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1、第一节第一节 概述概述分光光度法分光光度法: 紫外分光光度法紫外分光光度法 可见分光光度法可见分光光度法 红外分光光度法红外分光光度法特点特点: 灵敏度高灵敏度高,相对误差较大相对误差较大 操作简便、仪器设备简单、选择性好操作简便、仪器设备简单、选择性好2学习资料光谱区光谱区 波长范围波长范围 原子或分子的运动形式原子或分子的运动形式 x射线射线 0.0110nm 原子内层电子跃迁原子内层电子跃迁 远紫外线远紫外线 10200nm 分子中原子外层电子的跃迁分子中原子外层电子的跃迁 紫外线紫外线 200380nm 同上同上 可见光可见光 380780nm 同上同上 近红外近红外 780nm2.5
2、m 分子中涉及氢原子的振动分子中涉及氢原子的振动 红外红外 2.5 25m 分子中原子的振动及分子转动分子中原子的振动及分子转动 远红外远红外 25300m 分子的转动分子的转动 微波微波 0.3mm1m 同上同上 无线电波无线电波 11000m 核磁共振核磁共振3学习资料 紫外吸收光谱：分子价电子能级跃迁。紫外吸收光谱：分子价电子能级跃迁。 波长范围：波长范围：190-900 nm. 紫外光区和可见光区紫外光区和可见光区 在紫外光区的分析称为在紫外光区的分析称为紫外光谱分析紫外光谱分析. 在可见光区的分析则称为在可见光区的分析则称为比色法比色法。250300350400nm1234e e4学
3、习资料第二节第二节 紫外紫外- -可见吸收光谱的产生可见吸收光谱的产生 formation of UV-Vis-Vis5学习资料6学习资料3紫外紫外-可见吸收光谱的产生可见吸收光谱的产生n n 7学习资料带状光谱的产生带状光谱的产生由于一般的紫外由于一般的紫外-可见分光光度计的分辨率所可见分光光度计的分辨率所限，观察到的谱线为合并成较宽的限，观察到的谱线为合并成较宽的带状谱线带状谱线，所以称为带状光谱。所以称为带状光谱。n电子能级跃迁电子能级跃迁所需的能量：所需的能量： 在在120eV之间之间n振动能级振动能级的能量差：的能量差： 在在0.0251eVn转动能级转动能级的能量差：的能量差： 小
4、于小于0.025eV8学习资料紫外紫外-可见吸收光谱的产生可见吸收光谱的产生n n 由于分子吸收紫外由于分子吸收紫外由于分子吸收紫外由于分子吸收紫外- -可见光区的电磁辐射，可见光区的电磁辐射，可见光区的电磁辐射，可见光区的电磁辐射，分子中价电子（或外层电子）的能级跃迁而产分子中价电子（或外层电子）的能级跃迁而产分子中价电子（或外层电子）的能级跃迁而产分子中价电子（或外层电子）的能级跃迁而产生（吸收能量生（吸收能量生（吸收能量生（吸收能量=两个跃迁能级之差）两个跃迁能级之差）两个跃迁能级之差）两个跃迁能级之差）. . n当分子从外界吸收能量后，就能引起分子能级当分子从外界吸收能量后，就能引起分
5、子能级向高一级能级的跃迁向高一级能级的跃迁.n 即从基态能级跃迁到激发态能级即从基态能级跃迁到激发态能级.分子只能吸分子只能吸收等于二个能级之差的能量：收等于二个能级之差的能量：9学习资料 （一）有机化合物紫外（一）有机化合物紫外- -可见吸收光谱的主要类型可见吸收光谱的主要类型有机化合物分子中价电子：有机化合物分子中价电子： 键电子键电子 键电子键电子 n电子电子第二节第二节 有机化合物的紫外有机化合物的紫外-可见吸收光谱可见吸收光谱 ultraviolet spectrometry of organic compounds10学习资料 有机化合物的紫外有机化合物的紫外 可见吸收光谱是三种电
6、子跃迁的结果：可见吸收光谱是三种电子跃迁的结果：电子、电子、电子、电子、n n电子电子。COHnp ps sHs sp p *s s *RKE ,Bnp p E分子轨道理论分子轨道理论：成键轨道反键轨道。当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态当外层电子吸收紫外或可见辐射后，就从基态向激发态( (反反键轨道键轨道) )跃迁。主要有四种跃迁所需能量跃迁。主要有四种跃迁所需能量大小顺序为：大小顺序为：n n n n 11学习资料（二）基本概念（二）基本概念1. 生色团、助色团生色团、助色团（1）生色团）生色团 chromophore5krEumEfC:5krEumEfC: 在有机化合物分子
