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1、土壤水解性氮的测定 内容提要概述土壤中水解氮的测定碱解扩散法碱解氮实验概述一 土壤中氮素的含量及来源二 土壤中氮素的形态 有效化三 土壤中氮素的转化 氮的损失四 土壤中氮素对农田肥力的作用一 土壤中氮的来源及含量（一）来源（一）来源1. 施入土壤中的化学氮肥和有机肥料施入土壤中的化学氮肥和有机肥料2. 动植物残体的归还动植物残体的归还3. 生物固氮生物固氮4. 雷电降雨带来的雷电降雨带来的NH4N和和NO3N目前施入土壤中的肥料是土壤氮的主要来源目前施入土壤中的肥料是土壤氮的主要来源（二）含量土壤中氮素的含量受自然因素如母质、植被、气候等影响，同时也受人为因素如利用方式、耕作、施肥及灌溉等措施
2、的影响。g/kg之间。较高的氮素含量往往被看成为土壤肥沃程度的重要标志。表层含氮量最高，以下各层随深度增加而锐减。我国土壤含氮量的地域性规律：我国土壤含氮量的地域性规律： 北北 增加增加 西西 长江长江 东东 增加增加 南南 增加增加二 土壤中氮素的形态 有机态氮 占全氮的绝大部分，95%以上。可溶性有机氮 5%； 主要为： 游离氨基酸、胺盐及酰胺类化合物；水解性有机氮5070%； 蛋白质及肽类、核蛋白类、氨基糖类；非水解性有机氮3050%； 主要可能是杂环态氮、缩胺类 。有机氮有机氮 无机氮无机氮矿化作用矿化作用固定作用固定作用无机态氮 数量少、变化大，表土中占全氮 12% ，最多不超过58
3、%。铵态氮(NH4+ N)：可被土壤胶体吸附，一般不易流失，但在旱田中，铵态氮很少，在水田中较多。 在土壤里有三种存在方式：游离态、交换态、固定态。硝态氮(NO3- N) ：移动性大；通气不良时易反硝化损失；在土壤中主要以游离态存在。亚硝态氮(NO2- N)：主要在嫌气性条件下才有可能存在，而且数量也极少。在土壤里主要以游离态存在。其他，氨态氮、氮气及气态氮氧化合物。速效氮速效氮：土壤溶液中的铵溶液中的铵、交换性铵交换性铵和硝态氮硝态氮因能直接被植物根系所吸收，常被称为速效态氮。几个概念几个概念速效氮速效氮：土壤溶液中的铵、交换性铵和硝态氮因能直接被植物根系所吸收，常被称为速效态氮。有效氮：有
4、效氮：能被当季作物利用的氮素，包括无机氮(2)和易分解的有机氮水解氮：水解氮：包括无机的矿物态氮和部分有机质中易分解、比较简单的有机态氮。全氮全氮：土壤中氮素的总量。 全全 氮氮有有效效氮氮速速效效氮氮目前一般以土壤全氮、水解氮。速效氮3种形态的氮含量作为诊断指标。三 土壤中氮素的转化土壤氮素的有效化有机氮的矿化（有机氮水解；氨化）硝化（亚硝化；硝化）土壤氮素的损失反硝化生物脱氮化学脱氮（亚硝酸分解；氨挥发）粘粒对铵的固定生物固定氮素淋洗土壤氮素有效化土壤氮素有效化 有机氮矿化：有机氮矿化：定义定义：含氮的有机合化物，在多种微生物的作用下 降解为简单的氨态氮的过程。它包括：a.水解水解：b.氨
5、化：氨化：蛋白质蛋白质 多肽多肽 氨基酸氨基酸水解水解肽酶朊酶RCHNH2COOH + O2 RCH2COOH + NH3 + 能量能量酶氨化微生物RCHNH2COOH + O2 RCH2COOH + NH3 + 能量能量酶氨化微生物定义：定义：将土壤中的氨、胺、酰胺等微生物的作用下氧化 为硝酸的生物化学过程。第一步：亚硝化作用第一步：亚硝化作用第二步：硝化作用第二步：硝化作用土壤氮素有效化土壤氮素有效化 硝化过程：硝化过程：2NO2- + O2 2NO3- + 40千卡硝化微生物硝化微生物2HN4+ + 3O2 2NO2- + 2H2O + 4H+ + 158158千卡亚硝化微生物亚硝化微生
6、物速率：硝化作用亚硝化作用铵化作用速率：硝化作用亚硝化作用铵化作用。因此，正常土壤中，很少有亚硝态氮和铵态因此，正常土壤中，很少有亚硝态氮和铵态氮及氨的积累。氮及氨的积累。土壤氮素损失土壤氮素损失 反硝化（生物脱氮过程）反硝化（生物脱氮过程）过程：过程：NO3- NO2- NO N20 N2氧化亚氮还原酶硝酸盐还原酶硝酸盐还原酶氧化氮还原酶- H20 2NO HN03 2HNO2 H2N2O2 厌氧微生物厌氧微生物 +4H+4H+ - 2H2O -2H2O + 2H+-2H2O+2H2ON2- 4H+厌氧厌氧 微生物微生物N2O主要是一些特殊环境条件下的化学反应，如：主要是一些特殊环境条件下的
