《白介素的抗肿瘤机讲义课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《白介素的抗肿瘤机讲义课件（138页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、白介素的抗肿瘤机白介素的抗肿瘤机内容提要内容提要白介素白介素12的抗的抗肿瘤效果瘤效果白介素白介素12的抗的抗肿瘤机理瘤机理白介素白介素12可能的可能的临床床应用用白介素白介素12的的历史史白介素白介素12在国外的在国外的现状状白介素白介素12申申报国内国内肿瘤治瘤治疗的可行性的可行性白介素白介素12的抗的抗肿瘤效果瘤效果Interleukin 12 (IL-12) 白介素白介素12l由抗原呈由抗原呈由抗原呈由抗原呈递细递细胞在受到外源物胞在受到外源物胞在受到外源物胞在受到外源物质质（包括内毒素）刺（包括内毒素）刺（包括内毒素）刺（包括内毒素）刺激激激激时时分泌分泌分泌分泌l属于属于属于属于“
2、 “危危危危险险信号信号信号信号” ”之一：和外源侵入相关之一：和外源侵入相关之一：和外源侵入相关之一：和外源侵入相关l修修修修饰饰T T细细胞或者胞或者胞或者胞或者NKNK细细胞，决定后天免疫走向胞，决定后天免疫走向胞，决定后天免疫走向胞，决定后天免疫走向l先天免疫与后天先天免疫与后天先天免疫与后天先天免疫与后天获获得性免疫之得性免疫之得性免疫之得性免疫之间间的的的的衔衔接因子接因子接因子接因子l刺激靶刺激靶刺激靶刺激靶细细胞胞胞胞g-g-g-g-干干干干扰扰扰扰素素素素分泌（分泌（分泌（分泌（Th1Th1型免疫型免疫型免疫型免疫应应答）答）答）答）l至今至今至今至今发现发现的最有效的抗的最
3、有效的抗的最有效的抗的最有效的抗肿肿瘤瘤瘤瘤单单因子因子因子因子l作用与范作用与范作用与范作用与范围围与内毒素十分相似与内毒素十分相似与内毒素十分相似与内毒素十分相似l单单独用独用独用独用药药可以治愈可以治愈可以治愈可以治愈小小小小肿肿瘤（瘤（瘤（瘤（1cm)90%)90%)2) 2) 肿瘤体积减小（少见肿瘤体积减小（少见肿瘤体积减小（少见肿瘤体积减小（少见) )3) 3) 治愈治愈治愈治愈 （罕见（罕见（罕见（罕见) )治疗治疗治疗治疗0-30 0-30 天天天天 肿瘤细胞肿瘤细胞肿瘤细胞肿瘤细胞如何做如何做肿瘤治瘤治疗效果效果试验白介素白介素单独使用的最佳治独使用的最佳治疗效果效果实例例白
4、介素白介素单独治独治疗一般只一般只对某些初期建立的小某些初期建立的小肿瘤（瘤（3周）的大周）的大肿瘤瘤负担（担（15毫米直毫米直径，径，%体重）一般无法治愈体重）一般无法治愈白介素配合化白介素配合化疗在某些在某些肿瘤模型有出奇的瘤模型有出奇的疗效效白介素白介素12 结合化疗治疗结合化疗治疗32天小鼠天小鼠MCA207肿瘤模型：治疗前肿瘤模型：治疗前环磷酰胺加白介素环磷酰胺加白介素12（Cy+IL-12)治疗一周治疗一周环磷酰胺加白介素环磷酰胺加白介素12治疗治疗2周周环磷酰胺加白介素环磷酰胺加白介素12治疗治疗3周周环磷酰胺加白介素环磷酰胺加白介素12治疗治疗4周周环磷酰胺加白介素环磷酰胺加白
5、介素12治疗治疗6周周通通过白介素白介素12提高化提高化疗的抗的抗肿瘤效果瘤效果no Rxno RxCy aloneCy aloneIL-12 aloneIL-12 aloneCy+IL-12Cy+IL-1218天腹腔实体MCA207肿瘤 14天天静脉注射建立的肺扩散肿瘤模型静脉注射建立的肺扩散肿瘤模型Cy+IL-12Cy+IL-12在在在在腹腔及肺扩散肿瘤模型中的治疗效果腹腔及肺扩散肿瘤模型中的治疗效果腹腔及肺扩散肿瘤模型中的治疗效果腹腔及肺扩散肿瘤模型中的治疗效果接瘤途径接瘤途径接瘤途径接瘤途径治疗（治疗（治疗（治疗（起始天数）起始天数）起始天数）起始天数）治愈治愈治愈治愈率（存活天）率（
6、存活天）率（存活天）率（存活天）i.p.i.p.腹腔腹腔腹腔腹腔i.p.i.p.腹腔腹腔腹腔腹腔i.v.i.v.肺肺肺肺扩散扩散扩散扩散对照对照对照对照Cy+IL-12 (18)Cy+IL-12 (18)Cy+IL-12 (14)Cy+IL-12 (14)0/5 (20-27)0/5 (20-27)0/5 (21-31)0/5 (21-31)5/5 (90)5/5 (90)8/8 (90)8/8 (90)i.v.i.v.肺肺肺肺扩散扩散扩散扩散对照对照对照对照IL-12IL-12和和和和Cy+IL-12Cy+IL-12在在在在Sa1Sa1腹水腹水腹水腹水肿肿瘤模型中的治瘤模型中的治瘤模型中的治
7、瘤模型中的治疗疗效果效果效果效果100%100%50%50%0%0%对照对照对照对照IL-12IL-12CyCyCy+IL-12Cy+IL-120 01010202030304040接种接种接种接种治疗治疗治疗治疗存活率存活率存活率存活率天数天数天数天数白介素白介素12的抗的抗肿瘤机理研究瘤机理研究Cy+IL-12的的抗抗抗抗肿肿瘤作用是瘤作用是瘤作用是瘤作用是Th1Th1型型型型T T免疫免疫免疫免疫应应答答答答宿主宿主宿主宿主治愈率治愈率治愈率治愈率正常正常正常正常T T细胞受体敲除鼠细胞受体敲除鼠细胞受体敲除鼠细胞受体敲除鼠（T T细胞缺失）细胞缺失）细胞缺失）细胞缺失）裸鼠裸鼠裸鼠裸鼠
8、（T T和和和和B B细胞缺失）细胞缺失）细胞缺失）细胞缺失）咖玛干扰素敲除咖玛干扰素敲除咖玛干扰素敲除咖玛干扰素敲除鼠鼠鼠鼠（Th 1Th 1型缺失）型缺失）型缺失）型缺失）白介素白介素-4敲除鼠敲除鼠（Th 2Th 2型缺失）型缺失）型缺失）型缺失）10/100/50/200/2010/10与与肿瘤排斥所瘤排斥所对应的的强免疫反免疫反应CD4CD4CD8CD8治疗治疗治疗治疗之前之前之前之前治疗治疗治疗治疗之后之后之后之后白介素白介素12启启动的抗的抗肿瘤免疫瘤免疫细胞分布胞分布例子例子例子例子1 1例子例子例子例子2 2T T细胞细胞细胞细胞巨嗜细胞巨嗜细胞巨嗜细胞巨嗜细胞巨噬巨噬细胞可
9、能是靶效胞可能是靶效应细胞的胞的证据据T T 细胞细胞细胞细胞染色染色染色染色TUNELTUNEL自杀自杀自杀自杀细胞染色细胞染色细胞染色细胞染色H&EH&E组织学组织学组织学组织学染色染色染色染色巨嗜细胞巨嗜细胞巨嗜细胞巨嗜细胞染色染色染色染色白介素白介素白介素白介素1212启启启启动动的抗的抗的抗的抗肿肿瘤免疫瘤免疫瘤免疫瘤免疫应应答答答答对肿对肿瘤增生的抑制瘤增生的抑制瘤增生的抑制瘤增生的抑制对照对照对照对照治疗治疗治疗治疗溴嘧啶标记肿瘤增生溴嘧啶标记肿瘤增生溴嘧啶标记肿瘤增生溴嘧啶标记肿瘤增生环环磷磷酰酰胺胺加白介素是否加白介素是否对所有所有肿瘤有效？瘤有效？有效有效有效有效肿肿瘤模型
10、瘤模型瘤模型瘤模型: :C57B/6: MC203, MCA205, MCA207, FBL-3C57B/6: MC203, MCA205, MCA207, FBL-3BALB/c: CT26, CSA1M, OV-HMBALB/c: CT26, CSA1M, OV-HMA/J: Sa1A/J: Sa1无效无效无效无效肿肿瘤模型瘤模型瘤模型瘤模型: :C57BL/6: MCA101,B16, LLC, Pan02, EL-4C57BL/6: MCA101,B16, LLC, Pan02, EL-4C57BL/6: autochthonous primary tumorsC57BL/6: aut
