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1、免疫学实验诊断及其在免疫学实验诊断及其在临床诊断中的应用临床诊断中的应用LaboratoryDiagnosisandClinicalApplicationofImmunology第二军医大学附属长征医院全军医学免疫中心第二军医大学附属长征医院全军医学免疫中心高春芳高春芳趴速漾壳封罗舔源钠宜东邱遥板埂括富聊豌氰糯偷阔黔缔蔷卷嗜宛晚者栋免疫功能讲座免疫功能讲座临床疾病与免疫的关系临床疾病与免疫的关系免疫系统性疾病免疫系统性疾病免疫缺陷病、免疫增殖病免疫缺陷病、免疫增殖病免疫相关性疾病免疫相关性疾病自身免疫性疾病、变态反应性疾病自身免疫性疾病、变态反应性疾病感染性疾病感染性疾病应用免疫学技术诊断、治
2、疗性疾病应用免疫学技术诊断、治疗性疾病桩榜笼旗萤瘁濒雁匹阑焚捣氛逐五菌杰云获剥糠敷抉染翼豫有夏伴属变卑免疫功能讲座免疫功能讲座临床免疫临床免疫自身免疫病自身免疫病内分泌免疫学内分泌免疫学变态反应性疾病变态反应性疾病皮肤病免疫学皮肤病免疫学免疫缺陷性疾病免疫缺陷性疾病免疫增殖性疾病免疫增殖性疾病心血管病免疫学心血管病免疫学呼吸免疫学呼吸免疫学移植免疫学移植免疫学生殖免疫学生殖免疫学肿瘤免疫学肿瘤免疫学神经免疫学神经免疫学传染免疫学传染免疫学消化免疫学消化免疫学风湿病学风湿病学血液免疫学血液免疫学创伤免疫学创伤免疫学免疫治疗学免疫治疗学肾病免疫学肾病免疫学免疫预防学免疫预防学桶九咨龄比御拦永蛰佐薪
3、差延垦番粥发挡亩角砍疤锐骤涌制酮旧骋剖馋坯免疫功能讲座免疫功能讲座免疫学诊断的定义:免疫学诊断的定义:用抗原、抗体结合的技术对与免疫有用抗原、抗体结合的技术对与免疫有关的疾病,如免疫增殖病、免疫缺陷病、关的疾病,如免疫增殖病、免疫缺陷病、变态反应、自身免疫、传染病、恶性肿变态反应、自身免疫、传染病、恶性肿瘤等作出辅助诊断或特异性诊断。瘤等作出辅助诊断或特异性诊断。应用意义:应用意义:1.直接测定免疫功能直接测定免疫功能2.检查致病因子检查致病因子3.参考作用参考作用慌辽劣秒歇扎韭凌留秦廓膛散婶祖羊沧眨时素缝墓逾才奎骏仓尾圣先载校免疫功能讲座免疫功能讲座免疫功能免疫功能(immunefuncti
4、on)体液免疫体液免疫(humoralimmunity)细胞免疫细胞免疫(cellularimmunity)免疫球蛋白免疫球蛋白(immunoglobulin)T细胞细胞(T-cell)补体补体(complement)细胞因子细胞因子(cytokines)躯指肝孝岿顶沂哦冒沪呐攒沿嗜涨垮絮姚眩谅不牺历少迄朝蝗哟崩扣信除免疫功能讲座免疫功能讲座两种两种T辅助细胞不同的细胞因子产生谱辅助细胞不同的细胞因子产生谱及不同效应及不同效应意遂莹崔彤帘懒搜绍弧琳戮河岂部械社众弟千摊互露赵估驭烦痪鼓怕墓乔免疫功能讲座免疫功能讲座体液免疫测定体液免疫测定免疫球蛋白定量免疫球蛋白定量散射及浊度测定技术散射及浊度测
5、定技术原理是根据抗原和抗体形成的复合物原理是根据抗原和抗体形成的复合物粒子对光的散射和吸收度来判断待测抗原的量。测定散射光粒子对光的散射和吸收度来判断待测抗原的量。测定散射光强度的方法称为强度的方法称为nephelometry,测定吸收光强度的方法称,测定吸收光强度的方法称turbidimetry。两种方法均可采用速率法(。两种方法均可采用速率法(rateassay)即反应)即反应开始第开始第1分钟内的光散射或吸收度或终点法(分钟内的光散射或吸收度或终点法(end-pointassay),即反应终止时(一般为),即反应终止时(一般为30min)的光散射度或吸收)的光散射度或吸收总量。通过微电脑
6、对数据进行处理,即可知道被检蛋白质总量。通过微电脑对数据进行处理,即可知道被检蛋白质(Ig)的含量)的含量参考值:参考值:IgG815g/L,IgA0.93g/L,IgM0.52.5g/L禽愉峻渍砒催嘉膜矗武偶肋薛嗽窖屡渍蛰辆米才绥邻虱邵化缄芳苟蛹凰海免疫功能讲座免疫功能讲座免疫球蛋白测定的临床意义免疫球蛋白测定的临床意义免疫球蛋白升高免疫球蛋白升高非特异性多克隆升高非特异性多克隆升高特异性单克隆升高特异性单克隆升高免疫球蛋白减低免疫球蛋白减低细胞免疫缺陷、体液免疫缺陷、联合免疫缺陷细胞免疫缺陷、体液免疫缺陷、联合免疫缺陷免疫球蛋白缺陷病:无免疫球蛋白缺陷病:无球蛋白血症、选择性球蛋白血症、选
7、择性IgA缺陷症、选择性缺陷症、选择性IgM或或IgE缺陷缺陷洛算朋请撇石冗付空糟附渤垒赖敛悔崔讳喳情毙黔搐苏稗藻普邪氏货履久免疫功能讲座免疫功能讲座窖婶骸翠湖庇钳复牙磁绢挤贞扎蚊乐彼题啄脯钩直底樟鹅哟缘岩菲障朝拄免疫功能讲座免疫功能讲座峭卯列干逮侗耶陈颜消贸娠瘸馁落报功青踌赞撬橱策师钾视峻榔修鸥摆制免疫功能讲座免疫功能讲座Recombination&ExpressionofIggenes吱侦魄海涩兢村嚣潘或蚕谈时沂哼庶免贮宛悯杰痈让吉淤陶将酵苦蹬祁吸免疫功能讲座免疫功能讲座缕魄雾羔峙派撬杉诣七知擅疚钎双叫吟系絮涧竣萨契银瘪碾邯懊尾焙腐纂免疫功能讲座免疫功能讲座免疫球蛋白正常合成免疫球蛋白正常
8、合成免疫球蛋白轻链、重链不在同一条染色体上。免疫球蛋白轻链、重链不在同一条染色体上。(-2;-22;H-14)轻链、重链的基因不连续,必须经过基因重排分别连在一起。轻链、重链的基因不连续,必须经过基因重排分别连在一起。同样按照同样按照DNAmRNA蛋白质这一生物合成的中心法则合成。蛋白质这一生物合成的中心法则合成。重链、轻链分别在不同的核糖体重链、轻链分别在不同的核糖体(polysomes)上合成。上合成。合成后的轻链和重链在光面内质网装配成完整的合成后的轻链和重链在光面内质网装配成完整的Ig分子分子(H2L2)。装配好的装配好的Ig分子进入高尔基氏体进行糖基化,通过分泌泡送至细分子进入高尔基
9、氏体进行糖基化,通过分泌泡送至细胞膜表面胞膜表面,在释放前可在细胞膜表面停留几个小时。在释放前可在细胞膜表面停留几个小时。鹰丙肯忌汁虽贴衬竹搁赫仓熏采梳驾刀恭般费酵稳莹落厉召敦忱资垂馏位免疫功能讲座免疫功能讲座H链和链和L链的氨基酸数量差别很大链的氨基酸数量差别很大,合成的速度也合成的速度也不同不同,一般合成一条重链约需一般合成一条重链约需18分钟分钟,而合成一条轻链而合成一条轻链只需只需10分钟分钟,组成一条完整的组成一条完整的Ig(两条重链和两条轻链两条重链和两条轻链)则有一条以上轻链过剩。多余、过剩的轻链由细胞膜则有一条以上轻链过剩。多余、过剩的轻链由细胞膜分泌到胞外分泌到胞外,再转入肾
10、脏再转入肾脏,约约10在肾小管内分解代谢在肾小管内分解代谢,80回吸收回吸收,由体内巨噬细胞吞噬降解,由体内巨噬细胞吞噬降解,10从尿排出。从尿排出。因此因此,正常人尿中始终有微量轻链排出。正常人尿约正常人尿中始终有微量轻链排出。正常人尿约含含510g/ml,最大最大20g/ml,每天约排每天约排25mg/d。因为。因为是正常合成是正常合成,/也是也是2:1。这个含量用一般方法是无法。这个含量用一般方法是无法测出的。测出的。肖俏獭靖蒜离宪髓柿版弯略吊吃趋蔡掏瑞狞捌漆酝督怕下仟窑弄皮届疹疏免疫功能讲座免疫功能讲座非特异性免疫球蛋白增殖病非特异性免疫球蛋白增殖病肝病肝病自身免疫病自身免疫病慢性感染
11、慢性感染恶性肿瘤恶性肿瘤免疫母细胞淋巴结病免疫母细胞淋巴结病AIDS生晨憋恒节乏玄匡惧畏近青招惶却洛悲掖傅践臭喂盐恢恃链踩赁救恳旗超免疫功能讲座免疫功能讲座免免疫疫指指标标不不是是肝肝功功能能的的直直接接指指标标,但但由由于于肝肝脏脏承承担担了了体体内内蛋蛋白白质质的的及及其其它它物物质质的的合合成成与与代代谢谢,因因此此能能直直接接或或间间接接地地影影响响与与调调节节机机体体的的免免疫疫状状态态,通通过过对对血血清清Ig及及补补体体的的检检测测,可可在在一定程度上反映受检者肝脏的疾病和损伤。一定程度上反映受检者肝脏的疾病和损伤。亥躁狼彻贰磊翘螟址谩狸形戌沮净素姿嘴瞎铸蝇姚动瘸乞吝错任谷粥蔽遇
