 作为蛋白质合成的模板，根本上是由于A.含有核糖核苷酸；B.代谢快；C.含量少；D.由 DNA 转录而来；E.含有密码子( D )12. 热变

52、性的DNA具有 下列哪 种特 征？ A 核苷酸 间的 磷酸 二酯 键断 裂 B 形成三 股螺 旋C260nm 处的 光吸 收下降 D GC 对的 含量 直接 影响 Tm值( C )13.下列关于氨基酸密码的叙述哪一项是正确的A.由 DNA 链中相邻的三个核苷酸组成；B.由 tRNA 链中相邻的三个核苷酸组成；C.由 mRNA 链中相邻的三个核苷酸组成；D.由 rRNA 链中相邻的三个核苷酸组成；E.由多肽链中相邻的三个氨基酸组成( B )14. 某一 符合 米氏 方程 的酶， 当S=2Km 时， 其反 应速度V等于 ： AVmax B2/3Vmax C3/2 Vmax D2Vm ( D )15

53、. 下列 那种 因素 不使 酶活力 发生 变化 ？A增高温 度B加抑 制剂 C改变pH D 加 硫 酸 铵( D )16.生物体编码 20 种氨基酸的密码子个数A.16；B.61；C.20；D.64；E.60( E )17.真核生物在蛋白质生物合成中的启始tRNA 是A.亮氨酸 TrnA；B.丙氨酸 tRNA；C.赖氨酸 tRNA；D.甲酰蛋氨酸 tRNAE.蛋氨酸 tRNA( A )18. 下列 哪一 项不 是酶 具有高 催化 效率 的因 素?A有调控 能力 B 酸碱 催化 C “张 力” 和“ 形变 ” D邻近 定位 效应( A )19.反密码子中的哪个碱基在密码子阅读中摆动？A.第一个；

54、B.第二个；C.第一和第二个；D.第二和第三个；E.第三个1 6( B )20.L- 氨基酸 氧化 酶只 能催化L-氨基酸 的氧 化， 此种专一 性属 于：A几何专 一性 B 立体 异构 专一性 ， C结构 专一 性 D绝对专 一性( D )21.下列关于蛋白质四级结构的论述哪项是正确的。A由多个相同的亚基组成 B由多个不同的亚基组成C一定是由种类相同而不同数目的亚基组成 D亚基的种类和数目均可不同( A )22.下列关于蛋白质分子中肽键的叙述哪项是错误的？ (A) 能自由旋转(B)比通常的 C-N 单键短(C)通常有一个反式结构(D) 具有部分双键性质( B )23. 热变性的 DNA 在适

55、当条件可以复性，条件之一是： A 骤然冷却 B 缓慢冷却 C 能缩 D 加入浓的盐( B )24.下列关于蛋白质分子三级结构的叙述哪项是错误的？A天然蛋白质分子均有这种结构 B具有三级结构的多肽链都具有生物学活性C三级结构的稳定性主要由次级键维持 D亲水基团大多聚集在分子的表面( B )25.原核生物蛋白质生物合成中肽链延长所需的能量来源于A.ATP；B.GTP；C.GDP；D.UTP；E.CTP二、判断题二、判断题( )1、胰岛素是一种能提高血糖的激素；( )2、DNA 是生物界中唯一的遗传物质；()3、若 DNA 一条链的碱基顺序是 pCpTpGpGpApC,则另一条链的碱基顺序是pGpA

56、pCpCpTpG.；()4、天然氨基酸都有一个不对称的-碳原子；()5、米氏常数是酶的特征性常数，与底物无关；()6、稀碱溶液可以水解DNA，但不可以水解 RNA；( )7、维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键；()8、DNA 是遗传信息的载体，只存在于细胞核的染色质中；()9、少量中性盐使得蛋白质溶解度升高，过量（如达到饱和程度）中性盐使得蛋白质溶解度下降；()10、在DNA 变性过程中，总是GC 对丰富区先熔解开，形成小泡；()11、蛋白质分子的肽链数就是它的亚基数；()12、糖类的主要生理功能之一是为生物提供能量；()13、在底物浓度极低时，酶促反应初速度与底物浓度成正比；()14、糖

57、酵解过程无需氧的参加；()15、Sanger 提出的核酸序列分析法是双脱氧链终止法。9.填充题填充题1、 tRNA 上的反密码可以识别 mRNA 上的密码。2、 DNA 和 RNA 中的碱基不同的是 T和 U。3、脱氧核糖核酸 DNA 双链中若 GC% 含量高，则 Tm 值高。4、转移核糖核酸 tRNA 的二级结构为三叶草形状，三级结构为倒 L 形状5、脱氧核糖核酸（DNA）的基本结构单位是脱氧核糖核苷酸。6、无论是DNA 还是RNA 都是由许许多多核苷酸组成，通过 磷酸二酯键 连接而成的。7、两性离子是指即带正电荷又带负电荷的离子。8、核酸研究中，地依酚法常用来测定 RNA ，二苯胺法常用来

58、测定 DNA 。9、 Watson-Crick提出的B-DNA双螺旋结构的螺距为_ 3.4 nm，相邻两核苷酸之间的夹角是 36。10、核糖核酸RNA主要分为 tRNA、 mRNA和 rRNA三种类型。四、问答题四、问答题1 71、 新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖浓度高。 可是掰下的玉米贮存几天后就不那么甜了， 因为 50糖已经转化为淀粉了。如果将新鲜玉米去掉外皮后浸入沸水几分钟，然后于冷水中冷却，储存在冰箱中可保持其甜味。这是什么道理？答：采下的玉米在沸水中浸泡数分钟，可以使其中将糖转化成淀粉的酶基本失活，而后将玉米存放在冰箱中，可以使残存的酶处于一种低活性状态，从而保持了玉米的甜度。

59、2、为什么 RNA 易被碱水解，而 DNA 不容易被碱水解？答:因为 RNA 含有的 2-OH 起到分子内催化剂作用，水解能形成中间产物2,3-环状中间产物，而 DNA为脱氧核糖核酸，2碳原子上连接的是两个氢原子，不含 2-OH，因此无分子内催化剂的作用，磷酸二酯键不能被打断。3、有一条脱氧核糖核酸链，结构如下：5-ACCGTAACTTTAG-3请写出与该链互补的 DNA 链和 RNA 链的结构。如果该链为一条 DNA 编码链，写出由它转录产生的mRNA 序列。答：与之互补的 DNA 链： 5-CTAAAGTTACGGT-3；与之互补的 RNA 链：5-CUAAAGUUACGGU-3；mRNA

60、 链：5-ACCGUAACUUUAG-3；4、mRNA 遗传密码排列顺序翻译成多肽链的氨基酸排列顺序，保证准确翻译的关键是什么？答： 主要靠两点： 氨酰 tRNA 合成酶催化反应的专一性确保了什么氨基酸与什么tRNA 结合形成氨酰 tRNA，也就是说它们的结合是特异性的，而不是随机的；氨酰 tRNA 通过其上面的反密码子与 mRNA 上的密码子的特异性配对来进行结合，从而使得某种氨基酸与某种密码子一一对应，这样也就确保了mRNA 遗传密码排列顺序翻译成正确的多肽链的氨基酸排列顺序。5、假如你从一种新的病毒中提取到它的核酸：用两种不同方法确定它是 DNA 还是 RNA？通过一种简易方法判断它是双

61、链还是单链？答：判断是DNA 还是 RNA：颜色反应：DNA 的二苯胺反应会形成蓝色化合物，RNA 的苔黑酚反应会形成绿色化合物；酸水解后进行单核苷酸分析（层析或电泳） ，含 U 无 T 的为 RNA，含 T 无 U 的为 DNA；依据是否有增色效应可判断它是双链还是单链。双链核酸加热变性后有增色效应，单链核酸没有这种现象。6、别构酶有何特性？答：别构酶是一种活性可调节的酶，分子中含有两个或两个以上的亚基。除酶活性中心外还有调节部位。别构酶具有协同效应：同种效应和异种效应：由配体是否相同来区分；正协同效应和负协同效应：根据配体之间是互相促进还是降低它们与酶蛋白的结合能力来区分。7、一种病毒的核

62、酸链具有以下组成：A=32%, G=16%, T=40%, C=12% （摩尔含量比），请问该核酸是DNA 还是 RNA？它的结构具有什么特点？答：是DNA，因为含有碱基T。从A、T、G 和 C 的含量比可以看出，该病毒DNA 组成中嘧啶碱数目与嘌呤碱基数目不等，A 和 T 以及 G 和 C 的含量不等，所以不能构成双螺旋结构，可能是一条单链DNA。8、一个二肽酶对二肽 Ala-Gly 和二肽 Leu-Gly 的 Km 分别为 2.810-4 和 3.510-2，哪一个二肽是酶的最适底物？该酶的两个非竞争性抑制剂的Ki 值分别为 5.710-2 和 2.610-4。哪一个是最强的抑制剂？答：可

63、根据米氏方程及存在抑制剂时的酶促反应速率方程判断： Km 值小的 Ala-Gly 是最适底物；Ki 值最小的那个是最强的抑制剂。1 89、1/v 对 1/S的双倒数作图得到的直线斜率为 1.210-3min，在 1/v 轴上的截距为 2.010-2nmol-1mlmin。计算 Vmax 和 Km。答：斜率 S=(1/ Vmax)(1/ Km)= Km/ Vmax=1.210-3min,又因为1/Vmax=2.010-2nmol-1ml min，所以， Vmax50 nmol ml-1 min-1；Km6.0102 nmolml-1。、请简单论述 DNA 变性的特性。答：DNA 的变性是指 DN

64、A 双螺旋区的多聚核苷酸链间的氢键断裂，变成单链结构的过程。当DNA 的稀盐溶液加热到 80-100时，双螺旋结构即发生解体，两条链彼此分开，形成无规线团。DNA 变性后，它的一系列性质也随之发生变化，如粘度降低、紫外吸收(260 nm)值升高等。习题六答案习题六答案一、名词解释1.SSB:SSB:单链结合蛋白的英文缩写名。在DNA 复制过程中结合在刚解开的单链上防止它重新结合或被DNA酶降解。2. Exon: Exon:即外显子，是指断裂基因中携带遗传信息的DNA 片段。3. 超二级结构超二级结构: :由蛋白质的二级结构经过折叠盘绕形成的介于蛋白质二级结构和三级结构之间的一种蛋白质结构。4.

