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1、第一第一节概概述述第二第二节血脂、脂蛋白血脂、脂蛋白及及载脂脂蛋白蛋白测定定一、血脂和血浆脂蛋白一、血脂和血浆脂蛋白自学自学二、脂蛋白代谢紊乱二、脂蛋白代谢紊乱一高脂蛋白血症一高脂蛋白血症血脂含量超越正常称为血脂含量超越正常称为高脂血症,由于血脂均以血浆脂蛋白的方式存高脂血症,由于血脂均以血浆脂蛋白的方式存在,故也称为高脂蛋白血症。按发病缘由分为在,故也称为高脂蛋白血症。按发病缘由分为两大类。两大类。1.按表型分类按表型分类以以Fredrickson1967分类分类法为根底,经法为根底,经WHO1970修订的分类系统,修订的分类系统,根据血清根据血清TC、TG、外观和脂蛋白电泳图谱,将、外观和
2、脂蛋白电泳图谱,将其分为其分为6型。型。第一节第一节 概概 述述1型型高高脂脂蛋蛋白白血血症症又又称称高高乳乳糜糜微微粒粒血血症症。是是一一种种常常染染色色体体隐性性遗传病病。由由于于LPL缺缺损或或LPL活活化化因因子子ApoC缺缺损所所致致。婴儿儿期期即即可可发生生,但但稀稀有有。其其生生化化检查特征:特征:4冷冷置置实验,血血清清上上层为奶奶油油状状,下下层清亮。清亮。血血清清TG,达达11mmol/L以以上上,血血清清TC正常或正常或轻度度。血清血清LPL活性活性。血清脂蛋白血清脂蛋白电泳,泳,CM。 2 2aa高高脂脂蛋蛋白白血血症症 又又称称高高-脂脂蛋蛋白白血血症症或或高高胆胆固
3、固醇醇血血症症。属属常常染染色色体体显性性遗传,有有明明显的的家家族族史史。病病因因LPLLPL受受体体缺缺损,杂合合子子型型发生生频率率为1/5001/500,纯合合子子型型发生生频率率为1/1000001/100000。其生化。其生化检查特征:特征: 44冷冷置置实验,血血清清外外观清清亮亮透透明。明。 血血清清TCTC,15.6mmol/L15.6mmol/L尤尤其其是是LDL-CLDL-C,TGTG正常。正常。 血清脂蛋白血清脂蛋白电泳,泳,-LP-LP。 临床床表表现,中中青青年年常常伴伴有有冠冠状状动脉脉硬化,硬化,结局局为心肌堵塞。心肌堵塞。 3b型高脂蛋白血症型高脂蛋白血症在在
4、 a型型 根根 底底 上上 伴伴 有有 VLDL 高高LDL+VLDL血血症症,病病因因不不明明。其其生生化化检查特征:特征:4冷冷置置实验,血血清清外外观清清亮亮或或微混。微混。血清血清TC,TG。血血 清清 脂脂 蛋蛋 白白 电 泳泳 , -LP,pre-LP。4型型高高脂脂蛋蛋白白血血症症又又称称宽-脂脂蛋蛋白白血血症症。属属常常染染色色体体显性性遗传病病,发病病率率1/10000,病病因因,ApoE异异常常,与与相相应受受体体结合率合率。其生化。其生化检查特征:特征:4冷冷置置实验,血血清清外外观混混浊,后后构成蜡构成蜡样黄色薄膜。黄色薄膜。血清血清TC,TG。血血清清脂脂蛋蛋白白电泳