11、ochthonous primary tumorsBALB/c: 4T1, S180BALB/c: 4T1, S180为什么白介素什么白介素12在有的在有的肿瘤治瘤治疗模型里如此模型里如此有效，但在其他有效，但在其他肿瘤治瘤治疗模型几乎无效？模型几乎无效？对白介素对白介素12有无应答的肿瘤模型对比有无应答的肿瘤模型对比免疫型免疫型肿瘤瘤与与共存共存(预存存)免疫的概念免疫的概念免疫型免疫型肿瘤就是能瘤就是能够在接种后不久自在接种后不久自动诱发宿主免疫宿主免疫识别的的肿瘤瘤识别识别的的的的结结果果果果肿肿瘤生瘤生瘤生瘤生长长与抗与抗与抗与抗肿肿瘤免疫共存瘤免疫共存瘤免疫共存瘤免疫共存什么是共存（
12、什么是共存（预存）免疫？存）免疫？肿瘤与抗瘤与抗肿瘤免疫之瘤免疫之间的平衡的平衡宿主免疫系宿主免疫系统对肿瘤抗原有瘤抗原有特异性特异性识别肿瘤通瘤通过提供抗原提供抗原维持持这个免疫个免疫应答答这个免疫个免疫应答答对肿瘤有瘤有遏制遏制作用作用应答的性答的性质属于属于Th1型型细胞胞应答答预存免疫的状存免疫的状态决定决定IL-12或或Cy+IL-12疗效效免疫免疫细胞胞转导试验步步骤正常供体小鼠正常供体小鼠正常供体小鼠正常供体小鼠肿瘤疫苗肿瘤疫苗肿瘤疫苗肿瘤疫苗肿瘤接种肿瘤接种肿瘤接种肿瘤接种排斥接种排斥接种排斥接种排斥接种T T细胞缺失受体小鼠细胞缺失受体小鼠细胞缺失受体小鼠细胞缺失受体小鼠肿瘤
13、接种肿瘤接种肿瘤接种肿瘤接种14 14 dayday 输入输入输入输入T T细胞细胞细胞细胞T cellT cellIL-12/Cy+IL-12 IL-12/Cy+IL-12 治疗治疗治疗治疗治疗效果治疗效果治疗效果治疗效果? ?2 2 dayday预存免疫在白介素存免疫在白介素12治治疗中的关中的关键作用作用 输入输入输入输入细胞细胞细胞细胞治疗治疗治疗治疗治愈率治愈率治愈率治愈率无无无无未分化未分化未分化未分化T T细胞细胞细胞细胞肿瘤特异肿瘤特异肿瘤特异肿瘤特异T T细胞细胞细胞细胞IL-12IL-12生理盐水生理盐水生理盐水生理盐水IL-12IL-12IL-12IL-12Cy+IL-1
14、2Cy+IL-120/100/100/80/80/80/81/101/109/129/1210/1010/10Cy+IL-12Cy+IL-120/50/5未分化未分化未分化未分化T T细胞细胞细胞细胞未分化未分化未分化未分化T T细胞细胞细胞细胞肿瘤特异肿瘤特异肿瘤特异肿瘤特异T T细胞细胞细胞细胞肿瘤特异肿瘤特异肿瘤特异肿瘤特异T T细胞细胞细胞细胞生理盐水生理盐水生理盐水生理盐水受体：带受体：带受体：带受体：带MCA207MCA207肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤1414天的天的天的天的T T细胞缺失小鼠细胞缺失小鼠细胞缺失小鼠细胞缺失小鼠荷瘤鼠作荷瘤鼠作为T细胞供体（胞供体（预存免疫）的存免疫）的试验
15、供体细胞供体细胞供体细胞供体细胞治疗手段治疗手段治疗手段治疗手段治愈率治愈率治愈率治愈率生理盐水生理盐水生理盐水生理盐水IL-12IL-12IL-12IL-12Cy+IL-12Cy+IL-12Cy+IL-12Cy+IL-120/50/50/50/53/53/50/50/55/55/55/55/5荷瘤荷瘤荷瘤荷瘤0 0天脾脏天脾脏天脾脏天脾脏T cellT cellCy+IL-12Cy+IL-120/50/5受体：带受体：带受体：带受体：带MCA207MCA207肿瘤肿瘤肿瘤肿瘤1414天的天的天的天的T T细胞缺失小鼠细胞缺失小鼠细胞缺失小鼠细胞缺失小鼠荷瘤荷瘤荷瘤荷瘤1010天脾脏天脾脏天脾
16、脏天脾脏T cellT cell荷瘤荷瘤荷瘤荷瘤1010天脾脏天脾脏天脾脏天脾脏T cellT cell荷瘤荷瘤荷瘤荷瘤1010天脾脏天脾脏天脾脏天脾脏T cellT cell荷瘤荷瘤荷瘤荷瘤2828天脾脏天脾脏天脾脏天脾脏T cellT cell荷瘤荷瘤荷瘤荷瘤2828天脾脏天脾脏天脾脏天脾脏T cellT cell荷瘤荷瘤荷瘤荷瘤2828天脾脏天脾脏天脾脏天脾脏T cellT cell生理盐水生理盐水生理盐水生理盐水预存免疫是决定荷瘤鼠存免疫是决定荷瘤鼠对白介素白介素12治治疗应答与否的关答与否的关键条件条件为什么？什么？白介素白介素12受体表达特征受体表达特征未分化未分化T细胞不表达白介
17、素胞不表达白介素12 受体（不受影响）受体（不受影响）激活的激活的T细胞表达白介素胞表达白介素12受体受体表达表达为激活后的激活后的37天内，以后不再表达天内，以后不再表达环磷磷酰胺加白介素胺加白介素12疗效解效解释上的一个困惑上的一个困惑如果如果如果如果对对白介素白介素白介素白介素1212应应答好坏由受体表达决定，答好坏由受体表达决定，答好坏由受体表达决定，答好坏由受体表达决定，那化那化那化那化疗疗是如何提高白介素是如何提高白介素是如何提高白介素是如何提高白介素1212受体表达的？受体表达的？受体表达的？受体表达的？传统的解的解释肿瘤晚期免疫受到抑制瘤晚期免疫受到抑制抑制性抑制性抑制性抑制性
18、T T细细胞（胞（胞（胞（TregTreg）生成）生成）生成）生成T T细细胞不表达白介素胞不表达白介素胞不表达白介素胞不表达白介素1212受体受体受体受体对对白介素白介素白介素白介素1212单单独治独治独治独治疗疗不不不不应应答答答答化化疗药杀死死Treg抑制性抑制性抑制性抑制性T T细细胞由于代胞由于代胞由于代胞由于代谢较谢较高，高，高，高，对对化化化化疗药疗药敏感敏感敏感敏感去除抑制性去除抑制性去除抑制性去除抑制性T T细细胞之后胞之后胞之后胞之后释释放了被抑制的抗放了被抑制的抗放了被抑制的抗放了被抑制的抗肿肿瘤瘤瘤瘤应应答答答答抗抗抗抗肿肿瘤瘤瘤瘤T T细细胞被激活，表达白介素胞被激活
19、，表达白介素胞被激活，表达白介素胞被激活，表达白介素12 12 受体受体受体受体去除免疫抑制在我去除免疫抑制在我们的的肿瘤模型中不瘤模型中不起关起关键作用作用其他解其他解释？化化疗对肿瘤的瘤的杀伤导致抗原致抗原释放激活放激活预存免疫存免疫化化疗激活抗激活抗肿瘤免疫瘤免疫？我我我我们们做的是化做的是化做的是化做的是化疗还疗还是免疫治是免疫治是免疫治是免疫治疗疗？预存免疫的状存免疫的状态决定化决定化疗疗效效免疫参与免疫参与对化化疗疗效的效的贡献献化化疗的的疗效在没有免疫功能的情况下会不同效在没有免疫功能的情况下会不同吗？无法在人体内无法在人体内无法在人体内无法在人体内进进行行行行对对比比比比但可以