65、 亲和层析亲和层析: :指利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别和结合能力建立起来的分离纯化方法。5. 结构域结构域: :介于超二级结构和三级结构之间的一种蛋白质空间结构，由蛋白质二级结构进一步折叠盘绕形成。6. 编码链编码链: :DNA 双链中携带遗传信息的那条单链。7. 发夹结构发夹结构: :RNA 单链线型分子可以通过自身回折形成局部双链结构。这种由双链部分和非双链环状部分组成的结构型似发夹，被称为发夹结构。8. 盐析盐析: :向蛋白质溶液中添加大量中性盐后出现的蛋白质沉淀析出的现象。9. 增色效应增色效应: :核酸由双链变成单链后在260nm 处的吸光度增加的现象。10.反式作用因子反式

66、作用因子: :与顺式作用元件进行特异性结合的蛋白质因子被称为反式作用因子。10. 问答题1.生物分子杂交技术（印迹法）有几种？对它们分别进行简要说明。答：Southern 印迹法：将凝胶电泳分离的DNA 片段转移至硝酸纤维素膜上后再与经标记的DNA 探针进行杂交；Northern 印迹法：将 RNA 经电泳变性后转移至纤维素膜上再进行杂交；Western 印迹法：根据抗体和抗原可以结合的原理，采用核酸分子杂交类似方法进行蛋白质分析；2.采用高浓度 NaCl 溶液溶解以及苯酚抽提的方法可以从破碎的细胞匀浆中分离出DNA。请具体说明实验步骤和原理。答：通常细胞中的核酸物质都与蛋白质结合在一起，形成

67、核蛋白。DNA 蛋白溶于高浓度氯化钠溶液而不易溶于低浓度的氯化钠溶液，RNA 蛋白则相反。利用这一点将核蛋白加入到 1 摩尔浓度的氯化钠溶液中可以将 DNA 蛋白和 RNA 蛋白分离开。 接下来用苯酚提取法去蛋白。 用水饱和的苯酚与 DNA 蛋白震荡后冷冻离心。苯酚能使蛋白质迅速变性，因此经过离心 DNA 溶于上层的水相中。经过多次苯酚处理后就可以得到天然状态的 DNA。1 93. 为什么 DNA 和 RNA 可以采用定糖法进行含量测定？试以各自测定的具体方法为例加以说明。答：核糖核酸的测定：RNA 分子中的核糖和浓盐酸或浓硫酸作用脱水生成糠醛。糠醛再与地衣酚反应生成深绿色化合物。反应产物在6

68、60nm 处有最大吸收，并且与 RNA 的浓度成正比。脱氧核糖核酸的测定：DNA 分子中的脱氧核糖和浓硫酸作用脱水生成-羟基-酮基戊醛，再与二苯胺反应生成蓝色化合物。反应产物在595nm 处有最大吸收，并且与DNA 的浓度成正比。4. 在严格厌氧条件下的酒精发酵过程中，使用放射性标记的碳源进行示踪原子实验。试问在起始的葡萄糖分子的什么位置上标记14C ，才能使它出现在乙醇的羟基碳（连接羟基的碳原子）位置上？使用酒精发酵过程相关主要化合物分子式加以说明。5. 酶总共有几大类？它们各自催化何种反应？用曲线表示并简要说明底物浓度、温度以及pH 值对酶促反应速度的影响。答：酶的分类以及不同类别的酶所催

69、化的反应如下： 氧化还原酶类：催化氧化还原反应； 转移酶类：催化功能基团的转移； 水解酶类：催化水解的反应； 裂合酶类：催化水、氨或二氧化碳的去除或加入； 异构酶类：催化各种类型的异构作用； 合成酶类：催化消耗 ATP 的成键反应；不同因素对酶促反应速度的影响如下：6. 真核生物蛋白质合成与原核生物相比有哪些主要区别？答：主要差别在于：参与翻译的起始因子 eIF 较多，如 eIF2，eIF3，eIF4；真核细胞的核糖体较大（80s） ；形成起始复合物的氨基酸是甲硫氨酸而不是甲酰甲硫氨酸；形成起始复合物的机制不同；真核细胞 mRNA 为单顺反子，原核细胞mRNA 为多顺反子；与原核细胞的延长因子

70、EF-TU 和 EF-G 对应的真核细胞延长因子为EF1 和 EF2。7.一个未知肽的氨基酸组成为： Asp1, Ser1, Gly1, Ala1,Met1, Phe1和 Lys2。对其进行一系列分析，结果如下：DNFB 与之反应再酸水解得到DNP-Ala；经胰凝乳蛋白酶消化后从产物中分离出一个纯四肽，其组成为Asp1, Gly1, Lys1, Met1, 此四肽的 DNFB 反应降解产物为 DNP-Gly；该八肽经胰蛋白酶消化后可得到组成分别为 Lys1、Ala1、Ser1 以及 Phe1、Lys1 和 Gly1 的两个三肽及一个二肽。此二肽经CNBr 处理后游离出自由天冬氨酸。请推导该八肽

71、序列。答：根据结果，该序列为：Ala-（Asp1, Ser1, Gly1, Met1, Phe1和 Lys2） ；根据结果，该序列为：Ala-（Ser,Lys）-Phe- Gly (Asp, , Met,和 Lys） ；根据结果，该序列为：Ala-Ser-Lys-Phe- GlyLys-MetAsp；8.什么是同工酶？以乳酸脱氢酶为例说明它的组成。为什么能用电泳法对乳酸脱氢酶进行分离？举例说明乳酸脱氢酶在疾病诊断中的应用。 （6 分）2 0答：催化同种反应的不同的酶称为同工酶。以乳酸脱氢酶为例，9. 原核生物和真核生物mRNA 的结构特点是什么？答：原核细胞 mRNA 结构特点：一般为多顺反子

72、结构；转录与翻译是耦合的；mRNA 分子包括先导区，翻译区和非翻译区，即在两个顺反子之间存在插入序列；真核细胞 mRNA 结构特点：真核细胞 mRNA5末端有帽子结构，3末端有 polyA 尾巴；真核细胞的 mRNA 一般为单顺反子；真核细胞 mRNA 的转录与翻译是分开进行的；10. 比较淀粉、糖原和纤维素在结构和组成方面的异同，并简述它们的理化性质答：三者皆为由葡萄糖分子通过糖苷键连接而成的多糖生物大分子。淀粉分直链淀粉和支链淀粉。直链淀粉是葡萄糖分子通过-1，4 糖苷键相连而成的直链结构，支链淀粉中每两个直链间的连接键是-1，6 糖苷键。淀粉在冷水中不溶解，但是在加热的情况下可以吸收水分

73、而膨胀成糊状。直链淀粉遇碘成蓝色，支链淀粉遇碘成紫红色。糖原又称动物淀粉，与淀粉相同也是由-D-葡萄糖构成的同聚多糖，结构上则与支链淀粉相似，也是带有-1，6 分支点的-1，4 葡萄糖多聚物，但分支比支链淀粉多。糖原遇碘成红色。纤维素是由-D-葡萄糖通过-1，4 糖苷键相连而成的同聚多糖。纤维素不溶于水，稀酸和稀碱。纤维素中每个葡萄糖残基含有三个自由羟基，因此能与酸形成酯。11. 简述血糖的来源和去路。人体如何维持血糖水平的恒定？答：血糖主要来源于对食物的消化与吸收，肝糖原的分解以及非糖物质经过糖异生产生的糖；血糖的主要去路是彻底分解氧化释放能量，合成糖原，或其它糖类物质以及用于合成脂肪，氨基

74、酸等其它非糖物质。体内调节血糖水平的主要激素有胰岛素，胰高血糖素和肾上腺素。胰岛素通过多方面作用降低血糖：促进葡萄糖转运进入细胞，加速糖原合成，加快糖的有氧氧化，抑制糖异生作用，减少脂肪动员等。胰高血糖素则通过以下方式升高血糖：抑制糖原合成，促进糖原分解，抑制糖酵解，促进糖异生，加速脂肪动员。肾上腺素也是强有力的升高血糖的激素，主要通过加速糖原分解和乳酸循环来实现。12.什么是蛋白质的变性与沉淀？举例说明蛋白质变性与沉淀的关系。答：蛋白质分子由于受到某些理化因素的影响，空间构象被破坏，失去了原有的生物活性的现象即蛋白质变性。蛋白质分子的溶解度下降导致其从溶液中析出的现象即蛋白质沉淀。 使蛋白质

75、沉淀的方法有盐析法，有机溶剂沉淀法等。如果采用某些较强烈的方法如加热，有机酸，重金属盐等使蛋白质沉淀的话，沉淀出的蛋白质会变性。但是用盐析等较温和的方法沉淀蛋白质时沉淀出的蛋白质不会变性。变性的蛋白质一般会沉淀，但是有些蛋白质的稀溶液用酸、碱或加热的方法变性后并不沉淀。例如，将牛奶煮沸，其中的酪蛋白变性了，但并没有沉淀出来。13. lac 操纵子的基本结构是怎样的？它是如何通过阻遏物和CAP 调节基因表达的？答： 乳糖操纵子结构如下图所示：结构基因部分由三个基因组成，它们是编码 -半乳糖苷酶的基因 Z，编码通透酶的基因 Y，编码半乳糖苷乙酰化酶的基因a。2 1位于结构基因前面的是调控区，由启动

76、子 P 和操纵区 O 组成。位于调控区前面的是阻遏物基因 I。此外，启动子上游还有一段短序列是分解代谢基因活化蛋白CAP 的结合区。 结构基因表达调控的方式如下：无乳糖时，I 基因表达产生的阻遏物可与操纵区结合，从而挡住 RNA 聚合酶前移的通路，结构基因无法转录；当乳糖存在时， 乳糖作为诱导物可以与阻遏物结合， 并使得阻遏物发生变构而不能与操纵区结合，因此结构基因转录，产生三种消耗乳糖的酶；当乳糖和葡萄糖都存在时，细菌通常会先利用葡萄糖然后再利用乳糖。在利用葡萄糖时乳糖操纵子表达较差。当葡萄糖消耗完时，乳糖操纵子的表达增强。这种作用是通过CAP 实现的。当 cAMP 与 CAP 结合后，后者

