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1、靶向制剂基础靶向制剂基础 Targeting Preparations1行业实操Introduction 靶靶向向给给药药系系统统 (target-oriented drug delivery system,简称简称TODDS)又称靶向制剂又称靶向制剂 是是借借助助载载体体、配配体体或或抗抗体体将将药药物物通通过过局局部部给给药药、胃胃肠肠道道或或全全身身血血液液循循环环而而选选择择性性地地浓浓集集于于靶靶组组织织、靶靶器官、靶细胞或细胞内结构的制剂。器官、靶细胞或细胞内结构的制剂。2行业实操 一、一、TODDS的分类的分类 1. 从药物到达的部位，可分为三级：从药物到达的部位，可分为三级：
2、第一级指到达特定的器官或组织；第一级指到达特定的器官或组织； 第第二二级级指指到到达达器器官官或或组组织织内内的的特特定定的的细细胞胞（如如肿肿瘤瘤细细胞胞而而 不不是是正正常常细细胞胞，肝肝细细胞胞而而不不是是Kupffer细细胞）；胞）； 第三级指到达靶细胞内的特定的细胞器。第三级指到达靶细胞内的特定的细胞器。 3行业实操 一、一、TODDS的分类的分类 1. 从药物到达的部位，可分为三级：从药物到达的部位，可分为三级： 第一级指到达特定的器官或组织；第一级指到达特定的器官或组织； 第第二二级级指指到到达达器器官官或或组组织织内内的的特特定定的的细细胞胞（如如肿肿瘤瘤细细胞胞而而 不不是是
3、正正常常细细胞胞，肝肝细细胞胞而而不不是是Kupffer细细胞）；胞）； 第三级指到达靶细胞内的特定的细胞器。第三级指到达靶细胞内的特定的细胞器。 4行业实操靶向制剂的设计靶向制剂的设计1 1 被动靶向被动靶向即自然靶向，药物以微粒给药系统为载体即自然靶向，药物以微粒给药系统为载体(microparticles drug delivery (microparticles drug delivery systems)systems)通过正常的生理过程运通过正常的生理过程运送至肝、脾、肺等器官送至肝、脾、肺等器官5行业实操 （一）被动靶向制剂（一）被动靶向制剂迄今，研究最多的迄今，研究最多的被动靶
4、向被动靶向给药制剂是给药制剂是 LiposomesMicrospheresMicro-emulsionsNanoparticlesTODDS分类介绍分类介绍6行业实操 被动靶向制剂经静脉注射后，在体内的分布首先取决于被动靶向制剂经静脉注射后，在体内的分布首先取决于微粒微粒的粒径大小的粒径大小。通常小于通常小于50nm的纳米囊与纳米球缓慢积集于骨髓；的纳米囊与纳米球缓慢积集于骨髓；小于小于7m时一般被肝、脾中的巨噬细胞摄取；时一般被肝、脾中的巨噬细胞摄取；大于大于7m的微粒通常被肺的最小毛细血管床以机械滤过的方的微粒通常被肺的最小毛细血管床以机械滤过的方式截留，被单核白细胞摄取进入肺组织或肺气泡
5、。式截留，被单核白细胞摄取进入肺组织或肺气泡。 被动靶向制剂的体内靶向性被动靶向制剂的体内靶向性TODDS分类介绍分类介绍7行业实操靶向制剂的设计靶向制剂的设计2 2 主动靶向主动靶向是指表面经是指表面经修饰修饰后的药物微粒给药系统，后的药物微粒给药系统，不被单核吞不被单核吞噬系统识别噬系统识别其上连接有特殊的配体，其上连接有特殊的配体，使其能够与靶细胞的受体结合使其能够与靶细胞的受体结合；8行业实操脂质体脂质体 Liposomes9行业实操脂脂质质体体（liposomes）的的概概念念最最早早是是1965年年被被英英国国科学家科学家Banghan等提出的。等提出的。当当磷磷脂脂分分散散在在水
