3M测试方法讲座幻灯片

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5、ogy3MTM PetrifilmTM细菌总数测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM细菌总数测试片MicrobiologyMicrobiology计数所有红色菌落计数范围25-250方格设计便于计数3MTM PetrifilmTM细菌总数测试片判读MicrobiologyMicrobiology当每片菌落数大于250个时采用估算测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以20（总生长面积数）3MTM PetrifilmTM 细菌总数测试片估算MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 细菌总数测试片阴性对照Mic

6、robiologyMicrobiology不可计数含有改良的VRB培养基目标菌落为红色带气泡培养时叠放片数小于20AOAC官方方法3MTM PetrifilmTM 大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology 3MTM PetrifilmTM 大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 大肠菌群测试片计数红色有气泡的菌落为大肠菌群计数范围25-250方格设计便于计数判读MicrobiologyMicrobiology3MTM Pe

7、trifilmTM 大肠菌群测试片当每片菌落数大于150个时采用估算测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以20（总生长面积数）估算MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 大肠菌群测试片阴性对照不可计数MicrobiologyMicrobiology以最快速度确认大肠菌群含有改良的VRB培养基含有酸检测的pH指示剂培养时叠放片数小于20培养时间6-14 h，推测大肠菌群24 h，确认大肠菌群3MTM PetrifilmTM 快速大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 快速大肠菌群测试片Microb

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9、测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以20（总生长面积数）估算MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 快速大肠菌群测试片确认性试验(8-24 h)估算当每片菌落数大于150个时采用估算测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以20（总生长面积数）MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 快速大肠菌群测试片阴性对照不可计数MicrobiologyMicrobiology可接种5mL样品灵敏度高达每5mL液体或每克固体有一个菌落测试一克样品时，一张3MTM PetrifilmTM HSCC测试片可代替3个标准灌注平板

10、3MTM PetrifilmTM 高灵敏度大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 高灵敏度大肠菌群测试片含有改良的VRB培养基目标菌落为红色带气泡培养时叠放片数小于10培养时间24 hAOAC官方方法MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 高灵敏度大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 高灵敏度大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 高灵敏度大肠菌群测试片判读计数红色带气泡的菌落为大肠菌

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12、MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片含有改良的VRB培养基大肠菌群为红色和蓝色带气泡的菌落，大肠杆菌为蓝色带气泡的菌落培养时叠放片数小于20培养时间24-48 hAOAC官方方法MicrobiologyMicrobiology24 h得出大肠菌群数对于肉、家禽、海鲜食品，24 h得出大肠杆菌数其它食品，48 h得出大肠杆菌数E. coli O157表现为大肠菌群3MTM PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片M

13、icrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片判读计数所有红色或蓝色带气泡的菌落为大肠菌群计数蓝色带气泡的菌落为大肠杆菌计数范围15-150方格设计便于计数MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片估算当每片菌落数大于150个时采用估算测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以20（总生长面积数）MicrobiologyMicrobiology3MTM Petrifilm

14、TM 大肠杆菌/大肠菌群测试片阴性对照不可计数MicrobiologyMicrobiology在国际上作为加工后污染检测的主要方法除了包括大肠菌群外，还包括非大肠菌群，如沙门氏菌、志贺氏菌、耶尔森氏菌3MTM PetrifilmTM 肠杆菌测试片MicrobiologyMicrobiology “In my opinion, the species that comprise Enterobacteriaceae make excellent indicator organisms for assessing post-process sanitation.” Don Zink, Ph.DDi

15、rector Food Safety Nestles USA, Inc.3MTM PetrifilmTM 肠杆菌测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 肠杆菌测试片含有改良的VRB 葡萄糖培养基肠杆菌为红色带黄色区域，有或没有气泡的菌落含有酸检测的pH指示剂培养时叠放片数小于20培养时间24hMicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 肠杆菌测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 肠杆菌测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM Petrif

16、ilmTM 肠杆菌测试片判读计数所有红色带黄色区域，有或没有气泡的菌落为肠杆菌计数范围15-100方格设计便于计数MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 肠杆菌测试片估算当每片菌落数大于100个时采用估算测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以20（总生长面积数）MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 肠杆菌测试片阴性对照不可计数MicrobiologyMicrobiology含有酵母和霉菌生长的营养物，并添加抗生素培养时叠放片数小于20片5天内出结果AOAC官方方法3MTM PetrifilmTM 酵母和霉菌

17、测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 酵母和霉菌测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 酵母和霉菌测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 酵母和霉菌测试片酵母判读小型菌落边界清晰颜色均一棕褐色至蓝/绿色菌落隆起，有立体感方格设计方便计数计数范围15-150MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 酵母和霉菌测试片霉菌判读大型菌落边界模糊中间颜色深暗颜色不均一计数范围15-150MicrobiologyMicro