20、在但可以在但可以在但可以在试验试验小鼠体内小鼠体内小鼠体内小鼠体内进进行行行行对对比比比比T细胞胞对肿瘤瘤发展与化展与化疗疗效的影响效的影响治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小正常鼠正常鼠正常鼠正常鼠+ +环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺T T细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠+ +环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺正常鼠正常鼠正常鼠正常鼠+ +对照对照对照对照T T细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠+ +对照对照对照对照阿霉素与建阿霉素与建择在正常与在正常与T细胞缺失鼠中的胞缺失鼠中的疗效效对比比治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开
21、始后天数治疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小正常鼠正常鼠正常鼠正常鼠+ +阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素T T细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠+ +阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素正常鼠正常鼠正常鼠正常鼠+ +建择建择建择建择T T细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠+ +建择建择建择建择相似的相似的疗效差异用效差异用T细胞清除抗体也能看到胞清除抗体也能看到治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺+ + 抗抗抗抗CD4/CD8CD4/CD8阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素
22、阿霉素阿霉素+ +抗抗抗抗CD4/CD8CD4/CD8抗抗抗抗CD4/CD8CD4/CD8大大肿瘤模型中瘤模型中T细胞胞对化化疗疗效的效的贡献献治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小正常鼠正常鼠正常鼠正常鼠+ +环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺T T细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠细胞敲除鼠+ +环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺化化疗是如何激活抗是如何激活抗肿瘤免疫的呢？瘤免疫的呢？药物物对肿瘤瘤细胞的直接胞的直接杀伤是必要条件是必要条件排除去抑制解排除去抑制解排除去抑制解排除去抑制解释释：杀杀死抑制性死抑制性死抑制性死抑制性T T细细胞（胞（胞
23、（胞（TregTreg）直接直接杀伤导致抗原短期集中致抗原短期集中释放放释放的放的肿瘤抗原不足以启瘤抗原不足以启动全新的抗全新的抗肿瘤瘤应答，答，但可以激活但可以激活预存的抗存的抗肿瘤瘤应答答其他化其他化疗药与白介素与白介素12的的联合使用合使用疗效效化疗化疗化疗化疗+IL-12+IL-12治愈率治愈率治愈率治愈率（%）阿霉素（全身）阿霉素（全身）阿霉素（全身）阿霉素（全身）8080100100环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺阿霉素（瘤内，脂质体）阿霉素（瘤内，脂质体）阿霉素（瘤内，脂质体）阿霉素（瘤内，脂质体）0 06060100100建择（全身）建择（全身）建择（全身）建择（全身）0 02
24、020建择（瘤内，自由体）建择（瘤内，自由体）建择（瘤内，自由体）建择（瘤内，自由体）202040405 5氟氟氟氟0 0长春碱长春碱长春碱长春碱0 0肿瘤模型：肿瘤模型：肿瘤模型：肿瘤模型：2 24 4周周周周MCA207MCA207皮下肿瘤，皮下肿瘤，皮下肿瘤，皮下肿瘤， 10101717毫米直径毫米直径毫米直径毫米直径治疗：化疗单次给药，治疗：化疗单次给药，治疗：化疗单次给药，治疗：化疗单次给药，3 3天后开始白介素天后开始白介素天后开始白介素天后开始白介素1212（隔天一次（隔天一次（隔天一次（隔天一次x3x3次）次）次）次）化疗或者白介素化疗或者白介素化疗或者白介素化疗或者白介素12
25、12单独对照单独对照单独对照单独对照0%0%治愈率治愈率治愈率治愈率药物必物必须对肿瘤瘤细胞有足胞有足够的直接的直接杀伤药物及剂量药物及剂量药物及剂量药物及剂量对体细胞及肿瘤的杀伤对体细胞及肿瘤的杀伤对体细胞及肿瘤的杀伤对体细胞及肿瘤的杀伤疗效疗效疗效疗效（与对照比较）（与对照比较）（与对照比较）（与对照比较）环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺25mg/kg25mg/kg10%10%无无无无环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺50mg/kg50mg/kg30%30%弱弱弱弱环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺75mg/kg75mg/kg60%50%50%强强强强环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺125mg
26、/kg125mg/kg70%70%强强强强阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素10mg/kg 10mg/kg 全身全身全身全身10%70%70%90%90%100%100%100%100%100%100%白细胞白细胞白细胞白细胞10%10%30%50%50%70%70%50%50%? ?阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素5mg/kg5mg/kg瘤内瘤内瘤内瘤内50%50%10%10%? ?显显显显建择建择建择建择150mg/kg150mg/kg全身全身全身全身10%30%30%? ?无无无无建择建择建择建择50mg/kg50mg/kg瘤内瘤内瘤内瘤内30%30%30%9090天）天）天）天）获得性耐得性耐药的免疫解
27、的免疫解释治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小正常鼠正常鼠正常鼠正常鼠免疫缺失鼠免疫缺失鼠免疫缺失鼠免疫缺失鼠既然抗肿瘤免疫贡献了疗效的很大部分，当这既然抗肿瘤免疫贡献了疗效的很大部分，当这个应答不再启动时就会造成疗效明显下降个应答不再启动时就会造成疗效明显下降耐耐药与抗与抗肿瘤瘤应答的关答的关联耐耐药的荷瘤鼠体内看不到化的荷瘤鼠体内看不到化疗后的免疫后的免疫应答答WinnWinn氏法氏法氏法氏法测试测试：没有抗：没有抗：没有抗：没有抗肿肿瘤靶效瘤靶效瘤靶效瘤靶效应细应细胞存在胞存在胞存在胞存在体外与体外与体外与体外与树树突突突突细细胞共培养