7、结构中含有在有机化合物分子结构中含有键键的不饱和基团称为的不饱和基团称为生色团生色团。如乙烯基如乙烯基=C=C =C=C = =，乙炔基，乙炔基-CC-C-，羰基，羰基=C=O=C=O，亚硝基，亚硝基-N=O-N=O，偶氮基，偶氮基-N=N-N=N-，腈基，腈基-CN-CN等。等。产生产生* *或或nn* *跃迁跃迁。12学习资料 （2）助色团）助色团auxochrome5C:ksEkrEum5C:ksEkrEum 能使吸收峰波长向长波长方向移动的能使吸收峰波长向长波长方向移动的杂原杂原子饱和基团子饱和基团称为称为助色团助色团。 为为n n* *跃迁跃迁。助色团的结构特征是具有助色团的结构特征
8、是具有n孤对电子的基团，孤对电子的基团，即含有杂原子的基团，如即含有杂原子的基团，如NH2、 OH 、 OR 、 SH 、SR 、Cl 、SO3H、 COOH等。等。生色团生色团+助色团，助色团对应的跃迁类型为助色团，助色团对应的跃迁类型为nn* *。13学习资料 跃迁范围跃迁范围 甲烷甲烷 125 135nm 碘甲烷碘甲烷 150 210nm （* *） 259nm 259nm （n n * *） 二碘甲烷二碘甲烷 292nm292nm 三碘甲烷三碘甲烷 349nm349nm14学习资料（3）红移与蓝（紫）移）红移与蓝（紫）移 某些有机化合物常因其取代基或所用溶剂的某些有机化合物常因其取代基
9、或所用溶剂的改变，而使吸收带的最大吸收波长改变，而使吸收带的最大吸收波长maxmax发生发生移动。移动。 向向长波长方向长波长方向移动称为移动称为红移红移,red shift,red shift。 向向短波长方向短波长方向移动称为移动称为蓝（紫）移蓝（紫）移,blue ,blue shiftshift。 非共轭体系非共轭体系共轭体系共轭体系15学习资料 （1）K吸收带吸收带 K吸收带是吸收带是由德文由德文KonjugationKonjugation（共轭作用）（共轭作用）得名。得名。由于由于共轭双键中共轭双键中* *跃迁所产生的吸收跃迁所产生的吸收带称为带称为K K吸收带吸收带。2. 吸收带吸
10、收带 absorption band 是指吸收峰在紫外是指吸收峰在紫外- -可见光谱中的波带可见光谱中的波带位置位置. .16学习资料特点是特点是: :* *跃迁几率大，跃迁几率大，吸收峰强度大，吸收峰强度大，maxmax通常在通常在1000010000200000200000之间，之间，吸收峰位置吸收峰位置maxmax一般处在一般处在217217280nm280nm范范围内。围内。17学习资料 （2）R吸收带吸收带R R吸收带是由德文吸收带是由德文Radikal(Radikal(基团基团) )得名。得名。是由于是由于生色团及助色团中生色团及助色团中nn* *跃迁跃迁所引起的吸所引起的吸收带。
11、收带。只有分子中同时存在杂原子（具有只有分子中同时存在杂原子（具有n n孤对电子）孤对电子）和双键和双键电子时才有可能产生。电子时才有可能产生。它具有杂原子和双键的共轭基团它具有杂原子和双键的共轭基团, , 如如=C=C =O=O、-NO-NO、-NO-NO2 2、-N-N =N=N、-C-C =S=S等。等。18学习资料特点是特点是: :nn* *跃迁的能量最小跃迁的能量最小, ,处于长波长范处于长波长范围围, ,一般一般maxmax在在270nm270nm以上。以上。跃迁几率小，吸收强度弱，一般跃迁几率小，吸收强度弱，一般maxmax100100。19学习资料 (3)B吸收带吸收带B B吸
12、收带是由德文吸收带是由德文Benzenoid(Benzenoid(苯的苯的) )得名。得名。是由于是由于苯环苯环本身振动及闭合环状共轭双键本身振动及闭合环状共轭双键* *跃迁跃迁而产生的吸收带，是而产生的吸收带，是芳香族芳香族（包括杂环芳香族）的主要特征吸收带。（包括杂环芳香族）的主要特征吸收带。20学习资料特点是特点是: :在在230230270nm270nm呈现一呈现一宽峰，根据苯环取代宽峰，根据苯环取代情况在其中间会出现情况在其中间会出现若干个小峰。若干个小峰。苯的苯的B吸收带（在乙醇中）吸收带（在乙醇中）max255nm时，时，max约为约为200,属于弱属于弱吸收，常用来识别芳吸收，
