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1、人教版生物选修三专题一 基因工程ppt课件(共19张PPT) 基因工程,又叫DNA重组技术。是指按照人们的愿望,在DNA分子水平上进行严格的设计,并通过体外体外DNADNA重组重组和转基因技术转基因技术,赋予生物以新的遗传特性新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程的概念7/20/2024该资料由764723079友情提供普通玫瑰转三色紫罗兰基因蓝色玫瑰7/20/2024该资料由764723079友情提供7/20/2024该资料由764723079友情提供 G1234512345 A3,5-磷酸磷酸二酯键二酯键3端5端3端5端357/20/2024该资料由764
2、723079友情提供黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端1 1、限制性核酸内切酶、限制性核酸内切酶一种限制性内切酶只能一种限制性内切酶只能识别识别双链双链DNA分子的某种特分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的个核苷酸之间的磷酸二酯键断开磷酸二酯键断开(切割切割DNA分子分子)来源:来源:主要从原核细胞分离主要从原核细胞分离 作用:作用: 作用结果:作用结果:作用结果:作用结果:EcoRI平未端平未端 和和 粘性未端粘性未端1.1、 DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具7/20/2024该资料由764723079友情
3、提供限制酶的识别序列限制酶的识别序列7/20/2024该资料由764723079友情提供黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端EcoRIEcoRI限制酶的切割限制酶的切割 被限制酶切开的被限制酶切开的DNA两条两条单链的切口,带有几个单链的切口,带有几个伸出的伸出的核苷酸核苷酸,他们之间正好互补配他们之间正好互补配对,这样的切口叫对,这样的切口叫黏性末端黏性末端。7/20/2024该资料由764723079友情提供平末端平末端平末端平末端平末端平末端平末端平末端SmaISmaI限制酶的切割限制酶的切割当限制酶当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,从识别序列的中心轴线处切开时,切开的切开的DNADNA
4、两两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端平末端。7/20/2024该资料由764723079友情提供CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAAAATTCCGTAG 目的基因目的基因练习使用使用EcoRI剪切目的基因剪切目的基因模型构建模型构建3 37/20/2024该资料由764723079友情提供两两DNADNA片段要具有片段要具有互补互补的黏性末端的黏性末端才能拼起来才能拼起来D
5、NADNA连接酶的缝合作用连接酶的缝合作用注意:注意:DNADNA连接酶可连接双链连接酶可连接双链DNADNA中的中的DNADNA单链缺口,单链缺口,但不能连接单链但不能连接单链DNADNA!7/20/2024该资料由764723079友情提供DNADNA连接酶的缝合作用连接酶的缝合作用7/20/2024该资料由764723079友情提供 1. 1.连接酶的作用连接酶的作用:用用用用DNADNADNADNA连接酶连接两个相同的黏连接酶连接两个相同的黏连接酶连接两个相同的黏连接酶连接两个相同的黏性未端要连接几个磷酸二酯键?性未端要连接几个磷酸二酯键?性未端要连接几个磷酸二酯键?性未端要连接几个磷
6、酸二酯键?2.2.连接的部位:连接的部位:2.DNA连接酶-分子缝合针3.种类种类(比较)比较)将互补配对的两个黏性末端连接起来,将互补配对的两个黏性末端连接起来,使两个使两个DNA片段成为一个完整的片段成为一个完整的DNA分子。分子。磷酸二酯键磷酸二酯键7/20/2024该资料由764723079友情提供DNADNADNADNA聚合酶聚合酶聚合酶聚合酶DNADNADNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶区别区别1 1区别区别2 2相同点相同点DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事吗?为什么?1)1)只能将单个核苷酸连只能将单个核苷酸连接到已有的核酸片段上,接到已有的核酸片段上,形成磷酸二酯键形成磷酸
7、二酯键形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键1)1)在在两个两个DNADNA片段之片段之间形成磷酸二酯键间形成磷酸二酯键2)2)以一条以一条DNADNA链为模板,链为模板,将单个核苷酸通过磷酸将单个核苷酸通过磷酸将单个核苷酸通过磷酸将单个核苷酸通过磷酸二酯键二酯键二酯键二酯键连接成一条互补连接成一条互补的的DNADNA链链2)2)将将DNADNA双链上的两个双链上的两个缺口同时连接起来,缺口同时连接起来,不需要模板不需要模板7/20/2024该资料由764723079友情提供DNA1CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT DNA2GGCATCTTAAAATTCCGTA
8、G 重组重组DNADNAGGCATCTTAAAATTCCGTAG 练习使用使用DNA连接接酶制作重制作重组DNA分子分子模型构建模型构建4 4由于切割后的由于切割后的载载体和目的基因具有相同的末端,故重体和目的基因具有相同的末端,故重组组DNA存在存在3中可能中可能连连接接。即即 、 、 。重组DNA一定是载体-目的基因连接吗?载体-目的基因载体-载体目的基因-目的基因7/20/2024该资料由764723079友情提供3.运载体运载体:常用:常用质粒、质粒、质粒、质粒、 噬菌体的衍生物,动植物病毒噬菌体的衍生物,动植物病毒噬菌体的衍生物,动植物病毒噬菌体的衍生物,动植物病毒载体条件:载体条件
9、:1、对受体细胞无害、对受体细胞无害2、能、能自我复制自我复制并在受体细胞中并在受体细胞中稳定存在稳定存在3、有一个或多个、有一个或多个限制酶切点限制酶切点4、有、有标记基因标记基因注意:真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。注意:真正用作运载体的质粒都是人工改造过的。质粒:细菌核质粒:细菌核DNA外的外的双链环状双链环状DNA分子分子7/20/2024该资料由764723079友情提供1.要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切要想获得某个特定性状的目的基因必须要用限制酶切几个切口?可产生几个黏性几个切口?可产生几个黏性(平平)末端?末端? 要切两个切口,产生四个黏性要切两个切口,产生
10、四个黏性( (平平) )末端。末端。2.把两种来源不同的把两种来源不同的DNA用同种限制酶来切割,产生的用同种限制酶来切割,产生的末端相同吗?末端相同吗? 会产生相同的黏性会产生相同的黏性(平平)末端末端3.如果把具有相同黏性如果把具有相同黏性(平平)末端的末端的DNA连接起来,又会怎连接起来,又会怎样呢?样呢?得到重组得到重组DNA7/20/2024该资料由764723079友情提供5.如图,就下列与核酸相关酶的作用机理填空:限制酶 解旋酶 DNA连接酶 DNA聚合酶 RNA聚合酶baA.切断a处的酶为_B.连接a处的酶为_C.切断b处的酶为_D.连接b处的酶为_无7/20/2024该资料由764723079友情提供