《专题2动物细胞融合与单克隆抗体》由会员分享，可在线阅读，更多相关《专题2动物细胞融合与单克隆抗体（24页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、动物细胞工程动物细胞融合和单克隆抗体动物细胞融合和单克隆抗体1.1.动物细胞工程常用的技术手段有？最基础的是哪动物细胞工程常用的技术手段有？最基础的是哪个技术？个技术？2.2.动物细胞培养的过程；原理。动物细胞培养的过程；原理。3.3.动物细胞体外生长的特点；什么是细胞株和细胞动物细胞体外生长的特点；什么是细胞株和细胞系。系。4.4.体细胞核移植技术的过程和原理。体细胞核移植技术的过程和原理。回顾复习回顾复习2生物种间杂交生物种间杂交想像图想像图3温故知新温故知新问题思考问题思考Q1Q2获得白菜获得白菜-甘蓝利甘蓝利用了什么技术？用了什么技术？植物体细胞杂交植物体细胞杂交此技术的过程？此技术的
2、过程？4？再分化再分化？植物细胞杂交植物细胞杂交技术利用什么技术利用什么原理？原理？用什么方法可用什么方法可以诱导植物细以诱导植物细胞融合？胞融合？一、原理：细胞膜具有流动性细胞的全能性二、诱导方式：物理法、化学法植物细胞杂交植物细胞杂交技术最终获得技术最终获得什么？什么？三、用途：获得杂种植株温故知新温故知新脱分化脱分化5思考思考不同种动物体细胞能否杂交？过程如何？与植物体细胞杂交相比有何不同？已成功的动物细胞融合实例有很多，如人已成功的动物细胞融合实例有很多，如人小鼠、小鼠、人人兔、人兔、人鸡、鸡鸡、鸡鼠等上百种融合细胞。甚鼠等上百种融合细胞。甚至已成功完成了酵母菌至已成功完成了酵母菌鸡鸡
3、 、人、人胡萝卜胡萝卜 等细胞等细胞的融合。的融合。请阅读课本P52，填写下表6比较比较获得杂交细胞获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的病毒物理（离心、振动、电激） 化学（聚乙二醇）使细胞分散后诱导细胞融合去壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目结果诱导方法7 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的的的的糖蛋白糖蛋白糖蛋白糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞
4、膜上的蛋发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。生融合。生融合。生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染失去感染失去感染失去感染能力能力能力能力，但并，但并，但并，但并不破坏病原体的抗原结构不破坏病原体的抗原结构
5、不破坏病原体的抗原结构不破坏病原体的抗原结构。补充补充1. 灭活病毒诱导细胞融合的原理：灭活病毒诱导细胞融合的原理：82.诱导融合的方法诱导融合的方法物理法：物理法：物理法：物理法：化学法化学法化学法化学法：生物法生物法生物法生物法：电激电激电激电激聚乙二醇（聚乙二醇（聚乙二醇（聚乙二醇（PEG)PEG)灭活的病毒灭活的病毒灭活的病毒灭活的病毒3.意义和用途：意义和用途： （1）意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。交（种间、属间
6、、科间、动植物之间）成为可能。交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。（2）最重要的用途是最重要的用途是最重要的用途是最重要的用途是制备单克隆抗体制备单克隆抗体制备单克隆抗体制备单克隆抗体9什么是抗体?由什么细胞分泌产生？是否具有特异性？单克隆抗体10动物体内动物体内抗体抗体 （抗原不纯）（抗原不纯）血清抗体（抗体不纯）血清抗体（抗体不纯）筛选单一浆细胞筛选单一浆细胞不能无限增殖不能无限增殖 抗原抗原 浆细胞浆细胞血清血清人们获得抗体的传统方法：11人们获得抗体的传统方法小结向动物体内注射向动物体内注射_，使之产生抗体，使之产生抗体。抗原从动物从
7、动物_中分离抗体中分离抗体。血清(1)(1)方法：(2)(2)缺点： 产量低、纯度低，特异性差12思考思考怎样大量获得化学性质单一、特异性强的抗体呢？ B B淋巴细胞淋巴细胞 能分泌特异性抗体能分泌特异性抗体小鼠小鼠骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 能无限增殖能无限增殖杂交细胞杂交细胞设计方案：（不能无限增殖）（不能无限增殖）（不能产生抗体）（不能产生抗体）13杰出的成果杰出的成果-单克隆抗体单克隆抗体科勒科勒 George Kohler米尔斯坦米尔斯坦Csar Milstein荣获荣获19841984年诺贝尔生理学或医学奖年诺贝尔生理学或医学奖14单克隆抗体单克隆抗体杂交杂交杂交杂交 细胞细胞细胞细胞细
8、胞融合细胞融合细胞融合细胞融合骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞经免疫的小鼠经免疫的小鼠经免疫的小鼠经免疫的小鼠提取提取提取提取杂交瘤细胞杂交瘤细胞第一次筛选第一次筛选克隆化培养和抗体检测克隆化培养和抗体检测克隆化培养和抗体检测克隆化培养和抗体检测第二次筛选第二次筛选产生专一抗体的杂交瘤细胞群产生专一抗体的杂交瘤细胞群体外培养体外培养体外培养体外培养体内培养体内培养体内培养体内培养提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体选择性培养基选择性培养基选择性培养基选择性培养基单克隆抗体单克隆抗体B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞15B， 瘤，瘤， BB ， B瘤瘤 ， 瘤瘤瘤