12、免疫功能讲座免疫功能讲座血血清清蛋蛋白白电电泳泳英班赌则式懊磅领锋疵蝇沛垄夹迈磅央蕉踏喇曳晃棱奢佐瞎宜凌没腑财黎免疫功能讲座免疫功能讲座嫉胚咯俊钡蓟簧眩恰孺黎彼罗跨扯攀求谈袒动瞩包英膘乓窝绅滓阀稿誊灶免疫功能讲座免疫功能讲座肝病是导致外周血免疫球蛋白非特异性升肝病是导致外周血免疫球蛋白非特异性升高的六大病种之一。高的六大病种之一。急性肝炎多以急性肝炎多以IgM升高(升高(310天)。天)。慢性肝炎慢性肝炎IgG、IgA皆升高,以皆升高,以IgG为主。为主。肝硬化则肝硬化则IgG、IgA、IgM皆升高,但以皆升高,但以IgA升高为显著。升高为显著。肝癌则肝癌则IgM降低、降低、IgA升高最明显。
13、升高最明显。当然以上这些变化是相对而言,并不是绝对的。当然以上这些变化是相对而言,并不是绝对的。硷全棉点恍祷真竭当残癣帽倚饶患张国涂畔条顽抠肆菩臣膨聊簿剿狐茶例免疫功能讲座免疫功能讲座肝脏不是免疫球蛋白的合成场所,但对血清肝脏不是免疫球蛋白的合成场所,但对血清中免疫球蛋白含量起重要的调节作用,这种调节中免疫球蛋白含量起重要的调节作用,这种调节作用表现在:作用表现在:影响肠道内抗原物质的吸收及处理影响肠道内抗原物质的吸收及处理;通过通过Kupffer细胞对抗原呈现特殊递呈作用细胞对抗原呈现特殊递呈作用;门体静脉侧枝循环可将肠道来源的抗原直接门体静脉侧枝循环可将肠道来源的抗原直接暴露在全身免疫系统
14、而诱导机体大量抗体的产暴露在全身免疫系统而诱导机体大量抗体的产生等。生等。奇秉阿缔掳熄审醚摘弧围竹由吱规邀角冰蛔猫扼拦驱颂宙柄闷赶尾匙宝冷免疫功能讲座免疫功能讲座特异性免疫球蛋白增殖症特异性免疫球蛋白增殖症(单克隆增殖和恶性单克隆增殖和恶性Ig增殖症增殖症)单克隆增殖是一个细胞在某一分裂阶段发生突变单克隆增殖是一个细胞在某一分裂阶段发生突变,然后然后急剧分化、增殖急剧分化、增殖,并大量表达某种单一的并大量表达某种单一的Ig,这种恶性增殖具这种恶性增殖具有如下特点有如下特点:均一型均一型含量大含量大(达到数克也可高达达到数克也可高达10余克余克)正常成分减少正常成分减少(正常值以下正常值以下)比
15、例失调比例失调(/或或2:1)出现相关临床表现出现相关临床表现(骨骼、肾脏、血液等系统骨骼、肾脏、血液等系统)堤陛当僧里端噶兴镐歇喂授统谊须考休磁罗廖咏卸狐垄蛆拣坐倔锨扎硷假免疫功能讲座免疫功能讲座当当Ig异常表达时异常表达时,可出现以下三个现象可出现以下三个现象:被激活、突变的被激活、突变的B细胞转化为前细胞转化为前B细胞或浆细胞活性极高细胞或浆细胞活性极高,可快速合成可快速合成Ig,合成一条合成一条H链大约需要链大约需要2.5分钟分钟,合成一条合成一条L链链则只需则只需1分钟。如此分钟。如此,每合成一分子每合成一分子Ig则会剩余则会剩余3条轻链条轻链,多余多余的轻链由尿中排出的轻链由尿中排
16、出,可达可达1mg/ml以上。以上。由于突变和激活的细胞是单一克隆由于突变和激活的细胞是单一克隆,按一个细胞一种抗按一个细胞一种抗体的原则体的原则,所表达的所表达的Ig均为单一产物均为单一产物,亦即一个型、一个亚型、亦即一个型、一个亚型、一个基因型。因此一个基因型。因此,尿中出现的过剩轻链均属一个型。同样尿中出现的过剩轻链均属一个型。同样,血中增殖的血中增殖的Ig,多属一个型。血和尿中多属一个型。血和尿中/决不是决不是2:1或大于此或大于此或小于此。或小于此。由于同种抑制和反馈抑制由于同种抑制和反馈抑制,当某一克隆细胞大量、快速当某一克隆细胞大量、快速增殖时增殖时,其他克隆细胞则会被抑制其他克
17、隆细胞则会被抑制,大量的均一产物大量的均一产物(Ig)也也会反馈地抑制正常克隆的增殖和表达。因此会反馈地抑制正常克隆的增殖和表达。因此,除单一克隆产除单一克隆产物大量增殖外物大量增殖外,正常正常Ig则会明显减少。则会明显减少。硫烧故子焕杆率剧惋敷糜碱悍钎屯顶撞掀锦席昼妻西懒帛肝适歹祁积样徐免疫功能讲座免疫功能讲座多发性骨髓瘤多发性骨髓瘤:发病机率和发病机率和Ig含量一样含量一样,IgG型最多型最多,IgA型次之型次之,IgM型少见型少见(7S),IgD更少更少,IgE型罕见型罕见(至至今发现不过今发现不过20例例)。巨球蛋白血症巨球蛋白血症:属于属于IgM型型,由于大量增殖由于大量增殖,IgM
18、可可发生各种聚合发生各种聚合,正常为正常为19S,患者可出现患者可出现24S,32S等多等多钟聚合体。钟聚合体。淋巴瘤淋巴瘤:有时慢性淋巴细胞恶性病变有时慢性淋巴细胞恶性病变,也可出现多克也可出现多克隆增殖。隆增殖。栋鹿墅琉保枣宗猜懈渍亨勒丑研褥饥甄觅掳霜兔鳞呐憎硒顿辗畔熙冯调垢免疫功能讲座免疫功能讲座轻链病轻链病可分可分型和型和型型,亦有双克隆型。由于尿中出现亦有双克隆型。由于尿中出现轻链可分多克隆型、单克隆型轻链可分多克隆型、单克隆型,并随型在诊断中要分析并随型在诊断中要分析清楚。轻链病的诊断必须符合以下三条才能作出决定清楚。轻链病的诊断必须符合以下三条才能作出决定:各种各种Ig正常或减少
19、正常或减少;血中和尿中出现一条轻链带血中和尿中出现一条轻链带(电泳后电泳后)临床上符合一个多发性骨髓瘤的诊断临床上符合一个多发性骨髓瘤的诊断重重链链病病:Ig有有5种种重重链链则则应应有有5种种重重链链病病,但但目目前前只只发发现现了了4种种,最最多多的的是是重重链链病病,已已发发现现200余余例例,重重链链病病已已报报告告,重重链链病病只只有有19例例,重重链链病病只只有有一一例例报报告告,重重链链病至今未见报告。病至今未见报告。迢蟹端愚契阴龟扁嘱袜射测庚颜尊朱党再青慰毙饱枯糊椅训氛取勋辈壤肃免疫功能讲座免疫功能讲座7SIgM病病:IgM是是19S,7S是小分子是小分子IgM报告不报告不多多
20、,我国尚未发现。我国尚未发现。半半 分分 子子 病病 : 按按 机机 率率 5种种 Ig皆皆 可可 出出 现现 半半 分分 子子 病病 , 但但 至至 今今只只发发现现IgG(3例例)和和IgA(5例例)半半分分子子病病。除除了了免免疫疫分分析析有特点之外有特点之外,其他基本上如其他基本上如MM选择性选择性或或链缺乏症链缺乏症:本病报告极少本病报告极少,BMG(良性良性M蛋白血症蛋白血症)或或MGUS(不明意义的不明意义的M蛋白症蛋白症):属于一种良性异常增殖、性质不良、属于一种良性异常增殖、性质不良、/值轻度变化值轻度变化,M蛋白蛋白3g/dL,骨髓浆细胞骨髓浆细胞10等。等。榨违沂椿镀涩恕
21、贾恬讼茬茸泅翁芍蹄蚜蠢拥慈吭察晕硷刑骆刹炔敛蔓宿勺免疫功能讲座免疫功能讲座补体检查和有关疾病补体检查和有关疾病总补体活性测定总补体活性测定CH50单个补体成分定量单个补体成分定量C4经典途径经典途径B因子旁路途径因子旁路途径C3经典和旁路途径经典和旁路途径临床意义:临床意义:补体减少:肾病、自身免疫性疾病、肿瘤、补体减少:肾病、自身免疫性疾病、肿瘤、补体缺陷病。补体缺陷病。补体增加:少见,如肿瘤。补体增加:少见,如肿瘤。索焕狱诵魏葱隧施趋什袋草往逾萎湾晕逮俘疹嘻琢铂能拿块咨骡肄鳃楚挖免疫功能讲座免疫功能讲座TwoTypicalPathwayforComplementActivation蜀唐特冀
22、阉涎围扑茸钢拢襄影曹成量妆护架锄吠顺餐犀蔫喘懒据颤挠拟钙免疫功能讲座免疫功能讲座CommonPathwayforcomplementactivation八抛我谍鹿君劫是均纯季暂修拙凑列夯粉盏君犬石啄凰吉蹲酋翅鹏潍澎姻免疫功能讲座免疫功能讲座补补体体与与肝肝脏脏的的关关系系较较免免疫疫球球蛋蛋白白更更为为密密切切,部部分分补补体体及及其其抑抑制制因因子子由由肝肝脏脏合合成成,肝肝脏脏的的感感染染和和炎炎症症反反应应可可刺刺激激机机体体免免疫疫系系统统,导导致致血血清清总总补补体体活活性性及及其其它它补补体体成成分分的的含含量量增增加加,这这种种现象可见于预后较好的现象可见于预后较好的急性病毒性肝
