中药成分分析的研究生长点

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1、中药成分分析的研究生长点中药成分分析的研究生长点 现代中药分析方法的连续化、自动化、最现代中药分析方法的连续化、自动化、最优化、智能化等特征已成为中药成分分析科学优化、智能化等特征已成为中药成分分析科学发展的必然趋势,它推动了一种分离手段和一发展的必然趋势,它推动了一种分离手段和一种检测手段相结合组成的多种联用技术的诞生。种检测手段相结合组成的多种联用技术的诞生。概述概述 LC-MS LC-MS的难点的难点:MS:MS要求较高的真空度要求较高的真空度,LC,LC流动相流动相为液体有一定的压力,因此联用时的关键是接口为液体有一定的压力,因此联用时的关键是接口技术的研制与发展。技术的研制与发展。(

2、1 1)高选择性)高选择性/ /高灵敏度高灵敏度 对选择的离子进行检测(对选择的离子进行检测(SIMSIM)灵敏度为灵敏度为ppbppb级或者更低级或者更低通过质谱,分子量或特定的离解反应进行定性通过质谱,分子量或特定的离解反应进行定性分析更加准确。分析更加准确。(2 2)适用化合物范围广泛)适用化合物范围广泛低或非挥发性,极性与离子性化合物低或非挥发性,极性与离子性化合物热不稳定性化合物热不稳定性化合物特点:特点: 梁明金等用梁明金等用LC-MS LC-MS 法对川芎有效部位中藁本法对川芎有效部位中藁本内酯和亚丁烯邻苯二甲内酯等内酯和亚丁烯邻苯二甲内酯等2222种化学成分进行种化学成分进行了

3、研究与指纹图谱分析,通过测定不同产地和不了研究与指纹图谱分析,通过测定不同产地和不同批次的川芎药材样品,利用同批次的川芎药材样品,利用NISTNIST谱库分析样品,谱库分析样品,参照相对峰面积分析确定了指纹图谱中的参照相对峰面积分析确定了指纹图谱中的1616个共个共有峰。有峰。液质联用液质联用液质联用液质联用毛细管电泳毛细管电泳毛细管电泳毛细管电泳质谱联用质谱联用质谱联用质谱联用高效液相高效液相高效液相高效液相荧光检测法荧光检测法荧光检测法荧光检测法气质联用气质联用气质联用气质联用色谱联用技术色谱联用技术气相色谱气相色谱- -质谱联用(质谱联用(GC-MSGC-MS) GC-MS GC-MS可

4、同时完成待测组分的分离和鉴定,特可同时完成待测组分的分离和鉴定,特别适用于多组分混合物中未知组分的定性定量分别适用于多组分混合物中未知组分的定性定量分析、化合物的分子结构辨别、化合物的分子量测析、化合物的分子结构辨别、化合物的分子量测定和元素组成分析。对可挥发性未知成分与微量定和元素组成分析。对可挥发性未知成分与微量成分的结构分析更是具有独到之处。成分的结构分析更是具有独到之处。 但是,但是, GC-MS GC-MS的应用范围有限,因为所研究的的应用范围有限,因为所研究的药物样品必须气化,故难以用于极性、热不稳定药物样品必须气化,故难以用于极性、热不稳定和大分子化合物的测定。和大分子化合物的测

5、定。液质联用液质联用液质联用液质联用毛细管电泳毛细管电泳毛细管电泳毛细管电泳质谱联用质谱联用质谱联用质谱联用高效液相高效液相高效液相高效液相荧光检测法荧光检测法荧光检测法荧光检测法气质联用气质联用气质联用气质联用色谱联用技术色谱联用技术毛细管电泳毛细管电泳- -质谱联用(质谱联用(CE-MSCE-MS) CE-MS CE-MS 联用技术集毛细管电泳的柱效高、消联用技术集毛细管电泳的柱效高、消耗时间短、消耗缓冲液少、可自动化、污染少等耗时间短、消耗缓冲液少、可自动化、污染少等优点和优点和MSMS的高灵敏度、专属性强于一体,可对复的高灵敏度、专属性强于一体,可对复杂成分进行分离和鉴定,且在每次分析