77、构象发生变化，对 DNA 的亲和力增强。乳糖操纵子中 CAP 的结合位点紧接于启动基因上游区， cAMP-CAP 复合物结合到 DNA 上的 CAP 位点后，则会促进 RNA 聚合酶结合到该启动基因上，进行转录。葡萄糖能显著降低细菌细胞中 cAMP 的含量，这样复合物 cAMP-CAP 减少，影响乳糖操纵子转录的启动。当葡萄糖消耗完，cAMP 含量上升时，乳糖操纵子的转录启动。所以CAP 是一种正调节蛋白，其作用需要 cAMP 参与。习题七答案习题七答案一、名词解释一、名词解释1. 双缩脲反应双缩脲反应: :指蛋白质在碱性溶液中与 Cu2+产生紫红色的反应。它是蛋白质分子中肽键的反应，肽键越多

78、反应颜色越深。2. 顺式作用元件顺式作用元件: :指位于 DNA 上的特定序列如启动子和增强子等元件，通过它们可以控制基因的转录。3. 编码链编码链: :DNA 双链中携带遗传信息的那条单链。4.增强子增强子: :指在真核细胞中发现的一些能增强启动子活性的核苷酸序列。5.回文结构回文结构: :在 DNA 的某些片段中， 有些以某一假想轴成 180旋转对称的序列， 即顺读和逆读相同的序列。这就是回文结构。6.基因组学基因组学: :指研究生物基因和基因组的组成，结构，稳定性以及其功能的科学。7.盐溶盐溶: :在中性盐溶液中，低浓度的盐能促进蛋白质溶解的现象即盐溶。8.疏水键疏水键: :指非极性基团

79、为避开水而互相靠近产生的作用力。9. Intron:Intron:位于断裂基因中的不携带遗传信息的DNA 片段。10.减色效应减色效应: :核酸由单链变成双链后在260nm 处的吸光度下降的现象。11.11. 问答题问答题1.mRNA 遗传密码排列顺序翻译成多肽链的氨基酸排列顺序，保证准确翻译的关键是什么？答：关键有两点：氨酰 tRNA 合成酶能确保氨基酸与tRNA 结合的特异性， 即某种氨基酸只与特定的tRNA 结合；通过密码与反密码的配对， 特定的氨酰 tRNA 只会与特定的 mRNA 上的密码配对结合；通过上述两点，保证了特定氨基酸与特定密码子的对应关系，也就保证了翻译的准确性。2 22

80、.DNFB 方法，DNS 方法和 Edman 方法主要用于什么方面？它们之间的主要区别是什么？答：DNFB 方法，DNS 方法和 Edman 方法都可以用于多肽链 N-末端氨基酸的分析测定。除此之外，Edman 方法还可以用于多肽链序列的分析。DNS 方法原理与 DNFB 方法的原理相同，但是灵敏度高于 DNFB 法且反应后不必提取就可直接进行鉴定。Edman 方法与 DNFB 方法和 DNS 方法相比， 每测定一个 N-末端氨基酸后余下的肽段仍然完整可供继续测定下一个氨基酸，因此该法可用于测定蛋白质整个序列。3. 蛋白质在生命活动过程中的重要作用主要有哪些？答：蛋白质在生命活动过程中的重要作

81、用主要有：生物催化作用；代谢调节作用；免疫保护作用；转运和储存的左右；运动与支持作用；控制生长与分化作用；接受和传递信息的作用；生物膜的功能；记忆和识别功能；4. 在严格厌氧条件下的酒精发酵过程中，使用放射性标记的碳源进行示踪原子实验。试问在起始的葡萄糖分子的什么位置上标记14C ，才能使它出现在乙醇的甲基碳位置上？使用酒精发酵过程相关主要化合物分子式加以说明。16 假定你从一种新发现的病毒中提取了核酸，请用你所熟悉的方法确定： 它是 DNA 还是 RNA？它是单链还是双链结构？写出所用方法的实验步骤加以说明。答：可以通过定糖法来确定：将样品与浓硫酸反应，再向其中加入地衣酚试剂，如果出现深绿色

82、，说明样品是 RNA，否则是 DNA；可通过增色效应来判断它是双链还是单链。先测定样品的A260， 然后通过加热使核酸变性，再测定其A260，如果升高了说明该核酸是双链；如果不变说明是单链。6.酶和化学催化剂之间的共同点是什么？酶与化学催化剂相比的不同之处又是什么？答：共同点：用量少效率高；不改变反应平衡点只是缩短反应到达平衡点的时间；降低反应所需活化能；反应前后酶和催化剂本身不发生改变。不同点：绝大多数酶是蛋白质，因此酶更容易受环境因素的影响；通常酶的催化效率更高；酶的专一性更强；酶的活性可被调节；一些特殊的化学反应只能通过酶来催化；7.酶作用高效率的机制是什么？DNA 双螺旋结构的稳定因素

83、是什么？答：酶作用高效率的机制是：2. 底物的“趋近”和“定向”效应；3. 底物变形与张力作用；4. 共价催化作用；5. 酸碱催化作用；DNA 双螺旋结构的稳定因素是：互补碱基之间的氢键；碱基堆积力；离子键；8.一个未知肽的氨基酸组成为： Asp1, Ser1, Gly1, Ala1,Met1, Phe1和 Lys2。对其进行一系列分析，结果如下：DNFB 与之反应再酸水解得到DNP-Ala；经胰凝乳蛋白酶消化后从产物中分离出一个纯四肽，其组成为Asp1, Gly1, Lys1, Met1, 此四肽2 3的 DNFB 反应降解产物为 DNP-Gly；该八肽经胰蛋白酶消化后可得到组成分别为 Ly

84、s1、Ala1、Ser1 以及 Phe1、Lys1 和 Gly1 的两个三肽及一个二肽。此二肽经CNBr 处理后游离出自由天冬氨酸。请推导该八肽序列。答：根据结果，该序列为：Ala-（Asp1, Ser1, Gly1, Met1, Phe1和 Lys2） ；根据结果，该序列为：Ala-（Ser,Lys）-Phe- Gly (Asp, , Met,和 Lys） ；根据结果，该序列为：Ala-Ser-Lys-Phe- GlyLys-MetAsp；9. Southern 印迹法的基本步骤是什么？答：将 DNA 样品经限制性内切酶降解后，用琼脂糖凝胶电泳分离DNA 片段，将胶浸泡在 NaOH 中进行

85、DNA 变性，然后将变性DNA 片段转移到硝酸纤维素膜上在80烤 4-6 小时。使DNA 固定在膜上，再与标记的变性DNA 探针进行杂交，杂交反应在较高盐浓度和适当温度（68）下进行 10 多小时，经洗涤除去未杂交的标记探针、将纤维素膜烘干后进行放射自显影即可鉴定待分析的DNA 片段。10.什么是凝胶过滤？试以葡聚糖凝胶过滤为例说明它是如何将大小不同的物质分离开的。答：凝胶过滤又名分子筛层析或分子排阻层析，是指利用不同物质分子量的差异通过具有分子筛性质的凝胶对它们进行分离的方法。常用的凝胶有多种，以葡聚糖凝胶为例。它是由葡萄糖和交联剂形成的具有三维空间的网状结构物，两者的比例和反应条件决定其交

86、联度的大小，即孔径大小，用G 表示。G 越小，交联度越大，孔径越小。当蛋白质的直径大于凝胶的孔径时，被排阻于胶粒之外；当蛋白质的直径小于凝胶的孔径时，则进入凝胶。在层析洗脱时，大分子受阻小而先流出，小分子受阻大而后流出，结果使得大小不同的物质分离。11. 比较淀粉、糖原和纤维素在结构和组成方面的异同，并简述它们的理化性质答：三者皆为由葡萄糖分子通过糖苷键连接而成的多糖生物大分子。淀粉分直链淀粉和支链淀粉。直链淀粉是葡萄糖分子通过-1，4 糖苷键相连而成的直链结构，支链淀粉中每两个直链间的连接键是-1，6 糖苷键。淀粉在冷水中不溶解，但是在加热的情况下可以吸收水分而膨胀成糊状。直链淀粉遇碘成蓝色

87、，支链淀粉遇碘成紫红色。糖原又称动物淀粉，与淀粉相同也是由-D-葡萄糖构成的同聚多糖，结构上则与支链淀粉相似，也是带有-1，6 分支点的-1，4 葡萄糖多聚物，但分支比支链淀粉多。糖原遇碘成红色。纤维素是由-D-葡萄糖通过-1，4 糖苷键相连而成的同聚多糖。纤维素不溶于水，稀酸和稀碱。纤维素中每个葡萄糖残基含有三个自由羟基，因此能与酸形成酯。12.什么是蛋白质的变性与沉淀？举例说明蛋白质变性与沉淀的关系。答：蛋白质分子由于受到某些理化因素的影响，空间构象被破坏，失去了原有的生物活性的现象即蛋白质变性。蛋白质分子的溶解度下降导致其从溶液中析出的现象即蛋白质沉淀。 使蛋白质沉淀的方法有盐析法，有机

88、溶剂沉淀法等。如果采用某些较强烈的方法如加热，有机酸，重金属盐等使蛋白质沉淀的话，沉淀出的蛋白质会变性。但是用盐析等较温和的方法沉淀蛋白质时沉淀出的蛋白质不会变性。变性的蛋白质一般会沉淀，但是有些蛋白质的稀溶液用酸、碱或加热的方法变性后并不沉淀。例如，将牛奶煮沸，其中的酪蛋白变性了，但并没有沉淀出来。13. lac 操纵子的基本结构是怎样的？它是如何通过阻遏物和CAP 调节基因表达的？答： 乳糖操纵子结构如下图所示：结构基因部分由三个基因组成，它们是编码-半乳糖苷酶的基因 Z，编码通透酶的基因Y，编码半乳糖苷乙酰化酶的基因a。2 4位于结构基因前面的是调控区，由启动子 P 和操纵区 O 组成。