28、：没有伽胞共培养：没有伽胞共培养：没有伽胞共培养：没有伽玛玛干干干干扰扰素分泌素分泌素分泌素分泌瘤内瘤内瘤内瘤内T T细细胞浸胞浸胞浸胞浸润润：明：明：明：明显显减少减少减少减少为什么抗什么抗肿瘤免疫不再激活？瘤免疫不再激活？预预存免疫存免疫存免疫存免疫“ “衰竭衰竭衰竭衰竭” ”自身抗原的主自身抗原的主自身抗原的主自身抗原的主动动耐受耐受耐受耐受其他？其他？其他？其他？补充充预存免疫不能扭存免疫不能扭转耐耐药的的试验预预预预存存存存免免免免疫疫疫疫二二二二次次次次化化化化疗疗疗疗二次化疗二次化疗二次化疗二次化疗过继后二次化疗过继后二次化疗过继后二次化疗过继后二次化疗一次化疗后时间一次化疗后时
29、间一次化疗后时间一次化疗后时间肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小结论：预存免疫衰竭不是耐药的原因结论：预存免疫衰竭不是耐药的原因免疫耐受的可能免疫耐受的可能耐受是机体保耐受是机体保护自身免疫攻自身免疫攻击的有效机制的有效机制耐受与否取决于机体耐受与否取决于机体对抗原外源性的判断抗原外源性的判断外源性侵入往往伴随机体分泌外源性侵入往往伴随机体分泌“危危险信号信号”没有危没有危险信号情况下的免疫信号情况下的免疫应答自身抗原？答自身抗原？肿瘤本瘤本质上是自身上是自身组织，不能，不能诱发危危险信号信号在没有危在没有危险信号条件下的抗信号条件下的抗肿瘤的瘤的应答有可能被答有可能被机体看作自身免疫机体看作自
30、身免疫支持免疫耐受解支持免疫耐受解释的的试验观察察（干（干预化化疗疗效的效的细胞胞过继试验）化疗开始后天数化疗开始后天数化疗开始后天数化疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小细胞过继细胞过继细胞过继细胞过继环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺环磷酰胺未分化脾细胞未分化脾细胞未分化脾细胞未分化脾细胞耐药脾细胞耐药脾细胞耐药脾细胞耐药脾细胞非耐药脾细胞非耐药脾细胞非耐药脾细胞非耐药脾细胞如何防止耐受提高如何防止耐受提高疗效？效？防止机体把抗防止机体把抗肿瘤瘤应答看作自身免疫答看作自身免疫引入引入“危危险信号信号”？危危险信号一般由信号一般由细菌及病毒菌及病毒诱导陀陀样受体（受体（Toll like re
31、ceptor）产生生内毒素是典型的危内毒素是典型的危险信号信号诱发因子因子内毒素内毒素诱发的危的危险信号之一就是白介素信号之一就是白介素12化化疗后提供内毒素或者白介素后提供内毒素或者白介素12可以可以“欺欺骗”机体，机体，把抗把抗肿瘤瘤应答答误认为是抗外源侵入是抗外源侵入应答答白介素白介素12与化与化疗联合使用的其他例子合使用的其他例子（与局部阿霉素（与局部阿霉素联合使用）合使用）化疗开始后天数化疗开始后天数化疗开始后天数化疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小IL-12IL-12阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素9 9天天天天+IL-12+IL-12阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素3 3天天天天+IL
32、-12+IL-12为什么白介素什么白介素12的用的用药时间很关很关键？白介素白介素12必必须在化在化疗之后提供之后提供T T细细胞激活后表达白介素胞激活后表达白介素胞激活后表达白介素胞激活后表达白介素1212受体受体受体受体化化疗之后最佳使用期：之后最佳使用期：27天内天内白介素白介素白介素白介素1212受体表达短受体表达短受体表达短受体表达短暂暂：2 24 4天天天天白介素白介素12修修饰过的的T细胞不受抑制胞不受抑制调控控白介素白介素12不能改不能改变已已经接受接受负调控的控的T细胞（不胞（不表达白介素表达白介素12受体）受体）局部阿霉素加白介素局部阿霉素加白介素12在在MCA203肿瘤模
33、型瘤模型里里的治的治疗试验局部化局部化疗可以用来可以用来评判化判化疗的直接的直接杀伤与化与化疗激激活的免疫活的免疫杀伤各自各自对疗效的效的贡献献但但环磷磷酰胺是前体胺是前体药物，不能局部物，不能局部给药阿霉素脂阿霉素脂质体可以局部体可以局部给药如果化如果化疗一个病灶并激活免疫，一个病灶并激活免疫，对远端病灶会有端病灶会有什么什么疗效？效？双双侧接种的接种的MCA203肿瘤模型可以用来回答以上瘤模型可以用来回答以上问题白介素白介素12与化与化疗联合使用的其他例子合使用的其他例子（MCA203肿瘤模型瘤模型）化疗开始后天数化疗开始后天数化疗开始后天数化疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小化
34、化化化疗疗疗疗侧侧侧侧非非非非化化化化疗疗疗疗侧侧侧侧阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素IL-12IL-12阿霉素阿霉素阿霉素阿霉素+IL-12+IL-12局部建局部建择加加树突突细胞加白介素胞加白介素12在低免疫性在低免疫性肿瘤瘤Pan02模型中的模型中的疗效效治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数治疗开始后天数肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小建择建择建择建择+DC+IL-12, 6/10+DC+IL-12, 6/10建择建择建择建择+DC+IL-12, 4/10+DC+IL-12, 4/10建择建择建择建择+IL-12+IL-12无治疗对照无治疗对照无治疗对照无治疗对照为什么白介素什么白介素12
35、与化与化疗的的联合治合治疗在某些情在某些情况下极况下极为有效？有效？化化疗集中集中释放的大量放的大量肿瘤抗原激活瘤抗原激活预存免疫存免疫活化的活化的T细胞表达白介素胞表达白介素12受体受体外源提供的白介素外源提供的白介素12模模拟危危险信号信号机体机体认为激活的免疫激活的免疫应答是抗外源侵入答是抗外源侵入白介素白介素12修修饰的的T细胞不再受抑制性胞不再受抑制性调控控抗抗肿瘤的瘤的应答得以答得以扩大和持大和持续化化疗加白介素加白介素12启启动的抗的抗肿瘤免疫与持瘤免疫与持续化化疗的关系的关系环磷磷酰胺胺单药加白介素加白介素12只需一个只需一个疗程程与目前与目前临床持床持续化化疗的的实践不符合践