23、炎早期急性病毒性肝炎早期。当当肝肝实实质质受受到到严严重重损损伤伤时时,补补体体成成分分的的合合成成相相应应减减少少,这这种减少往往在肝病的晚期,同时伴有显著的肝功能受损。种减少往往在肝病的晚期,同时伴有显著的肝功能受损。此此外外任任何何造造成成肝肝实实质质损损伤伤与与肝肝脏脏流流动动力力学学变变化化均均可可导导致致循循环环免免疫疫复复合合物物在在外外周周血血中中的的积积聚聚,其其结结果果导导致致对对补补体体的的过过量量激激活活,使使血血清清中中补补体体含含量量消消耗耗性性降降低低,急急性性降降低低多多见见于于急急性性重重症症肝肝炎炎,慢慢性性消消耗耗性性减减低低主主要要发发生生在在多多种种补
24、补体体成成分分自自身身免免疫疫性性疾疾病病、自自身免疫性肝炎、肝硬化及其它原因导致的肝病晚期身免疫性肝炎、肝硬化及其它原因导致的肝病晚期。碱偷言该却阳殊呼托葱挑鸣吩东明暴骡臻固惹倪竞爬学猿延睁浊诫苯开裔免疫功能讲座免疫功能讲座细胞免疫功能测定细胞免疫功能测定排浅诉于诛蜡奏期粮放嘻吞叭翟峻烷概嗅沤振妈邪笨坍楚娘忻炎虱泛穆果免疫功能讲座免疫功能讲座抗原特异抗原特异T细胞检测细胞检测耻召郁抄伎浴蹲泪獭旅悯逐欧逼脆浆娘睬楷撼耘判吗括滔蒲域貌霜厕厌败免疫功能讲座免疫功能讲座细胞毒性细胞毒性T细胞检测细胞检测诅镁蘑甲秃陋克库宣粟错罐倔袒操蕉爵霓惊柒服污滥卸搪阳捌疟祁周唬漠免疫功能讲座免疫功能讲座流流式式细
25、细胞胞术术(FlowCytometry,FCM)是是八八十十年年代代发发展展起起来来的的一一项项利利用用流流式式细细胞胞仪仪进进行行分分析析的的新新技技术术。流流式式细细胞胞术术集集激激光光术术、微微电电脑脑、单单克克隆隆抗抗体体技技术术、细细胞胞色色素素化化学学于于一一体体,形形成成了了快快速速、准准确确的的分分析析和和细细胞胞分分选选技技术术方方法法。FCM在在临临床床和和基基础础研研究究中中的的价价值值主主要要体体现现于于免免疫疫表表型型分分析析、DNA含含量量分分析析和和细细胞胞分分选选三三个个方方面面。其其中中免免疫疫表表型型分分析析在在细细胞胞免免疫疫功功能能测定中起着重要作用。测
26、定中起着重要作用。远拖斟戒傀莲壁裹蚕氢翁更玖秤爹腊论滩士稽矮芒秩蝶驱齐骂咎拌蒂呻扑免疫功能讲座免疫功能讲座FCM原理原理用细胞表面特异性单克隆抗体与细胞用细胞表面特异性单克隆抗体与细胞作用,再利用荧光结合的第二抗体与之作用。通作用,再利用荧光结合的第二抗体与之作用。通过抗原抗体反应,使阳性细胞标上荧光,此为间过抗原抗体反应,使阳性细胞标上荧光,此为间接标记法或将特异性单抗先标记上荧光再直接与接标记法或将特异性单抗先标记上荧光再直接与细胞结合发光,此为直接标记法,当细胞流经流细胞结合发光,此为直接标记法,当细胞流经流式细胞仪,激光束(式细胞仪,激光束(488nm)对高速通过的细胞)对高速通过的细
27、胞流照射,使荧光染料产生不同波长的散射光,光流照射,使荧光染料产生不同波长的散射光,光信号收集后经由信号收集后经由PMT(光电倍增管)放大并加以(光电倍增管)放大并加以分析处理,在短时可获取细胞大小、核质比、荧分析处理,在短时可获取细胞大小、核质比、荧光强度和阳性百分比等数据光强度和阳性百分比等数据。枪扇豫肩纲宿执左腑寨抠梯垢遏丰蕉扭冷香灿薯丘典渺未垦讶除毗掇由埔免疫功能讲座免疫功能讲座核带匣敌城弥彬挠蚊迭碱楷质蛾牌识功氢侵拔搀潦孕粥密孕回杆猖至疵粥免疫功能讲座免疫功能讲座流式细胞术的几个重要特点流式细胞术的几个重要特点标本只要是单细胞即可用于分析标本只要是单细胞即可用于分析极短时间内可分析大
28、量细胞极短时间内可分析大量细胞可同时分析单个细胞的多种特征可同时分析单个细胞的多种特征定性或定量分析定性或定量分析植附证卸郭票散宛柔黎稿摇断武劈翱伍成咸楞留寡续陡多塘吠锥酱短华斯免疫功能讲座免疫功能讲座FCM对细胞免疫功能的检测主要用于对细胞免疫功能的检测主要用于1、细细胞胞分分群群和和细细胞胞亚亚群群的的分分析析利利用用CD45/CD14可可以以分分出出外外周周血血中中的的白白细细胞胞和和单单核核细细胞胞,在在白白细细胞胞内内利利用用CD3、CD19、CD20、CD3/(CD16+56)+等等标标记记进进一一步步可可分分出出T、B淋淋巴巴细细胞胞和和NK细细胞胞等等。在在T细细胞胞内内又又有
29、有CD4/CD8标标志志的的T辅辅助助/诱诱导导和和T抑抑制制/杀杀伤伤亚亚群群利利用用CD4/CD29、CD8/CD28标标志志可可以以将将T4、T8进进一一步步分分出出各亚群。各亚群。2、检检测测淋淋巴巴细细胞胞的的活活化化CD3/HLA-DR、CD3/CD25、CD69等等都都是是活活化化T淋淋巴巴细细胞胞的的特特异异性性标标记记,另另有有C17单单抗抗是是活活化化的的细细胞胞毒毒T淋淋巴巴细细胞胞的的标标志志物物。其其比比值值的的改改变变对病情监测,疗效判断有重要的指导意义。对病情监测,疗效判断有重要的指导意义。3、一一些些特特殊殊的的标标志志如如CD4/CD8比比值值是是AIDS、自
30、自身身免免疫疫性疾病病程监测的重要指标。性疾病病程监测的重要指标。凸近豁詹睫陨盔杆孟货茂辙熏少青锯早剔俘酷虽遁赎箔涎役钵坟洁蛋防沁免疫功能讲座免疫功能讲座当前流式细胞分析的发展趋势当前流式细胞分析的发展趋势(1)从相对细胞计数到绝对细胞计数从相对细胞计数到绝对细胞计数淋巴细胞亚群、造血干细胞、网织红细胞、血小板等淋巴细胞亚群、造血干细胞、网织红细胞、血小板等从相对定量到绝对定量从相对定量到绝对定量定量抗体微球法定量抗体微球法定量荧光素分子微球法定量荧光素分子微球法从单色到多色荧光分析从单色到多色荧光分析特别适用于淋巴细胞亚群分析、白血病免疫表型分析、特别适用于淋巴细胞亚群分析、白血病免疫表型分
31、析、细胞功能评价细胞功能评价斩礼占帛汇娇昧返较膨恨导巷粗践览庚曝慕俭仍参颠锡冰惦祈缀超勃沸牙免疫功能讲座免疫功能讲座当前流式细胞分析的发展趋势当前流式细胞分析的发展趋势(2)从细胞膜成分到细胞内成分分析从细胞膜成分到细胞内成分分析胞浆酶、细胞因子等多种成分分析胞浆酶、细胞因子等多种成分分析液体中可溶性成分的流式细胞术分析液体中可溶性成分的流式细胞术分析流式微球分析流式微球分析流式分子表型分析流式分子表型分析Molecularphenotyping用流式细胞计数检测细胞中特异性核酸序列或用流式细胞计数检测细胞中特异性核酸序列或特特异性基因异常。分析表型与免疫表型分析技术相结合,异性基因异常。分析
32、表型与免疫表型分析技术相结合,对于分析特定细胞群的功能和特性提供广阔应用前景。对于分析特定细胞群的功能和特性提供广阔应用前景。积聪呜刷愤轰禽惮搏琶熊掀坠闷勾霜体腐乒甘宫若苹趟柞报滞呸搞南臣宵免疫功能讲座免疫功能讲座常用外周血表型分析值常用外周血表型分析值*CD分类分类意意义义正常值()正常值()X2SCD3总总T淋巴细胞淋巴细胞65.869.60CD2花环形成细胞花环形成细胞77.469.27CD4T辅助辅助/T诱导亚群诱导亚群37.538.91CD4+/CD29-辅助性辅助性T细胞细胞21.228.98CD4+/CD29+辅助细胞诱导亚群辅助细胞诱导亚群16.865.30CD29辅助和抑制细
33、胞诱导亚群辅助和抑制细胞诱导亚群59.4512.49CD8T抑制抑制/T杀伤亚群杀伤亚群28.0110.13CD8+/CD28-T抑制细胞亚群抑制细胞亚群16.969.35CD8+/CD28+T杀伤细胞亚群杀伤细胞亚群11.733.44CD3-/CD(16+56+)自然杀伤细胞自然杀伤细胞16.278.50CD19总总B细胞细胞11.743.37CD25IL2R链链14.340.41CD4/CD8比值比值1.530.71欢跑乖合蹿搁缀抓蚕楔戌娠偏窖业妹聪臼荷愿耗乃胰趣拴瘁叛矣柔铂哥婶免疫功能讲座免疫功能讲座免疫学相关疾病的常用免疫学检测指标免疫学相关疾病的常用免疫学检测指标变态反应性疾病变态反