89、位于调控区前面的是阻遏物基因 I。此外，启动子上游还有一段短序列是分解代谢基因活化蛋白CAP 的结合区。 结构基因表达调控的方式如下：无乳糖时，I 基因表达产生的阻遏物可与操纵区结合，从而挡住 RNA 聚合酶前移的通路，结构基因无法转录；当乳糖存在时， 乳糖作为诱导物可以与阻遏物结合， 并使得阻遏物发生变构而不能与操纵区结合，因此结构基因转录，产生三种消耗乳糖的酶；当乳糖和葡萄糖都存在时，细菌通常会先利用葡萄糖然后再利用乳糖。在利用葡萄糖时乳糖操纵子表达较差。当葡萄糖消耗完时，乳糖操纵子的表达增强。这种作用是通过CAP 实现的。当 cAMP 与 CAP 结合后，后者构象发生变化，对 DNA 的

90、亲和力增强。乳糖操纵子中 CAP 的结合位点紧接于启动基因上游区， cAMP-CAP 复合物结合到 DNA 上的 CAP 位点后，则会促进 RNA 聚合酶结合到该启动基因上，进行转录。葡萄糖能显著降低细菌细胞中 cAMP 的含量，这样复合物 cAMP-CAP 减少，影响乳糖操纵子转录的启动。当葡萄糖消耗完，cAMP 含量上升时，乳糖操纵子的转录启动。所以CAP 是一种正调节蛋白，其作用需要 cAMP 参与。习题八习题八一、选择题一、选择题( B B )1.下列关于 -螺旋结构的叙述中哪个是错误的？A为右手螺旋 B肽平面围绕多个轴旋转C螺旋一周为 3.6 个氨基酸残基 D 肽链内形成氢键( C

91、C )2.如果反密码子是 UGA，它可识别下列哪个密码子？A ACU B CUA C UCA D UAC( B B )3.血浆蛋白质 pI 大多在 56 之间，它们在血液中的主要存在形式是：A.带正电荷 B. 带负电荷C兼性离子D非极性离子 E疏水分子( C C )4. 下列关于原核和真核生物DNA复制的描述中哪一项是不正确的?A 以复制叉定点复制,通常为双向等速复制 B 复制方向为53C 前导链和随从链都是不连续复制 D 必有冈崎片断,必须切去引物E 最后由 DNA 连接酶连接( E E )5.关于 酶的 性质 哪一 种说法 不对 ？ A 高效催 化性 B 专一性 C 反应 条件 温和 D

92、可调节 控制E可使 反应 平衡 向有 利于 产物 方向移 动( B B )6.下列哪种试剂可使蛋白质的二硫键打开?A溴化氰 B-巯基乙醇 C碘乙酸 D2,4-二硝基氟苯( C C )7.氨基酸顺序测定仪是根据哪种方法建立的？（A）2,4-二硝基氟苯法 (B)丹磺酰氯法 (C)苯异硫氰酸酯法 (D)酶水解法2 5(B B )8. DNA 复制需要解链酶引物酶DNA 聚合酶拓扑异构酶DNA 连接酶。 其作用的顺序A ， B ，C ， D ，E ，( C C )9. 下列 关于 酶活 性中 心的描述 哪个 是正 确的 ？A酶分子 上的 几个 必需 基团 B酶分 子与 底物 的结 合部 位 C 酶分子

93、 结合 底物 并发 挥催化 作用 的三 维结 构区 域 D 酶分子 催化 底物 转化 的部 位( C C )10.DNA 中含有18.4% 的A时，其 碱基C+G% 总含量 为多 少？ A36.8 B37.2 C 63.2 D 55.2;( E )11.mRNA 作为蛋白质合成的模板，根本上是由于A.含有核糖核苷酸；B.代谢快；C.含量少；D.由 DNA 转录而来；E.含有密码子( D D )12. 热变 性的DNA具有 下列哪 种特 征？ A 核苷酸 间的 磷酸 二酯 键断 裂 B 形成三 股螺 旋C260nm 处的 光吸 收下降 D GC 对的 含量 直接 影响 Tm值( C C)13.下

94、列关于氨基酸密码的叙述哪一项是正确的A.由 DNA 链中相邻的三个核苷酸组成；B.由 tRNA 链中相邻的三个核苷酸组成；C.由 mRNA 链中相邻的三个核苷酸组成；D.由 rRNA 链中相邻的三个核苷酸组成；E.由多肽链中相邻的三个氨基酸组成( B B )14. 某一符 合米 氏方 程的酶， 当S=2Km 时， 其反 应速度V等于 ： AVmax B2/3Vmax C3/2 Vmax D2Vm ( D D )15. 下列那 种因 素不 使酶活力 发生 变化 ？A增高温 度B加抑 制剂 C改变pH D 加 硫 酸 铵( D )16.生物体编码 20 种氨基酸的密码子个数A.16；B.61；C.

95、20；D.64；E.60(E E )17.真核生物在蛋白质生物合成中的启始tRNA 是A.亮氨酸 TrnA；B.丙氨酸 tRNA；C.赖氨酸 tRNA；D.甲酰蛋氨酸 tRNAE.蛋氨酸 tRNA( A A )18. 下列哪 一项 不是 酶具有高 催化 效率 的因 素?A有调控 能力 B 酸碱 催化 C “张 力” 和“ 形变 ” D邻近 定位 效应( A A )19.反密码子中的哪个碱基在密码子阅读中摆动？A.第一个；B.第二个；C.第一和第二个；D.第二和第三个；E.第三个( B B )20.L- 氨基 酸氧 化酶 只能催化L-氨基酸 的氧 化， 此种专一 性属 于：A几何专 一性 B 立

96、体 异构 专一性 ， C结构 专一 性 D绝对专 一性(D D )21.下列关于蛋白质四级结构的论述哪项是正确的。A由多个相同的亚基组成 B由多个不同的亚基组成C一定是由种类相同而不同数目的亚基组成 D亚基的种类和数目均可不同( A A )22.下列关于蛋白质分子中肽键的叙述哪项是错误的？ (A) 能自由旋转(B)比通常的 C-N 单键短(C)通常有一个反式结构(D) 具有部分双键性质(B B )23. 热变性的 DNA 在适当条件可以复性，条件之一是： A 骤然冷却 B 缓慢冷却 C 能缩 D 加入浓的盐(B B )24.下列关于蛋白质分子三级结构的叙述哪项是错误的？A天然蛋白质分子均有这种

97、结构 B具有三级结构的多肽链都具有生物学活性C三级结构的稳定性主要由次级键维持 D亲水基团大多聚集在分子的表面( B B )25.原核生物蛋白质生物合成中肽链延长所需的能量来源于A.ATP；B.GTP；C.GDP；D.UTP；E.CTP2 6二、判断题二、判断题( )1、胰岛素是一种能提高血糖的激素；( )2、DNA 是生物界中唯一的遗传物质；()3、若 DNA 一条链的碱基顺序是 pCpTpGpGpApC,则另一条链的碱基顺序是pGpApCpCpTpG.；()4、天然氨基酸都有一个不对称的-碳原子；()5、米氏常数是酶的特征性常数，与底物无关；()6、稀碱溶液可以水解DNA，但不可以水解 R

98、NA；( )7、维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键；()8、DNA 是遗传信息的载体，只存在于细胞核的染色质中；()9、少量中性盐使得蛋白质溶解度升高，过量（如达到饱和程度）中性盐使得蛋白质溶解度下降；()10、在DNA 变性过程中，总是GC 对丰富区先熔解开，形成小泡；()11、蛋白质分子的肽链数就是它的亚基数；()12、糖类的主要生理功能之一是为生物提供能量；()13、在底物浓度极低时，酶促反应初速度与底物浓度成正比；()14、糖酵解过程无需氧的参加；()15、Sanger 提出的核酸序列分析法是双脱氧链终止法。三、填充题三、填充题1、 tRNA 上的反密码反密码可以识别 mRNA 上

99、的密码。2、 DNA 和 RNA 中的碱基不同的是T T和U U。3、脱氧核糖核酸 DNA 双链中若G GC%C% 含量高，则TmTm 值高。4、转移核糖核酸 tRNA 的二级结构为三叶草三叶草形状，三级结构为倒倒 L L 形状5、脱氧核糖核酸（DNA）的基本结构单位是脱氧核糖核苷酸脱氧核糖核苷酸。6、无论是DNA 还是RNA 都是由许许多多核苷酸核苷酸组成，通过 磷酸二酯键磷酸二酯键 连接而成的。7、两性离子是指即带正电荷又带负电荷的离子即带正电荷又带负电荷的离子。8、核酸研究中，地依酚法常用来测定 RNARNA ，二苯胺法常用来测定DNADNA 。9、 Watson-Crick提出的B-D

100、NA双螺旋结构的螺距为_ 3.4 nm3.4 nm，相邻两核苷酸之间的夹角是3636。10、核糖核酸RNA主要分为tRNAtRNA、 mRNAmRNA和rRNArRNA三种类型。四、问答题四、问答题1、 新掰下的玉米的甜味是由于玉米粒中的糖浓度高。 可是掰下的玉米贮存几天后就不那么甜了， 因为 50糖已经转化为淀粉了。如果将新鲜玉米去掉外皮后浸入沸水几分钟，然后于冷水中冷却，储存在冰箱中可保持其甜味。这是什么道理？答：采下的玉米在沸水中浸泡数分钟，可以使其中将糖转化成淀粉的酶基本失活，而后将玉米存放在冰箱答：采下的玉米在沸水中浸泡数分钟，可以使其中将糖转化成淀粉的酶基本失活，而后将玉米存放在冰

101、箱中，可以使残存的酶处于一种低活性状态，从而保持了玉米的甜度。中，可以使残存的酶处于一种低活性状态，从而保持了玉米的甜度。2、为什么 RNA 易被碱水解，而 DNA 不容易被碱水解？答答: :因为因为 RNARNA 含有的含有的 2 2-OH-OH 起到分子内催化剂作用，水解能形成中间产物起到分子内催化剂作用，水解能形成中间产物 2 2,3,3- -环状中间产物，而环状中间产物，而 DNADNA为脱氧核糖核酸，为脱氧核糖核酸，2 2碳原子上连接的是两个氢原子，不含碳原子上连接的是两个氢原子，不含 2 2-OH-OH，因此无分子内催化剂的作用，磷酸二，因此无分子内催化剂的作用，磷酸二酯键不能被打