13、常用来识别芳香族化合物香族化合物 21学习资料（4）E吸收带吸收带 E吸收带也是吸收带也是芳香族的特征吸收芳香族的特征吸收，由苯环中三个，由苯环中三个乙烯基的乙烯基的环状共轭引起的环状共轭引起的* *跃迁。跃迁。E E带可细分为带可细分为E E1 1和和E E2 2吸收带。吸收带。E E1 1带的吸收峰大约在带的吸收峰大约在185nm185nm，maxmax一般为一般为4700047000，因在真空紫外区，所以，因在真空紫外区，所以在紫外区观测不到。在紫外区观测不到。E E2 2带的吸收峰约在带的吸收峰约在204nm204nm，maxmax一般为一般为79007900。22学习资料若苯环上有助
14、色团如若苯环上有助色团如-OH-OH、-Cl-Cl等取代基，等取代基，由于由于nn* *共轭，使共轭，使E E2 2吸收带向长波长方吸收带向长波长方向移动，但一般在向移动，但一般在210nm210nm左右；左右；若有生色团取代而且与苯环共轭，形成了若有生色团取代而且与苯环共轭，形成了-共轭，则共轭，则E E2 2吸收带与吸收带与K K吸收带合并且吸收带合并且发生红移。发生红移。23学习资料（三）有机化合物的紫外（三）有机化合物的紫外- -可见吸收光谱可见吸收光谱 ultraviolet spectrometry of organic compounds24学习资料25学习资料26学习资料当饱和
15、烃含有当饱和烃含有助色团助色团时，除有时，除有* *跃迁外，还有跃迁外，还有nn* *跃迁，跃迁，n n电子较电子较键电子易于激发，则键电子易于激发，则maxmax产生红移产生红移。例如例如: :甲烷甲烷一般跃迁范围在一般跃迁范围在125125135nm135nm（远紫外区），（远紫外区），碘甲烷碘甲烷（CHCH3 3I I）的吸收峰为）的吸收峰为259nm259nm（nn* *跃迁），跃迁），CHCH2 2I I2 2和和CHICHI3 3的吸收峰则分别为的吸收峰则分别为292nm292nm和和349nm349nm。27学习资料 2. 不饱和烃不饱和烃这类化合物含有这类化合物含有孤立双键的烯
16、烃孤立双键的烯烃（如（如乙烯）和乙烯）和共轭双键的烯烃共轭双键的烯烃（如丁二烯）（如丁二烯）。它们含有它们含有电子，吸收能量后产生电子，吸收能量后产生* *跃迁。跃迁。28学习资料（1）孤立双键）孤立双键C C2 2H H6 6 maxmax150nm150nm， C C2 2H H4 4的的maxmax=171nm=171nm。丙烯醛丙烯醛CHCH2 2=CH-CHO=CH-CHO 208nm 208nm的的* *吸收峰，吸收峰， 328nm 328nm附近还有一个附近还有一个nn* *吸收峰。吸收峰。29学习资料 (2)共轭双键共轭双键K K吸收带吸收带。 (3)醛和酮类醛和酮类醛、酮中均
17、含有羰基，醛、酮中均含有羰基，羰基羰基可以产生可以产生三个吸三个吸收峰收峰：* *跃迁产生的吸收峰跃迁产生的吸收峰maxmax在在150nm150nm附近；附近；nn* *跃迁产生的吸收峰跃迁产生的吸收峰maxmax在在180nm180nm附近；附近；nn* *跃迁产生的吸收峰，在跃迁产生的吸收峰，在270270300nm300nm附附近，吸收强度较低，近，吸收强度较低，maxmax为为10102020。30学习资料 3. 芳香烃芳香烃苯苯的紫外光谱（乙醇为溶剂）有的紫外光谱（乙醇为溶剂）有三个吸三个吸收带收带均是由均是由* *跃迁引起的。跃迁引起的。31学习资料在在185nm185nm(ma
18、xmax=47000)=47000)有强吸收的有强吸收的E E1 1吸收带吸收带，因因在远紫外区在远紫外区，在此检测不到。，在此检测不到。在在204nm204nm(maxmax=7900)=7900)有中等强度的有中等强度的E E2 2吸收吸收带带，因其接近于，因其接近于200nm200nm，属于检测波长范围，属于检测波长范围的边缘，所以的边缘，所以不常用不常用。在在230230270nm270nm（maxmax=200=200）范围内较弱的）范围内较弱的一系列吸收带，为一系列吸收带，为B B吸收带吸收带。B B吸收带常被用来辨认芳香族化合物吸收带常被用来辨认芳香族化合物。32学习资料乙酰苯和
19、苯的紫外吸收光谱乙酰苯和苯的紫外吸收光谱 33学习资料若苯的两个取代基在对位时，波长较长；若苯的两个取代基在对位时，波长较长；而间位和邻位取代时，波长较小。而间位和邻位取代时，波长较小。例如：例如：34学习资料有一分子式为有一分子式为C8H8O的化合物的化合物,测得其紫外测得其紫外光谱如图所示。光谱如图所示。从图中说明该化合物有从图中说明该化合物有3种不同的吸收带，种不同的吸收带，都是什么带都是什么带?分子有什么生色团？分子有什么生色团？确定分子的结构式。确定分子的结构式。 35学习资料K带：带：217-280nm，max10 000-200 000B带：带：230-270nm，当苯环上有取代