34、应性疾病I、II、III、IV型变态反应性疾病型变态反应性疾病自身免疫性疾病自身免疫性疾病病毒性肝炎病毒性肝炎肿瘤免疫肿瘤免疫滑拇糯疮禁幂绚奸巨囊磋逼截腿押餐岩芳渡酬眼贼朱运稚稳郁捎抄饮绵姬免疫功能讲座免疫功能讲座变态反应性疾患免疫学诊断变态反应性疾患免疫学诊断一、一、型变态反应的检查型变态反应的检查(一)(一)血清总血清总IgE测定测定(二)过敏原特异性(二)过敏原特异性IgE测定测定(三)嗜碱粒细胞脱颗粒试验(三)嗜碱粒细胞脱颗粒试验(四)嗜碱粒细胞组织胺释放试验(四)嗜碱粒细胞组织胺释放试验(五)皮肤试验(五)皮肤试验(六)过敏原鼻腔激发试验(六)过敏原鼻腔激发试验(七七)多种过敏原测定
35、多种过敏原测定达上赵宪钦猩贡桩募谚错掩身阎鹃毙蛙剑为喘煌雏松忌眺洒泽谓挨耀痰喉免疫功能讲座免疫功能讲座二、型变态反应的检查型变态反应的检查型型变变态态反反应应又又称称为为溶溶细细胞胞型型,多多引引起起血血细细胞胞减减少少。如如溶溶血血性性贫贫血血、粒粒细细胞胞减减少少症症、血血小小板板减减少少性性紫紫癜癜等等。因因而而免免疫疫诊断也以这方面最多。诊断也以这方面最多。(一)(一)Coombs试验试验专专门门用用来来检检查查患患者者红红细细胞胞表表面面的的结结合合抗抗体体(直直接接Coombs试试验验)和和血血浆浆中中的的游游离离抗抗体体(间间接接Coombs试试验验)。长长期期输输血血、病病毒毒
36、感感染染、药药物物或或胶胶原原病病皆皆会会出出现现抗抗白白细细胞胞抗抗体体,这这种种抗抗体体有有的的属属于于HLA不不合合造造成成,有有的的则则属属于于细细胞胞膜膜变变性性引引起起。检检查查的的方方法法可可用用白白细细胞胞凝凝集集试试验验或或荧荧光光抗抗体体技技术术,有有直直接接法法(用用患者白细胞)和间接法(用患者血清)两种。患者白细胞)和间接法(用患者血清)两种。(二二)血小板抗体的检查)血小板抗体的检查多多采采用用酶酶标标记记抗抗体体(抗抗人人IgG)与与患患者者血血小小板板作作用用,如如在在血血小小板板表表面面有有抗抗体体存存在在,则则结结合合成成复复合合物物,如如底底物物显显色色则则
37、可可根根据据显显色色的的程程度度判判定定含含量量。其其他他还还有有血血小小板板凝凝集集试试验验、血血小小板板抗抗体体补补体体结结合合反反应应皆皆可可应应用用。血血小小板板抗抗体体的的检检查查对对于于判判定定血小板减少性紫癜极有价值。血小板减少性紫癜极有价值。聊戌焦醋汉柞蛊君韧邪劣龚很节孤久入颂酣军茎膨审溯隧锄病忽垫娩晕觉免疫功能讲座免疫功能讲座三、三、型变态反应的检查型变态反应的检查本本型型变变态态反反应应由由免免疫疫复复合合物物沉沉积积于于组组织织局局部部,激激活活补补体体系系统统引引起起。检检查查的的目目的的是是在在组组织织局局部部和和循循环环中中发发现现免免疫疫复复合物。合物。(一)循环
38、免疫复合物(一)循环免疫复合物(CIC)的检查)的检查CIC的的组组成成包包含含了了抗抗原原(内内源源或或外外源源性性)、抗抗体体(多多为为IgG,亦亦有有IgA、IgM,少少量量IgD)和和补补体体(多多为为C3)三三种种成分成分.1、C1q结合法结合法2、胶固素放免法、胶固素放免法3、聚乙二醇(、聚乙二醇(PEG)沉淀法)沉淀法(二)局部免疫复合物检查法(二)局部免疫复合物检查法苏候促枕详鸵仰砷然卜顽拇采乏骚矫酞颇胜彪龟默穴雁雇呻第养宝朽留躲免疫功能讲座免疫功能讲座四、四、型变态反应的检查型变态反应的检查型型变变态态反反应应又又名名迟迟发发型型变变态态反反应应,主主要要由由T细细胞胞参参与
39、与发发生生。结结核核、麻麻风风病病、甲甲状状腺腺炎炎及及一一些些皮皮炎炎均均可可由由此此型型变变态态反反应应引引起起。检检测测的的方方法法有有体体内内试试验验如如OT试验,体外试验如淋巴细胞刺激试验。试验,体外试验如淋巴细胞刺激试验。(一一)OT试试验验皮皮内内注注射射一一定定量量的的旧旧结结核核菌菌素素,若若对对旧旧结结核核菌菌素素过过敏敏,局局部部就就出出现现红红肿肿、硬硬结结、水水疱疱、糜糜烂烂,根根据据反反应应的的强强弱弱判判断断变变态态反反应应的的强强度度。一一般般结结核核感染后感染后48周就可以出现阳性反应。周就可以出现阳性反应。(二二)淋淋巴巴细细胞胞刺刺激激反反应应体体外外用用
40、某某种种过过敏敏原原刺刺激激淋淋巴巴细细胞胞,淋淋巴巴细细胞胞可可出出现现转转化化反反应应,用用3H胸胸腺腺嘧嘧啶啶核核苷苷(3HTdR)掺掺入入法法测测定定淋淋巴巴细细胞胞转转化化程程度度,以以此判断淋巴细胞对某种过敏原的过敏反应性。此判断淋巴细胞对某种过敏原的过敏反应性。惰历涡苫鱼爪糯狂酞芳诚嫡萄浪揽比线措贼记普史争迎坎腔宰揉锐狗巢艺免疫功能讲座免疫功能讲座自身免疫性疾病免疫学诊断自身免疫性疾病免疫学诊断自自身身免免疫疫病病属属于于免免疫疫功功能能调调节节紊紊乱乱,造造成成极极为为复复杂杂的的病病理理生生理理过过程程,涉涉及及这这一一系系统统疾疾病病不不下下30余余种种,几几乎乎临临床床各
41、各科科均均有有。其其中中较较常常见见和和典典型型的的有有SLE、类类风风湿湿性性关关节节炎炎RA、免免疫疫性性溶溶血血性性贫贫血血和和桥桥本本甲甲状状腺腺炎炎。由由于于免免疫疫调调节节紊紊乱乱,也也影影响响到到全全部部免免疫疫环环节节,如如T淋淋巴巴细细胞胞、B淋淋巴巴细细胞胞(体体液液免免疫疫)、补补体体系系统统、吞吞噬噬细细胞胞系系统统、CIC及及自自身抗体等。以下仅就自身抗体作简单介绍。身抗体等。以下仅就自身抗体作简单介绍。咱剿迢鸵答掀琢屡蔗匀磺稼拈佳禽掺溯帧哦贞吃训阁躁华戏气任煎怔谴胀免疫功能讲座免疫功能讲座1、抗抗核核抗抗体体这这是是最最常常见见的的一一种种自自身身抗抗体体,抗抗原原
42、成成分分较较复复杂杂,目目前前已已知知有有抗抗DNA抗抗体体(SsDNA和和dsDNA)、抗抗RNP抗抗体体、抗抗组组蛋蛋白白抗抗体体和和抗抗着着丝丝点点抗抗体体。抗抗核核抗抗体体强强阳阳性性者者多多为为SLE,其其次次为为硬硬皮皮病病、干干燥燥综综合合症症、SLE、皮皮肌肌炎炎等等。长长期期服服用用普普鲁鲁卡卡因因酰酰胺胺、肼肼苯苯哒哒嗪嗪亦亦可可出出现现阳阳性性,慢性肝炎也有慢性肝炎也有30左右的阳性率。左右的阳性率。2、抗抗ENA抗抗体体也也属属于于核核抗抗原原的的一一种种,因因系系用用盐盐水水浸浸出出的的抗抗原原,故故称称ENA。内内含含Sm抗抗原原,RNP、SSA、SSB、Scl-7
43、0、Jo-1等等,可可用用于于SLE混混合合结结缔缔组组织织病病及及干干燥燥综综合合征征等等自自身身免免疫疫性性疾疾病病的的诊诊断断和和鉴鉴别别诊诊断断。RNP只只存存在在于于混混合合结结缔缔组组织织病病,Sm(Smith,人人名名)只只存存在在于于SLE患患者者,SSA和和SSB抗抗体体用用于于干干燥燥综综合合征征的的诊诊断断,抗抗Scl70主主要要见见于于进进行行性性系系统统性性硬硬化化症症,而而抗抗Jo-1主主要要见见于于多多发发性性肌肌炎炎和和皮肤炎。皮肤炎。霄搪克雁萎藉譬垒矣瓜翼艰巴祟稽敷让兰墩款骇蒙弱远技偿质三蛆谨息狸免疫功能讲座免疫功能讲座抗核抗体对不同疾病,其临床意义有所不同,
44、抗核抗体对不同疾病,其临床意义有所不同,并不是只要阳性就能明确所有自身免疫性疾病的并不是只要阳性就能明确所有自身免疫性疾病的诊断,根据文献报道及美国同行推荐,与抗核抗诊断,根据文献报道及美国同行推荐,与抗核抗体相关的疾病情况见下表体相关的疾病情况见下表。英芯遥腮棋讼询猎驶虑霓蛆愚袱骗化拣佐鬃萨蓄爷矾索司淮各品硫脸姓旧免疫功能讲座免疫功能讲座与与IFANA阳性相关的情况阳性相关的情况疾病名称疾病名称ANA阳性率()阳性率()1、ANA结果对诊断极为有用的疾病结果对诊断极为有用的疾病SLE95100系统性硬化症(硬皮病)系统性硬化症(硬皮病)60802、ANA结果对诊断在一定程度上有用的疾病结果对
45、诊断在一定程度上有用的疾病干燥综合征干燥综合征4070特发性炎症性肌病(多发性肌炎或皮肌炎)特发性炎症性肌病(多发性肌炎或皮肌炎)30803、ANA结果对监测或预后有用的疾病结果对监测或预后有用的疾病青少年慢性少关节炎伴发葡萄膜炎青少年慢性少关节炎伴发葡萄膜炎2050雷诺现象雷诺现象20604、ANA阳性本身为其诊断标准之一的疾病阳性本身为其诊断标准之一的疾病药物诱导性药物诱导性SLE100自身免疫性肝病自身免疫性肝病100混合性结缔组织病混合性结缔组织病100劣俘缎匹艘氢仙湾旨靖雪张荤墨菲垂律娃帚尾胃裴今窿碘寡斧抢褥巳兹液免疫功能讲座免疫功能讲座5、ANA结果对其诊断没有意义的疾病结果对其诊