36、不符合后后续化化疗对免疫的打免疫的打击？临床床应用用问题：需要改：需要改变现有的化有的化疗程序程序吗？试验模型：模型：Cy+IL-12Cy+IL-12激活免疫激活免疫激活免疫激活免疫其他化其他化其他化其他化疗疗制造外周血白制造外周血白制造外周血白制造外周血白细细胞下降胞下降胞下降胞下降观观察察察察疗疗效及效及效及效及肿肿瘤局部免疫瘤局部免疫瘤局部免疫瘤局部免疫细细胞胞胞胞变变化化化化其他手段其他手段对Cy+IL-12疗效的干效的干扰试验无治疗无治疗无治疗无治疗Cy+IL-12Cy+IL-12+ +建择建择建择建择+5Fu +5Fu + +抗抗抗抗CD4/8 CD4/8 干扰药物：干扰药物：干扰
37、药物：干扰药物：Cy+IL-12Cy+IL-12结束时（结束时（结束时（结束时（7 7天）开始天）开始天）开始天）开始建择：每三天一次，每次建择：每三天一次，每次建择：每三天一次，每次建择：每三天一次，每次2 2毫克，毫克，毫克，毫克， 一共一共一共一共4 4次次次次5Fu 5Fu ：5Fu 5Fu 每天每天每天每天2 2毫克加叶酸（毫克加叶酸（毫克加叶酸（毫克加叶酸（1.251.25毫克），毫克），毫克），毫克），8 8天（半数毒性致死）天（半数毒性致死）天（半数毒性致死）天（半数毒性致死）抗抗抗抗CD4/8CD4/8：200200微克抗体连续微克抗体连续微克抗体连续微克抗体连续2 2天天天
38、天. .以后每周一次以后每周一次以后每周一次以后每周一次x2x2周周周周肿肿肿肿瘤瘤瘤瘤大大大大小小小小外周血外周血外周血外周血脾脏脾脏脾脏脾脏4M4M110M110M2.9M2.9M132M132M35M35M2.1M2.1M0.2M0.2M33M33M2.3M2.3M92M92M结论白介素白介素12启启动的抗的抗肿瘤瘤应答一旦启答一旦启动后有很后有很强的持的持续和抗抑制能力和抗抑制能力免疫免疫对肿瘤宿主生存的支持瘤宿主生存的支持肿肿瘤晚期，瘤晚期，瘤晚期，瘤晚期，恶恶液液液液质质以及免疫紊乱以及免疫紊乱以及免疫紊乱以及免疫紊乱白介素白介素白介素白介素1212的抗的抗的抗的抗恶恶液液液液质质
39、与抗与抗与抗与抗肿肿瘤瘤瘤瘤综综合效果合效果合效果合效果肿瘤晚期的瘤晚期的现象象出出现恶液液质（消瘦衰竭代（消瘦衰竭代谢内分泌紊乱）内分泌紊乱）停止停止对治治疗的的应答（手答（手术和其他减和其他减负治治疗）肿瘤瘤发展加速展加速肿瘤生瘤生长本身造成的？本身造成的？有些病人只有有些病人只有有些病人只有有些病人只有肿肿瘤瘤瘤瘤标标志物但几乎看不到复志物但几乎看不到复志物但几乎看不到复志物但几乎看不到复发发病灶病灶病灶病灶癌症病人死于癌症病人死于肿瘤的直接作用瘤的直接作用吗？除了功能性占位，除了功能性占位，除了功能性占位，除了功能性占位，肿肿瘤如何致死？瘤如何致死？瘤如何致死？瘤如何致死？有有恶液液质
40、的癌症病人死于免疫紊乱而非的癌症病人死于免疫紊乱而非肿瘤瘤肿瘤可以瘤可以诱发恶液液质的的产生生恶液液质，而非，而非肿瘤，瘤，导致晚期症状致晚期症状恶液液质是独立致死疾病是独立致死疾病恶液液质的本的本质是系是系统炎症（免疫紊乱）炎症（免疫紊乱）抑制系抑制系统炎症可以抑制炎症可以抑制恶液液质和死亡和死亡抗抗肿瘤免疫瘤免疫应答是最好的答是最好的恶液液质抑制和抑制和调控手段控手段恶液液质的的发生生标志着抗志着抗肿瘤免疫的消退瘤免疫的消退恶液液质的的临床表床表现体重下降（肌肉和脂肪萎体重下降（肌肉和脂肪萎缩）厌食，食，恶心，呕吐心，呕吐弓背，眼弓背，眼窝塌陷塌陷精力及体力萎靡，精力及体力萎靡，丧失活失活
41、动欲望欲望胸腹水，水胸腹水，水肿（肝（肝脏功能低下）功能低下）低低烧，白，白细胞及中性粒胞及中性粒细胞增加，特异免疫低下胞增加，特异免疫低下凝血异常（凝血异常（DIC，内出血），内出血）代代谢紊乱紊乱心肺及其他器官衰竭心肺及其他器官衰竭实验室与室与临床的脱床的脱节：缺少合适的：缺少合适的动物模型物模型绝大多数大多数动物物肿瘤模型不形成瘤模型不形成恶液液质肿肿瘤瘤瘤瘤负负担可以达到基本上与体重相似而不会致死担可以达到基本上与体重相似而不会致死担可以达到基本上与体重相似而不会致死担可以达到基本上与体重相似而不会致死极个极个别早期早期恶液液质模型主要以体重下降模型主要以体重下降为表表现缺少有缺少有临
42、床表床表现且且肿瘤瘤负担不大的模型担不大的模型CHX207CHX207恶液质模型：恶液质模型：恶液质模型：恶液质模型：皮下中小肿瘤导致恶液皮下中小肿瘤导致恶液皮下中小肿瘤导致恶液皮下中小肿瘤导致恶液质及死亡质及死亡质及死亡质及死亡为什么什么恶液液质模型如此重要？模型如此重要？大多数癌症病人死于大多数癌症病人死于恶液液质的直接或的直接或间接作用接作用传统治治疗（手（手术，放化，放化疗）有可能加速）有可能加速恶液液质病病人的死亡（医生的忌人的死亡（医生的忌讳）在非在非恶液液质模型中开模型中开发的的药物不适用物不适用恶液液质状状态下的治下的治疗（加速死亡）（加速死亡）恶液液质与特异抗与特异抗肿瘤免疫
43、之瘤免疫之间相互排斥相互排斥问题出在出在认识上上恶液液质是癌症晚期的是癌症晚期的结果果还是原因？是原因？肿瘤生长肿瘤生长肿瘤生长肿瘤生长进入晚期进入晚期进入晚期进入晚期恶液质恶液质恶液质恶液质死亡死亡死亡死亡传统观念传统观念传统观念传统观念新观念新观念新观念新观念肿瘤生长肿瘤生长肿瘤生长肿瘤生长进入晚期进入晚期进入晚期进入晚期恶液质恶液质恶液质恶液质死亡死亡死亡死亡恶液液质和非和非恶液液质模型的模型的对比比体体体体重重重重变变变变化化化化%接种后生长天数接种后生长天数接种后生长天数接种后生长天数恶液质模型恶液质模型恶液质模型恶液质模型非恶液质模型非恶液质模型非恶液质模型非恶液质模型恶液液质模型
44、的模型的发病率，生存期及体重病率，生存期及体重变化化恶液质发病率恶液质发病率恶液质发病率恶液质发病率发病后生存率发病后生存率发病后生存率发病后生存率体重变化率体重变化率体重变化率体重变化率发病率：发病率：发病率：发病率：1414天天天天50%50%；1818天天天天70%70%生存率：生存率：生存率：生存率：70%70%死于发病后死于发病后死于发病后死于发病后3 31010天天天天肿瘤瘤负担：担：发病（两天内病（两天内7%体重下降）体重下降）肿瘤瘤负担：担：死亡死亡体重，大小，脂肪，肌肉比体重，大小，脂肪，肌肉比较正常荷瘤鼠正常荷瘤鼠正常荷瘤鼠正常荷瘤鼠恶液质荷瘤鼠恶液质荷瘤鼠恶液质荷瘤鼠恶液
45、质荷瘤鼠宿主怎么就死于一个不大的皮下宿主怎么就死于一个不大的皮下肿瘤？瘤？肿瘤瘤诱发的的恶液液质导致宿主致宿主进入晚期和死亡入晚期和死亡恶液液质的本的本质是什么？怎么是什么？怎么导致宿主死亡？致宿主死亡？恶液液质是一个是一个临床而不是病理表述床而不是病理表述恶液液质的机理一直不清楚的机理一直不清楚早期早期认为是由于某些免疫因子（白介素是由于某些免疫因子（白介素6）恶液液质致死的原因不清楚（代致死的原因不清楚（代谢紊乱？）紊乱？）近期近期临床上床上观察到伴随系察到伴随系统炎症（因果不清）炎症（因果不清）什么是系什么是系统炎症？炎症？先天免疫和先天免疫和获得性免疫得性免疫系系统炎症是先天免疫亢炎症