20、基当苯环上有取代基时，发生红移时，发生红移R带：带：270nm，max10036学习资料 K带、带、B带、带、R带带共轭双键、羰基共轭双键、羰基37学习资料第三节第三节 溶剂对紫外溶剂对紫外- -可见吸收光谱的影响可见吸收光谱的影响一般选用在紫外一般选用在紫外-可见区无吸收峰可见区无吸收峰的饱和烃作为溶剂。的饱和烃作为溶剂。常用的有己烷、庚烷、环己烷、水、常用的有己烷、庚烷、环己烷、水、乙醇等。乙醇等。38学习资料39学习资料第四节第四节 紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计 ultraviolet and visible spectrometer 一、分光光度计的基本组成一、分光光度计
21、的基本组成 各种型号的紫外各种型号的紫外-可见分光光度计，一般由可见分光光度计，一般由五个部分组成：五个部分组成：40学习资料紫外可见分光光度计（日本）紫外可见分光光度计（日本）41学习资料 紫外紫外- -可见分光光度计基本结构示意图可见分光光度计基本结构示意图42学习资料1.光源光源 light source光源是提供能引起分子中价电子跃迁的能光源是提供能引起分子中价电子跃迁的能量。量。一般分为可见光光源和紫外光光源。一般分为可见光光源和紫外光光源。可见光光源常用钨丝灯和卤钨灯；可见光光源常用钨丝灯和卤钨灯；紫外光光源常用氢灯和氘灯紫外光光源常用氢灯和氘灯。43学习资料钨灯和碘钨灯可使用的波
22、钨灯和碘钨灯可使用的波长范围在长范围在3402500nmnm。必须严格控制灯丝的电压。必须严格控制灯丝的电压。在紫外区常用氢灯和氘灯。在紫外区常用氢灯和氘灯。它们在它们在160375nmnm范围范围内产生连续光源。内产生连续光源。44学习资料氘灯氘灯45学习资料2.单色器 monochromator单色器是能从光源辐射出的连续复合光中分出所需单色光单色器是能从光源辐射出的连续复合光中分出所需单色光的光学装置。的光学装置。 入射狭缝：光源的光由此进入单色器；入射狭缝：光源的光由此进入单色器； 准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束 色散元件：将复合光
23、分解成单色光；棱镜或光栅色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅 聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝；聚焦至出射狭缝； 出射狭缝。出射狭缝。46学习资料3.吸收池吸收池 absorption cell常用的吸收池材料有常用的吸收池材料有石英和玻璃两种石英和玻璃两种。石英池适用于紫外光区及可见光区。石英池适用于紫外光区及可见光区。玻璃吸收池只能用于可见光区。玻璃吸收池只能用于可见光区。47学习资料比色皿比色皿48学习资料4.检测器检测器 detector检测器是检测器是将光信号转变成电信号的装置将光信号转变成电信号的装置，
24、是基于是基于光电效应原理光电效应原理制成的。制成的。对对检测器的要求检测器的要求是：具有高的灵敏度，对是：具有高的灵敏度，对辐射能量的响应时间短，线性关系好，稳辐射能量的响应时间短，线性关系好，稳定性好等。定性好等。常用的检测器有常用的检测器有光电池、光电管和光电倍光电池、光电管和光电倍增管增管等。等。49学习资料光电倍增管光电倍增管50学习资料光电倍增管光电倍增管51学习资料5.信号显示记录系统信号显示记录系统信号显示记录系统的作用是放大信号并信号显示记录系统的作用是放大信号并以适当方式显示或记录下来。以适当方式显示或记录下来。52学习资料 53学习资料54学习资料第四节第四节 紫外紫外-
25、-可见分光光度法的应用可见分光光度法的应用 application of ultraviolet and visible spectrometry紫外紫外可见分光光度法能对物质进行可见分光光度法能对物质进行: 定性分析定性分析 结构分析结构分析 定量分析定量分析55学习资料1.定性分析定性分析 qualitative analysis未知物与已知标准物未知物与已知标准物如果吸收光谱的形状，包括如果吸收光谱的形状，包括: :吸收光谱的吸收光谱的maxmax、minmin、吸收峰的数目、位、吸收峰的数目、位置、拐点以及置、拐点以及maxmax等完全一致，可初步认为等完全一致，可初步认为是同一化合物