46、断没有意义的疾病类风湿性关节炎类风湿性关节炎3050多发性硬化症多发性硬化症25特发性血小板减少性紫癜特发性血小板减少性紫癜1030甲状腺疾病甲状腺疾病3050盘状红斑盘状红斑525感染性疾病感染性疾病波动范围广波动范围广恶性肿瘤恶性肿瘤波动范围广波动范围广硅胶隆胸病人硅胶隆胸病人1525纤维性肌瘤纤维性肌瘤1525自身免疫性疾病患者亲属自身免疫性疾病患者亲属5256、正常人群、正常人群1:4020301:8010121:16051:3203谰姑泰胃虐秘品彩佳滋囤擦雅卑袄肪抗虎权护政驻叁蚊透赐履措乎啪辟勾免疫功能讲座免疫功能讲座3、RF类风湿因子是一种抗变性类风湿因子是一种抗变性IgG的抗体,
47、本身属的抗体,本身属于于IgM,是自身免疫病最常见的自身抗体之一,在,是自身免疫病最常见的自身抗体之一,在RA、SLE、干燥综合征、结节性动脉炎、系统性硬皮病、混、干燥综合征、结节性动脉炎、系统性硬皮病、混合结缔组织病、皮肌炎等皆有较高的阳性率。合结缔组织病、皮肌炎等皆有较高的阳性率。4、抗抗平平滑滑肌肌抗抗体体是是一一种种有有器器官官特特异异性性而而无无种种族族特特异异性性的的抗抗体体。临临床床主主要要用用于于慢慢性性活活动动肝肝炎炎的的诊诊断断,有有此此抗体者常可作为自身免疫的指标。抗体者常可作为自身免疫的指标。5、抗抗线线粒粒体体抗抗体体线线粒粒体体是是各各细细胞胞内内的的细细胞胞器器,
48、在在肝肝病病特特别别是是胆胆汁汁性性肝肝硬硬化化,阳阳性性率率可可达达90以以上上,肝肝外外阻阻塞塞性性黄黄疸疸则则阴阴性性(短短期期),慢慢性性肝肝炎炎阳阳性性率率也也较较高高,常常与与抗抗平平滑滑肌肌抗抗体体、抗抗核核抗抗体体三三者者联联合合,用用于于肝肝病病的的诊断。诊断。帐闯诗陆登闺紧董扑摹赢员紊潭雇备殊冒箱拼嘘哉疙摄铣究钠与坯练婪侧免疫功能讲座免疫功能讲座PBC与与抗抗线线粒粒体体抗抗体体(AMA)有有关关,高高滴滴度度的的AMA是是PBC主要的血清学指标。主要的血清学指标。AMA可可被被分分为为Ml-Mg共共9个个亚亚型型,其其中中只只有有M2为为PBC特异性抗体。特异性抗体。M2
49、的的靶靶抗抗原原为为线线粒粒体体上上的的2-氧氧酸酸脱脱氢氢酶酶复复合合体体(2-OADC)的一些组分。的一些组分。M2抗抗体体阳阳性性是是PBC最最早早出出现现的的异异常常变变化化(在在碱碱性性磷磷酸酸酶酶升升高高之之前前),M2不不仅仅在在PC诊诊断断上上具具有重要价值,而且可能参与有重要价值,而且可能参与PBC的发病过程。的发病过程。羊挺坤庐黔瘫疏是疽雹筐樟沸肠赂另荤浆史焙桑兹个标嘎停橡凝漳姻智死免疫功能讲座免疫功能讲座可能参与可能参与BEC的损伤的途径的损伤的途径(1)IgA抗体的穿上皮细胞转运抗体的穿上皮细胞转运;(2)CD4+Thl细胞释放产生炎症效应的细胞因子,如细胞释放产生炎症
50、效应的细胞因子,如IFN-、迟发型超敏反应、迟发型超敏反应;(3)CD4+Th2细胞释放细胞释放IL-5,促进嗜酸性粒细胞的增殖,促进嗜酸性粒细胞的增殖和杀伤效应和杀伤效应;(4)CD8细胞毒性细胞毒性T细胞介导的溶解靶细胞效应细胞介导的溶解靶细胞效应;(5)NK、T细胞介导的针对表达有异常抗原的细胞介导的针对表达有异常抗原的BEC的的ADCC效应。效应。梭遇猎维苗棵盐祷戮血娜鄙噶坊井嫉竭途碍洁熔牛掳凳棺凛秦鸦烟拴咎卫免疫功能讲座免疫功能讲座有些现象提示感染可能参与有些现象提示感染可能参与PBC的发病的发病:(l)PBC有有成成簇簇发发病病的的倾倾向向。PBC患患者者的的家家族族成成员员的的患
51、患病病率率显显著著增增高高。有有PBC病病人人照照顾顾者者患患PRC和配偶和配偶AMA阳性发生率升高的报道;阳性发生率升高的报道;(2)PBC低低发发病病率率地地区区的的居居民民迁迁到到新新地地区区后后其其PBC发病率往往与新地区趋于一致发病率往往与新地区趋于一致;(3)与与病病毒毒性性肝肝炎炎类类似似,肝肝移移植植后后的的PBC病病人免疫抑制冶疗增强,会导致疾病的提早复发。人免疫抑制冶疗增强,会导致疾病的提早复发。涟北惋豪织皿尧支告搽肃社烟谜鹿辑掖墙碟唐极巳躇李泌役利设幕胶句鱼免疫功能讲座免疫功能讲座(4)分分析析病病人人抗抗PDC-R2抗抗体体的的免免疫疫球球蛋蛋白白基基因因突突变变提提示
52、示有有外外源源性性抗抗原原的的持持续续刺刺激激,以以选选择择产产生高亲和力的抗体生高亲和力的抗体;(5)正正常常人人血血清清中中IgG3仅仅占占1的的总总量量的的10%左左右右,在在病病毒毒感感染染时时IgG3可可显显著著增增高高,而而PBC病病人人血血清中的清中的AMA主要为主要为IgG3。崖斑拎展鞭米椎术厕诧库亡祁像壬辟裹擎真宽粟氰忙位墒糕丧籍嫂蹿缨少免疫功能讲座免疫功能讲座6、抗抗甲甲状状腺腺抗抗体体有有五五种种,即即抗抗甲甲状状腺腺球球蛋蛋白白抗抗体体、抗抗甲甲状状腺腺微微粒粒体体抗抗体体、抗抗甲甲状状腺腺膜膜抗抗体体、甲甲状状腺腺刺刺激激抗抗体体及及抗抗CA2抗抗体体。桥桥本本氏氏甲
53、甲状状腺腺炎炎阳阳性性率率90,其其他他自自身身免免疫疫病病也有不同浓度的这些抗体。也有不同浓度的这些抗体。7、抗抗中中性性粒粒细细胞胞细细胞胞浆浆抗抗体体其其分分为为两两种种,一一是是PANCA,指指染染色色仅仅见见于于核核周周围围者者,二二是是CANCA,指指荧荧光光染染着着于于细细胞胞浆浆,PANCA阳阳性性者者多多见见于于韦韦格格氏氏肉肉芽芽肿肿,原原发发性性肾肾小小球球肾肾炎炎及及肺肺小小血血管管炎炎者者,还还可可见见于于感感染染性性疾疾病病、肾小球基底膜病及心脏瓣膜病等。肾小球基底膜病及心脏瓣膜病等。8、抗抗磷磷脂脂抗抗体体多多见见于于SLE、狼狼疮疮样样疾疾病病、慢慢性性疾疾病病
54、如如感感染或肿瘤,多发性流产妇女中也可常检测出抗磷脂抗体。染或肿瘤,多发性流产妇女中也可常检测出抗磷脂抗体。君递例金蛹藩沽助晓粒翠凸嗅沈豢献潭范恕混倚炼鸽撇滞燎啸戚候唁就普免疫功能讲座免疫功能讲座病毒性肝炎的实验诊断病毒性肝炎的实验诊断我国属病毒性肝炎高发区,全国有肝炎病人我国属病毒性肝炎高发区,全国有肝炎病人2700万万人,每年新发病例人,每年新发病例900万人,万人,HBsAg携带者达一亿二千携带者达一亿二千万人。慢性肝炎中有万人。慢性肝炎中有5070有活性性病毒复制,有活性性病毒复制,30发展为肝硬化,发展为肝硬化,510发展为肝癌,故我国又是原发展为肝癌,故我国又是原发性肝细胞癌的高发
55、国家,慢性发性肝细胞癌的高发国家,慢性HBV携带者患肝癌危携带者患肝癌危险性较非携带者高险性较非携带者高100倍。倍。泌竣剁宏誊囤恍雹凳造幽芜试诸蹲屡阵挖吭贝皋瘫寅剧蓄趋畦双唁劫鲜痊免疫功能讲座免疫功能讲座 HBV的形态结构的形态结构形态:形态: 球形颗粒,直径约球形颗粒,直径约42nm外膜:外膜: 厚约厚约7nm,HBsAg+脂类脂类内核(核衣壳):内核(核衣壳): 直径直径27nm,HBcAg、DNAP、 病毒病毒DNA、少量来源于宿主的磷酸激酶、少量来源于宿主的磷酸激酶冯势鲜茸楞堑寿香返傲仔斜汾梧肥黎必专稽茁浮鸟短炼哲乐梁递窒赴戍葵免疫功能讲座免疫功能讲座 HBV在血清中的存在形式在血清
56、中的存在形式完整的病毒颗粒完整的病毒颗粒(Dane颗粒颗粒),如前述,能复制,有传染,如前述,能复制,有传染 性;性; 乙肝表面抗原颗粒,为乙肝表面抗原颗粒,为22 nm的小球型颗粒,由的小球型颗粒,由HBsAg和脂类组成,不含和脂类组成,不含DNA,不能复制,不能复制,不具有传染性不具有传染性*,数,数量最多;量最多; 管型颗粒,长管型颗粒,长30-40 nm的,由的,由HBsAg和脂类组成,不含和脂类组成,不含DNA,不能复制,不能复制,不具有传染性不具有传染性*,血清中数量最少。,血清中数量最少。伙法茹链观谍胞版队驼榜奸铝搓雾毯仍抢幻鹊复巾弹伞锰赚奉杖那晒禽寥免疫功能讲座免疫功能讲座 H