6、水中中时时形形成成多多层层囊囊泡泡，而而且且每每一一层层均均为为脂脂质质双双分分子子层层，各各层层之之间间被被水水相相隔隔开开。这这种种由由脂脂质质双双分分子子层层组组成成，内内部部为为水水相相的的闭闭合合囊囊泡泡称称之之为为脂脂质体。质体。一、概述一、概述 Introductions图图 脂质体的示意图脂质体的示意图10行业实操脂质体主要由磷脂和胆固醇组成。磷脂由一个亲水脂质体主要由磷脂和胆固醇组成。磷脂由一个亲水的头部和两个疏水的尾部组成。的头部和两个疏水的尾部组成。一、概述一、概述 Introductions常见磷脂的结构示意图常见磷脂的结构示意图11行业实操载药脂质体的结构示意图载药脂
7、质体的结构示意图 12行业实操药物被脂质体包封后有以下特点：药物被脂质体包封后有以下特点：1 1靶向性和淋巴定向性靶向性和淋巴定向性 2 2长效性长效性 3 3细胞亲和性与组织相容性细胞亲和性与组织相容性 4 4降低药物毒性降低药物毒性 5 5提高药物稳定性提高药物稳定性 一、概述一、概述 Introductions13行业实操Enhanced permeability and retention (EPR) effect正常组织中的微血管内皮间隙致密、结构完整,大分子和脂质颗粒不易透过血管壁,而实体瘤组织中血管丰富、血管壁间隙较宽、结构完整性差, 造成大分子类物质和脂质颗粒具有选择性高通透性
8、和滞留性,这种现象被称作实体瘤组织的高通透性和滞留效应,简称EPR效应效应。14行业实操15行业实操16行业实操蛋白质的聚乙二醇化蛋白质的聚乙二醇化Methoxy Polyethylene Glycol，mPEGVeronese M. Drug Discovery Today. 2005 Nov; 10(21) PEGylated MoleculesFrank F. Davis1981行业实操 PEG-IFN -2b 1.5 g/kg1.5 g/kg浓浓度度度度 干干干干扰扰素素素素a-2b (pg/mL)a-2b (pg/mL)0204060801001201101001000IFN -2b
9、 3 MU3 MU140 160 180周一周一 周二周二 周三周三 周四周四 周五周五 周六周六 周日周日未检测到血清干扰素病毒重新出现h hData from EASL 2001: Schering-Plough Research Institute蛋白质的聚乙二醇化蛋白质的聚乙二醇化行业实操PEG conjugates already on the market腺苷脱氨酶腺苷脱氨酶天冬酰胺酶天冬酰胺酶促红细胞生成素促红细胞生成素行业实操蛋白质的聚乙二醇化蛋白质的聚乙二醇化聚乙二醇化干扰素聚乙二醇化干扰素半半衰衰期期生生物物活活性性Schering-Plough Corporation,
10、Wyss et al., Current Pharmaceutical Design, 200240h30%行业实操Half-life & activity following PEGylation行业实操Random & Site-specific PEGylation行业实操 脂脂 质质 体体 在在 体体 内内 与与 细细 胞胞 的的 作作 用用 过过 程程 :分分 吸吸 附附adsorption、 脂脂 交交 换换 lipid exchange、 内内 吞吞endocytosis、融合、融合fusion四个阶段。四个阶段。吸吸附附是是脂脂质质体体与与细细胞胞作作用用的的开开始始，受受粒粒
11、子子大大小小和和表面电荷等因素影响；表面电荷等因素影响；脂交换脂交换是脂质体的脂类与细胞膜上脂类发生交换；是脂质体的脂类与细胞膜上脂类发生交换；内内吞吞作作用用是是脂脂质质体体被被作作为为外外来来异异物物吞吞噬噬，通通过过内内吞吞，脂脂质质体体能能特特异异地地将将药药物物浓浓集集于于起起作作用用的的细细胞胞内；内；融融合合指指脂脂质质体体的的膜膜与与细细胞胞膜膜融融合合进进入入细细胞胞内内，然然后经溶酶体消化释放药物。后经溶酶体消化释放药物。一、概述一、概述 Introductions23行业实操24行业实操1中性磷脂磷中性磷脂磷磷磷脂脂酰酰胆胆碱碱phosphatidylcholine是是最