26、。是同一化合物。56学习资料2.结构分析结构分析 structure determination of organic compounds (1)官能团的鉴定官能团的鉴定 （）化合物在）化合物在220220800nm800nm范围内无吸收峰范围内无吸收峰说明此化合物是脂肪烃、脂环烃或它们的衍生说明此化合物是脂肪烃、脂环烃或它们的衍生物物( (氯化物、醇、醚、胺、腈、羧酸等。氯化物、醇、醚、胺、腈、羧酸等。可能是单烯或孤立多烯烃。可能是单烯或孤立多烯烃。可以推断该化合物不含苯环、共轭双键、醛、可以推断该化合物不含苯环、共轭双键、醛、酮或溴、碘等基团。酮或溴、碘等基团。57学习资料 （）在）在22
27、0220250nm250nm范围内有强吸收带（范围内有强吸收带（10 000）说明有共轭的两个不饱和键存在，此吸收带为说明有共轭的两个不饱和键存在，此吸收带为* *跃迁产生的跃迁产生的K K带，带，那么该化合物一定含有共轭二烯烃或不饱和醛酮结构。那么该化合物一定含有共轭二烯烃或不饱和醛酮结构。不饱和酮除了具有不饱和酮除了具有K K带，还应在带，还应在320nm320nm附近有附近有R R带出现。带出现。在在260260、300300和和330nm330nm附近有强吸收带，那么就有附近有强吸收带，那么就有3 3、4 4或或5 5个共轭双键存在个共轭双键存在。 （）在）在270270350nm35
28、0nm范围内有弱吸收带（范围内有弱吸收带（=10=10100100）在在200nm200nm附近无其它吸收，该吸收带为酮醛中羰基附近无其它吸收，该吸收带为酮醛中羰基nn* *跃迁产生的跃迁产生的R R带。带。 （）在）在260300范围内有中等强度吸收带（范围内有中等强度吸收带（ =200=200200000 ）且该吸收带可能带有精细结构，该吸收带为单个苯环的特征且该吸收带可能带有精细结构，该吸收带为单个苯环的特征B B带。带。若在大于若在大于300nm300nm或吸收延伸到可见区有高强度吸收，且具有稠环芳或吸收延伸到可见区有高强度吸收，且具有稠环芳烃、稠环杂芳烃或其衍生物存在。烃、稠环杂芳烃
29、或其衍生物存在。58学习资料1,2-1,2-二苯乙稀具有顺式和反式两种异构体：二苯乙稀具有顺式和反式两种异构体： 反式反式 顺式顺式 maxmax:295.5nm :295.5nm maxmax:280nm:280nm maxmax:27000 :27000 maxmax:10500:10500(2)判断顺反异构体判断顺反异构体59学习资料(3)判断互变异构体判断互变异构体乙酰乙酸乙脂有酮式和烯醇式间的互变异构：乙酰乙酸乙脂有酮式和烯醇式间的互变异构： 酮式酮式 烯醇式烯醇式240nm处仅有弱吸收处仅有弱吸收245nm处出现了强处出现了强的的K吸收带，吸收带，max 为为1800060学习资料
30、3.定量分析定量分析 quantitative analysisLambert-Beer law:Lambert-Beer law: The absorbance of a sample is The absorbance of a sample is proportional to the total amount of proportional to the total amount of material that absorbs the incident material that absorbs the incident light. Experimentally, it can b
31、e shown light. Experimentally, it can be shown that A=alcthat A=alc61学习资料nIn other words, the absorbance is directly proportional to the following:na,a constant that is a property of the material itself as well as the wavelength of the measurement;nl,the length of the path through which the light tr