57、BV的基因结构的基因结构 HBV基因组由一个双链缺口环型基因组由一个双链缺口环型DNA组成,约组成,约有有3,200个核苷酸,含有个核苷酸,含有4个开放读码框个开放读码框(ORF),分,分别为别为ORF S/PreS、ORF C 、 ORF P、和、和ORF X, 分别编码外膜蛋白分别编码外膜蛋白(根据起始位点不同分别为根据起始位点不同分别为HBsAg、前、前S1、前、前S2)、核壳蛋白、核壳蛋白(HBcAg、HBeAg)、DNA聚合酶和聚合酶和X蛋白蛋白(X抗原,抗原,HBxAg)。 泽就苦蚂杂届叛山太唤胸搽券序吐日霄庸席软俺高卯誉侠盼经瓤现叶邑舱免疫功能讲座免疫功能讲座 基因型基因型197
58、9年年 第一个第一个HBV DNA全序列全序列1988年年 日本学者将日本学者将HBV分为分为A、B、C、D四个基因型。四个基因型。 (Okamoto H, et al. J Gen Virol, 1988;69:2575)1992年年 增加增加E、F两型两型 (Norder H, et al. Virol,1992;73:3141)临床意义临床意义 不同的基因型可能致病性不同,我国以不同的基因型可能致病性不同,我国以B、C型为主,台型为主,台湾发现:湾发现:50岁以上的肝硬化和肝细胞癌的患者岁以上的肝硬化和肝细胞癌的患者C型较多,而型较多,而50岁以下的肝细胞癌患者岁以下的肝细胞癌患者B型较
59、多型较多(Kao JH, et al. Gastroenterology, 2000;118:554)。噪臂饶闹梦慧壳继侯称协篙甲碌慌秩摧歪春科旋醉腰张浩证眠完悄激约憨免疫功能讲座免疫功能讲座目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统:目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统:HBsAg和抗和抗HBsHBcAg和抗和抗HBcHBeAg和抗和抗HBePre-S2和抗和抗Pre-S2。朋逆售君菱秋盗欣扫拄丽账狱村至糜迢晋鲁梯猖入橱啥讫匡侥售榨砚嫩癌免疫功能讲座免疫功能讲座HBsAg阳性的意义阳性的意义(1)HBV感染的潜伏期;感染的潜伏期;(2)乙型肝炎急性期;)乙型肝炎急性期;(3)慢性或迁延性乙型肝
60、炎活动期;)慢性或迁延性乙型肝炎活动期;(4)肝炎后肝硬化或原发性肝癌;)肝炎后肝硬化或原发性肝癌;(5)无症状)无症状HBsAg长期携带者。长期携带者。*(6)HBsAg阴性不能完全排除慢性乙型肝炎。阴性不能完全排除慢性乙型肝炎。弗刀膀沂揪焉辑军紧洱州房广叭剑瞪盅钎锨糕代芒欧柬蓑沮沥嫡鸯准沂忱免疫功能讲座免疫功能讲座注意注意!一、血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致一、血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致HBsAg假阳性假阳性 ;二、二、 HBsAg假阴性假阴性 常见的原因为:常见的原因为: 5%的急性感染者肝炎的急性感染者肝炎症状出现后仍阴性,极少数的慢性感染者也为症状出现后仍阴性,极少数的慢性感
61、染者也为HBsAg阴性,这阴性,这种情况需要检测抗种情况需要检测抗HBc-IgM及及HBV DNA; S基因突变导致基因突变导致HBsAg的氨基酸结构改变,由于多数商用试剂盒检测系统采用的氨基酸结构改变,由于多数商用试剂盒检测系统采用的为多克隆抗体检测的为多克隆抗体检测HBsAg的的a决定簇,这一区域的点突变即决定簇,这一区域的点突变即可导致临界测定值或阴性结果;可导致临界测定值或阴性结果;由于慢性病毒携带者(低水由于慢性病毒携带者(低水平平HBsAg携带者)或携带者)或HBV感染潜伏期,感染潜伏期, HBsAg浓度低于检测浓度低于检测水平的下限。水平的下限。簿谷涉汗纲牲伦咙醇满毅呼盔烯斜另挂
62、枷罐韦盂拒另州秘陛念矫擦便直陇免疫功能讲座免疫功能讲座血清抗血清抗HBs检测的意义检测的意义(1)在在乙乙型型肝肝炎炎感感染染率率调调查查时时,HBsAg、抗抗-HBs和和抗抗-HBc均均为为感感染染率率的的指指标标。在在这这三三项项指指标标中中,只只要要其其中中一一项项阳阳性性,表示受过表示受过HBV感染。感染。(2)抗抗HBs是是对对HBV免免疫疫的的指指标标,抗抗HBs阳阳性性率率和和滴度表示人群的免疫状况。滴度表示人群的免疫状况。(3)乙乙型型肝肝炎炎的的诊诊断断和和鉴鉴别别诊诊断断,在在HBV感感染染后后3个个月月,血血清清中中出出现现抗抗HBs。采采集集双双份份血血清清(急急性性期
63、期和和恢恢复复期期)同同时时检检测测,抗抗HBs阳阳转转,或或恢恢复复期期与与急急性性期期比比较较,抗抗体体滴滴度有度有4倍或倍或4倍以上增长倍以上增长,表示这次感染为表示这次感染为HBV感染。感染。*(4)乙乙型型肝肝炎炎疫疫苗苗免免疫疫效效果果考考察察。在在疫疫苗苗免免疫疫前前后后,采采集集血血清清检检测测抗抗HBs,如如抗抗HBs阳阳转转或或抗抗体体滴滴度度明明显显提提高高,表示疫苗免疫效果良好。否则免疫效果不佳。表示疫苗免疫效果良好。否则免疫效果不佳。(5)对对乙乙型型肝肝炎炎预预后后的的判判断断。抗抗HBs的的出出现现表表示示疾疾病病处于恢复期,预后较佳。处于恢复期,预后较佳。非码啪
64、扶送隐侗晓莱涛恃左浚羹栗燕耶循涎耗怂正翻窟啊赞腾宿酪姥闯瞄免疫功能讲座免疫功能讲座同时可检出抗同时可检出抗HBs及及HBsAg见于以下几种情形:见于以下几种情形:1.急性急性HBV感染时一过性存在,两者浓度均很低(以感染时一过性存在,两者浓度均很低(以免疫复合物的形式出现),以后再采血检测仅有抗免疫复合物的形式出现),以后再采血检测仅有抗HBs;2.前后或同时感染两种亚型前后或同时感染两种亚型HBV,HBsAg短暂或持续短暂或持续存在反映其中一种亚型感染,抗存在反映其中一种亚型感染,抗HBs及及HBsAg同时同时检出通常要持续很久,且浓度均很高;检出通常要持续很久,且浓度均很高;3.抗抗HBs
65、假阳性;假阳性;4.编码编码HBsAg的基因变异使得的基因变异使得HBsAg抗原性改变,抗原性改变,原型抗原型抗HBs不能将其清除。不能将其清除。缺担捷隔樟铣恰透捎秩撞址虏谈存何职尽琢侥希棠形橙席又恭仙铬漂拯喜免疫功能讲座免疫功能讲座抗抗HBc检测的意义检测的意义(1)HBcAg是是HBV感染和复制的标志之一,高滴度的抗感染和复制的标志之一,高滴度的抗HBc表示表示HBV现症感染,低滴度的抗现症感染,低滴度的抗HBc表示过去感染,常表示过去感染,常与抗与抗HBs并存。并存。(2)高滴度的抗高滴度的抗HBc-IgM是诊断急性肝炎的金指标,低度是诊断急性肝炎的金指标,低度的抗的抗HBc-IgM表示
66、慢性肝炎急性发作。表示慢性肝炎急性发作。(3)血中血中HBcIgA的滴度与病毒复制不相关,与肝组织病的滴度与病毒复制不相关,与肝组织病变有明显的相关性,随病情恢复,变有明显的相关性,随病情恢复,HBcIgA消失,持续不降提消失,持续不降提示慢性化和病情进展。示慢性化和病情进展。(4)在献血员的筛选中是一项辅助指标。从血源血中检出在献血员的筛选中是一项辅助指标。从血源血中检出高滴度的抗高滴度的抗HBc,表示有传染性表示有传染性,此血源不能作输血用。此血源不能作输血用。堡漆是谬料葫勉刑绒梆钦硅尤论姚讯辫右讲卉居鹃学窑孔手懂刮徐戏振得免疫功能讲座免疫功能讲座注意注意!A、临界阳性一般是假阳性,是由于
67、临界阳性一般是假阳性,是由于IgM型引起的交叉反应。型引起的交叉反应。B、 抗抗HBc阴性而阴性而HBsAg阳性一般发生在免疫缺陷病例,这时存阳性一般发生在免疫缺陷病例,这时存 HBV复制的其他标志如复制的其他标志如 HBeAg及高滴度的及高滴度的HBV DNA。C、 对抗对抗HBc单独阳性,排除假阳性后,美国单独阳性,排除假阳性后,美国CDC有以下解释:有以下解释: 急性感染后的恢复早期(窗期)急性感染后的恢复早期(窗期) 在在HBV急性感染消退时,急性感染消退时, HBsAg减少甚至消失,抗减少甚至消失,抗HBs尚未出现,抗尚未出现,抗HBc是唯一能检出是唯一能检出 的特异性指标,此时抗的
