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1、一、检测器器二、二、溶媒溶媒三、三、供供试品溶液的配制品溶液的配制四、四、顶空瓶中空瓶中样品体品体积五、五、色色谱柱柱六、六、七、七、进样方式方式八、八、提高灵敏度提高灵敏度九、提高分离度九、提高分离度十、十、未知峰未知峰归属属十一、十一、方法方法验证一、一、检测器器FIDFID（火焰（火焰电离）、离）、 NPDNPD（热表面表面电离）和离）和ECDECD（化学（化学电离）离） ，应用范用范围分分别为有机物、有机物、氮氮/ /磷化合物、磷化合物、电负性物性物质（卤代代烃）。）。多数情况下，三多数情况下，三氯甲甲烷、DMFDMF、DMSODMSO均用均用FIDFID检测，但需采取一些措施提高，但
2、需采取一些措施提高检测灵敏度灵敏度。四氯化碳则必须用ECD检测器。以下三点注意：FIDFID质量型量型检测器，器，对有机物均有响有机物均有响应，只，只是是对难电离的离的卤代代烃和氮和氮/ /磷化合物灵敏度比磷化合物灵敏度比ECDECD、NPDNPD检测器低很多。器低很多。ECDECD半半选择性的性的检测器，器，对多种多种类型化合物型化合物均有响均有响应。如果含有其他非。如果含有其他非卤代代烃溶溶剂，应进行系行系统适用性适用性试验考察分离度。考察分离度。如果采用如果采用FIDFID检测器，同器，同时又采用填充柱又采用填充柱测定定三三氯甲甲烷，灵敏度达不到限度要求。，灵敏度达不到限度要求。二、溶媒
3、二、溶媒选择原原则：溶解：溶解样品，并品，并对色色谱柱无柱无损坏坏L例如直接例如直接进样不能含不能含GCGC不能分析的无机不能分析的无机盐 顶空进样：首首选水，其次水，其次DMFDMF、DMSODMSO、不、不挥发酸碱溶液，不可使酸碱溶液，不可使用用盐酸溶液和氨水，可酸溶液和氨水，可选择在在808090C90C加加热能溶解能溶解样品的品的试剂。温度太高爆瓶温度太高爆瓶如待如待查成分成分为苯、甲苯、三苯、甲苯、三氯甲甲烷等水溶性不好的等水溶性不好的溶溶剂，可采用混合液，即先用少量乙醇或甲醇溶解，可采用混合液，即先用少量乙醇或甲醇溶解待待查溶溶剂再用水稀再用水稀释。当待当待测溶溶剂在有机相中的分配
4、系数明在有机相中的分配系数明显大于水相大于水相（例如三（例如三氯甲甲烷），），对顶空空进样来来说采用有机相如采用有机相如DMFDMF为溶溶剂不是很好的不是很好的选择（K K大，灵敏度低）；如大，灵敏度低）；如果果样品也只能在有机相中溶解，建品也只能在有机相中溶解，建议采用混合液。采用混合液。直接直接进样：水、合适的有机溶媒或混合液。水、合适的有机溶媒或混合液。对于非极性于非极性色色谱柱，水柱，水对柱有影响，会柱有影响，会缩短柱的使用寿短柱的使用寿命。命。助溶方式：有有报道加道加5%SDS5%SDS助溶。助溶。顶空小平加盖后可超声加空小平加盖后可超声加热助溶助溶三、供三、供试品溶液的配制品溶液的
5、配制不可超声或加不可超声或加热助溶助溶 ，以免残留溶以免残留溶剂挥发；如果；如果顶空空进样，样品置品置顶空瓶封空瓶封盖之后可以超声或加盖之后可以超声或加热溶解。溶解。大大颗粒粒样品不可以研磨取品不可以研磨取样，只能取原，只能取原态样品（或冷品（或冷冻粉碎）。粉碎）。顶空空进样方式要求方式要求对照品配制与供照品配制与供试品品配制方法配制方法应绝对一致，否一致，否则顶空瓶中气空瓶中气液平衡状液平衡状态有差异（基有差异（基质效效应）。）。对照品配制最好采用照品配制最好采用标准加入法。准加入法。四、四、顶空瓶中空瓶中样品体品体积顶空样品瓶中的样品体积（Vs）对分析结果影响很大，因为它直接决定了相比。C