6、时都可同杂成分进行分离和鉴定,且在每次分析时都可同时得到迁移时间、分子量和碎片特征信息,是一时得到迁移时间、分子量和碎片特征信息,是一种对复杂样品既可定性分析又可定量分析的强有种对复杂样品既可定性分析又可定量分析的强有力手段。力手段。 目前常见的与质谱连接的接口有与单四极杆目前常见的与质谱连接的接口有与单四极杆质谱连接的接口、与离子阱串联质谱连接的接口质谱连接的接口、与离子阱串联质谱连接的接口及与电喷雾飞行时间质谱连接的接口等。当前,及与电喷雾飞行时间质谱连接的接口等。当前,CE-MSCE-MS法最大的问题是方法的重现性不好且分析成法最大的问题是方法的重现性不好且分析成本高。本高。 陈军辉等建

7、立了快速定性分析黄连中生物碱陈军辉等建立了快速定性分析黄连中生物碱类化合物的高效毛细管电泳类化合物的高效毛细管电泳- -电喷雾飞行时间质谱电喷雾飞行时间质谱(HPCE-ESI-TOF-MSHPCE-ESI-TOF-MS)联用分析方法。使用未涂层)联用分析方法。使用未涂层石英毛细管,以石英毛细管,以50mmol/L 50mmol/L 醋酸铵醋酸铵-0.5%-0.5%甲醇溶液甲醇溶液( (用氨水调用氨水调pH=7.2) pH=7.2) 为运行缓冲液,分离电压为为运行缓冲液,分离电压为25KV25KV;鞘液组成为;鞘液组成为50%50%甲醇甲醇-49.5% -49.5% 水水-0.5% -0.5%

8、醋酸,醋酸,鞘液流速为鞘液流速为4L/min 4L/min ;质谱选用正离子模式,碰;质谱选用正离子模式,碰撞电压为撞电压为100V100V。结果通过各色谱峰紫外光谱和质。结果通过各色谱峰紫外光谱和质谱可测得精确分子量。该法简便、快速,是黄连谱可测得精确分子量。该法简便、快速,是黄连中生物碱类化合物快速分离、鉴别的有效方法。中生物碱类化合物快速分离、鉴别的有效方法。液质联用液质联用液质联用液质联用毛细管电泳毛细管电泳毛细管电泳毛细管电泳质谱联用质谱联用质谱联用质谱联用高效液相高效液相高效液相高效液相荧光检测法荧光检测法荧光检测法荧光检测法气质联用气质联用气质联用气质联用色谱联用技术色谱联用技术

9、高效液相色谱法高效液相色谱法- - 荧光检测法(荧光检测法(HPLC-FLDHPLC-FLD) 高效液相色谱法结合荧光检测法具有的较高高效液相色谱法结合荧光检测法具有的较高的灵敏度的灵敏度, , 检出限非常低。同时检出限非常低。同时, , 由于其只能适由于其只能适用于可发出荧光的物质或成分的检测用于可发出荧光的物质或成分的检测, , 可以避免可以避免不发荧光的物质、成分的干扰不发荧光的物质、成分的干扰, , 因此具有良好的因此具有良好的选择性选择性, , 这成为荧光检测的独特优点这成为荧光检测的独特优点, ,但适用性较但适用性较差。差。例:荧光检测高效液相色谱法测定例:荧光检测高效液相色谱法测

10、定 茶叶中的五种菊酯类农药残留茶叶中的五种菊酯类农药残留采用梯度洗脱后荧光采用梯度洗脱后荧光检测检测exex为为221nm221nmemem为为320nm320nm 随着分析科学的不断发展,色谱联用技术已随着分析科学的不断发展,色谱联用技术已成为一种常规应用的现代分析检测技术。色谱联成为一种常规应用的现代分析检测技术。色谱联用技术具有较高的灵敏度、选择性及广泛的适用用技术具有较高的灵敏度、选择性及广泛的适用性,可对提取物中的已知、未知结构的成分及其性,可对提取物中的已知、未知结构的成分及其代谢物进行定性分析。随着色谱联用设备的普及,代谢物进行定性分析。随着色谱联用设备的普及,色谱联用技术必将在中药分析研究领域广泛应用。色谱联用技术必将在中药分析研究领域广泛应用。成为中药成分分析研究新的成为中药成分分析研究新的“ “生长点生长点” ”。谢谢大家!结束结束

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