12、最常常见见的的中中性性磷磷脂脂。有有天天然然和和合合成成两两种种来来源源。与与其其它它磷磷脂脂比比较较，它具有价格低、电中性、化学惰性等性质。它具有价格低、电中性、化学惰性等性质。合成的磷脂酰胆碱：合成的磷脂酰胆碱：二二棕棕榈榈酰酰胆胆碱碱dipalmitoyl phosphatidyl choline, DPPC二二 硬硬 脂脂 酰酰 胆胆 碱碱 distearoyl phosphatidyl choline, DSPC鞘磷脂鞘磷脂sphingomyelin, SM磷脂酰乙醇胺磷脂酰乙醇胺phosphatidylethanolamine，PE）。）。二、制备脂质体的材料二、制备脂质体的材料
13、Materials for preparation of liposomes25行业实操26行业实操2负电荷磷脂负电荷磷脂负电荷磷脂又称为酸性磷脂。制备脂质体常用的负负电荷磷脂又称为酸性磷脂。制备脂质体常用的负电荷脂质有：电荷脂质有：磷脂酸（磷脂酸（phosphatidic acid, PA）；）；磷脂酰甘油（磷脂酰甘油（phosphatidyl glycerol, PG）；）；磷脂酰肌醇（磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol, PI）；）；磷脂酰丝氨酸（磷脂酰丝氨酸（phosphatidyl serine, PS）等。）等。二、制备脂质体的材料二、制备脂质体的材料 Mater
14、ials for preparation of liposomes27行业实操3正电荷脂质正电荷脂质正电荷脂质均为人工合成产品，目前常用正电荷脂质均为人工合成产品，目前常用的正电荷脂质有：的正电荷脂质有：硬脂酰胺（硬脂酰胺（stearylamine, SA）；）；胆固醇衍生物等。胆固醇衍生物等。正电荷脂质制备的脂质体在基因的传递系正电荷脂质制备的脂质体在基因的传递系统中应用非常普遍。统中应用非常普遍。二、制备脂质体的材料二、制备脂质体的材料 Materials for preparation of liposomes28行业实操4胆固醇胆固醇 cholesterol 胆胆固固醇醇（Ch）是是自
15、自然然界界膜膜中中的的另另一一类类重重要要的的组组成成成分。成分。 它它是是一一种种中中性性脂脂质质，亦亦属属于于两两亲亲性性分分子子，但但是是亲亲油油性大于亲水性。性大于亲水性。胆固醇的结构胆固醇的结构 二、制备脂质体的材料二、制备脂质体的材料 Materials for preparation of liposomes29行业实操5长循环膜材长循环膜材 长长 循循 环环 脂脂 质质 体体 是是 指指 含含 有有 神神 经经 节节 苷苷 脂脂GM1ganglioside GM1或或 聚聚 乙乙 二二 醇醇 Polyethylene glycol, PEG衍生物的脂质体。衍生物的脂质体。神神经
16、经节节苷苷脂脂GM1引引入入了了唾唾液液酸酸残残基基增增强强了了膜膜的的稳稳定定性性、明明显显减减少少了了网网状状内内皮皮系系统统细细胞胞对对脂脂质质体体的的摄取，延长了脂质体的体内循环时间；摄取，延长了脂质体的体内循环时间；极极性性的的聚聚乙乙二二醇醇基基则则增增强强了了脂脂质质体体膜膜的的亲亲水水性性，减减少少了了血血浆浆蛋蛋白白与与脂脂质质体体膜膜的的相相互互作作用用，阻阻止止网网状状内内皮皮系系统统细细胞胞对对脂脂质质体体的的摄摄取取，从从而而也也延延长长了了脂质体的体内循环时间。脂质体的体内循环时间。二、制备脂质体的材料二、制备脂质体的材料 Materials for prepara