6、gCo/（K）其中Vg/Vs，KCs/Cg，当K时，样品体积改变对灵敏度影响很小。 当K时，影响很大。例如，分析水中的二氧六环和环己烷（三氯甲烷），60C平衡，两者的K分别为642、0.04。当样品体积由1ml增加至5ml，二氧六环的峰面积只提高了1.3，而环己烷却提高了452。根据实际经验来说，20ml顶空瓶样品装量为5ml比较适当。五、色五、色谱柱柱残留溶残留溶剂检查大多需要大多需要较高的分离度和高的分离度和检测灵敏度，通常采用毛灵敏度，通常采用毛细管色管色谱柱。柱。填充柱口填充柱口径大，造成溶径大，造成溶剂峰峰扩散，散，检测灵敏度低。灵敏度低。实践践证明，使用非极性至中等极性色明，使用非
7、极性至中等极性色谱柱，柱，配合适当柱温梯度可分离大部分有机溶配合适当柱温梯度可分离大部分有机溶剂。通常当待通常当待查溶溶剂数目数目仅两、三种两、三种时，可用极，可用极性性较强的色的色谱柱，出峰快，分析柱，出峰快，分析时间短；当短；当溶溶剂数目数目较多多时，还是是优选非极性至中等极非极性至中等极性柱分离性柱分离较好。好。非极性柱弱极性柱中低极性柱中等极性柱商品名DM-1, DB-1, HP-1, SPB-1, BP-1, SE-30,Rtx-1, ZB-1, AT-1,CP-Sil5CB等DM-5, DB-5,HP-5, SPB-5, BP-5, SE-52,Rtx-5, ZB-5, PE-5,
8、SE-54,CP-Sil8CB等DM-35, DB-35, HP-35,SPB-35, BP-35, Rtx-35, ZB-35, 等DM-1701, HP-1701,SPB-7, ZB-1701,Rtx-1701, CP-Sil19CB等化学成分100二甲基聚硅氧烷5%苯基-甲基聚硅氧烷35%苯基65%甲基聚硅氧烷14%氰苯基86%甲基聚硅氧烷中等/强极性极性柱极性柱商品名 DB-225, HP-225,SP-225, BP-225,DB-23，Rtx-225,AT-225, OV225等DB-WAX, HP-INNOWAX,DB-WAXetr,CP-WAX,ZB-WAXDB-FFAP, H
9、P-FFAP,CP- FFAP，OV-3501等化学成分 50氰丙基甲基聚硅氧烷聚乙二醇（PEG）硝基对苯二酸改性的聚乙二醇六、温度六、温度色色谱柱：初温柱：初温应接近接近样品中最品中最轻组分的沸点，分的沸点，而而终温温则取决于最重取决于最重组分的沸点，升温速率分的沸点，升温速率则要依要依样品的复品的复杂程度。程度。进样口：一般接近沸点最高的口：一般接近沸点最高的组分，但要低分，但要低于易分解于易分解组分的分解温度。常用的条件是分的分解温度。常用的条件是250250C C。检测器：原器：原则是避免流出色是避免流出色谱柱的柱的组分冷凝。分冷凝。FIDFID检测器通常器通常设置置为300300C
10、C。顶空瓶平衡温度：温度越高，蒸汽空瓶平衡温度：温度越高，蒸汽压越高，越高，顶空气空气体的体的浓度越高，分析灵敏度越高。待度越高，分析灵敏度越高。待测组分的沸点分的沸点越低，越低，对温度越敏感。但温度的改温度越敏感。但温度的改变只影响分配系只影响分配系数数K K，并不影响相比，并不影响相比。例如水溶液中的甲醇、甲乙例如水溶液中的甲醇、甲乙酮、甲苯、正己、甲苯、正己烷和四和四氯乙乙烯，8080C C平衡温度与平衡温度与4040C C平衡温度相比，平衡温度相比，甲醇在甲醇在顶空气体中的空气体中的浓度增加度增加5.155.15倍，甲乙倍，甲乙酮浓度度增加增加2.612.61倍，甲苯只增加倍，甲苯只增