102、断。酯键不能被打断。3、有一条脱氧核糖核酸链，结构如下：5-ACCGTAACTTTAG-3请写出与该链互补的 DNA 链和 RNA 链的结构。如果该链为一条 DNA 编码链，写出由它转录产生的mRNA 序列。答：与之互补的答：与之互补的 DNADNA 链：链： 5 5 -CTAAAGTTACGGT-3-CTAAAGTTACGGT-3 ；2 7与之互补的与之互补的 RNARNA 链：链：5 5 -CUAAAGUUACGGU-3-CUAAAGUUACGGU-3 ；mRNAmRNA 链：链：5 5 -ACCGUAACUUUAG-3-ACCGUAACUUUAG-3 ；4、mRNA 遗传密码排列顺序翻译

103、成多肽链的氨基酸排列顺序，保证准确翻译的关键是什么？答：答： 主要靠两点：主要靠两点： 氨酰氨酰 tRNAtRNA 合成酶催化反应的专一性确保了什么氨基酸与什么合成酶催化反应的专一性确保了什么氨基酸与什么 tRNAtRNA 结合形成氨酰结合形成氨酰 tRNAtRNA，也就是说它们的结合是特异性的，而不是随机的；也就是说它们的结合是特异性的，而不是随机的；氨酰氨酰 tRNAtRNA 通过其上面的反密码子与通过其上面的反密码子与 mRNAmRNA 上的密码子的特异性配对来进行结合，从而使得某种氨基酸与上的密码子的特异性配对来进行结合，从而使得某种氨基酸与某种密码子一某种密码子一 一对应，这样也就确

104、保了一对应，这样也就确保了 mRNAmRNA 遗传密码排列顺序翻译成正确的多肽链的氨基酸排列顺序。遗传密码排列顺序翻译成正确的多肽链的氨基酸排列顺序。5、假如你从一种新的病毒中提取到它的核酸：用两种不同方法确定它是 DNA 还是 RNA？通过一种简易方法判断它是双链还是单链？答：判断是答：判断是 DNADNA 还是还是 RNARNA：颜色反应：颜色反应：DNADNA 的二苯胺反应会形成蓝色化合物，的二苯胺反应会形成蓝色化合物，RNARNA 的苔黑酚反应会形成绿色化合物；酸水解后进的苔黑酚反应会形成绿色化合物；酸水解后进行单核苷酸分析（层析或电泳）行单核苷酸分析（层析或电泳） ，含，含 U U

105、无无 T T 的为的为 RNARNA，含，含 T T 无无 U U 的为的为 DNADNA；依据是否有增色效应可判断它是双链还是单链。双链核酸加热变性后有增色效应，单链核酸没有这种现依据是否有增色效应可判断它是双链还是单链。双链核酸加热变性后有增色效应，单链核酸没有这种现象。象。6、别构酶有何特性？答：别构酶是一种活性可调节的酶，分子中含有两个或两个以上的亚基。除酶活性中心外还有调节部位。答：别构酶是一种活性可调节的酶，分子中含有两个或两个以上的亚基。除酶活性中心外还有调节部位。别构酶具有协同效应：别构酶具有协同效应：同种效应和异种效应：由配体是否相同来区分；同种效应和异种效应：由配体是否相同

106、来区分；正协同效应和负协同效应：根据配体之间是互相促进还是降低它们与酶蛋白的结合能力来区分。正协同效应和负协同效应：根据配体之间是互相促进还是降低它们与酶蛋白的结合能力来区分。7、一种病毒的核酸链具有以下组成：A=32%, G=16%, T=40%, C=12% （摩尔含量比），请问该核酸是DNA 还是 RNA？它的结构具有什么特点？答：是答：是 DNADNA，因为含有碱基，因为含有碱基 T T。从。从 A A、T T、G G 和和 C C 的含量比可以看出，该病毒的含量比可以看出，该病毒 DNADNA 组成中嘧啶碱数目与嘌呤组成中嘧啶碱数目与嘌呤碱基数目不等，碱基数目不等，A A 和和 T

107、T 以及以及 G G 和和 C C 的含量不等，所以不能构成双螺旋结构，可能是一条单链的含量不等，所以不能构成双螺旋结构，可能是一条单链 DNADNA。8、一个二肽酶对二肽 Ala-Gly 和二肽 Leu-Gly 的 Km 分别为 2.810-4 和 3.510-2，哪一个二肽是酶的最适底物？该酶的两个非竞争性抑制剂的Ki 值分别为 5.710-2 和 2.610-4。哪一个是最强的抑制剂？答：可根据米氏方程及存在抑制剂时的酶促反应速率方程判断：答：可根据米氏方程及存在抑制剂时的酶促反应速率方程判断： Km Km 值小的值小的 Ala-GlyAla-Gly 是最适底物；是最适底物；KiKi 值

108、最值最小的那个是最强的抑制剂。小的那个是最强的抑制剂。9、1/v 对 1/S的双倒数作图得到的直线斜率为 1.210-3min，在 1/v 轴上的截距为 2.010-2nmol-1mlmin。计算 Vmax 和 Km。答：斜率答：斜率 S=(1/ Vmax)S=(1/ Vmax)(1/ Km)= Km/ Vmax=(1/ Km)= Km/ Vmax=1.2101.210-3min,-3min,又因为又因为1/Vmax=1/Vmax=2.0102.010-2nmol-1ml min-2nmol-1ml min，所以，所以， Vmax Vmax50 nmol ml-1 min-150 nmol m

109、l-1 min-1；KmKm6.0106.0102 nmolml-12 nmolml-1。10、请简单论述 DNA 变性的特性。答：答：DNADNA 的变性是指的变性是指 DNADNA 双螺旋区的多聚核苷酸链间的氢键断裂，变成单链结构的过程。当双螺旋区的多聚核苷酸链间的氢键断裂，变成单链结构的过程。当 DNADNA 的稀盐溶的稀盐溶液加热到液加热到 80-10080-100时，双螺旋结构即发生解体，两条链彼此分开，形成无规线团。时，双螺旋结构即发生解体，两条链彼此分开，形成无规线团。DNADNA 变性后，它的一系变性后，它的一系列性质也随之发生变化，如粘度降低、紫外吸收列性质也随之发生变化，如

110、粘度降低、紫外吸收(260 nm)(260 nm)值升高等。值升高等。2 8习题九答案习题九答案一、选择题一、选择题( D )1. 1958年Meselson和Stahl利用15N及14N标记大肠杆菌DNA的实验首先证明了下列 哪一种机制?A DNA能被复制 B DNA基因可转录为mRNAC DNA基因可表达为蛋白质 D DNA的半保留复制机制E DNA的全保留复制机制( A )2. DNA 以半保留方式进行复制,若一完全被标记的DNA分子,置于无放射标记的溶液中复制两代,所产生的四个DNA分子的放射性状况如何?A 两个分子有放射性,两个分子无放射性 B 均有放射性C 两条链中的半条具有放射性

111、 D 两条链中的一条具有放射性E 均无放射性( C )3. 如果缺乏下列酶之一，复制叉上一个核苷酸也加不上去。这是哪一种酶?A DNA酶合酶(聚合活性) B DNA聚合酶(53核酸外切酶活性)C DNA聚合酶 D DNA连接酶 E DNA聚合酶( D )4. DNA复制时下列哪一种酶是不需要的?A DNA指导的DNA聚合酶 B DNA指导的RNA聚合酶C 连接酶 D RNA指导的DNA聚合酶E 螺旋酶(heliease)、拓朴异构酶(topoisomerase)及回旋酶(gyrase)( B )5. 下列关于DNA的复制的叙述哪一项论述是错误的?A 有DNA指导的RNA聚合酶参加 B 有RNA

112、指导的DNA聚合酶参加C 为半保留复制 D 以四种dNTP为原料E 有DNA指导的DNA聚合酶参加( A )6. DNA复制时,序列5-TpApGpAp-3将合成下列哪种互补结构?A 5-TpCpTpAp-3 B 5-ApTpCpTp-3C 5-UpCpUpAp-3 D 5-GpCpGpAp-3 E 3-TpCpTpAp-3( B )7. 合成DNA的原料是A dAMP dGMP dCMP dTMP B dATP dGTP dCTP dTTPC dADP dGDP dCDP dTGP D ATP GTP CTP UTP ( C )8. 下列 哪一 种维 生素 是甲基 和甲 酰基 的载 体？A硫

113、胺素 ; B 抗坏 血酸 ; C叶酸; D 核黄 素( D )9. 转氨 酶的 辅酶 是下 列化合 物中 的哪 一种 ？ AVB1 B 叶酸 C 生物素 D 磷酸吡哆 醛( C )10. 米氏 常数Km是一个 用来度 量A 酶被底 物饱 和程 度的 常数B酶促 反应 速度 大小 的常数 C酶与底 物亲 和力 大小 的常 数 D 酶稳定 性的 常数( C )11. 下列氨基酸中哪种是精氨酸 AAsp B His C Arg D Lys ( B )12.下列氨基酸中哪种氨基酸具有咪唑基团？ A 精氨酸 B 组氨酸 C 酪氨酸 D 脯氨酸( A )13.直接参与维系蛋白质二级结构的化学键是 A 氢键

114、 B盐键 C 疏水键 D 二硫键2 9 ( E )14.哺乳动物核蛋白体大亚基的沉降常数是A.40S； B.70S； C.30S； D.80S； E.60S ( A )15.密码 GGC 的对应反密码子是A.GCC； B.CCG； C.CCC； D.CGC； E.GGC二、判断题二、判断题 ( )1、tRNA 分子的 3末端具有聚腺苷酸的“尾”结构。 ( )2、DNA 的二级结构由两条平行的多核苷酸链构成。 ( )3、 在变性后，DNA 的紫外吸收增加。 ( )4、氢键是稳定DNA双螺旋的主要因素。 ( )5、双链DNA 中每条单链的（G+C）含量与双链的（G+C）含量相等。 ( )6、“必需