46、是先天免疫亢奋的表的表现由大量体由大量体由大量体由大量体细细胞急性死亡启胞急性死亡启胞急性死亡启胞急性死亡启动动无法无法无法无法过过渡到渡到渡到渡到获获得性免疫（缺少抗原）得性免疫（缺少抗原）得性免疫（缺少抗原）得性免疫（缺少抗原）系系统炎症疾病：炎症疾病：急性：急性：急性：急性：脓脓毒症；器官缺血灌注，无感染毒症；器官缺血灌注，无感染毒症；器官缺血灌注，无感染毒症；器官缺血灌注，无感染创伤创伤（手（手（手（手术术）慢性：乙肝；艾滋病；肺慢性：乙肝；艾滋病；肺慢性：乙肝；艾滋病；肺慢性：乙肝；艾滋病；肺结结核；慢性核；慢性核；慢性核；慢性肾肾衰竭；某些慢衰竭；某些慢衰竭；某些慢衰竭；某些慢性关
47、性关性关性关节节炎和心炎和心炎和心炎和心脏脏病；糖尿病等慢性病；糖尿病等慢性病；糖尿病等慢性病；糖尿病等慢性顽顽疾疾疾疾粒粒细胞胞总数及比例升高，数及比例升高，T细胞胞总数及比例下降数及比例下降恶液液质和系和系统炎症：伴随炎症：伴随还是机理？是机理？白细胞白细胞白细胞白细胞T T细胞细胞细胞细胞中性粒细胞细胞中性粒细胞细胞中性粒细胞细胞中性粒细胞细胞正常值正常值正常值正常值抑制炎症能防止或逆抑制炎症能防止或逆转恶液液质吗？传统炎症抑制手段：炎症抑制手段：激素：激素：激素：激素：强强地松地松地松地松非激素非激素非激素非激素类类：塞来昔布：塞来昔布：塞来昔布：塞来昔布化化化化疗药疗药物：建物：建物
48、：建物：建择择，环环磷磷磷磷酰酰胺胺胺胺免疫免疫调控控获获得性免疫与先天免疫之得性免疫与先天免疫之得性免疫与先天免疫之得性免疫与先天免疫之间间的关系的关系的关系的关系抗抗抗抗肿肿瘤免疫的双重意瘤免疫的双重意瘤免疫的双重意瘤免疫的双重意义义激素（激素（强地松）地松）对恶液液质发病和死亡的影响病和死亡的影响发病率发病率发病率发病率死亡率死亡率死亡率死亡率强地松强地松强地松强地松= 5mg/kg/= 5mg/kg/天天天天 x 10 x 10天天天天A塞来昔布抑制塞来昔布抑制恶液液质的的进展并延展并延长生存生存BC发病后天数发病后天数发病后天数发病后天数接种后后天数接种后后天数接种后后天数接种后后天
49、数接种后后天数接种后后天数接种后后天数接种后后天数生存期生存期生存期生存期体重变化体重变化体重变化体重变化肿瘤大小肿瘤大小肿瘤大小肿瘤大小对照组对照组对照组对照组治疗组治疗组治疗组治疗组治疗组治疗组治疗组治疗组对照组对照组对照组对照组塞来昔布：发病两天后开始，塞来昔布：发病两天后开始，塞来昔布：发病两天后开始，塞来昔布：发病两天后开始，5 5毫克毫克毫克毫克/ /天天天天x10x10天天天天吉西他吉西他滨（建（建择）的抗炎症及）的抗炎症及恶液液质效果效果生存期生存期生存期生存期体重变化体重变化体重变化体重变化肿瘤大小肿瘤大小肿瘤大小肿瘤大小发病后天数发病后天数发病后天数发病后天数接种后天数接种
50、后天数接种后天数接种后天数对照组对照组对照组对照组治疗组治疗组治疗组治疗组建择：发病两天后开始给药，建择：发病两天后开始给药，建择：发病两天后开始给药，建择：发病两天后开始给药，1 1毫克毫克毫克毫克x2x2天天天天吉西他吉西他滨抗炎症效果抗炎症效果T T细胞细胞细胞细胞粒细胞粒细胞粒细胞粒细胞白细胞总数（百万）白细胞总数（百万）白细胞总数（百万）白细胞总数（百万）3.93.98.38.31.91.91.01.0观察察结果果抑制炎症可以逆抑制炎症可以逆转恶液液质症状延症状延长生存生存结论系系统炎症是造成炎症是造成恶液液质和死亡的原因和死亡的原因T细胞胞对恶液液质发病率即病程的影响病率即病程的影
51、响 发病率发病率发病率发病率 生存率生存率生存率生存率对照鼠对照鼠对照鼠对照鼠T T细胞缺失细胞缺失细胞缺失细胞缺失T细胞胞对恶液液质发病率即体重病率即体重的影响的影响 没有没有没有没有T T细胞的小鼠细胞的小鼠细胞的小鼠细胞的小鼠 正常小鼠正常小鼠正常小鼠正常小鼠 不诱导恶液质的肿瘤不诱导恶液质的肿瘤不诱导恶液质的肿瘤不诱导恶液质的肿瘤通通过提高抗提高抗肿瘤免疫可以防止瘤免疫可以防止恶液液质的的发生生和和发展展吗？试验一：通一：通过细胞胞转导在在恶液液质发生前生前输入抗入抗肿瘤瘤T细胞，胞，观察察恶液液质的的发病率病率变化化试验二：某些化二：某些化疗药物（物（环磷磷酰胺）的抑制炎症胺）的抑制
52、炎症与激活免疫与激活免疫综合作用合作用试验三：白介素三：白介素12的抗的抗恶液液质的直接与的直接与间接作用接作用通通过输入抗入抗肿瘤瘤T细胞来抑制胞来抑制恶液液质发病率发病率发病率发病率生存率生存率生存率生存率无输入无输入无输入无输入未分化未分化未分化未分化T T细胞细胞细胞细胞抗肿瘤抗肿瘤抗肿瘤抗肿瘤T T细胞细胞细胞细胞抗肿瘤抗肿瘤抗肿瘤抗肿瘤T T细胞细胞细胞细胞未分化未分化未分化未分化T T细胞细胞细胞细胞无输入无输入无输入无输入肿瘤接种后天数肿瘤接种后天数肿瘤接种后天数肿瘤接种后天数发发发发病病病病率率率率%生生生生存存存存率率率率%环磷磷酰胺的胺的综合抗炎症及免疫激活效果合抗炎症及
53、免疫激活效果生存率生存率生存率生存率抗肿瘤抗肿瘤抗肿瘤抗肿瘤体重变化体重变化体重变化体重变化对照组对照组对照组对照组CyCyCy+Cy+抗抗抗抗CD4/CD8CD4/CD8CyCyCy+Cy+抗抗抗抗CD4/CD8CD4/CD8对照组对照组对照组对照组CyCyCy+Cy+抗抗抗抗CD4/CD8CD4/CD8days after tumor inocdays after tumor inocdays after cachexia onsetdays after cachexia onsetdays after cachexia onsetdays after cachexia onsetIL-1
54、2IL-12对照组对照组对照组对照组days after tumor inocdays after tumor inoc体体体体重重重重变变变变化化化化白介素白介素12的的抗抗恶液液质效果高效果高剂量（量（100ng）生存率生存率生存率生存率对照组对照组对照组对照组IL-12IL-12肿瘤大小肿瘤大小肿瘤大小肿瘤大小体体体体重重重重变变变变化化化化体重体重体重体重/ /生存率生存率生存率生存率肿瘤大小肿瘤大小肿瘤大小肿瘤大小IL-12IL-12对照组对照组对照组对照组白介素白介素12的的抗抗恶液液质效果低效果低剂量量（20ng）跟踪研究以及跟踪研究以及结论白介素白介素12具有直接与具有直接与间
55、接抗接抗恶液液质的作用的作用白介素白介素12的直接抗的直接抗恶液液质作用不需要通作用不需要通过T细胞，胞，但需要通但需要通过伽伽玛干干扰素素白介素白介素12的的间接抗接抗恶液液质作用是通作用是通过抑制抑制恶液液质后激活抗后激活抗肿瘤特异性免疫瘤特异性免疫应答答进一步抑制一步抑制肿瘤瘤白介素白介素12的抗的抗恶液液质作用不需要大作用不需要大剂量，但需要量，但需要常常剂量（每天一次）量（每天一次）白介素白介素12的的临床床应用分析用分析白介素白介素12的开的开发历史史1989年完成分子年完成分子鉴定定1990年申年申请分子和分子和应用用专利（抗利（抗肿瘤和感染）瘤和感染）1991发表抗表抗肿瘤瘤动