18、biology3MTM PetrifilmTM 酵母和霉菌测试片估算当每片菌落数大于150个时采用估算测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以30（总生长面积数）MicrobiologyMicrobiology可以快速测定金黄色葡萄球菌26 h内得出确认结果快速测定有利于商业运作3MTM PetrifilmTM 金黄色葡萄球菌快速测试片MicrobiologyMicrobiology和BAM上所述的三个Baird Parker平板加一个凝固酶试管的做法等效26 h确认金黄色葡萄球菌，而BAM方法需69 h使用热稳定核酸酶使用一个平板即可确认所有的分离菌3MTM PetrifilmTM 金黄色葡

19、萄球菌快速测试片MicrobiologyMicrobiology含有改良的Baird Parker 培养基TNase确认反应片含有DNA、甲苯胺蓝和TCC，有利于菌落计数3MTM PetrifilmTM 金黄色葡萄球菌快速测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 金黄色葡萄球菌快速测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 金黄色葡萄球菌快速测试片MicrobiologyMicrobiology35 C培养24 h62 C培养1 h置入TNase确认反应片35 C再培养1 h3MTM PetrifilmT

20、M 金黄色葡萄球菌快速测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 金黄色葡萄球菌快速测试片判读计数红色或蓝色并有粉红色区域菌落计数范围15-100方格设计便于计数MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 金黄色葡萄球菌快速测试片估算当每片菌落数大于100个时采用估算测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以30（总生长面积数）MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 金黄色葡萄球菌快速测试片阴性对照不可计数MicrobiologyMicrobiology3MTM Petri

21、filmTM 第二代金黄色葡萄球菌快速测试片24 2 h即可获得确认结果 必要时在相同温度下用确认反应片确认使用判读简单效率高MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 第二代金黄色葡萄球菌快速测试片MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 第二代金黄色葡萄球菌快速测试片判读计数紫红色菌落为金黄色葡萄球菌加入确认反应片后，计数有粉红色晕环的菌落为金黄色葡萄球菌计数范围15-100方格设计便于计数MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 第二代金黄色葡萄球菌快速测试片 估算当每片

22、菌落数大于150个时采用估算测定每小格（1cm2）内的平均菌落数乘以30（总生长面积数）MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 第二代金黄色葡萄球菌快速测试片接种 1mL 样品培养 35 或37 C, 24 2 h计数 紫红色菌落为金黄色葡萄球菌可疑菌落辨认 紫红色外的菌落用确认反应片辨认 35 或37 C, 1-3 hMicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 两代金葡快速测试片的比较第二代第二代24 h内无需确认反应片即可看到金黄色葡萄球菌蓝色更浅，粉红色菌落，方便计数培养温度单一 (35 或 37 C)第一代

23、第一代确认反应片使用前菌落不可见菌落难观察需要高温培养 (62 C)MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 两代金葡快速测试片的比较第二代第二代把手环 和包装使确认反应片使用更方便 确认反应片并非必须培养基选择性强第一代第一代确认反应片操作繁琐确认反应片每次必须培养基选择性差MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM 两代金葡快速测试片的比较第二代第二代pH 6-8蛋白胨缓冲液可用使用DNase (取决于选择性培养基 )第一代第一代pH 6.5-7.5不能使用蛋白胨缓冲液使用TNase ( 取决于高温筛选 )Mic

24、robiologyMicrobiology软、硬件自动化实验数据处理 登录组织存储扫描仪自动分析Petrifilm细菌总数测试片用户友好的条代码系统提高了效率及精度3MTM PetrifilmTM 信息管理系统MicrobiologyMicrobiology能整合到复杂的LIMS系统，也能作为独立系统运行接受所有的希腊字母表示的实验结果（Petrifilm 测试片、Redigel测试品、琼脂等）为NCIMS接受3MTM PetrifilmTM 信息管理系统MicrobiologyMicrobiology提高实验室的信息管理水平3MTM PetrifilmTM 信息管理系统以更好的信息作出满意的

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26、obiology3MTM PetrifilmTM 畜体取样包 6454含有： 25 mL空白稀释液样品包取样棉球取样板和手套满足USDA FSIS关于大肠杆菌的检测规程 MicrobiologyMicrobiology3MTM电子移液枪1 mL和5 mL样式综合 便捷性 高效性 准确性减少 人为误差 重复操作导致的疲劳损伤 浪费MicrobiologyMicrobiology3MTM电子移液枪可预设程序，开展常规稀释自动检测计数误差满足乳制品检测特殊精度的标准满足FDA 2400 规程MicrobiologyMicrobiology3MTM移液枪1 mL和5 mL配套枪头为3M电子移液枪专门设