5、泳,-LP,pre-LP,IDL。交融构成。交融构成宽区区带。5型型高高脂脂蛋蛋白白血血症症又又称称高高前前-脂脂蛋蛋白白血血症症或或家家族族性性高高甘甘油油三三脂脂血血症症。属属常常染染色色体体显性性遗传病病,较常常见,我我国国原原发性性高高脂脂蛋蛋白白血血症症中中一一半半属属于于此此型型。病病因因,ApoA2异异常常。其其生生化化检查特征:特征:4冷置冷置实验,血清外,血清外观混混浊。血清血清TG,TC正常或稍正常或稍。血清脂蛋白血清脂蛋白电泳,泳,pre-LP。临床床表表现,多多见于于中中年年人人易易发生生冠心病。冠心病。6型型高高脂脂蛋蛋白白血血症症属属常常染染色色体体显性性遗传病病,
6、病病因因不不详,能能够由由几几种种遗传缺缺陷陷所所致致,较稀稀有有。生生化化检查特征:特征:4冷冷置置实验,血血清清上上层为奶奶油状,下油状,下层混混浊。血清血清TG,TC。血血 清清 脂脂 蛋蛋 白白 电 泳泳 , CM,pre-LP。2.按按能能否否继继发发于于全全身身性性疾疾病病分分类类分分为为原原发发性性和和继继发发性性高高脂脂血血症症。常常继继发发于于糖糖尿尿病病、肝肝病病、肾肾病病、肥肥胖胖以以及及过量饮酒,成人发病率为过量饮酒,成人发病率为3%5%。3.高高脂脂血血症症的的基基因因分分型型法法一一部部分分高高脂脂血血症症患患者者存存在在单单一一或或多多个个遗遗传传基基因因的的缺缺
7、陷陷,具具有有明明显显的的家家族族聚聚集集性性,有明显的遗传倾向。有明显的遗传倾向。二低脂蛋白血症二低脂蛋白血症主要有四种主要有四种类型型1.低低LDL血血症症是是一一种种常常染染色色体体显性性遗传病病,病病因因ApoB100低低下下,血血浆LDL减减少少,TC。2.无无LDL血血症症稀稀有有的的常常染染色色体体隐性性遗传病病,病病因因ApoB100、B48缺缺损,血血浆中中无无LDL,TC。3.低低HDL血血症症病病因因不不详,血血清清TG,动脉粥脉粥样硬化、冠心病的硬化、冠心病的发病率高。病率高。4.无无HDL血血症症Tangier病病稀稀有有的的常常染染色色体体隐性性遗传病病,ApoA、
8、A缺缺损,血血浆TC,HDL-C。血血脂脂测定定方方法法很很多多,目目前前临床床实验室室根根本本检验工工程程有有:血血清清外外观分分析析,TC,TG,HDL-C,LDL-C测定定。进一一步步可可做做HDL亚组分分,IDL,Apo如如ApoA、ApoB100,Lpa及及脂脂蛋蛋白白电泳泳,LPL,LCAT测定定,为保保证分分析析结果果的的可可靠靠性性,标本本的的采采集集应在在餐餐后后12h以上。以上。第二第二节血脂、脂蛋白及血脂、脂蛋白及载脂蛋白脂蛋白测定定一、血清外观分析血清冷置实验一、血清外观分析血清冷置实验混浊混浊TG增高增高下下层浊VLDL增高增高型型下下层清清VLDL正常正常型型均匀混
9、均匀混浊VLDLTC正常正常型型上上层奶油奶油样CMTC增高增高a型型TC正常正常正常人正常人清亮清亮TG正常正常TCb,型型空空腹腹血血清清测测TC TC 4过过夜夜测测TCTC二、血清总胆固醇测定二、血清总胆固醇测定胆固醇是人体重要的脂类成分,胆固醇是人体重要的脂类成分,具有重要的生理功能,如合成类固醇具有重要的生理功能,如合成类固醇激素,维生素激素,维生素D3胆汁酸,并构成细胞胆汁酸,并构成细胞膜成分,膜成分,TC包括包括FC1/3和和CE2/3,胆固醇与动脉粥样硬化有亲,胆固醇与动脉粥样硬化有亲密关系,故胆固醇测定是最常用的实密关系,故胆固醇测定是最常用的实验室检测工程之一。验室检测工