115、氨基酸”的含义是指：合成蛋白质必不可少的一些氨基酸。 ( )7 在等电点时蛋白质的溶解度最小。 ( )8、tRNA 分子中含有较多的稀有碱基。 ( )9、酶是依据其催化反应类型来分类的。 ( )10、同工酶是催化一类化学反应的一类酶。 ( )11、DNA 复制时，主导链只需一个引物，随从链需要多个引物。 ( )12、氨酰 tRNA 合成酶既能识别氨基酸，又能识别tRNA，使它们特异结合。 ( )13、糖酵解的终产物是乙醇和乳酸。 ( )14、动植物细胞中都存在乙醛酸循环途径。 ( )15、hnRNA 是真核 mRNA 的前体物质。三、填充题三、填充题1、 tRNA 上的反密码可以识别 mRNA

116、 上的密码。2、 DNA 和 RNA 中的碱基不同的是 T和 U。3、脱氧核糖核酸 DNA 双链中若 GC% 含量高，则 Tm 值高。4、转移核糖核酸 tRNA 的二级结构为三叶草形状，三级结构为倒 L 形状5、脱氧核糖核酸（DNA）的基本结构单位是脱氧核糖核苷酸。6、无论是DNA 还是RNA 都是由许许多多核苷酸组成，通过 磷酸二酯键 连接而成的。7、两性离子是指即带正电荷又带负电荷的离子。8、核酸研究中，地依酚法常用来测定 RNA ，二苯胺法常用来测定 DNA 。9、 Watson-Crick提出的B-DNA双螺旋结构的螺距为_ 3.4 nm，相邻两核苷酸之间的夹角是 36。10、核糖核酸

117、RNA主要分为 tRNA、 mRNA和 rRNA三种类型。、问答题、问答题1、某种溶液中含有三种三肽：Tyr - Arg - Ser , Glu - Met - Phe 和 Asp - Pro - Lys , - COOH 基团的 pKa 为 3.8; -NH3 基团的 pKa 为 8.5。在哪种 pH（2.0,6.0 或 13.0）下，通过电泳分离这三种多肽的效果最好？答：pH=6.0 比 pH=2.0 或 pH=13.0 时电泳能提供更好的分辨率。因为在 pH6.0 的条件下每种肽都带有不同的净电荷(+1，-1，和0)，而在pH2.0 的条件下净电荷分别为+2，+1 和+2，在pH13.0

118、 的条件下净电荷分别为-2，-2 和-2。12. 下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中：3 0CNBr 异硫氰酸苯酯 丹黄酰氯 脲 6mol/LHCl -巯基乙醇 水合茚三酮 过甲酸 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶其中哪一个最适合完成以下各项任务？（a）测定小肽的氨基酸序列。（b）鉴定肽的氨基末端残基。（c）不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂？（d）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。（e）在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。（f）在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。答：（a）异硫氰酸苯酯。（b）丹黄酰氯。（c）脲；-巯基乙醇还原二硫键。（d）胰凝乳蛋白酶。（e）CNBr。 （f）胰蛋白酶

119、13. 有二个 DNA 样品，分别来自两种未确认的细菌，两种DNA 样品中的腺嘌呤碱基含量分别占它们DNA 总碱基的 32和 17。这两个 DNA 样品的腺嘌呤，鸟嘌呤，胞嘧啶和胸腺嘧啶的相对比例是多少？其中哪一种 DNA 是取自温泉（64）环境下的细菌，哪一种DNA 是取自嗜热菌？答案的依据是什么？答：一个DNA 含量为 32A、32T、18G 和 18C，另一个为17A、17T、33G 和 33C，均为双链DNA。前一种取自温泉的细菌，后一种取自嗜热菌，因为其GC 含量高，变性温度高因而在高温下更稳定。14. 有一条脱氧核糖核酸链，结构如下：5- CTAAAGTTACGGT -3请写出与该

120、链互补的 DNA 链和 RNA 链的结构。如果该链为一条 DNA 编码链，写出由它转录产生的mRNA 序列。答：与之互补的 DNA 链： 5-ACCGTAACTTTAG -3；与之互补的 RNA 链：5-ACCGUAACUUUAG -3；mRNA 链：5- CUAAAGUUACGGU -3；15. 把 C-1 位用 14C 标记的葡萄糖与能进行糖酵解的无细胞提取物共同温育，标记物出现在丙酮酸的什么位置？答: 被标记的葡萄糖通过葡萄糖-6-磷酸进入酵解途径，在果糖-1.6 二磷酸被醛缩酶裂解生成甘油醛-3-磷酸和磷酸二羟丙酮之前标记始终出现在 C-1。因为磷酸二羟丙酮含有最初葡萄糖分子的 C-1

121、 至 C-3 原子，因而它的 C-1 带有标记。然后磷酸二羟丙酮异构化变为甘油醛-3-磷酸，最终 14C 出现在丙酮酸的甲基上。16. 增加以下各种代谢物的浓度对糖酵解有什么影响？（a）葡萄糖-6-磷酸 （b）果糖-1.6-二磷酸（c）柠檬酸（d）果糖-2.6-二磷酸答： （a）最初葡萄糖-6-磷酸浓度的增加通过增加葡萄糖 6-磷酸异构酶的底物水平以及以后的酵解途径的各步反应的底物水平也随之增加， 从而增加了酵解的速度。 然而葡萄糖-6-磷酸也是己糖激酶的一个别构抑制剂，因此高浓度的葡萄糖-6-磷酸可以通过减少葡萄糖进入酵解途径从而抑制酵解。（b） 果糖-1.6-二磷酸是由磷酸果糖激酶-1催化

122、反应的产物， 它是酵解过程中主要的调控点， 增加果糖-1.6-二磷酸的浓度等于增加了所有随后糖酵解途径的反应的底物水平，所以增加了酵解的速度。（c）柠檬酸是柠檬酸循环的一个中间产物，同时也是磷酸果糖激酶-1 的一个反馈抑制剂，因而柠檬酸浓度的增加降低了酵解反应的速率。（d）果糖-2,6-二磷酸是在磷酸果糖激酶-2（PFK-2）催化的反应中由果糖-6-磷酸生成的，因为它是磷酸果糖激酶-1（PFK-1）的激活因子，因而可以增加酵解反应的速度。3 17、柠檬酸循环共涉及八种酶使乙酰基氧化，它们是柠檬酸合成酶，顺乌头酸酶，异柠檬酸脱氢酶，-酮戊二酸脱氢酶，琥珀酰辅酶 A 合成酶，琥珀酸脱氢酶，延胡索酸

123、酶和苹果酸脱氢酶。写出每一种酶所催化的反应平衡方程式以及每一酶促反应需要的辅助因子。答：柠檬酸合成酶：乙酰辅酶 A草酰乙酸H2O柠檬酸辅酶 A H （辅酶 A）乌头酸酶：柠檬酸异柠檬酸异柠檬酸脱氢酶：异柠檬酸NAD 酮戊二酸CO2NADH（NAD ）酮戊二酸脱氢酶：酮戊二酸NAD 辅酶 A琥珀酰辅酶 ACO2NADH（NAD 、辅酶A 和焦磷酸硫胺素）琥珀酰辅酶A 合成酶：琥珀酰辅酶 APiGDP琥珀酸GTP 辅酶 A（辅酶 A）琥珀酸脱氢酶：琥珀酸FAD延胡索酸FADH2（FAD）延胡索酸酶：延胡索酸H2O苹果酸苹果酸脱氢酶：苹果酸NAD 草酰乙酸H NADH（NAD ）8、合成的多肽多聚谷

124、氨酸（ （Glu）n ） ，当处在pH3.0 以下时，在水溶液中形成 螺旋，而在pH5.0 以上时却为伸展的形态。（a）试解释该现象。（b）在哪种 PH 条件下多聚赖氨酸（Lys）会形成 -螺旋？答： （a）由可离子化侧链的氨基酸残基构成的 -螺旋对 pH 值的变化非常敏感，因为溶液的 pH 值决定了侧链是否带有电荷，由单一一种氨基酸构成的聚合物只有当侧链不带电荷时才能形成 -螺旋，相邻残基的侧链上带有同种电荷会产生静电排斥力从而阻止多肽链堆积成-螺旋构象。Glu 侧链的 pKa 约为 4.1，当 pH 值远远低于 4.1（大约 3 左右）时，几乎所有的多聚谷氨酸侧链为不带电荷的状态，多肽链能

125、够形成-螺旋。在 pH 值为 5 或更高时，几乎所有的侧链都带负电荷，邻近电荷之间的静电排斥力阻止螺旋的形成，因此使同聚物呈现出一种伸展的构象。（b）Lys 侧链的 pK 为 10.5，当 pH 值远远高于 10.5 时，多聚赖氨酸大多数侧链为不带电荷的状态，该多肽可能形成一种 -螺旋构象，在较低的 pH 值时带有许多正电荷的分子可能会呈现出一种伸展的构象。习题十答案习题十答案一、名词解释1.SSB.SSB:单链结合蛋白的英文缩写名。在DNA 复制过程中结合在刚解开的单链上防止它重新结合或被DNA酶降解。2. Exon Exon:即外显子，是指断裂基因中携带遗传信息的DNA 片段。3. 超二级

126、结构超二级结构:由蛋白质的二级结构经过折叠盘绕形成的介于蛋白质二级结构和三级结构之间的一种蛋白质结构。4. 亲和层析亲和层析:指利用蛋白质分子对其配体分子特有的识别和结合能力建立起来的分离纯化方法。5. 结构域结构域:介于超二级结构和三级结构之间的一种蛋白质空间结构，由蛋白质二级结构进一步折叠盘绕形成。6. 编码链编码链:DNA 双链中携带遗传信息的那条单链。7. 发夹结构发夹结构:RNA 单链线型分子可以通过自身回折形成局部双链结构。这种由双链部分和非双链环状部分组成的结构型似发夹，被称为发夹结构。8. 盐析盐析:向蛋白质溶液中添加大量中性盐后出现的蛋白质沉淀析出的现象。9. 增色效应增色效