32、avels in the sample; and nc,the concentration of the material that absorbs the light. The difference in use of c as the speed of light and c as the concentration should be obvious from the context.62学习资料nWhen the concentration c is in (mol L-1) and the path length in cm, then the constant a will hav
33、e the units (L mol-1 cm-1), in which case, it is given the symbol .is called the molar extinction coefficient, or molar absorptivity (the term currently preferred). With labels included, we seenA(unitless)= (L mol-1 cm-1)l(cm)c(mol L-1)nA=lc63学习资料 即在一定波长处被测定物质的吸光度与它的浓即在一定波长处被测定物质的吸光度与它的浓度呈线性关系。度呈线性关
34、系。 式中：式中：A A：溶液的吸光度；：溶液的吸光度； T T：溶液的透光度；：溶液的透光度； I0：入射光强度；：入射光强度； I：透射光强度；：透射光强度； ：摩尔消光系数，：摩尔消光系数，(L(Lmol-1cm-1) )； c c：溶液的浓度，：溶液的浓度，(mol(molL-1) )； l l：液层的厚度，即样品的光程长度：液层的厚度，即样品的光程长度,(cm),(cm)64学习资料 1必须是使用单色光为入射光 2溶液为稀溶液吸收定律的适用条件吸收定律的适用条件65学习资料3 3吸吸收收定定律律能能够够用用于于彼彼此此不不相相互互作作用用的的多多组组分分溶溶液液。它它们们的的吸吸光光
35、度度具具有有加加合合性性，且对每一组分分别适用，即：且对每一组分分别适用，即：nA A总总= A= A1 1+ A+ A2 2+ A+ A3 3+ A+ An nn=1 1bcbc1 1+2 2bcbc2 2+3 3bcbc3 3+n nbcbcn n4 4吸吸收收定定律律对对紫紫外外光光、可可见见光光、红红外外光都适用光都适用66学习资料n例题：已知某化合物的相对分子量为例题：已知某化合物的相对分子量为251251，将此化合物用已醇作溶剂配成浓度为，将此化合物用已醇作溶剂配成浓度为0.150 m mol 0.150 m mol L L-1-1溶液，在溶液，在480nm480nm处用处用2.0
36、0cm2.00cm吸收池测得透光率为吸收池测得透光率为39.8%39.8%，求该，求该化合物在上述条件下的摩尔吸光系数和吸化合物在上述条件下的摩尔吸光系数和吸光系数。光系数。67学习资料nA 5.0010-4M solution of a nickel macrocycle is put into a sample cuvette with a pathlength of 1.000 cm. The absorbance at 592 nm is found to be 0.446.What is at 592 nm? nIf a solution of unknown concentrati
37、on of the nickel macrocycle has an absorbance of 0.125 at the same , what is its concentration?68学习资料（1）单组分的定量方法）单组分的定量方法（）标准曲线法）标准曲线法（）标准对比法）标准对比法69学习资料 (2）多组分的定量方法多组分的定量方法 根据吸光度具有加和性的特征，在同一根据吸光度具有加和性的特征，在同一试样中可以测定两个或两个以上组分。试样中可以测定两个或两个以上组分。70学习资料71学习资料n例：某一化合物在例：某一化合物在287nm处有强吸收，处有强吸收，将其配制成将其配制成4.010-5molL-1的溶液，的溶液，用用1cm比色皿测得吸光度为比色皿测得吸光度为0.56，求其，求其和和T值。值。72学习资料n例：有两种异构体，异构体甲的吸收峰例：有两种异构体，异构体甲的吸收峰在在228nm(=14 000)，而异构体乙吸收，而异构体乙吸收峰在峰在296nm(=11 000)。试指出这两种。试指出这两种异构体分别属于下面两种结构中的哪一异构体分别属于下面两种结构中的哪一种。种。73学习资料