11、加25%25%，而正己，而正己烷和四和四氯乙乙烯，分分别增加增加2.6%2.6%和和10.4%10.4%。实际工作中往往是在工作中往往是在满足灵敏度的条件下，足灵敏度的条件下，选择较低的平衡温度。低的平衡温度。过高的温度可能高的温度可能导致某些致某些组分分的分解和氧化。一般采用高沸点溶的分解和氧化。一般采用高沸点溶剂时，样品比品比较稳定的情况下，推荐定的情况下，推荐8080C C左右的平衡温度。左右的平衡温度。七、七、进样方式方式作作为残留溶残留溶剂检查，顶空空进样有有许多多优越性，越性，不需要不需要对样品品进行特殊行特殊处理，不用担心理，不用担心样品品中不中不挥发组分分对GCGC分析的影响。
12、直接分析的影响。直接进样对仪器要求低，由于部分器要求低，由于部分实验室不具室不具备顶空空进样器，器，该方法的方法的应用也具普遍性。用也具普遍性。进样方式方式选择需注意的几点：需注意的几点： 对于待于待测溶溶剂在溶解在溶解样品的溶品的溶剂中溶解度小中溶解度小（分配系数小）的情况下，例如三（分配系数小）的情况下，例如三氯甲甲烷在在水溶液中，采用水溶液中，采用顶空空进样方式方式测得的灵敏度得的灵敏度将大于直接将大于直接进样；反之，例如甲醇与水互溶；反之，例如甲醇与水互溶性好，直接性好，直接进样的灵敏度将大于的灵敏度将大于顶空空进样。测定二定二氯甲甲烷、三、三氯甲甲烷等等卤代代烃时，如果，如果溶溶剂为
13、水，直接水，直接进样容易造成容易造成FIDFID检测器器灭火，火，此此时优选顶空空进样。无无论是采用是采用细口径或粗口径，均可口径或粗口径，均可选择不分流不分流进样，提高灵敏度。当然，采用，提高灵敏度。当然，采用不分流不分流进样也要考也要考虑溶媒性溶媒性质，挥发性性太大的溶媒太大的溶媒对色色谱柱柱污染染较大。大。直接直接进样要考要考虑样品性品性质。顶空空进样体体积可达到可达到2ml2ml气体，而直接气体，而直接进样只能只能1 1至至3ul3ul液体。液体。 八、提高灵敏度对于限度要求很于限度要求很严格的溶格的溶剂，或，或贵重重样品品取取样量有限制量有限制时，或，或检测器器对该溶溶剂灵敏度灵敏度
14、低的情况下，采取一些措施提高灵敏度是低的情况下，采取一些措施提高灵敏度是方法成方法成败的关的关键。溶溶剂温度温度不分流不分流进样顶空瓶体空瓶体积利用利用盐析作用，即在水溶液中加入无机析作用，即在水溶液中加入无机盐（硫酸（硫酸钠）来改）来改变挥发性性组分的分配系数。分的分配系数。常用高常用高浓度，甚至用度，甚至用饱和和浓度。度。盐析作用析作用对极性极性组分的影响分的影响远大于大于对非极性非极性组分的影响。分的影响。例如在水溶液例如在水溶液样品溶品溶剂中加入中加入0.01mol/L0.01mol/L氯化化钠溶液可使甲醇、乙醇灵敏度提高溶液可使甲醇、乙醇灵敏度提高5 5倍倍（这种方法不常用）。种方法
15、不常用）。在有机溶液中加入水，可以减少有机物在有在有机溶液中加入水，可以减少有机物在有机相中的溶解度，增大其在机相中的溶解度，增大其在顶空气体中的含空气体中的含量（常用）。量（常用）。例如采用例如采用FIDFID检测器器测定三定三氯甲甲烷，DMFDMF为溶媒，溶媒，顶空空进样1ml1ml气体，分流比气体，分流比5 5：1 1，限，限度度浓度的度的对照品溶液照品溶液检不出峰。不出峰。改改为：水：水为溶媒，三溶媒，三氯甲甲烷用少量乙醇用少量乙醇溶解，水稀溶解，水稀释至刻度，至刻度，顶空空进样2ml2ml气体，不气体，不分流分流进样，结果限度果限度浓度的度的对照品溶液可照品溶液可检出很明出很明显的色
16、的色谱峰，灵敏度可达到限度的峰，灵敏度可达到限度的五十分之一。五十分之一。九、改善分离度v程序升温程序升温v增大分流比增大分流比十、未知峰归属对于供于供试品色品色谱图中出中出现的未知峰，的未知峰，应进行行确确认。首先分析是否。首先分析是否为样品裂解峰，其次核品裂解峰，其次核实是否是否为应控制溶控制溶剂，可采用双柱定性方式。，可采用双柱定性方式。十一、方法验证方法的方法的线性范性范围主要由主要由检测器的特性器的特性决定决定检测限由限由检测器、方法决定器、方法决定回收率加回收率加样回收率回收率重复性、中重复性、中间精密度和重精密度和重现性性药检所残留溶所残留溶剂方法复核内容、方法复核内容、常常见问
