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1、稀释涂布法纯化大肠杆菌稀释涂布法纯化大肠杆菌稀释涂布平板法1 1、概念、概念将菌液进行一系列的梯度将菌液进行一系列的梯度稀释稀释，然后将，然后将不同稀释度的菌液不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。当稀释倍数进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落标准菌落。 系列稀释操作系列稀释操作涂布平板操作涂布平板操作系列稀释操作1.将分别盛有将分别盛有9mL水的水的6支试管灭菌，并按支试管灭菌，并按101106的顺序编号。的顺序编号。菌液菌液2.2.用移液管吸取用移液管吸取1mL1mL培养的菌液，注入第二
2、支试管中。用培养的菌液，注入第二支试管中。用手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分手指轻压移液管上的橡皮头，吹吸三次，使菌液与水充分混匀。混匀。系列稀释操作菌液菌液菌液菌液系列稀释操作3.3.从从10101 1倍稀释的试管中吸取倍稀释的试管中吸取1mL1mL稀释液，注入稀释液，注入10102 2倍稀释倍稀释的试管中，重复第的试管中，重复第2 2步的操作。依次类推，直到完成最后步的操作。依次类推，直到完成最后一支试管的稀释。一支试管的稀释。系列稀释操作注意：注意： 移液管需要经过灭菌。操作时，移液管需要经过灭菌。操作时，试管口和移液管离火焰试管口和移液管离火焰12cm处处.涂布平板操
3、作涂布器涂布器1.将涂布器浸在盛有酒精将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。的烧杯中。注意：注意：酒精浓度为酒精浓度为70%70%。涂布平板操作3.3.将沾有少量酒精的涂布将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却燃尽后，冷却810s810s涂布平板操作4.4.用涂布器将菌液均匀地涂布用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可以转在培养基表面。涂布时可以转动培养皿，使菌液分布均匀。动培养皿，使菌液分布均匀。涂布平板操作稀稀释释10104 4稀稀释释10105 5稀稀释释10106 6结果与评价1 1：培养未接种培养基的作用是什么？若有菌落形成，说：培养未接种培养基的作用是什么？若有菌落形成，说明什么？明什么？ 对照对照培养基灭菌不彻底培养基灭菌不彻底2 2：在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？：在肉汤培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？ 呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐呈白色，为圆形，光滑有光泽，边缘整齐 3 3：培养：培养12h12h和和24h24h后的菌落大小？菌落分布位置？原因？后的菌落大小？菌落分布位置？原因？ 大小不同，位置相同大小不同，位置相同时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落时间越长，菌落中细菌繁殖越多，菌落体积越大；菌落的位置不动，但菌落数增多。的位置不动，但菌落数增多。