17、tion of liposomes30行业实操脂质体的制备方法很多，常用的有下列几种：脂质体的制备方法很多，常用的有下列几种：1薄膜法薄膜法 Film forming method 该法最早由该法最早由Bangham报道，这是最早而至今仍常用报道，这是最早而至今仍常用的方法。的方法。系将磷脂等膜材溶于适量的氯仿或其它有机溶剂，系将磷脂等膜材溶于适量的氯仿或其它有机溶剂，脂溶性药物可加在有机溶剂中，然后在减压旋转下脂溶性药物可加在有机溶剂中，然后在减压旋转下除去溶剂，使脂质在器壁形成薄膜，加入含有水溶除去溶剂，使脂质在器壁形成薄膜，加入含有水溶性药物的缓冲液，进行振摇，则可形成大多室脂质性药物的
18、缓冲液，进行振摇，则可形成大多室脂质体（体（multilamellar vesicles, MLV），其粒径范围约），其粒径范围约1-5 m。然后可用各种机械方法分散薄膜法形成的类脂膜，然后可用各种机械方法分散薄膜法形成的类脂膜，形成形成MLV脂质体。脂质体。三、制备脂质体的方法三、制备脂质体的方法 Preparation of liposomes31行业实操2逆相蒸发法逆相蒸发法Reverse-phase evaporation最初由最初由Szoka提出。一般的制法系将磷脂等膜材溶于提出。一般的制法系将磷脂等膜材溶于有机溶剂如氯仿、乙醚等，加入待包封药物的水溶有机溶剂如氯仿、乙醚等，加入待包
19、封药物的水溶液（水溶液液（水溶液:有机溶剂有机溶剂=1:3-1:6）进行短时超声，直）进行短时超声，直至形成稳定的至形成稳定的WO型乳剂，减压蒸发有机溶剂，型乳剂，减压蒸发有机溶剂，形成脂质体。形成脂质体。用逆相蒸发法制备的脂质体一般为大单层脂质体，用逆相蒸发法制备的脂质体一般为大单层脂质体，常称为常称为REVs。本法特点是包封的药物量大，体积包封率可大于超本法特点是包封的药物量大，体积包封率可大于超声波分散法声波分散法30倍，它适合于包封水溶性药物及大分倍，它适合于包封水溶性药物及大分子生物活性物质如各种抗生素、胰岛素、免疫球蛋子生物活性物质如各种抗生素、胰岛素、免疫球蛋白、碱性磷脂酶、核酸
20、等。白、碱性磷脂酶、核酸等。三、制备脂质体的方法三、制备脂质体的方法 Preparation of liposomes32行业实操典型脂质体制备过程典型脂质体制备过程称量脂材料，称量脂材料， 如如 EPC/CHOL/PEG-DSPE =55/40/5 mol/mol/mol将脂材料溶解将脂材料溶解蒸发形成脂膜蒸发形成脂膜水化形成粗脂质体水化形成粗脂质体挤压形成小脂质体（空挤压形成小脂质体（空白或载药脂质体）白或载药脂质体）33行业实操典型脂质体制备方法典型脂质体制备方法薄膜法又称干膜分散法薄膜法又称干膜分散法即将脂质材料及脂溶性药即将脂质材料及脂溶性药的混合于有机溶剂中，通的混合于有机溶剂中，
21、通过氮气或减压除去有机溶过氮气或减压除去有机溶剂，在容器底壁上形成脂剂，在容器底壁上形成脂质薄膜；质薄膜；然后将溶有药物的水溶液然后将溶有药物的水溶液加到脂质薄膜上，室温下加到脂质薄膜上，室温下放置放置30min30min使脂质水化，然使脂质水化，然后在高于后在高于Tc Tc 振荡分散脂膜，振荡分散脂膜，类脂膜碎片吸水膨胀，形类脂膜碎片吸水膨胀，形成大多室脂质体。成大多室脂质体。经超声分散后可形成小单经超声分散后可形成小单室脂质体。室脂质体。34行业实操典型脂质体制备方法典型脂质体制备方法French压力制备脂质体（压力制备脂质体（French press liposomes, FPL）超声制
22、备脂质体的最大问题是生物材料遭受超声辐射，这样超声制备脂质体的最大问题是生物材料遭受超声辐射，这样不仅脂质变性，而且包裹在脂质体内的大分子和其它敏感化不仅脂质变性，而且包裹在脂质体内的大分子和其它敏感化合物也发生变化性。合物也发生变化性。目前有几种温和方法使膜破碎和重建。其中之一是将形成的目前有几种温和方法使膜破碎和重建。其中之一是将形成的大脂质体放入大脂质体放入French压力室，在很大的压力下挤压。这各方压力室，在很大的压力下挤压。这各方法产生直径法产生直径3080nm单层或寡层的脂质体。单层或寡层的脂质体。该法适于作为敏感大分子载体，其稳定性比超声制备的脂质该法适于作为敏感大分子载体，其