56、物物实验19921994 开展早期开展早期临床床实验（一期和二期）（一期和二期）1994年出年出现严重重临床副作用（两例死亡）床副作用（两例死亡）19962005年开展后期年开展后期临床床试验2005年白介素年白介素12供供应中断中断2008美国美国NIH启用最后一批启用最后一批过期白介素期白介素122010年白介素年白介素12专利利过期期白介素白介素12早期早期临床床试验GI/WyethGI/Wyeth做做做做的一期的一期的一期的一期临临床床床床4040肿肿瘤病人（瘤病人（瘤病人（瘤病人（肾肾癌，黑色素癌，直癌，黑色素癌，直癌，黑色素癌，直癌，黑色素癌，直肠肠癌）癌）癌）癌）身体状况良好（身
57、体状况良好（身体状况良好（身体状况良好（KarnofskyKarnofsky指数指数指数指数7070）3 31000ng/kg/day 1000ng/kg/day 静脉静脉静脉静脉给药给药，每周，每周，每周，每周5 5天，隔周重复，一天，隔周重复，一天，隔周重复，一天，隔周重复，一共两次共两次共两次共两次一个一个一个一个CRCR（melanoma)melanoma)，一个，一个，一个，一个PR(RCC) PR(RCC) MTDMTD为为500ng/kg500ng/kg毒副作用：毒副作用：毒副作用：毒副作用： 感冒症状（感冒症状（感冒症状（感冒症状（发烧发烧，恶恶心，呕吐，心，呕吐，心，呕吐，心
58、，呕吐，厌厌食，食，食，食，懒懒惰）惰）惰）惰） 口口口口疮疮 肝肝肝肝脏转脏转胺胺胺胺酶酶升高升高升高升高 血液白血液白血液白血液白细细胞，淋巴胞，淋巴胞，淋巴胞，淋巴细细胞胞胞胞暂时暂时下降（下降（下降（下降（30308080）白介素白介素12早期早期临床床试验Roche做的准一期做的准一期临床床10例黑色素瘤病人例黑色素瘤病人皮下皮下给药，每周一次，每周一次，500ng/kg有混和有混和临床床疗效，但达不到效，但达不到PR标准准毒副作用：毒副作用：感冒症状感冒症状肝肝脏转胺胺酶升高升高血液白血液白细胞，淋巴胞，淋巴细胞胞暂时下降下降白介素白介素12早期早期临床床试验RocheRoche做
59、的一期做的一期做的一期做的一期临临床床床床2828例例例例肾肾癌病人癌病人癌病人癌病人皮下皮下皮下皮下给药给药，每周一次，每周一次，每周一次，每周一次，100-1250ng/kg100-1250ng/kgMTDMTD为为1000ng/kg1000ng/kg1PR1PR（500ng/kg500ng/kg）毒副作用：毒副作用：毒副作用：毒副作用：感冒症状（感冒症状（感冒症状（感冒症状（发烧发烧，恶恶心，呕吐，心，呕吐，心，呕吐，心，呕吐，厌厌食，食，食，食，懒懒惰）惰）惰）惰）口口口口疮疮肝肝肝肝脏转脏转胺胺胺胺酶酶升高升高升高升高血液白血液白血液白血液白细细胞，淋巴胞，淋巴胞，淋巴胞，淋巴细细胞
60、胞胞胞暂时暂时下降（下降（下降（下降（30308080）白介素白介素12早期早期临床床试验Roche做的二期做的二期临床床试验设计80例，例，实际30例例肾癌病人癌病人皮下皮下给药，每周一次，逐，每周一次，逐渐上升到上升到1250ng/kg2例例PR没有明没有明显的毒副作用的毒副作用试验由于达不到由于达不到预期的期的临床床疗效而停止效而停止白介素白介素12的二期的二期临床事故床事故GI做的二期做的二期临床床17肾癌病人癌病人500ng/kg静脉静脉给药，每周，每周5天天12个病人在两次注射之后个病人在两次注射之后发生生4级副作用副作用2个病人最个病人最终死于副作用（胃死于副作用（胃肠道出血和道
61、出血和结肠炎）炎）白介素白介素12二期二期临床事故的原因床事故的原因二期省略了二期省略了预备注射（注射（pre-dosing)步步骤预备注射是在注射是在连续注射之前一周注射之前一周单独独给药预备注射降低了注射降低了连续给药时的血液伽的血液伽马干干扰素水素水平平动物（小鼠和猴子）物（小鼠和猴子）试验可以可以证明明预备注射降低注射降低毒副作用的意毒副作用的意义实际问题是只要控制伽是只要控制伽马干干扰素水平就可以防止素水平就可以防止白介素白介素12的毒副作用的毒副作用白介素白介素12后期后期临床床试验自从事故自从事故发生后，两家公司均生后，两家公司均对高高剂量白介素量白介素12的的临床床应用用产生生
62、怀疑疑此后的白介素此后的白介素12肿瘤瘤临床床试验多多为学学术机构以研机构以研究究为目的目的进行的中低行的中低剂量量试验新的新的动物物试验表明低表明低剂量的白介素量的白介素12有有时也可以也可以起起到抗到抗肿瘤效果瘤效果白介素白介素12后期后期临床床试验降低降低给药频率，但保持率，但保持500ng/kg给药量量28个个肾癌病人癌病人每周两次（第一，四天）静脉注射每周两次（第一，四天）静脉注射一个一个PR三个三个SD停停药后仍后仍观察到持察到持续的的肿瘤消退瘤消退没有没有严重毒副作用重毒副作用因因为疗效与伽效与伽马干干扰素的持素的持续诱发相关，相关，认为增加白介素增加白介素2可能会提高可能会提高
63、疗效（后来效（后来证明是明是错误的）的）白介素白介素12后期后期临床床试验皮下注射，降低皮下注射，降低单次次药量，增加量，增加频率率15个个肾癌，黑色素癌及大癌，黑色素癌及大肠癌病人癌病人每周三次，每次每周三次，每次50，100，300ng/kg1CR（50ng/kg),1PR(300ng/kg)毒副作用：毒副作用：白白细胞，淋巴胞，淋巴细胞和中性淋巴胞和中性淋巴细胞抑制胞抑制肝肝脏转胺胺酶升高升高Beta2-微球蛋白及微球蛋白及C反反应蛋白升高蛋白升高(系系统炎症）炎症）白介素白介素12后期后期临床床试验低低低低剂剂量白介素量白介素量白介素量白介素1212与疫苗与疫苗与疫苗与疫苗结结合合合合
64、黑色素癌抗原黑色素癌抗原黑色素癌抗原黑色素癌抗原MelanMelan-A-A的片段的片段的片段的片段IL-12:0IL-12:0100ng/kg,100ng/kg,第一，第第一，第第一，第第一，第2222天（静脉或皮下）天（静脉或皮下）天（静脉或皮下）天（静脉或皮下）MelanMelan-A-A肽肽段：第段：第段：第段：第1 1，8 8，1515，2222，5757gp100gp100试验试验：IL-12:30ng/kgIL-12:30ng/kg与与与与肽肽段同段同段同段同时时，同点皮内注射，同点皮内注射，同点皮内注射，同点皮内注射gp100:gp100:两周一次（两周一次（两周一次（两周一次
65、（x2)x2)到四周一次到四周一次到四周一次到四周一次(x2)(x2)到八周一次到八周一次到八周一次到八周一次没有明没有明没有明没有明显显毒副作用毒副作用毒副作用毒副作用没有明没有明没有明没有明显显白介素白介素白介素白介素1212与与与与临临床床床床效果的效果的效果的效果的对应对应白介素白介素12临床失床失败的主要原因的主要原因没有掌握白介素没有掌握白介素12 的最佳使用条件的最佳使用条件没有在没有在没有在没有在T T细细胞激活胞激活胞激活胞激活时给药时给药排除任何接受放化排除任何接受放化排除任何接受放化排除任何接受放化疗疗的病人的病人的病人的病人没有没有给药依据依据白介素白介素白介素白介素1