17、题及及处理理一、复核内容一、复核内容灵敏度灵敏度用申用申报方法方法检验所提供所提供样品，比品，比较结果果二、常二、常见问题及及处理措施理措施灵敏度低，限度溶液不出峰灵敏度低，限度溶液不出峰（源于（源于检测器或器或方法）方法）分离度不好；分离度不好；样品出峰并与溶品出峰并与溶剂峰不能达到峰不能达到基基线分离；分离；图谱基基线不好不好杂峰多峰多（柱温、色（柱温、色谱柱或柱或进样方式）方式）溶媒不合适溶媒不合适供供试品配制方法不当品配制方法不当较大未知峰大未知峰应进行行归属属复核复核结果不合格果不合格方法方法评价价一、首先关注待一、首先关注待测溶溶剂有哪些？有哪些？是否有下述三是否有下述三类溶溶剂：
18、卤代代烃（三（三氯甲甲烷、四、四氯化碳）化碳）氮氮/ /磷化合物（磷化合物（DMSODMSO、DMFDMF）限度小的溶限度小的溶剂（苯、四（苯、四氢呋喃等限度小于喃等限度小于0.0X0.0X）如果有上述物如果有上述物质应警惕方法的灵敏度是否能达警惕方法的灵敏度是否能达到到检测限度要求。限度要求。二、是否使用了二、是否使用了专属属检测器？器？FIDFID：有机物：有机物ECDECD：卤代代烃（三（三氯甲甲烷、四、四氯化碳等）化碳等）NPDNPD：氮：氮/ /磷化合物（磷化合物（DMFDMF、DMSODMSO等）等） 同同时具具备上述三种上述三种检测器的器的实验室不多。室不多。请注意下注意下述三点
19、：述三点：四四氯化碳必化碳必须用用ECDECD！不可用不可用FID FID 填充柱填充柱检查前述三前述三类物物质，灵敏度低，灵敏度低使用使用ECDECD进行分离度行分离度试验应考考虑非非卤代代烃！三、溶媒三、溶媒根据原料溶解性，溶媒是否能溶解根据原料溶解性，溶媒是否能溶解样品？品？ 水、水、DMFDMF、DMSODMSO、不、不挥发酸碱溶液，不可使用酸碱溶液，不可使用盐酸酸液和氨水，液和氨水，顶空空进样可可选择在在8090C8090C加加热能溶解能溶解样品的品的试剂。其次溶媒是否能溶解待其次溶媒是否能溶解待测溶溶剂？ 苯、甲苯、三苯、甲苯、三氯甲甲烷等水溶性不好的溶等水溶性不好的溶剂，可先用，
20、可先用少量乙醇或甲醇溶解待少量乙醇或甲醇溶解待查溶溶剂再用水稀再用水稀释。前述三前述三类溶溶剂如果如果顶空空进样应选择K K小的溶媒！小的溶媒！不主不主张使用使用污染性大、毒性大的溶媒！染性大、毒性大的溶媒！四、供四、供试品制品制备不可研磨不可研磨样品，必品，必须原原态取取样不可超声、不能加不可超声、不能加热溶解溶解样品品样品置品置顶空瓶中空瓶中压盖后可以超声、加盖后可以超声、加热样品与品与对照品配制方法一致，避免基照品配制方法一致，避免基质效效应前述三前述三类溶溶剂取取样量尽可能大，至少量尽可能大，至少0.1g/ml0.1g/ml五、五、进样方式方式进样方式首方式首选顶空，基空，基线干干净卤代代烃直接直接进样容易容易灭火火六、限度六、限度ICHICH限度并不是最高要求限度并不是最高要求建建议三三类溶溶剂根据根据实际情况尽量提高限度情况尽量提高限度总量量应控制控制七、方法验证方法的方法的线性范性范围主要由主要由检测器的特性器的特性决定决定检测限由限由检测器、方法决定器、方法决定回收率加回收率加样回收率回收率重复性和重重复性和重现性前者容易性前者容易实现，后者，后者更重要，是方法更重要，是方法验证必必须考察的。考察的。请提宝提宝贵意意见！