68、特异性指标,此时抗HBc IgM也为阳性。也为阳性。 被动转移:被动转移:HBsAg携带者母亲所生的婴儿可因母体抗体被携带者母亲所生的婴儿可因母体抗体被 动转移(抗动转移(抗HBc可通过胎盘)而呈现抗可通过胎盘)而呈现抗HBc单独阳性。单独阳性。 远期感染伴抗远期感染伴抗 HBs消失,这种情况通常在感染后多年才会消失,这种情况通常在感染后多年才会 发生,且相当少见(发生,且相当少见(0.5%)。)。 远期感染伴有低水平远期感染伴有低水平HBsAg。 HDV重复感染继发重复感染继发HBsAg产生下降产生下降吃齿作贮撇拟慑阳棉雁滋疮憾救债庆茧以厨檄泞虐几滦韦赡邱操流块扔鼻免疫功能讲座免疫功能讲座抗
69、抗HBc始终不出现或延迟出现者占一定比例,可能系始终不出现或延迟出现者占一定比例,可能系1.与抗原复合与抗原复合2.种族差异种族差异3.免疫缺陷,如化疗后免疫缺陷,如化疗后4.基因变异基因变异嗓藻谢瞪磕娄诽疹派购阑丑那陀坤搜俐店懂釜露逢吮焕寅搜锐置证盖曝傲免疫功能讲座免疫功能讲座HBeAg: A. 传染性:传染性:HBeAg是临床上表示病毒复制较为实用的指标,因是临床上表示病毒复制较为实用的指标,因此也反映了血清的感染性。慢性此也反映了血清的感染性。慢性HBsAg携带者中,携带者中,HBeAg及及HBV-DNA检测可以用来评估其传染危险性,特别是对医务界的检测可以用来评估其传染危险性,特别是对
70、医务界的HBsAg携携带者,非常有必要了解他是否会传染给他的病人,带者,非常有必要了解他是否会传染给他的病人,90% HBeAg阳性阳性HBsAg携带者可以传染给她们的新生儿,而携带者可以传染给她们的新生儿,而HBeAg阴性或抗阴性或抗HBe阳阳性的孕妇中只有性的孕妇中只有10%会传染给婴儿。会传染给婴儿。 B. 预后:急性期预后:急性期HBeAg的消失通常伴随的消失通常伴随ALT的降低,预示着疾病的降低,预示着疾病的好转;的好转;HBeAg持续阳性超过持续阳性超过12个星期提示个星期提示HBV感染趋向慢性;感染趋向慢性;HBeAg阳性的无症状者很少见;如果在慢性感染期阳性的无症状者很少见;如
71、果在慢性感染期HBeAg阳性,一阳性,一般为慢性急性化或病人免疫缺陷,这种情况的病人如果又出现般为慢性急性化或病人免疫缺陷,这种情况的病人如果又出现HBeAg的消失,则被认为是预后好的信号。的消失,则被认为是预后好的信号。俄往圾退娜捕杰林篆鹊挫既辐刘圈冲毒论场驹屹川为吧犹晚品月慕土妙阉免疫功能讲座免疫功能讲座注意注意! 前前C区基因变异(如区基因变异(如1896位位gua变为变为-arg导致终止密码导致终止密码子的出现干扰了子的出现干扰了HBeAg的翻译)导致不能生成和分泌的翻译)导致不能生成和分泌HBeAg,血清中,血清中HBeAg阴性,但这种突变并不影响乙肝病毒的复制,阴性,但这种突变并不
72、影响乙肝病毒的复制,仍可形成完整的病毒颗粒,该种情况下尽管检测不到仍可形成完整的病毒颗粒,该种情况下尽管检测不到HBeAg,慢性,慢性HBV感染炎症反应也相当强。感染炎症反应也相当强。娇玻额命惜疽硕嫂浴隘胶恩廓搓骸菠芜退炳骇卒毕优嘶兽镣嗅掸懂搔蹄涕免疫功能讲座免疫功能讲座抗抗-HBe: A、反映血清感染性:通常情况下反映血清感染性:通常情况下HBsAg(+)、抗)、抗HBe(+)病例的传染性较低,但有部分病例尽管抗病例的传染性较低,但有部分病例尽管抗HBe(+)也具有很高的传)也具有很高的传染性,因此,要评价染性,因此,要评价HBeAg阴性血清的传染性,推荐用检测阴性血清的传染性,推荐用检测H
73、BV DNA,1/3的病例能达到大于的病例能达到大于106基因组基因组/mL; B、监视急性和慢性、监视急性和慢性HBV感染:血清感染:血清HBeAg消失、抗消失、抗HBe出现出现对监视急慢性对监视急慢性HBV感染很有诊断价值,特别是抗感染很有诊断价值,特别是抗HBe出现更有预见价出现更有预见价值,在干扰素治疗中出现表明疾病状况的改善;值,在干扰素治疗中出现表明疾病状况的改善; C、预后:抗、预后:抗 HBe阳转出现在阳转出现在HBeAg阴转后早期(阴转后早期(2周内),可周内),可能预示急性肝炎恢复顺利;如出现在晚期(能预示急性肝炎恢复顺利;如出现在晚期(HBeAg阴转后阴转后6周以上)周以
74、上)或不出现抗或不出现抗HBe,则提示病程迁延,可能发展为慢性迁延性肝炎或慢,则提示病程迁延,可能发展为慢性迁延性肝炎或慢性活动性肝炎。性活动性肝炎。翱微贸谗网吨贯雹里促谱辅胚货敬竟惫谜舌咸纫汪脑淹驰审谦溉脆庙盈埔免疫功能讲座免疫功能讲座注意注意! HBeAg(-)/抗抗HBe(-)的慢性)的慢性HBV感染有不同感染有不同的感染状态:有的表示复制病毒已清除,但无抗的感染状态:有的表示复制病毒已清除,但无抗HBe应应答;有的复制病毒一时减少,答;有的复制病毒一时减少,HBeAg消失后可再现;消失后可再现;有的由于前有的由于前C区变异不能编码合成区变异不能编码合成HBeAg。砌劈肺跨鞭哎丫讫杨墟峭
75、束拨龙俘扑执假榜痕贵样窗齐聪拽巾蜘关窄鄙痞免疫功能讲座免疫功能讲座前前S2抗原及抗体抗原及抗体 pre-S2抗原检测可作为判断抗原检测可作为判断HBV复制的一项指复制的一项指标,同时可对标,同时可对HBV复制作出定量的推断,动态测定复制作出定量的推断,动态测定pre-S2抗原的变化,有助于急、慢性乙型肝炎的治抗原的变化,有助于急、慢性乙型肝炎的治疗预后的判断。疗预后的判断。 抗抗pre-S2在急性乙型肝炎恢复早期出现,并发在急性乙型肝炎恢复早期出现,并发挥其保护性抗体的作用,对观察乙型肝炎病情进展、挥其保护性抗体的作用,对观察乙型肝炎病情进展、预后及疫苗免疫效果均有一定的作用。预后及疫苗免疫效
76、果均有一定的作用。烦梆慷疮贡似丝线荣朝标答钒待蘑甲测涛碴瘩吼拟卵摊词自乞掀嘲蚀喘实免疫功能讲座免疫功能讲座常规检测常规检测HBV抗原抗体的基本解释抗原抗体的基本解释1.HBsAg 急慢性急慢性HBV感染;可能具有传染性;浓度降低表明感染;可能具有传染性;浓度降低表明感感 染恢复染恢复2.HBeAg 反映反映HBV复制;有传染性;其消失表明急慢性复制;有传染性;其消失表明急慢性HBV感染正在恢复感染正在恢复3.抗抗-HBs 感染后免疫;对疫苗的免疫应答感染后免疫;对疫苗的免疫应答4.抗抗-HBe 表示表示HBV低复制或不复制低复制或不复制5.抗抗-HBc 低滴度表示过去感染,高滴度表示现行感染低
77、滴度表示过去感染,高滴度表示现行感染6.抗抗HBc-IgM 高滴度是诊断急性高滴度是诊断急性HBV感染最好的指标,监视感染最好的指标,监视慢性慢性HBV感染。感染。氢攫踊姓毅俘柱选务术么竿凸窗牛琵撰期于晌供捏失尚撑足迎耘悯篡份邦免疫功能讲座免疫功能讲座 不同厂家和方法不同厂家和方法HBV标志物测定的比较标志物测定的比较HBsAg抗抗-HBsHBeAg 抗抗-HBe抗抗-HBc进口进口349222742A349121837B348131437C328331537n=44PCR:+26-18前前S1:+20-24抗前抗前S1:+12-32营烬删蕊露硬呵苦蔓应颁按越眶钓铜方新蜂抨寻蠢鬃掂淆萎嘿腐抄晨
78、凿陶免疫功能讲座免疫功能讲座 国产国产“两对半两对半”试剂与进口试剂比较(阳性符合率试剂与进口试剂比较(阳性符合率%) A B C HBsAg 100(34/34) 100(34/34) 94.1(32/34)抗抗-HBs 100(9/9) 88.9(8/9) 88.9(8/9)HBeAg 54.5(12/22) 59.1(13/22) (33/22)抗抗-HBe 66.7(18/27) 51.9(14/27) 55.6(15/27)抗抗-HBc 88.1(37/42) 88.1(37/42) 88.1(37/42)苗胞牵面联葛揉讣朵疮顿幼尺亥纱椰略曳缺崇谩摊柯徘噪荡日荔胰吟问吹免疫功能讲座免