66、212受体表达不明：没有任何受体表达不明：没有任何受体表达不明：没有任何受体表达不明：没有任何测试测试给药剂量量错误高高高高剂剂量造成量造成量造成量造成NKNK细细胞激活，胞激活，胞激活，胞激活，T T细细胞抑止胞抑止胞抑止胞抑止大量游离伽大量游离伽大量游离伽大量游离伽马马干干干干扰扰素的副作用明素的副作用明素的副作用明素的副作用明显显白介素白介素12在抗病毒方面的在抗病毒方面的临床床试验抗艾滋病（抗艾滋病（HIV）一期）一期临床床试验6565个艾滋病毒感染者个艾滋病毒感染者个艾滋病毒感染者个艾滋病毒感染者CD4CD4细细胞数胞数胞数胞数50x10300x10300x106 6皮下注射，皮下注
67、射，皮下注射，皮下注射，30-300ng/kg, 30-300ng/kg, 一周两次（共一周两次（共一周两次（共一周两次（共4 4周）周）周）周）没有明没有明没有明没有明显显毒副作用毒副作用毒副作用毒副作用没有明没有明没有明没有明显显的抗病毒效果的抗病毒效果的抗病毒效果的抗病毒效果体外体外体外体外细细胞特异免疫功能没有明胞特异免疫功能没有明胞特异免疫功能没有明胞特异免疫功能没有明显变显变化化化化白介素白介素12在抗病毒方面的在抗病毒方面的临床床试验抗慢性丙肝病毒（抗慢性丙肝病毒（抗慢性丙肝病毒（抗慢性丙肝病毒（HCVHCV）的）的）的）的I/III/II期期期期临临床床床床试验试验（Roche
68、)Roche)6060个慢性丙肝病人个慢性丙肝病人个慢性丙肝病人个慢性丙肝病人皮下注射，皮下注射，皮下注射，皮下注射，30-500ng/kg,30-500ng/kg,每周一次，一共每周一次，一共每周一次，一共每周一次，一共1010周周周周毒副作用同以前毒副作用同以前毒副作用同以前毒副作用同以前报报道道道道过过的相同，不的相同，不的相同，不的相同，不严严重，与重，与重，与重，与剂剂量有关量有关量有关量有关根据根据根据根据剂剂量有量有量有量有17-5317-53的病人病毒的病人病毒的病人病毒的病人病毒RNARNA量下降量下降量下降量下降50%50%肝肝肝肝脏转脏转胺胺胺胺酶酶没有明没有明没有明没有
69、明显显下降下降下降下降没有完全病毒没有完全病毒没有完全病毒没有完全病毒转转阴的情况阴的情况阴的情况阴的情况疗疗效比不上效比不上效比不上效比不上a a a a干干干干扰扰素（素（素（素（1010转转阴）阴）阴）阴）白介素白介素12在抗病毒方面的在抗病毒方面的临床床试验抗慢性丙肝病毒（抗慢性丙肝病毒（HCV）的）的临床床试验（GI）225225个抗个抗个抗个抗a a a a干干干干扰扰素的慢性丙肝病人素的慢性丙肝病人素的慢性丙肝病人素的慢性丙肝病人皮下注射，皮下注射，皮下注射，皮下注射，500ng/kg,500ng/kg,每周两次，一共每周两次，一共每周两次，一共每周两次，一共1212周周周周百分
70、之三的病人因副作用退出百分之三的病人因副作用退出百分之三的病人因副作用退出百分之三的病人因副作用退出试验试验百分之一的病人中有百分之一的病人中有百分之一的病人中有百分之一的病人中有疗疗效效效效肝肝肝肝脏脏活活活活检检没有没有没有没有发现发现明明明明显变显变化化化化肝肝肝肝脏转脏转胺胺胺胺酶酶水平没有明水平没有明水平没有明水平没有明显显下降下降下降下降白介素白介素12在抗病毒方面的在抗病毒方面的临床床试验抗慢性乙肝病毒（抗慢性乙肝病毒（抗慢性乙肝病毒（抗慢性乙肝病毒（HBVHBV）的）的）的）的临临床床床床试验试验（RoheRohe）4646个慢性乙肝病人个慢性乙肝病人个慢性乙肝病人个慢性乙肝病
71、人皮下注射，皮下注射，皮下注射，皮下注射，30,250,500ng/kg,30,250,500ng/kg,每周一次，每周一次，每周一次，每周一次，1212周周周周病毒病毒病毒病毒转转阴率阴率阴率阴率：1515左右左右左右左右病毒病毒病毒病毒转转阴伴随阴伴随阴伴随阴伴随HBeAgHBeAg抗原抗原抗原抗原转转阴和阴和阴和阴和转转胺胺胺胺酶酶正常化正常化正常化正常化副作用与副作用与副作用与副作用与剂剂量相关但没有量相关但没有量相关但没有量相关但没有严严重情况重情况重情况重情况出出出出现现为什么有些乙肝病人有什么有些乙肝病人有应答而另一些没有？答而另一些没有？白介素白介素12的主要功能是修的主要功能
72、是修饰激活后的激活后的T细胞，防胞，防止耐受止耐受在没有在没有T细胞激活的情况下，白介素胞激活的情况下，白介素12主要靠主要靠NK生成的伽生成的伽马干干扰素有一些左右，但不治本素有一些左右，但不治本个个别病人在治病人在治疗期期间发生自生自发的病毒免疫的病毒免疫应答造答造成成对白介素白介素12 的的应答答白介素白介素12的当前的当前处境境基本分子基本分子专利于利于2010年到期年到期两家美国公司已于两家美国公司已于2000年之前放弃自己年之前放弃自己进行白介行白介素素12的的临床开床开发剩余的白介素剩余的白介素12由由GI公司交公司交给美国美国NIH使用使用从从2005年年6月以后月以后GI拒拒
73、绝继续向向NIH提供提供临床床级白白介素介素122008年美国年美国NIH将最后一批将最后一批过期的白介素期的白介素12投入投入临床床实验重新启重新启动白介素白介素12临床床应用的机会用的机会美国美国Wyeth公司因公司因为临床事故与缺乏床事故与缺乏疗效而放弃效而放弃了白介素了白介素12 的开的开发中国中国药厂指望白介素厂指望白介素12在美国上市后仿制的道路在美国上市后仿制的道路已已经堵死堵死中国有数家重中国有数家重组白介素白介素12的的GMP生生产中国有中国有庞大的白介素大的白介素12应用适用适应症人群：症人群：肿瘤，瘤，乙肝，艾滋病乙肝，艾滋病这些因素与我些因素与我们最新理念的最新理念的结
74、合合白介素白介素12的的临床最佳床最佳应用角度用角度肿瘤治瘤治疗方面方面常常常常规规放化放化放化放化疗对实疗对实体瘤的一部分（体瘤的一部分（体瘤的一部分（体瘤的一部分（10104040）有抑止但）有抑止但）有抑止但）有抑止但无法根治无法根治无法根治无法根治无法根治的原因一部分是因无法根治的原因一部分是因无法根治的原因一部分是因无法根治的原因一部分是因为为放化放化放化放化疗疗激活的免疫反激活的免疫反激活的免疫反激活的免疫反应应进进行不行不行不行不彻彻底并形成免疫衰竭甚至耐受底并形成免疫衰竭甚至耐受底并形成免疫衰竭甚至耐受底并形成免疫衰竭甚至耐受白介素白介素白介素白介素1212一方面推一方面推一方
75、面推一方面推进进免疫反免疫反免疫反免疫反应应的的的的强强化和深化，另一方化和深化，另一方化和深化，另一方化和深化，另一方面防止耐受面防止耐受面防止耐受面防止耐受实体瘤（肺癌，乳腺，消化道，肝癌等）实体瘤（肺癌，乳腺，消化道，肝癌等）实体瘤（肺癌，乳腺，消化道，肝癌等）实体瘤（肺癌，乳腺，消化道，肝癌等）放化疗放化疗放化疗放化疗急性免疫回放反应急性免疫回放反应急性免疫回放反应急性免疫回放反应抗原释放抗原释放抗原释放抗原释放树突细胞树突细胞树突细胞树突细胞应答，耐受，复发应答，耐受，复发应答，耐受，复发应答，耐受，复发死亡死亡死亡死亡白介素白介素白介素白介素1212持续应答持续应答持续应答持续应答治愈或带瘤生存治愈或带瘤生存治愈或带瘤生存治愈或带瘤生存谢谢大家的耐心大家的耐心