23、稳定性比超声制备的脂质体稳定性好。高压挤压对于重组稳定的膜蛋白也是非常有用体稳定性好。高压挤压对于重组稳定的膜蛋白也是非常有用的方法。的方法。French压力是根据其发明人之一命名的。最初设计用于植物压力是根据其发明人之一命名的。最初设计用于植物细胞和细菌的的破碎。目前由细胞和细菌的的破碎。目前由SLM-Aminco Inc制造制造, Urbana, Illinois 61801，USA 。French压力室的中央是压力室，由不诱钢材料制成。能持续压力室的中央是压力室，由不诱钢材料制成。能持续耐受耐受137824kPa甚至甚至275684kPa压力，有不同大小的压力室，压力，有不同大小的压力室
24、，分别为小于分别为小于4ml和和 40ml。35行业实操典型脂质体制备方法典型脂质体制备方法 挤压制备脂质体（挤压制备脂质体（membrane extrusion）通过挤压使脂质体通过固定孔径的滤膜，脂质体粒径变小。通过挤压使脂质体通过固定孔径的滤膜，脂质体粒径变小。该方法需要很低的压力，该方法需要很低的压力，689kPa即可。即可。过滤膜分两类，一类是用于除菌用膜，它的通道是弯曲的，过滤膜分两类，一类是用于除菌用膜，它的通道是弯曲的，这些通道的孔径由膜中纤维密度决定，由于通道的弯曲性质，这些通道的孔径由膜中纤维密度决定，由于通道的弯曲性质，当大于膜孔径的脂质体通过些膜时，膜孔很容易堵塞，脂质
25、当大于膜孔径的脂质体通过些膜时，膜孔很容易堵塞，脂质体不能到达另一面；另一类是聚碳酸酯膜（体不能到达另一面；另一类是聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）,该膜的通道是直的并且大小相同，脂质体容易该膜的通道是直的并且大小相同，脂质体容易通过，即使脂质体直径略大于孔径也能通过。一般将脂质体通过，即使脂质体直径略大于孔径也能通过。一般将脂质体原液稀释至原液稀释至12mol/ml后再过膜，脂质体易通过孔径。后再过膜，脂质体易通过孔径。脂质体加压通过孔时，其结构发生变化，根据所需脂质体的脂质体加压通过孔时，其结构发生变化，根据所需脂质体的大小选择膜的孔径。大小选择膜的孔径。36行业
26、实操3主动包封法主动包封法 Remote loading method主主动动包包封封法法使使得得制制备备高高包包封封率率脂脂质质体体成成为为可可能能，从从根本上改变了难以制备高包封率脂质体的局面。根本上改变了难以制备高包封率脂质体的局面。但但是是主主动动包包封封技技术术的的应应用用与与药药物物的的结结构构密密切切相相关关，不能推广到任意结构的药物，因而受到了限制。不能推广到任意结构的药物，因而受到了限制。主主动动包包封封法法也也称称为为遥遥控控包包封封装装载载(remote loading)技技术术，对对于于弱弱碱碱性性的的药药物物可可采采用用pH梯梯度度法法、硫硫酸酸铵铵梯梯度法等，对于弱
27、酸性的药物可采用醋酸钙梯度法等。度法等，对于弱酸性的药物可采用醋酸钙梯度法等。三、制备脂质体的方法三、制备脂质体的方法 Preparation of liposomes37行业实操三、制备脂质体的方法三、制备脂质体的方法 Preparation of liposomesPassive loadingActive loading38行业实操Doxorubicin39行业实操H+H+DDDH+DH+insideacid pHoudsideneutral pHH+40行业实操pH梯度法包封阿霉素隐形脂质体的原理梯度法包封阿霉素隐形脂质体的原理 前提：（前提：（1）分子型药物易穿透脂膜；）分子型药物易