9、瘤 ，1.细胞融合后培养液中有几种细胞？单克隆抗体单克隆抗体思考：3 3.制备过程中应用哪些细胞工程技术手段？2. 为什么要对小鼠注射抗原？获得产生相应抗体的获得产生相应抗体的B淋巴细胞（浆细胞）淋巴细胞（浆细胞）细胞融合技术、细胞培养技术细胞融合技术、细胞培养技术16单克隆抗体单克隆抗体杂交杂交杂交杂交 细胞细胞细胞细胞细胞融合细胞融合细胞融合细胞融合骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞B B淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞淋巴细胞经免疫的小鼠经免疫的小鼠经免疫的小鼠经免疫的小鼠提取提取提取提取杂交瘤细胞杂交瘤细胞第一次筛选第一次筛选克隆化培养和抗体检测克隆化培养和抗体检测克隆化培养和抗体检测克
10、隆化培养和抗体检测第二次筛选第二次筛选产生专一抗体的杂交瘤细胞群产生专一抗体的杂交瘤细胞群体外培养体外培养体外培养体外培养体内培养体内培养体内培养体内培养提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体提取单克隆抗体4.此过程中至少进行了几次筛选？目的相同吗？5.单克隆抗体的优点？特异性强，灵敏度高，特异性强，灵敏度高，可大量制备。可大量制备。选择性培养基选择性培养基选择性培养基选择性培养基单克隆抗体单克隆抗体17（1）作为诊断试剂）作为诊断试剂最广泛应用最广泛应用 准确、高效、简易、快速准确、高效、简易、快速（如同位素标记单（如同位素标记单（如同位素标记单（如同位素标记单克隆抗体，可诊断克隆抗体，
11、可诊断克隆抗体，可诊断克隆抗体，可诊断肿瘤、心血管畸形肿瘤、心血管畸形肿瘤、心血管畸形肿瘤、心血管畸形等）等）等）等）单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用18（2）运载药物）运载药物生物导弹生物导弹生物导弹生物导弹= =单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体单克隆抗体 + + 药物（治疗肿瘤）药物（治疗肿瘤）药物（治疗肿瘤）药物（治疗肿瘤）(“(“生物导弹生物导弹生物导弹生物导弹” ” 单抗导向，药物为弹头单抗导向，药物为弹头单抗导向，药物为弹头单抗导向，药物为弹头) )单克隆抗体的应用单克隆抗体的应用191 1、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，
12、得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（ ） A.A.经过免疫的经过免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞 B.B.没经过免疫的没经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞C.C.经过免疫的经过免疫的T T淋巴细胞淋巴细胞 D.D.没经过免疫的淋巴细胞没经过免疫的淋巴细胞A2.2.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较中，正确的是（ ）A.诱导融合的方法完全相同诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同所用的技术手段基本相同 C. 操作步骤基本相同操作步骤基本相同 D. 都能形成杂种细
13、胞都能形成杂种细胞 D考考你考考你203. 3. 单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（单克隆抗体制备过程中培育的杂交细胞是（ ）A.A.由小鼠能产生抗体的由小鼠能产生抗体的B B淋巴细胞与肝细胞融合淋巴细胞与肝细胞融合 B.B.由小鼠一个由小鼠一个B B淋巴细胞诱导融合而成淋巴细胞诱导融合而成 C.C.由小鼠一个由小鼠一个B B淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成淋巴细胞与肌瘤细胞诱导融合而成 D.D.由小鼠一个由小鼠一个B B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合而成 D4.4.只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（ ）A APEGPEG
14、B B灭活的病毒灭活的病毒 C C电刺激电刺激 D D离心离心B考考你考考你215.5. 单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B B淋巴细胞诱导融合后，淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是殖的细胞是 （ ）淋巴细胞淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞小鼠骨髓瘤细胞 B B淋巴细胞自身融合细胞淋巴细胞自身融合细胞小小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞杂交瘤细胞A. B.A. B.C. C. D. D. C C考考你考考你22两个或多两个或多 一一细胞膜的流动性细胞膜的流动性聚乙二醇诱导、灭活的病毒诱导、电刺激聚乙二醇诱导、灭活的病毒诱导、电刺激有性杂交有性杂交单克隆单克隆抗体抗体B淋巴细胞淋巴细胞杂交瘤细胞杂交瘤细胞单克隆单克隆抗体抗体理化性质单一，特异性强、灵敏度高，理化性质单一，特异性强、灵敏度高，并能大量制备并能大量制备23Thank You!