27、计宽孔枪头方便取样类型 无菌包装 非无菌包装 特大包装MicrobiologyMicrobiology3MTM快速涂抹棒可快速、简单、稳定地涂抹并收集环境样品使涂抹设备制备和样品收集的时间减少50减少培养基，稀释液及移液设备的花费MicrobiologyMicrobiology便捷的环境涂抹测试系统设备齐全干、湿两种取样方式直接转移1毫升样品，无需移液设备3MTM快速涂抹棒MicrobiologyMicrobiology3MTM快速涂抹棒5英寸长的人造纤维涂抹头1.4 mL Letheen肉汤培养基(接种量约1 mL)伽马射线辐射灭菌MicrobiologyMicrobiology使用方便弯曲

28、红色塞管，折断后将肉汤培养基挤入管体内取出涂抹棉签后取样放回涂抹棉签后摇晃10秒钟将样品倒入Petrifilm测试片3MTM快速涂抹棒MicrobiologyMicrobiology3MTM PetrifilmTM测试片环境检测过程空气取样方法用1 mL稀释液水化测试片使测试片凝胶1 h提起上层膜将测试片于空气中暴露15 分钟直接培养水化好的测试片可以冷藏7天MicrobiologyMicrobiology涂抹接触法1.润湿棉球，在瓶壁或快速涂抹棒管壁内侧挤掉多余溶液2.使涂抹棉签和表面保持30 C3.完全涂抹表面4.重复3次5.将涂抹刷放回管内并摇晃10秒6.将管内溶液接种测试片7.培养3M

29、TM PetrifilmTM测试片环境检测过程MicrobiologyMicrobiology直接接触法用1mL稀释液水化测试片放置一定时间使胶固化提起上层膜，使胶体部分置于目的表面用手指摩擦上层膜外侧，保证膜与表面充分接触使上层膜与目的表面分离，然后将其与培养基合上将测试片置于培养箱培养3MTM PetrifilmTM测试片环境检测过程MicrobiologyMicrobiologyAOAC官方分析方法原奶和巴氏消毒奶 细菌总数，大肠菌群 方法986.33金黄色葡萄球菌 方法2003.08所有乳制品 细菌总数，大肠菌群 方法989.10 高灵敏度大肠菌群测试 方法996.023MTM Pet

30、rifilmTM测试片乳品工业认证MicrobiologyMicrobiology“A”级巴氏消毒奶条例 牛奶和乳制品 细菌总数，大肠菌群和高灵敏度大肠菌群测试片使用测试片接种配件3M电子移液枪满足SMEDP精度要求满足FDA 2400 规则3MTM PetrifilmTM测试片乳品工业认证MicrobiologyMicrobiology原奶和巴氏消毒奶 细菌总数，大肠菌群 方法986.33金黄色葡萄球菌 方法2003.08巴氏消毒奶细菌总数，大肠菌群 方法986.33乳制品细菌总数，大肠菌群 方法989.10 高灵敏度大肠菌群 方法996.02 金黄色葡萄球菌 方法2003.083MTM P

31、etrifilmTM测试片AOAC官方方法MicrobiologyMicrobiology家禽、肉、海鲜 大肠杆菌/大肠菌群 方法998.08金黄色葡萄球菌 方法2003.11冷冻食品 金黄色葡萄球菌 方法2003.07食品 细菌总数 方法990.12 大肠菌群，大肠杆菌/大肠菌群 方法991.14 霉菌酵母 方法997.023MTM PetrifilmTM测试片AOAC官方方法MicrobiologyMicrobiologyAOAC OMASM与AOAC RI官方方法实验室内合作研究全世界认可为ISO,IDF及欧洲标准化组织采纳研究由副裁判长主持研究所独立实验室美国认可为方法或试剂盒认证提供

32、性能测试满足合作研究的前期需要1年认证过程MicrobiologyMicrobiology3MTM 灭菌安全产品3MTM AttestTM生物指示剂3MTM ComplyTM 化学指示仪3MTM AttestTM 监视启动试剂盒3MTM AttestTM 培养箱3MTM AttestTM 记录跟踪系统MicrobiologyMicrobiology简单、有效地精确检测蒸汽灭菌过程 包括： 时间 温度 蒸汽3MTM 灭菌安全产品MicrobiologyMicrobiology3MTM ComplyTM 化学指示仪蒸汽化学积分仪 检测： 时间 温度 蒸汽当灭菌条件满足时指示评价高压蒸汽灭菌锅的性能MicrobiologyMicrobiology3MTM AttestTM生物指示剂The “Gold standard” for assessing sterilization efficacyMicrobiologyMicrobiology嗜热杆菌芽孢有活性，非病原性，抵抗性强准确检测芽孢的致死情况3MTM AttestTM生物指示剂MicrobiologyMicrobiology