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1、分子生物实验室分子生物实验室 刘海花刘海花 2014.2.26乙肝、丙肝实验室检测及临床乙肝、丙肝实验室检测及临床意义意义n我国乙型肝炎感染率为57.6%，乙型肝炎病毒携带率为9.8%n我国有73慢性肝病患者，78肝硬化及71肝癌患者与HBV感染有关n我国每年有28万人死于HBV感染引起的疾病，占全世界的1/3HBV DNA检测检测HBV血清学检测HBeAgHBeAgHCV RNA检测检测表面抗原表面抗原 (HBsAg)表面抗体表面抗体(抗抗-HBs)e 抗原抗原(HBeAg)e抗体抗体(抗抗-HBe)n定性（qualitative） 判断阴阳性n定量（quantitative） 单位：ng/
2、ml、IU/ml、IU/L、PEIU/mlHBVHBV血清学检测血清学检测乙肝两对半乙肝两对半定性-乙肝“两对半”HBsAgHBsAg抗抗-HBs-HBsHBeAgHBeAg抗抗-HBe-HBe抗抗-HBc-HBc临床意义临床意义现症感染者，传染性强，现症感染者，传染性强，大三阳大三阳现症感染者，传染性低，现症感染者，传染性低，小三阳小三阳现症感染者，传染性低现症感染者，传染性低乙肝恢复期，必要时查乙肝恢复期，必要时查HBV DNAHBV DNA既往感染过，不需再注射疫苗既往感染过，不需再注射疫苗既往感染过，需再接种疫苗既往感染过，需再接种疫苗接种疫苗获得免疫力接种疫苗获得免疫力检测检测适用标
3、本适用标本项目编号项目编号价格价格方法方法乙肝五项（定性）测定血浆/血清/全血2502504030974030972525元元酶免化学发光酶免酶免乙肝五项（定量）测定血浆/血清/全血S S2502504030034030039595元元核心抗原测定血浆/血清/全血2504030662504030665050元元丙型肝炎抗体测定（Anti-HCV）血浆/血清/全血2504030142504030142020元元每天上午10：00前样本当天可出报告，10:00后样本第二天下午出报告相关检验项目详情相关检验项目详情相关检验项目详情相关检验项目详情 检验科（检验科（检验科（检验科（8400840084
4、0084005 5 5 5） HBV DNA检测检测HBV血清学检测HBeAgHBeAgHCV RNA检测检测HBV DNA HBV DNA 分子检测分子检测HBV DNA HBV DNA 定量检测定量检测HBV HBV 耐药突变株检测耐药突变株检测乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)DNA(HBV)DNA检测意义检测意义 高水平复制高水平复制(10(107 7copies/ml)copies/ml) 中等水平复制（中等水平复制（10105 510106 6copies/mlcopies/ml） 低水平复制（低水平复制（10104 4copies/mlcopies/ml） 病毒可能不存在（低于检
5、测限病毒可能不存在（低于检测限 ）可以为是否进行抗病毒可以为是否进行抗病毒药物治疗以及选择不同药物治疗以及选择不同抗病毒药物提供参考抗病毒药物提供参考结合免疫学指标、肝功结合免疫学指标、肝功能指标可以更全面、科能指标可以更全面、科学、准确地掌握病情，学、准确地掌握病情，进而指导治疗进而指导治疗nHBVHBV感染者病毒感染者病毒存在与否存在与否以及以及复制水平复制水平的判断的判断血清（浆）血清（浆）HBV DNA HBV DNA 含量高，反映病毒复制活跃。含量高，反映病毒复制活跃。乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)DNA(HBV)DNA检测意义检测意义n对抗病毒药物对抗病毒药物治疗效果治疗效果进
6、行有效监测进行有效监测测定次数测定次数监测抗病毒药物治疗效果监测抗病毒药物治疗效果不能凭两三次结果来判断，不能凭两三次结果来判断，必须进行多次测定必须进行多次测定每次检测的间隔时间不宜每次检测的间隔时间不宜太短，一般间隔太短，一般间隔2 2周以上周以上PCRPCR检测结果与其它检测项检测结果与其它检测项目不同，一般量值变化在目不同，一般量值变化在一个数量级内均视为没有一个数量级内均视为没有变化变化乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)DNA(HBV)DNA检测意义检测意义n缩短缩短“窗口期窗口期”，有利于感染的，有利于感染的早期诊断早期诊断HBVHBV感染后至血液中出现可检出的感染后至血液中出现可
7、检出的HBsAgHBsAg或或HBVHBV特异抗体需要一定时间。特异抗体需要一定时间。nHBV DNAHBV DNA先于先于HBsAgHBsAg出出现于外周血循环中现于外周血循环中n实时荧光定量实时荧光定量PCRPCR检检测方法比其它方法具测方法比其它方法具有更高的灵敏度有更高的灵敏度n病毒病毒S S区变异可导致区变异可导致HBsAgHBsAg无法检出无法检出乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒(HBV)DNA(HBV)DNA检测意义检测意义n可以准确可以准确判断传染性强弱判断传染性强弱血清（浆）中血清（浆）中HBV DNAHBV DNA浓度越高，传染性越强浓度越高，传染性越强l 10109 9copie