10、程之一。TC测定方法很多,约测定方法很多,约200多种,多种,分为化学测定法、酶法、气相色谱法、分为化学测定法、酶法、气相色谱法、高效液相色谱法、核素稀释质谱法高效液相色谱法、核素稀释质谱法决议性方法。决议性方法。一化学测定法一化学测定法主要有两类主要有两类1.Liberman-Burchard反反响响简简称称L-B反反响响,胆胆固固醇醇经经冰冰醋醋酸酸,浓浓硫硫酸酸脱脱水水生生成成3.5-胆胆烷烷二二烯烯阳阳离离子子,然然后后被被醋醋酐酐,浓浓硫硫酸酸氧氧化化生生成成绿绿色色的的胆胆烷烷六六烯烯磺磺酸酸。呈呈色色稳稳定性差。定性差。2.Zak反反响响胆胆固固醇醇经经冰冰醋醋酸酸,浓浓硫硫酸酸
11、脱脱水水生生成成3.5-胆胆烷烷二二烯烯阳阳离离子子,然然后后在在Fe3+存存在在下下氧氧化化生生成成紫紫红红色色胆胆烷烷四四烯烯阳阳离离子子,灵灵敏敏度度较较L-B反反响响高高7倍倍,且且呈呈色色稳稳定定性性好好,但但试试剂剂腐腐蚀蚀性性极极大大,不不能能用用于于自自动动化分析。化分析。二酶法二酶法胆固醇酯胆固醇酯胆固醇胆固醇脂肪酸脂肪酸胆胆固固醇醇O2胆胆烷烷-4-烯烯-3酮酮H2O2H2O24AAP酚酚红红色色亚亚胺胺醌醌H2OCEHChODPOD试试剂剂中中除除上上述述三三种种酶酶外外,还还有有胆胆酸酸钠钠和和外外表表活活性性剂剂及及稳稳定定剂剂,胆胆酸酸钠钠用用于于激激活活CEH,外
12、外表表活活性性剂剂促进胆固醇从脂蛋白中释放。促进胆固醇从脂蛋白中释放。酶酶法法操操作作简简便便,快快速速,试试剂剂无无腐腐蚀蚀性性,适适宜宜于于自自动动化化分分析析,但但也也存存在在有有一一些些缺缺乏乏,CEH对对胆胆固固醇醇水水解解不不完完全全,外外表表活活性性剂剂影影响响CEH活活性性,黄黄疸疸血血清中过高的胆红素可复原清中过高的胆红素可复原H2O2使结果偏低。使结果偏低。【参考范【参考范围】3.105.70mmol/L【临床床意意义】血血清清TC含含量量受受年年龄、性性别、饮食食和和运运动等等要要素素的的影影响响。20岁以以上上随随年年龄而而,70岁以以后后那那么么有有下下降降趋势。20
13、40岁阶段段男男性性高高于于女女性性,但但女女性性绝经后后那那么么高高于于男男性性。城城市市人人群群高高于于乡村村人人群群,与与饮食食和和运运动有有关关。脑力力劳动者者高于膂力高于膂力劳动者。者。病病理理性性高高胆胆固固醇醇血血症症原原发性性高高胆胆固固醇醇血血症症,糖糖尿尿病病、胆胆道道阻阻塞塞、肾病病综合合症症、甲状腺功能减退。甲状腺功能减退。病病理理性性低低胆胆固固醇醇血血症症严重重贫血血、甲甲亢、亢、营养不良。养不良。三、血清甘油三脂测定三、血清甘油三脂测定TG是有一分子甘油与三分子脂肪是有一分子甘油与三分子脂肪酸组成的化合物,主要存在于酸组成的化合物,主要存在于VLDL和和CM中,临