28、穿透脂膜； （2）离子型药物不易穿透脂膜。）离子型药物不易穿透脂膜。普通磷脂材料和普通磷脂材料和PEG材料形成类脂薄膜材料形成类脂薄膜用用pH（如（如4）较低的枸橼酸盐缓冲液水化脂膜，形成脂质体）较低的枸橼酸盐缓冲液水化脂膜，形成脂质体挤压过膜处理使脂质体粒径变小，得空白脂质体混悬液挤压过膜处理使脂质体粒径变小，得空白脂质体混悬液调节脂质体膜外调节脂质体膜外pH使呈弱碱性（如使呈弱碱性（如pH8）另另外外取取盐盐酸酸阿阿霉霉素素溶溶于于枸枸橼橼酸酸盐盐缓缓冲冲液液（pH8），得得药药物物溶溶液液将将空空白白脂脂质质体体混混悬悬液液和和药药物物溶溶液液分分别别于于一一定定温温度度水水浴浴中中（T
29、c以以上上）加加热热片片刻刻，混混合合，于于该该水水浴浴中中放放置置10分分钟钟，不不时时振振摇摇，即得。即得。这是因为盐酸阿霉素在碱性环境中为阿霉素分子存在，在这是因为盐酸阿霉素在碱性环境中为阿霉素分子存在，在Tc以上分子型更易穿透脂质体膜，进入脂质体内部后，由于内以上分子型更易穿透脂质体膜，进入脂质体内部后，由于内部呈酸性，又形成枸橼酸阿霉素，以离子型存在，不能再缓部呈酸性，又形成枸橼酸阿霉素，以离子型存在，不能再缓回到溶液中，从而包封入脂质体内部。该法可达到回到溶液中，从而包封入脂质体内部。该法可达到95%以上以上的包封率。的包封率。 41行业实操高包封率：高包封率：遥控装载遥控装载硫酸
30、铵梯度法硫酸铵梯度法包封隐形脂质体包封隐形脂质体硫酸铵梯度法包封脂质体是根据化学平衡移动原硫酸铵梯度法包封脂质体是根据化学平衡移动原理而设计的，空白脂质体包封阿霉素的前提是：理而设计的，空白脂质体包封阿霉素的前提是： （1）脂质体膜可透过分子型药物；）脂质体膜可透过分子型药物； （2）离子型化合物较少或几乎不透过脂膜；）离子型化合物较少或几乎不透过脂膜； （3）硫酸阿霉素的溶度积）硫酸阿霉素的溶度积 盐酸阿霉素的溶度积。盐酸阿霉素的溶度积。42行业实操遥控装载遥控装载硫酸铵梯度法硫酸铵梯度法制备脂薄膜；制备脂薄膜；用高浓度硫酸铵溶液使脂膜水化（用高浓度硫酸铵溶液使脂膜水化（hydration）
31、；）；挤压使此混悬液分别通过不同孔径的核子打孔的聚挤压使此混悬液分别通过不同孔径的核子打孔的聚碳酸酯微孔滤膜，较大粒径的脂质体被剪切、碳酸酯微孔滤膜，较大粒径的脂质体被剪切、“粉粉碎碎”成较小粒径的脂质体，这样制备成了空白脂质成较小粒径的脂质体，这样制备成了空白脂质体。体。通过透析法或凝胶色谱柱过滤后，除去脂质体囊泡通过透析法或凝胶色谱柱过滤后，除去脂质体囊泡外部的硫酸铵，从而使脂质体囊泡内、外部的硫酸外部的硫酸铵，从而使脂质体囊泡内、外部的硫酸铵浓度形成了浓度梯度差铵浓度形成了浓度梯度差(如如1000倍。倍。分子型分子型DOXNH2可透过脂质体膜，则在脂质体膜可透过脂质体膜，则在脂质体膜内、
32、外形成如下平衡，见下图。内、外形成如下平衡，见下图。43行业实操遥控装载遥控装载硫酸铵梯度法硫酸铵梯度法44行业实操4免疫脂质体制备法免疫脂质体制备法免疫脂质体免疫脂质体immunoliposomes对靶细胞分子水平上的对靶细胞分子水平上的识别能力，取决于其表面所连接识别分子的特异性识别能力，取决于其表面所连接识别分子的特异性结合能力。当将癌细胞特异性单克隆抗体结合能力。当将癌细胞特异性单克隆抗体McAb结合结合到脂质体上，能选择性地杀伤癌细胞。到脂质体上，能选择性地杀伤癌细胞。抗体与脂质体结合方法有：抗体与脂质体结合方法有：（1）吸附法）吸附法（2）脂质蛋白融合法）脂质蛋白融合法 （3）交联
33、法）交联法三、制备脂质体的方法三、制备脂质体的方法 Preparation of liposomes45行业实操1形态、粒径及其分布形态、粒径及其分布脂质体的形态为封闭的多层囊状或多层圆球。其粒脂质体的形态为封闭的多层囊状或多层圆球。其粒径大小可用显微镜法测定径大小可用显微镜法测定小于小于2m时须用扫描电镜或透射电镜。时须用扫描电镜或透射电镜。也可用电感应法也可用电感应法(如如Coulter计数器计数器)光感应法光感应法(如粒度分布光度测定仪如粒度分布光度测定仪)激光散射法或激光粒度测定法测定脂质体粒径及其激光散射法或激光粒度测定法测定脂质体粒径及其分布。分布。四、脂质体的表征四、脂质体的表征