8、s/mlcopies/ml，日常生活密切接触有，日常生活密切接触有强传染性强传染性l 10105 510106 6copies/mlcopies/ml，日常生活密切接触，日常生活密切接触传染传染 性较小性较小l 10 105 5 copies/ml copies/ml，日常生活密切接触，日常生活密切接触几乎没有什几乎没有什么传染危险性么传染危险性l 但只要血液中有几个病毒即可发生输血后感染但只要血液中有几个病毒即可发生输血后感染2012EASL指南 20122012： 为为 了了 避避 免免 乙乙 肝肝 复复 发发 ， HBVHBVDNADNA需需控控制制在在实实时时荧荧光光定定量量PCRPC
9、R检检测测不不到到的的水水平平（1015IU/ml1015IU/ml）。HBVHBVDNADNA的监测是检测治疗失败的关键。的监测是检测治疗失败的关键。 20112011：超超敏敏感感实实时时荧荧光光定定量量PCRPCR是是检检测测丙丙肝肝病病毒毒感感染染诊诊断断的的最最理理想想的的方方法法，其检测灵敏度下限为其检测灵敏度下限为50IU/ml50IU/ml。 欧洲肝脏研究协会欧洲肝脏研究协会HBV DNAHBV DNA检测方法检测方法实验室检测HBV DNA有两种方法：一步法：灵敏度HBV:100 IU/ml 磁珠法（内标定量）：灵敏度HBV:10 IU/ml大大提高HBV感染监测的准确性和精
10、确度，缩短HBV血清学诊断“窗口期”为临床早期诊断和疗效评价提供重要的依据为血液筛查打下坚实的基础高精度肝病毒核酸检测技术的临床意义HBV DNA检测检测HBV 血清学检测血清学检测HBeAgHBeAgHCV RNA检测检测1.大大提高HCV感染的检测准确性，有利于疾病的早期诊断2.对“窗口期”感染的筛选和提高输血安全也有重要意义3.在抗病毒药物治疗中，HCV RNA是疗效评价的指标之一，同时可为用药和预后提供参考高精度丙肝病毒核酸检测技术的临床意义HCVHCV核心抗原、核心抗原、HCVHCV抗体及抗体及HCVHCV RNARNA检测结果模式及意义检测结果模式及意义丙肝核心抗原丙肝核心抗原HC
11、V-cAg丙肝抗体丙肝抗体HCV-Ab 丙肝丙肝 核酸核酸HCV-RNA简要意义简要意义-没有感染丙肝病毒或早于没有感染丙肝病毒或早于14天感染，天感染，低于试剂最低检测灵敏度低于试剂最低检测灵敏度-+-已感染过丙肝病毒或丙肝病毒感染后已感染过丙肝病毒或丙肝病毒感染后病毒已清除病毒已清除+-+丙肝病毒感染早期，丙肝抗体检测窗丙肝病毒感染早期，丙肝抗体检测窗口期，有传染性口期，有传染性-+早期丙肝病毒感染，早期丙肝病毒感染，12-14天感染，低天感染，低于抗原最低检测灵感度，有传染性于抗原最低检测灵感度，有传染性+-早期丙肝病毒感染，早期丙肝病毒感染，HCV RNA检检测线或测线或RNA样本降解
12、，有传染性样本降解，有传染性+慢性丙肝病毒感染，有传染性慢性丙肝病毒感染，有传染性分子生物实验室分子生物实验室肝炎肝炎病毒病毒的检测的检测项目详情项目详情科室代码84010检测检测适用标本适用标本项目编号项目编号价格价格乙肝乙肝DNADNA检测（荧光检测（荧光PCRPCR）血浆血浆/ /血清血清/ /全血全血250700029250700029130130元元乙型肝炎乙型肝炎HBVHBV病毒载量内标定量测定病毒载量内标定量测定血浆血浆/ /血清血清/ /全血全血250400108250400108500500元元乙型肝炎耐药基因检测乙型肝炎耐药基因检测血浆血浆/ /血清血清/ /全血全血250
13、500037250500037480480元元丙肝丙肝RNARNA（荧光（荧光PCRPCR）血浆血浆/ /血清血清/ /全血全血250700047250700047130130元元丙型肝炎病毒核糖核酸扩增定量检测丙型肝炎病毒核糖核酸扩增定量检测血浆血浆/ /血清血清/ /全血全血250400135250400135280280元元丙型肝炎丙型肝炎HCVHCV病毒载量内标定量测定病毒载量内标定量测定血浆血浆/ /血清血清/ /全血全血250403095250403095500500元元分子生物实验室肝炎病毒检测样本要求及检测时间分子生物实验室肝炎病毒检测样本要求及检测时间 科室代码科室代码8408401 10 0项目项目样本要求样本要求保存运输条件保存运输条件检测时间检测时间HBV DNA检测全血、血清、血浆促凝管 4每周一、周四10:30前样本，15:00出报告HBV DNA高精度检测 全血、血清、血浆促凝管 4每周四11:00前样本，当日16:30出报告 HCV RNA检测 全血、血清、血浆促凝管 4h内送至实验室每周三10:00前样本，15:00出报告 HBV耐药基因检测全血、血清、血浆促凝管 4送检日起一周内出报告