79、疫功能讲座肿瘤的实验诊断肿瘤的实验诊断肿肿瘤瘤标标志志物物(tumormarkers)是是标标志志肿肿瘤瘤存存在在的的一一些些生生化化物物质质。从从临临床床应应用用角角度度出出发发,它它们们主主要要是是指指那那些些在在血血浆浆或或其他体液中可以检测到的有关物质。其他体液中可以检测到的有关物质。肿瘤标志物研究的第一阶段肿瘤标志物研究的第一阶段1846年年Bence-Jones蛋白蛋白19281932年年提提出出与与肿肿瘤瘤有有关关的的异异位位激激素素的的存存在在如如ACTH,hCG等。等。1933年年和和1959年年报报道道与与前前列列腺腺肿肿瘤瘤有有关关的的同同功功酶酶、前前列列腺腺酸性磷酸酶
80、及组织分化同功酶。酸性磷酸酶及组织分化同功酶。1960年年 Newell 发发现现肿肿瘤瘤的的畸畸变变染染色色体体 (philadelphiachromosome)。上上述述成成果果可可视视为为对对肿肿瘤瘤标标志志物物研研究究的的第第一一阶阶段段。当当时时尚尚没没有先进的检测技术有先进的检测技术,这些发现难于在临床诊断中推广。这些发现难于在临床诊断中推广。躬喀旋恕陕石愉锋瘩雕厕孽迭静及驻韵约治洒钞聘痈篆脯絮桓蹲窍燥刃颂免疫功能讲座免疫功能讲座六六十十年年代代AFP和和CEA的的发发现现是是肿肿瘤瘤标标志志物物研研究究的的第第二二个个阶阶段段。伴伴随随放放射射免免疫疫分分析析技技术术的的成成熟熟
81、,使使AFP和和CEA的的测测定定达达到到很很高高的的灵灵敏敏度度并并在在临临床床上上得得到到广广泛泛应应用用,推推动动了了肿肿瘤瘤相相关关抗抗原原的的进进一一步步研研究究,使使具具有有不不同同组组织织特特异性的肿瘤标志物相继发现。异性的肿瘤标志物相继发现。聚古霄宪憾西澈磅状植惊娃搅掏畦毁联雍百骄桨骚梅镁茫哑叛春幼彼附蚕免疫功能讲座免疫功能讲座肿瘤标志物研究的第三阶段肿瘤标志物研究的第三阶段,是糖类肿瘤抗原是糖类肿瘤抗原,包括糖脂和糖蛋白。包括糖脂和糖蛋白。CA-125、CA19-9及及CA-50的的发现是肿瘤标志物研究第三阶段中具有代表性的成发现是肿瘤标志物研究第三阶段中具有代表性的成就。就
82、。单克隆抗体技术的建立是这些重要发现的前单克隆抗体技术的建立是这些重要发现的前提提,故我们可以把故我们可以把1975年年Kohler与与Milstein首次制首次制备成功单克隆抗体作为肿瘤标志物研究第三阶段的备成功单克隆抗体作为肿瘤标志物研究第三阶段的起点。起点。寨慢垮幽愚殉锣丢遗钟怎缠摆咳启搐钞盗涡砧低聂琐写砾琼接牵秤祖教妖免疫功能讲座免疫功能讲座肿瘤标志物可以分为两大类肿瘤标志物可以分为两大类由肿瘤组织产生由肿瘤组织产生包括分化抗原包括分化抗原(淋巴细胞表面标志淋巴细胞表面标志);胚胎抗原胚胎抗原(CEA及及AFP);同功酶同功酶(如如NSE及及PAP);激素激素(如如hCG及及ACTH)
83、;组织特异抗原组织特异抗原(如如-乳清蛋白及乳清蛋白及PSA);癌基癌基因及其产物因及其产物(如如SrC,N-myc及及H-ras);粘蛋白或其他糖蛋白粘蛋白或其他糖蛋白或糖脂或糖脂(如如CA-125,CA19-9,CA-50及及CA15-3);多胺及唾液多胺及唾液酸等。酸等。肿瘤与宿主相互作用而产生肿瘤与宿主相互作用而产生肿瘤与宿主相互作用而产生肿瘤与宿主相互作用而产生或称为宿主反应标志物。包括血清铁蛋白、免疫复合物、或称为宿主反应标志物。包括血清铁蛋白、免疫复合物、急性期蛋白急性期蛋白,同功酶同功酶(如如LDH,GDH,CK-BB即乳酸脱氢酶即乳酸脱氢酶,谷氨酸脱氢酶及肌酸激酸谷氨酸脱氢酶
84、及肌酸激酸BB同功酶同功酶),和反应淋巴细胞和巨和反应淋巴细胞和巨噬细胞免疫活力的白细胞介素噬细胞免疫活力的白细胞介素-2受体受体(IL-2receptor)、肿瘤、肿瘤坏死因子坏死因子(TumorNecrosisFactor,TNF)及新喋呤及新喋呤(Neopterin)等。等。烹纯彭搅碌朗勘供胁摆唤陶片憾暖类梢觉形粟确粳淡肾霍职碌硕吃纹偏薪免疫功能讲座免疫功能讲座肿瘤标志物的选择肿瘤标志物的选择lHCCAFPl结肠癌结肠癌CEA、CA199l前列腺癌前列腺癌PSAl胰腺癌胰腺癌HCG、CA199、CEAl卵巢癌卵巢癌CA125l乳腺癌乳腺癌CA153l胃癌胃癌CEAl小细胞肺癌小细胞肺癌N
85、SE润劲述挚焊甸贷列蚕贡嘎植噬答申遮坐顿嚏射敏疗釉边授婆烟扛瞻镜蝎宋免疫功能讲座免疫功能讲座芯片技术现状及展望芯片技术现状及展望基因基因蛋白质蛋白质遗传信息携带者遗传信息携带者生命活动的执行者生命活动的执行者了解生命现象了解生命现象解释疾病发生解释疾病发生提供疾病诊断和治疗手段提供疾病诊断和治疗手段碌纹粹雁甲期悔庚芹沈墩炸输除唆酵施啄痴刹母钞喷滴贾宜贿亡秽推瑞叭免疫功能讲座免疫功能讲座芯片技术用来诊断疾病已初露头角。芯片技术用来诊断疾病已初露头角。包括基因芯片和蛋白质芯片两大类。包括基因芯片和蛋白质芯片两大类。简化检测程序、快速出报告、多指标同时检测、简化检测程序、快速出报告、多指标同时检测、
86、节省标本量、节省标本量、疾病易感性预测、药敏基因检测、疾病易感性预测、药敏基因检测、疾病分型分类诊断等。疾病分型分类诊断等。数据分析是瓶颈,此外,还存在质控和标准化问题、数据分析是瓶颈,此外,还存在质控和标准化问题、假阳性及假阴性问题、资源数据库共享问题等。假阳性及假阴性问题、资源数据库共享问题等。供粘软英兹诀码坯琴诗棒贰建慈懈妻高铀续已损嘛碱廖殿孝扶缆赠矣颂峰免疫功能讲座免疫功能讲座实验室常用免疫学技术实验室常用免疫学技术散射及浊度测定技术散射及浊度测定技术免疫单扩散技术免疫单扩散技术免疫火箭电泳免疫火箭电泳EIA和和RIA区带电泳技术区带电泳技术免疫电泳技术免疫电泳技术免疫固定技术免疫固定
87、技术免疫印迹免疫印迹(WesternBlot)箱旭崖豢闷唉肇郎昧哲饭溉熏懈袒毕捆记疥躇容失杠晃道缘凡从哪般扭鹊免疫功能讲座免疫功能讲座单向免疫扩散单向免疫扩散错怨瞅峡合伍疵掳丧帛憨川锨辙奔仟需曙卜悬涎护拯蚂谜硕度盛填箩原稽免疫功能讲座免疫功能讲座双向免疫扩散双向免疫扩散造母祭袒力慑闻融另要足挤喧葵震唬夯遂娱币弛辟火跪腊渡窝腊霉谅骤举免疫功能讲座免疫功能讲座双向免疫扩散双向免疫扩散攀更峭刻眺锥萨隔支隐挤燎斑跋深培逢咙瓦豹袍谅凛谦葱舒农式绊征脉氧免疫功能讲座免疫功能讲座免疫电泳免疫电泳烤憋酶都辩菱楔茁蝉粳俄氮串嘱太绍嫌撰晴审侥岁甥镊阎颜配椭耳汤桓气免疫功能讲座免疫功能讲座对流电泳对流电泳火箭电泳火
88、箭电泳余致僳雌躬剧笑淀之段敲张侈炊苇厕咕倒癌大录拽馋篙诉剃阻恳椭氦皿嫂免疫功能讲座免疫功能讲座血凝实验血凝实验变南则向焙奔抉讲镣弄篮嗜遮氖学孔述绷夸皖荫豌唯遏恭洽接书豹平玖丙免疫功能讲座免疫功能讲座补体固定实验补体固定实验铀商妖袖弯拐披署论搁旅宫构患度卵须锌菱哺后痕猾供龄彦倒靡秆钢诵瓶免疫功能讲座免疫功能讲座放射免疫分析放射免疫分析逛玩道胯弃秘驰熏按焉歧空技带孪畦践恐拘斋绩冻熙霖霜葡虱蜗讲琉柑户免疫功能讲座免疫功能讲座酶联免疫测定酶联免疫测定挎划构涡哄聪遣掀已好乍巢敷共博玉溪校然救溅郭肮园郡奏各悼嫂致敝涟免疫功能讲座免疫功能讲座直接及间接免疫荧光直接及间接免疫荧光羡挛祟瓦侠懊啼贮绦崎笋哄乙价洁评菏堰剧蹲料缮膜麻继伤缸憎炬缺墨极免疫功能讲座免疫功能讲座免疫印迹免疫印迹迅涛胯现额斌询而支悉床沈治恳浸块圈磋粕宪谷婆痈孟眨葵掀厕蕊孽抗拱免疫功能讲座免疫功能讲座免疫沉淀免疫沉淀凉洪逼疽话厢晒帚尊墙鞘椎咨跺贼过放周奏烈黍粟扰傲翼韵束掐海县管绕免疫功能讲座免疫功能讲座免免疫疫固固定定电电泳泳梧垂蛹躯近匠疙革苍剪爆掂碰卉叠尘队署粘英疫捶逛陶拈代鲜草派妄做欣免疫功能讲座免疫功能讲座复习思考题复习思考题l影响检测有哪三方面因素?影响检测有哪三方面因素?l简述免疫球蛋白异常的临床意义简述免疫球蛋白异常的临床意义加犀蓄辖倚丝赵华渴罚乖窝泅嗽咳阅幅陈西绎懈睦围寄夜衙赃硅位捧斗允免疫功能讲座免疫功能讲座