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1、菊花的组织培养菊花的组织培养12 菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物, ,是是我国的传统名花。我国的传统名花。 长期以来菊花采用长期以来菊花采用分株、扦插等无性繁殖分株、扦插等无性繁殖方法进行繁殖。但是传统的繁殖方法易受环境方法进行繁殖。但是传统的繁殖方法易受环境影响影响, ,繁殖周期长。繁殖周期长。 植物组织培养具有植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度增殖效率高、繁殖速度快快等特点等特点, ,可以用可以用较短的时间和较少的空间较短的时间和较少的空间生产生产出大量的试管苗。出大量的试管苗。一、项目介绍一、项目介绍3二、实验原理二、实验原理二、实验原理二、实验原
2、理1、植物组织培养、植物组织培养 指在指在无菌条件无菌条件下，将下，将离体离体的植物器官、的植物器官、组织、细胞等，培养在人工配制的培养基上，组织、细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适当的培养条件，使其生长、增值、分给予适当的培养条件，使其生长、增值、分化成完整植株的技术。化成完整植株的技术。 4二、实验原理二、实验原理二、实验原理二、实验原理2、植物细胞的全能性、植物细胞的全能性 植物细胞具有植物细胞具有全能性全能性，即生物体的细胞，即生物体的细胞具有使后代细胞形成完整植株个体的能力。具有使后代细胞形成完整植株个体的能力。植物细胞表现出全能性的条件：植物细胞表现出全能性的条件：离体离体状
3、态状态在一定的在一定的营养物质营养物质、激素激素和其他和其他外界条件外界条件（光照、温度光照、温度）53 3、细胞分化、细胞分化在植物的个体发育过程中，细胞在形在植物的个体发育过程中，细胞在形态、结构和生理功能上出现稳定性差态、结构和生理功能上出现稳定性差异的过程。异的过程。基因的选择性表达基因的选择性表达形成各种不同的组织和器官形成各种不同的组织和器官结果：结果：实质：实质：定义：定义：二、实验原理二、实验原理二、实验原理二、实验原理6离体离体的植物的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织根根芽芽植植物物体体三、实验过程三、实验过程三、实验过程三、实验过程请阅读课本
4、：请阅读课本：32页图页图3-1。 外植体：外植体：离体离体的植物器官或组织片段的植物器官或组织片段7脱分化（去分化）：由脱分化（去分化）：由高度分化高度分化的植物组的植物组织或细胞产生织或细胞产生愈伤组织愈伤组织的过程。的过程。相关概念相关概念愈伤组织是通过愈伤组织是通过细胞分裂细胞分裂形成的，其细胞形成的，其细胞排列排列疏松而无规则疏松而无规则，高度，高度液泡化液泡化呈呈无定形无定形状态状态的的薄壁薄壁细胞。细胞。8离体离体的植物的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈愈伤伤组组织织再分化再分化根根芽芽植植物物体体三、实验过程三、实验过程三、实验过程三、实验过程请阅读课本：请阅
5、读课本：32页图页图3-1。9愈伤组织是通过愈伤组织是通过细胞分裂细胞分裂形成的，其细胞形成的，其细胞排列排列疏松而无规则疏松而无规则，高度，高度液泡化液泡化呈呈无定形无定形状态状态的的薄壁薄壁细胞。细胞。脱分化（去分化）：由脱分化（去分化）：由高度分化高度分化的植物组的植物组织或细胞产生织或细胞产生愈伤组织愈伤组织的过程。的过程。再分化：脱分化产生的再分化：脱分化产生的愈伤组织愈伤组织继续进行培继续进行培养，又可以重新分化成养，又可以重新分化成根或芽根或芽等器官，这个过等器官，这个过程叫再分化。程叫再分化。相关概念相关概念10离体离体的植物的植物器官、组织、器官、组织、细胞细胞脱分化脱分化愈
6、愈伤伤组组织织再分化再分化根根芽芽植植物物体体三、实验过程三、实验过程三、实验过程三、实验过程请阅读课本：请阅读课本：32页图页图3-1。营养、温度、营养、温度、PH、激素、激素营养、温度、营养、温度、PH、激素、激素、光照光照11影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素不同植物不同植物的组织培养难度不同的组织培养难度不同1 1、外植体的选取、外植体的选取同一种植物的同一种植物的不同组织不同组织培养难度不同培养难度不同12影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素2 2、培养基的配制、培养基的配制(MS(MS培养基培养基) )1314影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素大量元素：
7、大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S微量元素：微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物：有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素：植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等生长素、细胞分裂素、赤霉素等2 2、培养基的配制、培养基的配制( (MS培养基培养基) )15你能说出各种营养物质的作用吗？同专题你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2 2中微中微生物培养基的配方相比，生物培养基的配方相比，MSMS培养基的配方有哪些培养基的配方有哪些明显的不同？明显的不同？微量元素和大量元素提供植物微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的细胞生活所
8、必需的无机盐无机盐；蔗糖提供蔗糖提供碳源碳源，同时能够维持细胞的，同时能够维持细胞的渗透压渗透压；微生物培养基微生物培养基以有机营养为主以有机营养为主。与微生物的培养。与微生物的培养不同，不同，MSMS培养基则需培养基则需提供大量无机营养提供大量无机营养。甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物细胞对细胞对特殊营养特殊营养的需求。的需求。16影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素3 3、不同植物激素浓度的使用顺序和使用量不同植物激素浓度的使用顺序和使用量使用顺序使用顺序实验结果实验结果先使用生长素，后使用细先使用生长素，后使用细胞分裂素胞分裂素
9、有利于有利于细胞分裂细胞分裂，但不，但不利分化利分化先使用细胞分裂素后使用先使用细胞分裂素后使用生长素生长素细胞细胞既分裂也分化既分裂也分化同时使用同时使用分化频率分化频率提高提高17影响植物组织培养的因素影响植物组织培养的因素3 3、不同植物激素浓度的使用顺序和使用量不同植物激素浓度的使用顺序和使用量生长素细胞分裂素比值生长素细胞分裂素比值结果结果 比值高时比值高时 促促根根分化，抑芽形成分化，抑芽形成 比值低时比值低时 促促芽芽分化，抑根形成分化，抑根形成 比值适中比值适中 促进促进愈伤组织愈伤组织生长生长 18总结植物组织培养过程总结植物组织培养过程: :离离体体组组织织或或细细胞胞植植物物体体脱分化脱分化细胞分细胞分裂素裂素生长素生长素愈愈伤伤组组织织芽芽根根细胞分裂细胞分裂素素 生长素生长素细胞分裂细胞分裂素素 生长素生长素细胞分裂细胞分裂素素 生长素生长素再分化再分化55本课题内本课题内容小结容小结菊花菊花组织组织培养培养基础基础知识知识实验实验操作操作植物体植物体的组织的组织培养培养影响组影响组织培养织培养的因素的因素细胞分化细胞分化细胞全能性细胞全能性组织培养过程组织培养过程营养营养激素激素环境条件环境条件MSMS固体培养基制备固体培养基制备外植体消毒外植体消毒接种接种培养培养移栽移栽栽培栽培56