127、应:核酸由双链变成单链后在260nm 处的吸光度增加的现象。10.反式作用因子反式作用因子:与顺式作用元件进行特异性结合的蛋白质因子被称为反式作用因子。3 2二、问答题1.生物分子杂交技术（印迹法）有几种？对它们分别进行简要说明。答：Southern 印迹法：将凝胶电泳分离的DNA 片段转移至硝酸纤维素膜上后再与经标记的DNA 探针进行杂交；Northern 印迹法：将 RNA 经电泳变性后转移至纤维素膜上再进行杂交；Western 印迹法：根据抗体和抗原可以结合的原理，采用核酸分子杂交类似方法进行蛋白质分析；2.采用高浓度 NaCl 溶液溶解以及苯酚抽提的方法可以从破碎的细胞匀浆中分离出DN

128、A。请具体说明实验步骤和原理。答：通常细胞中的核酸物质都与蛋白质结合在一起，形成核蛋白。DNA 蛋白溶于高浓度氯化钠溶液而不易溶于低浓度的氯化钠溶液，RNA 蛋白则相反。利用这一点将核蛋白加入到 1 摩尔浓度的氯化钠溶液中可以将 DNA 蛋白和 RNA 蛋白分离开。 接下来用苯酚提取法去蛋白。 用水饱和的苯酚与 DNA 蛋白震荡后冷冻离心。苯酚能使蛋白质迅速变性，因此经过离心 DNA 溶于上层的水相中。经过多次苯酚处理后就可以得到天然状态的 DNA。3. 为什么 DNA 和 RNA 可以采用定糖法进行含量测定？试以各自测定的具体方法为例加以说明。答：核糖核酸的测定：RNA 分子中的核糖和浓盐酸

129、或浓硫酸作用脱水生成糠醛。糠醛再与地衣酚反应生成深绿色化合物。反应产物在660nm 处有最大吸收，并且与 RNA 的浓度成正比。脱氧核糖核酸的测定：DNA 分子中的脱氧核糖和浓硫酸作用脱水生成-羟基-酮基戊醛，再与二苯胺反应生成蓝色化合物。反应产物在595nm 处有最大吸收，并且与DNA 的浓度成正比。4. 在严格厌氧条件下的酒精发酵过程中，使用放射性标记的碳源进行示踪原子实验。试问在起始的葡萄糖分子的什么位置上标记14C ，才能使它出现在乙醇的羟基碳（连接羟基的碳原子）位置上？使用酒精发酵过程相关主要化合物分子式加以说明。6. 酶总共有几大类？它们各自催化何种反应？答：酶的分类以及不同类别的

130、酶所催化的反应如下： 氧化还原酶类：催化氧化还原反应； 转移酶类：催化功能基团的转移； 水解酶类：催化水解的反应； 裂合酶类：催化水、氨或二氧化碳的去除或加入； 异构酶类：催化各种类型的异构作用； 合成酶类：催化消耗 ATP 的成键反应；6. 真核生物蛋白质合成与原核生物相比有哪些主要区别？答：主要差别在于：参与翻译的起始因子 eIF 较多，如 eIF2，eIF3，eIF4；真核细胞的核糖体较大（80s） ；形成起始复合物的氨基酸是甲硫氨酸而不是甲酰甲硫氨酸；形成起始复合物的机制不同；真核细胞 mRNA 为单顺反子，原核细胞mRNA 为多顺反子；与原核细胞的延长因子EF-TU 和 EF-G 对

131、应的真核细胞延长因子为EF1 和 EF2。3 37.一个未知肽的氨基酸组成为： Asp1, Ser1, Gly1, Ala1,Met1, Phe1和 Lys2。对其进行一系列分析，结果如下：DNFB 与之反应再酸水解得到DNP-Ala；经胰凝乳蛋白酶消化后从产物中分离出一个纯四肽，其组成为Asp1, Gly1, Lys1, Met1, 此四肽的 DNFB 反应降解产物为 DNP-Gly；该八肽经胰蛋白酶消化后可得到组成分别为 Lys1、Ala1、Ser1 以及 Phe1、Lys1 和 Gly1 的两个三肽及一个二肽。此二肽经CNBr 处理后游离出自由天冬氨酸。请推导该八肽序列。答：根据结果，该

132、序列为：Ala-（Asp1, Ser1, Gly1, Met1, Phe1和 Lys2） ；根据结果，该序列为：Ala-（Ser,Lys）-Phe- Gly (Asp, , Met,和 Lys） ；根据结果，该序列为：Ala-Ser-Lys-Phe- GlyLys-MetAsp；8.什么是同工酶？以乳酸脱氢酶为例说明它的组成。为什么能用电泳法对乳酸脱氢酶进行分离？举例说明乳酸脱氢酶在疾病诊断中的应用。答：催化同种反应的不同的酶称为同工酶。以乳酸脱氢酶为例，.9. 原核生物和真核生物mRNA 的结构特点是什么？答：原核细胞 mRNA 结构特点：一般为多顺反子结构；转录与翻译是耦合的；mRNA 分

133、子包括先导区，翻译区和非翻译区，即在两个顺反子之间存在插入序列；真核细胞 mRNA 结构特点：真核细胞 mRNA5末端有帽子结构，3末端有 polyA 尾巴；真核细胞的 mRNA 一般为单顺反子；真核细胞 mRNA 的转录与翻译是分开进行的；10. 比较淀粉、糖原和纤维素在结构和组成方面的异同，并简述它们的理化性质答：三者皆为由葡萄糖分子通过糖苷键连接而成的多糖生物大分子。淀粉分直链淀粉和支链淀粉。直链淀粉是葡萄糖分子通过-1，4 糖苷键相连而成的直链结构，支链淀粉中每两个直链间的连接键是-1，6 糖苷键。淀粉在冷水中不溶解，但是在加热的情况下可以吸收水分而膨胀成糊状。直链淀粉遇碘成蓝色，支链

134、淀粉遇碘成紫红色。糖原又称动物淀粉，与淀粉相同也是由-D-葡萄糖构成的同聚多糖，结构上则与支链淀粉相似，也是带有-1，6 分支点的-1，4 葡萄糖多聚物，但分支比支链淀粉多。糖原遇碘成红色。纤维素是由-D-葡萄糖通过-1，4 糖苷键相连而成的同聚多糖。纤维素不溶于水，稀酸和稀碱。纤维素中每个葡萄糖残基含有三个自由羟基，因此能与酸形成酯。11. 简述血糖的来源和去路。人体如何维持血糖水平的恒定？答：血糖主要来源于对食物的消化与吸收，肝糖原的分解以及非糖物质经过糖异生产生的糖；血糖的主要去路是彻底分解氧化释放能量，合成糖原，或其它糖类物质以及用于合成脂肪，氨基酸等其它非糖物质。体内调节血糖水平的主

135、要激素有胰岛素，胰高血糖素和肾上腺素。胰岛素通过多方面作用降低血糖：促进葡萄糖转运进入细胞，加速糖原合成，加快糖的有氧氧化，抑制糖异生作用，减少脂肪动员等。胰高血糖素则通过以下方式升高血糖：抑制糖原合成，促进糖原分解，抑制糖酵解，促进糖异生，加速脂肪动员。肾上腺素也是强有力的升高血糖的激素，主要通过加速糖原分解和乳酸循环来实现。12.什么是蛋白质的变性与沉淀？举例说明蛋白质变性与沉淀的关系。3 4答：蛋白质分子由于受到某些理化因素的影响，空间构象被破坏，失去了原有的生物活性的现象即蛋白质变性。蛋白质分子的溶解度下降导致其从溶液中析出的现象即蛋白质沉淀。 使蛋白质沉淀的方法有盐析法，有机溶剂沉淀

136、法等。如果采用某些较强烈的方法如加热，有机酸，重金属盐等使蛋白质沉淀的话，沉淀出的蛋白质会变性。但是用盐析等较温和的方法沉淀蛋白质时沉淀出的蛋白质不会变性。变性的蛋白质一般会沉淀，但是有些蛋白质的稀溶液用酸、碱或加热的方法变性后并不沉淀。例如，将牛奶煮沸，其中的酪蛋白变性了，但并没有沉淀出来。13. lac 操纵子的基本结构是怎样的？它是如何通过阻遏物和CAP 调节基因表达的？答： 乳糖操纵子结构如下图所示：结构基因部分由三个基因组成，它们是编码 -半乳糖苷酶的基因 Z，编码通透酶的基因 Y，编码半乳糖苷乙酰化酶的基因a。位于结构基因前面的是调控区，由启动子 P 和操纵区 O 组成。位于调控区

137、前面的是阻遏物基因 I。此外，启动子上游还有一段短序列是分解代谢基因活化蛋白CAP 的结合区。 结构基因表达调控的方式如下：无乳糖时，I 基因表达产生的阻遏物可与操纵区结合，从而挡住 RNA 聚合酶前移的通路，结构基因无法转录；当乳糖存在时， 乳糖作为诱导物可以与阻遏物结合， 并使得阻遏物发生变构而不能与操纵区结合，因此结构基因转录，产生三种消耗乳糖的酶；当乳糖和葡萄糖都存在时，细菌通常会先利用葡萄糖然后再利用乳糖。在利用葡萄糖时乳糖操纵子表达较差。当葡萄糖消耗完时，乳糖操纵子的表达增强。这种作用是通过CAP 实现的。当 cAMP 与 CAP 结合后，后者构象发生变化，对 DNA 的亲和力增强

138、。乳糖操纵子中 CAP 的结合位点紧接于启动基因上游区， cAMP-CAP 复合物结合到 DNA 上的 CAP 位点后，则会促进 RNA 聚合酶结合到该启动基因上，进行转录。葡萄糖能显著降低细菌细胞中 cAMP 的含量，这样复合物 cAMP-CAP 减少，影响乳糖操纵子转录的启动。当葡萄糖消耗完，cAMP 含量上升时，乳糖操纵子的转录启动。所以CAP 是一种正调节蛋白，其作用需要 cAMP 参与。习题十一答案习题十一答案、名词解释名词解释1.1. 双缩脲反应双缩脲反应; ;指蛋白质在碱性溶液中与Cu2+产生紫红色的反应。 它是蛋白质分子中肽键的反应， 肽键越多反应颜色越深。2. 顺式作用元件顺