34、 Characterization of liposomes46行业实操47行业实操生物药剂学沈阳药科大学沈阳药科大学扫描电子显微镜扫描电子显微镜扫描电子显微镜扫描电子显微镜 ( (SEMSEM) )分辨率分辨率分辨率分辨率: : : : 5nm5nm5nm5nm放大倍数放大倍数放大倍数放大倍数: : : : 20,000020,000020,000020,0000透射电子显微镜透射电子显微镜透射电子显微镜透射电子显微镜 (TEM)(TEM)分辨率分辨率分辨率分辨率: : : : 0.2nm0.2nm0.2nm0.2nm放大倍数放大倍数放大倍数放大倍数: : : : 60,000060,000
35、0P9P9生物药剂学沈阳药科大学沈阳药科大学原子力显微镜原子力显微镜原子力显微镜原子力显微镜 (SPM)(SPM)分辨率分辨率分辨率分辨率: 0.1nm: 0.1nm: 0.1nm: 100,0000: 100,0000: 100,0000: 100,0000生物药剂学沈阳药科大学沈阳药科大学乳腺癌细胞乳腺癌细胞红细胞红细胞大肠杆菌大肠杆菌环状溴原子环状溴原子扫描隧道显微镜扫描隧道显微镜扫描隧道显微镜扫描隧道显微镜 分辨率分辨率分辨率分辨率: : 0.1 0.1 埃（埃（埃（埃（1/100nm1/100nm） 放大倍数放大倍数放大倍数放大倍数: : 3 3 亿倍亿倍亿倍亿倍2包封率和载药量的测
36、定包封率和载药量的测定 对处于液态介质中的脂质体制剂，可通过适当的对处于液态介质中的脂质体制剂，可通过适当的方法分离脂质体，分别测定介质和脂质体中的药方法分离脂质体，分别测定介质和脂质体中的药量，按下式计算包封率：量，按下式计算包封率： 包封率包封率=脂质体中的药量脂质体中的药量(介质中的药量介质中的药量+脂质体脂质体中的药量中的药量)100载药量载药量是指脂质体内含药物的重量百分率，如用是指脂质体内含药物的重量百分率，如用包封药物溶液体积的相对量表示，可称为体积包包封药物溶液体积的相对量表示，可称为体积包封率封率(entrapped volume)，单位为，单位为L/mol类脂。类脂。分离脂
37、质体分离脂质体可用柱色谱法、离心法和透析法等。可用柱色谱法、离心法和透析法等。四、脂质体的表征四、脂质体的表征 Characterization of liposomes51行业实操3渗漏率的测定渗漏率的测定脂质体不稳定性的主要表现为渗漏和聚集。脂质体不稳定性的主要表现为渗漏和聚集。渗漏率表示脂质体在液态介质中贮存期间包封率的渗漏率表示脂质体在液态介质中贮存期间包封率的变化，可由下式计算：变化，可由下式计算：渗漏率（贮藏一定时间后渗漏到介质中的药量渗漏率（贮藏一定时间后渗漏到介质中的药量/包包封的药量）封的药量）1004药物体内分布的测定药物体内分布的测定 通常以小鼠为受试对象，将脂质体静注给
38、药，以评通常以小鼠为受试对象，将脂质体静注给药，以评价脂质体在动物体内的分布。价脂质体在动物体内的分布。四、脂质体的表征四、脂质体的表征 Characterization of liposomes52行业实操53行业实操54行业实操55行业实操56行业实操57行业实操58行业实操59行业实操Abraxane Abraxis BioScience, Inc.(Paclitaxel protein-bound particles for injectable suspension). Each 50 mL vial contains 100 mg of paclitaxel and 900 mg of human albumin as a sterile lyophilized powder.60行业实操乳化溶剂蒸发法乳化溶剂蒸发法61行业实操62行业实操63行业实操64行业实操65行业实操66行业实操67行业实操68行业实操69行业实操70行业实操71行业实操72行业实操