7、化学反应，如：a.氨态氮挥发氨态氮挥发a.NH4+ + OH- NH3 + H2Ob.在碱性条件下进行b.亚硝酸分解反应亚硝酸分解反应 3HNO2 HNO3 + 2NO + H2O条件：酸性愈强，分解愈快。土壤氮素损失土壤氮素损失 化学脱氮过程化学脱氮过程土壤氮素损失土壤氮素损失 其他损失途径其他损失途径粘粒矿物对铵的固定粘粒矿物对铵的固定 北方的土壤中，能固铵的粘粒矿物较多，但其土壤中铵极少，而北方的土壤中，能固铵的粘粒矿物较多，但其土壤中铵极少，而南方水田的铵态较多，而能固定铵的粘土矿物不多。因此，铵的南方水田的铵态较多，而能固定铵的粘土矿物不多。因此，铵的粘土矿物固定在我国的意义不大。粘
8、土矿物固定在我国的意义不大。生物固定生物固定氮素的淋洗氮素的淋洗淋淋洗洗硅铝片硅铝片硅铝片硅铝片NH4+ 铵态氮铵态氮 硝态氮硝态氮 吸附态铵或吸附态铵或固定态铵固定态铵水体中的水体中的硝态氮硝态氮 矿化作用矿化作用 硝化作用硝化作用 生物固定生物固定 硝酸还原作用硝酸还原作用 NH3 N2、NO、N2O 挥发损失挥发损失 反硝化作用反硝化作用吸附固定吸附固定 淋洗损失淋洗损失 有有机机质质有有机机氮氮生生物物 固固定定土壤中氮素转化的各个过程之间有着密切关系，土壤中氮素转化的各个过程之间有着密切关系，在一定程度上存在着相互抑制或促进作用。在一定程度上存在着相互抑制或促进作用。土壤水解性氮的测
9、定方法原理方法特点仪器设备操作步骤注意事项结果计算土壤水解性氮的测定土壤水解性氮的测定碱解扩散法碱解扩散法1. 1. 方法原理方法原理 在扩散皿中，用1.0 molL-1 NaOH水解土壤，使易水解态氮（潜在有效氮）碱解转化为NH3，NH3扩散后为H3BO3所吸收。H3BO3吸收液中的NH3再用标准硫酸滴定，硫酸与硼酸氨反应完全后，指示剂变色范围pH 4.4（红）5.4（蓝）硫酸过量一滴溶液显红色，即滴定终点。由此计算土壤中碱解氮的含量。在此处插入两幅图片 一个是滴定前得蓝色 一个是滴定后的红色扩散皿扩散皿内室反应：NH3+H3BO3NH4H2BO3滴定过程的反应：NH4H2BO3+HClH2
10、BO3+NH4Cl2 . .方法特点 不包括土壤中的NO3-N。若要包括NO3-N ，测定时需加FeSO47H2O粉，并以Ag2SO4为催化剂，使NO3-N还原成NH4+-N。由于FeSO4需要消耗部分NaOH，所以测定时需要提高NaOH 溶液的浓度。3. 仪器和设备 扩散皿扩散皿扩散皿扩散皿 半微量滴定管半微量滴定管恒温箱4. 操作步骤 称取过2mm筛风干土样2.00g，均匀平铺于扩散皿外室取2.0ml H3BO3 指示剂溶液于扩散皿的内室在扩散皿外室的边缘涂上碱性胶液盖上毛玻璃(毛面朝下），旋转数次，使粘合完全转开毛玻璃的一边，使扩散皿的外室露出一条狭缝迅速加入1.0molL-1NaOH溶
11、液10ml于扩散皿外室立即盖严，轻轻旋转扩散皿，使碱液盖住所有土壤用橡皮筋圈紧，使毛玻璃固定平放在401的恒温箱中，碱解扩散240.5 h取出，用0.005或0.0025molL-1H2SO4标准溶液滴定同时做空白试验，校正试剂和滴定误差。 5. 注意事项微量扩散皿使用前必须彻底清洗。利用小刷去除残余后，冲洗，先后浸泡于软性清洁剂及稀盐酸中，然后以自来水充分冲洗，最后再用蒸馏水淋洗。应熟练操作技巧以防止内室硼酸一指示剂液遭受碱液之污染。由于碱性胶液的碱性很强，在涂胶液和洗涤扩散皿时，必须细心，慎防污染内室，致使造成误差。称样时可在扩散皿内室加一个小盖 子，这样可以防止将土称入内室。滴定前首先要
12、检查滴定管 的下端是否充有气泡。若 有，首先要把气泡排出。滴定时，标准酸要逐滴加 入，在接近终点时，用玻 璃棒从滴定管尖端沾取少 量标准酸滴入扩散皿内。 易产生气泡处6. 结果结算滴定过程的反应：滴定过程的反应：NH4H2BO3+HClH2BO3+NH4Cl 1 1 x (V-V0) C(H+) X= (V-V0) C(H+) 扩散皿内室反应：扩散皿内室反应：NH3+H3BO3NH4H2BO3 1 1 Y (V-V0) C(H+) Y= (V-V0) C(H+) 土壤碱解氮实验不同筛号下测定土壤碱解氮含量不同称样量和NaOH体积对测定结果的影响操作过程中失误对测定结果的影响不同温度不同培养时间下测定的碱解氮含量不同筛号下测定土壤碱解氮含量处理处理1 1：土样：土样1g + NaOH 1g + NaOH 5mL5mL处理处理2 2：土样：土样1g + NaOH 1g + NaOH 10mL10mL处理处理3 3：土样：土样2g + NaOH 2g + NaOH 5mL5mL处理处理4 4：土样：土样2g + NaOH 2g + NaOH 10mL10mL不同称样量和NaOH体积对测定结果的影响此处插入图片此处插入图片() ()不同温度不同时间下测定的碱解氮含量
