《第三节细胞因子的检测技术一生物学检测技术依赖细胞株》由会员分享，可在线阅读，更多相关《第三节细胞因子的检测技术一生物学检测技术依赖细胞株（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第三节第三节 细胞因子的检测技术细胞因子的检测技术一、一、 生物学检测技术生物学检测技术 依赖细胞株测定法依赖细胞株测定法 二、二、 免疫学检测技术免疫学检测技术 ELISA ELISA法法三、分子生物学检测技术三、分子生物学检测技术 分子杂交、分子杂交、PCRPCR 等检测等检测mRNAmRNA 1 1生物学检测生物学检测 依赖细胞株测定法依赖细胞株测定法PBMC + PHA PBMC + PHA 培养培养 取上清液取上清液 + CTLL-2 + CTLL-2细胞细胞 培养培养 + MTT + MTT 培养培养 测测ODOD570570值值 2 2第四节 免疫学常用的分子生物学技术一一一一.
2、 . . .免疫印迹试验免疫印迹试验免疫印迹试验免疫印迹试验(immunoblotting, Western (immunoblotting, Western (immunoblotting, Western (immunoblotting, Western blotting)blotting)blotting)blotting)(1)(1)(1)(1)电泳：抗原电泳：抗原电泳：抗原电泳：抗原( ( ( (如蛋白质如蛋白质如蛋白质如蛋白质) ) ) )在在在在SDS-SDS-SDS-SDS-聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺凝胶聚丙烯酰胺凝胶内内内内电泳，各组分按分子量大小分开。电泳，各组
3、分按分子量大小分开。电泳，各组分按分子量大小分开。电泳，各组分按分子量大小分开。(2)(2)(2)(2)转印：将电泳后的蛋白质转移至硝基纤维膜上。转印：将电泳后的蛋白质转移至硝基纤维膜上。转印：将电泳后的蛋白质转移至硝基纤维膜上。转印：将电泳后的蛋白质转移至硝基纤维膜上。(3)(3)(3)(3)鉴定：用酶标记或同位素标记的抗体确定抗原的鉴定：用酶标记或同位素标记的抗体确定抗原的鉴定：用酶标记或同位素标记的抗体确定抗原的鉴定：用酶标记或同位素标记的抗体确定抗原的位置，并可得知其分子量的范围。位置，并可得知其分子量的范围。位置，并可得知其分子量的范围。位置，并可得知其分子量的范围。 3 34 4二、免疫二、免疫PCR (immuno-polymerase chain PCR (immuno-polymerase chain reaction) reaction)原理：原理： 抗原包被抗原包被 + + 抗体抗体 + + 亲和素亲和素-SPA-SPA融合蛋白融合蛋白 + + 生物素生物素-DNA-DNA片段片段 PCR PCR扩扩增增 测定扩增产物测定扩增产物应用：应用： 同一样品中多种抗原的分析与鉴定。同一样品中多种抗原的分析与鉴定。5 56 6