139、式作用元件; ;指位于 DNA 上的特定序列如启动子和增强子等元件，通过它们可以控制基因的转录。3. 编码链编码链;DNA 双链中携带遗传信息的那条单链。4.4.增强子增强子;指在真核细胞中发现的一些能增强启动子活性的核苷酸序列。5.5.回文结构回文结构; ;在 DNA 的某些片段中， 有些以某一假想轴成180旋转对称的序列， 即顺读和逆读相同的序列。这就是回文结构。6.6.基因组学基因组学; ;指研究生物基因和基因组的组成，结构，稳定性以及其功能的科学。3 57.7.盐溶盐溶; ;在中性盐溶液中，低浓度的盐能促进蛋白质溶解的现象即盐溶。8.疏水键疏水键; ;指非极性基团为避开水而互相靠近产生

140、的作用力。9. IntronIntron ;位于断裂基因中的不携带遗传信息的DNA 片段。10.减色效应减色效应; ;核酸由单链变成双链后在260nm 处的吸光度下降的现象。二、问答题二、问答题1.mRNA 遗传密码排列顺序翻译成多肽链的氨基酸排列顺序，保证准确翻译的关键是什么？答：关键有两点：氨酰 tRNA 合成酶能确保氨基酸与tRNA 结合的特异性， 即某种氨基酸只与特定的tRNA 结合；通过密码与反密码的配对， 特定的氨酰 tRNA 只会与特定的 mRNA 上的密码配对结合；通过上述两点，保证了特定氨基酸与特定密码子的对应关系，也就保证了翻译的准确性。2.DNFB 方法，DNS 方法和

141、Edman 方法主要用于什么方面？它们之间的主要区别是什么？答：DNFB 方法，DNS 方法和 Edman 方法都可以用于多肽链 N-末端氨基酸的分析测定。除此之外，Edman 方法还可以用于多肽链序列的分析。DNS 方法原理与 DNFB 方法的原理相同，但是灵敏度高于 DNFB 法且反应后不必提取就可直接进行鉴定。Edman 方法与 DNFB 方法和 DNS 方法相比， 每测定一个 N-末端氨基酸后余下的肽段仍然完整可供继续测定下一个氨基酸，因此该法可用于测定蛋白质整个序列。3. 蛋白质在生命活动过程中的重要作用主要有哪些？答：蛋白质在生命活动过程中的重要作用主要有：生物催化作用；代谢调节作

142、用；免疫保护作用；转运和储存的左右；运动与支持作用；控制生长与分化作用；接受和传递信息的作用；生物膜的功能；记忆和识别功能；4. 在严格厌氧条件下的酒精发酵过程中，使用放射性标记的碳源进行示踪原子实验。试问在起始的葡萄糖分子的什么位置上标记14C ，才能使它出现在乙醇的甲基碳位置上？使用酒精发酵过程相关主要化合物分子式加以说明。5.假定你从一种新发现的病毒中提取了核酸，请用你所熟悉的方法确定： 它是 DNA 还是 RNA？它是单链还是双链结构？写出所用方法的实验步骤加以说明。答：可以通过定糖法来确定：将样品与浓硫酸反应，再向其中加入地衣酚试剂，如果出现深绿色，说明样品是 RNA，否则是 DNA

143、；可通过增色效应来判断它是双链还是单链。先测定样品的A260， 然后通过加热使核酸变性，再测定其A260，如果升高了说明该核酸是双链；如果不变说明是单链。6.酶和化学催化剂之间的共同点是什么？酶与化学催化剂相比的不同之处又是什么？答：共同点：用量少效率高；不改变反应平衡点只是缩短反应到达平衡点的时间；降低反应所需活化能；反应前后酶和催化剂本身不发生改变。不同点：绝大多数酶是蛋白质，因此酶更容易受环境因素的影响；通常酶的催化效率更高；酶的专一性更强；酶的活性可被调节；一些特殊的化学反应只能通过酶来催化；7.酶作用高效率的机制是什么？3 6DNA 双螺旋结构的稳定因素是什么？答：酶作用高效率的机制

144、是：、底物的“趋近”和“定向”效应；、底物变形与张力作用；、共价催化作用；、酸碱催化作用；DNA 双螺旋结构的稳定因素是：互补碱基之间的氢键；碱基堆积力；离子键；8.一个未知肽的氨基酸组成为： Asp1, Ser1, Gly1, Ala1,Met1, Phe1和 Lys2。对其进行一系列分析，结果如下：DNFB 与之反应再酸水解得到DNP-Ala；经胰凝乳蛋白酶消化后从产物中分离出一个纯四肽，其组成为Asp1, Gly1, Lys1, Met1, 此四肽的 DNFB 反应降解产物为 DNP-Gly；该八肽经胰蛋白酶消化后可得到组成分别为 Lys1、Ala1、Ser1 以及 Phe1、Lys1

145、和 Gly1 的两个三肽及一个二肽。此二肽经CNBr 处理后游离出自由天冬氨酸。请推导该八肽序列。答：根据结果，该序列为：Ala-（Asp1, Ser1, Gly1, Met1, Phe1和 Lys2） ；根据结果，该序列为：Ala-（Ser,Lys）-Phe- Gly (Asp, , Met,和 Lys） ；根据结果，该序列为：Ala-Ser-Lys-Phe- GlyLys-MetAsp；9. Southern 印迹法的基本步骤是什么？答：将 DNA 样品经限制性内切酶降解后，用琼脂糖凝胶电泳分离DNA 片段，将胶浸泡在 NaOH 中进行 DNA 变性，然后将变性DNA 片段转移到硝酸纤维素

146、膜上在80烤 4-6 小时。使DNA 固定在膜上，再与标记的变性DNA 探针进行杂交，杂交反应在较高盐浓度和适当温度（68）下进行 10 多小时，经洗涤除去未杂交的标记探针、将纤维素膜烘干后进行放射自显影即可鉴定待分析的DNA 片段。10.什么是凝胶过滤？试以葡聚糖凝胶过滤为例说明它是如何将大小不同的物质分离开的。答：凝胶过滤又名分子筛层析或分子排阻层析，是指利用不同物质分子量的差异通过具有分子筛性质的凝胶对它们进行分离的方法。常用的凝胶有多种，以葡聚糖凝胶为例。它是由葡萄糖和交联剂形成的具有三维空间的网状结构物，两者的比例和反应条件决定其交联度的大小，即孔径大小，用G 表示。G 越小，交联度

147、越大，孔径越小。当蛋白质的直径大于凝胶的孔径时，被排阻于胶粒之外；当蛋白质的直径小于凝胶的孔径时，则进入凝胶。在层析洗脱时，大分子受阻小而先流出，小分子受阻大而后流出，结果使得大小不同的物质分离。11. 比较淀粉、糖原和纤维素在结构和组成方面的异同，并简述它们的理化性质答：三者皆为由葡萄糖分子通过糖苷键连接而成的多糖生物大分子。淀粉分直链淀粉和支链淀粉。直链淀粉是葡萄糖分子通过-1，4 糖苷键相连而成的直链结构，支链淀粉中每两个直链间的连接键是-1，6 糖苷键。淀粉在冷水中不溶解，但是在加热的情况下可以吸收水分而膨胀成糊状。直链淀粉遇碘成蓝色，支链淀粉遇碘成紫红色。糖原又称动物淀粉，与淀粉相同

148、也是由-D-葡萄糖构成的同聚多糖，结构上则与支链淀粉相似，也是带有-1，6 分支点的-1，4 葡萄糖多聚物，但分支比支链淀粉多。糖原遇碘成红色。纤维素是由-D-葡萄糖通过-1，4 糖苷键相连而成的同聚多糖。纤维素不溶于水，稀酸和稀碱。纤维素中每个葡萄糖残基含有三个自由羟基，因此能与酸形成酯。3 712.什么是蛋白质的变性与沉淀？举例说明蛋白质变性与沉淀的关系。答：蛋白质分子由于受到某些理化因素的影响，空间构象被破坏，失去了原有的生物活性的现象即蛋白质变性。蛋白质分子的溶解度下降导致其从溶液中析出的现象即蛋白质沉淀。 使蛋白质沉淀的方法有盐析法，有机溶剂沉淀法等。如果采用某些较强烈的方法如加热，

149、有机酸，重金属盐等使蛋白质沉淀的话，沉淀出的蛋白质会变性。但是用盐析等较温和的方法沉淀蛋白质时沉淀出的蛋白质不会变性。变性的蛋白质一般会沉淀，但是有些蛋白质的稀溶液用酸、碱或加热的方法变性后并不沉淀。例如，将牛奶煮沸，其中的酪蛋白变性了，但并没有沉淀出来。13. lac 操纵子的基本结构是怎样的？它是如何通过阻遏物和CAP 调节基因表达的？答： 乳糖操纵子结构如下图所示：结构基因部分由三个基因组成，它们是编码 -半乳糖苷酶的基因 Z，编码通透酶的基因 Y，编码半乳糖苷乙酰化酶的基因a。位于结构基因前面的是调控区，由启动子 P 和操纵区 O 组成。位于调控区前面的是阻遏物基因 I。此外，启动子上

150、游还有一段短序列是分解代谢基因活化蛋白CAP 的结合区。 结构基因表达调控的方式如下：无乳糖时，I 基因表达产生的阻遏物可与操纵区结合，从而挡住 RNA 聚合酶前移的通路，结构基因无法转录；当乳糖存在时， 乳糖作为诱导物可以与阻遏物结合， 并使得阻遏物发生变构而不能与操纵区结合，因此结构基因转录，产生三种消耗乳糖的酶；当乳糖和葡萄糖都存在时，细菌通常会先利用葡萄糖然后再利用乳糖。在利用葡萄糖时乳糖操纵子表达较差。当葡萄糖消耗完时，乳糖操纵子的表达增强。这种作用是通过CAP 实现的。当 cAMP 与 CAP 结合后，后者构象发生变化，对 DNA 的亲和力增强。乳糖操纵子中 CAP 的结合位点紧接于启动基因上游区， cAMP-CAP 复合物结合到 DNA 上的 CAP 位点后，则会促进 RNA 聚合酶结合到该启动基因上，进行转录。葡萄糖能显著降低细菌细胞中 cAMP 的含量，这样复合物 cAMP-CAP 减少，影响乳糖操纵子转录的启动。当葡萄糖消耗完，cAMP 含量上升时，乳糖操纵子的转录启动。所以CAP 是一种正调节蛋白，其作用需要 cAMP 参与。3 8