14、床化学中往往以测定甘中,临床化学中往往以测定甘油代表油代表TG的含量。的含量。TG的测定方法很的测定方法很多,如气相色谱法、高效液相色谱法、多,如气相色谱法、高效液相色谱法、红外分光光度法。但上述方法需特殊红外分光光度法。但上述方法需特殊的仪器设备和技术,故普通只用于研的仪器设备和技术,故普通只用于研讨任务中。临床实验室主要用化学法讨任务中。临床实验室主要用化学法和酶法。和酶法。一化学法一化学法根本步骤可归纳为四步根本步骤可归纳为四步1.提提取取:甘甘油油三三脂脂的的提提取取采采用用适适宜宜的的溶溶剂剂,使使脂脂蛋蛋白白变变性性提提取取TG,同同时时去去除除干干扰扰物物质质(磷磷脂脂、游游离离
15、甘甘油油、葡葡萄萄糖糖等等),常常用用方法有:方法有:1异异丙丙醇醇抽抽提提,沸沸石石合合剂剂沸沸石石、高岭土吸附。高岭土吸附。2异丙醇抽提,氧化铝吸附磷脂。异丙醇抽提,氧化铝吸附磷脂。3正正壬壬烷烷、异异丙丙醇醇、稀稀硫硫酸酸分分溶溶抽抽提提,免免去去吸吸附附磷磷脂脂的的操操作作,后后用用价价廉廉的的正正庚庚烷替代正壬烷。运用较广。烷替代正壬烷。运用较广。2.皂皂化化:甘甘油油三三脂脂的的水水解解普普通通都都采采用用KOH乙乙醇醇或或KOH异异丙丙醇醇溶溶液液,60,515min可使可使TG完全水解。完全水解。3.氧氧化化:甘甘油油的的氧氧化化最最常常用用的的氧氧化化剂是是HIO4,甘甘油油
16、在在酸酸性性条条件件下下被被氧氧化化成成甲甲醛、甲甲酸酸。反反响响受受-磷磷酸酸甘甘油油、葡葡萄萄糖糖、丝氨氨酸酸的的干干扰,故故抽抽提提时应尽量除去此尽量除去此类物物质的干的干扰。4.显显色色:显显色色测测定定甲甲醛醛。常常用用方方法有:法有:1甲甲醛醛与与变变色色酸酸4.5-二二羟羟-2.7-萘萘二二磺磺酸酸在在硫硫酸酸溶溶液液中中加加热热生生成紫红色化合物。成紫红色化合物。570nm2甲甲醛醛与与乙乙酰酰丙丙酮酮在在氨氨的的存存在在下下缩缩合合成成黄黄色色的的3.5-二二乙乙酰酰-1.4-二二氢氢-2.6-二甲基吡啶。二甲基吡啶。420nm二酶法二酶法常用的有:常用的有:1.磷磷酸酸甘甘
17、油油氧氧化化酶酶法法GK-GPOD-POD法法TGH2O甘油甘油FA甘甘油油ATP3-磷磷酸酸甘甘油油ADP3-磷磷酸酸甘甘油油O2磷磷酸酸二二羟羟丙酮丙酮H2O2H2O24-AAP酚酚红红色色亚亚胺醌胺醌H2O试试剂剂较较稳稳定定,灵灵敏敏度度高高,线线性性范范围围宽宽,胆胆红红素素、维维生生素素C可可耗耗费费H2O2使使结结果偏低。果偏低。LPLGKGPODPOD2.乳酸脱氢酶法乳酸脱氢酶法GK-PK-LDH法法TGH2O甘油甘油FA甘甘油油ATP3-磷磷酸酸甘甘油油ADPADP磷磷酸酸烯烯醇醇式式丙丙酮酮酸酸ATP丙酮酸丙酮酸丙丙酮酮酸酸NADHH+乳乳酸酸NAD+3.甘油氧化酶法甘油氧
18、化酶法第一步消除血清中原有的甘油:第一步消除血清中原有的甘油:LPLGPODPKLDH游离甘油游离甘油O2甘油醛甘油醛H2O2GlyODH2O2EMAE无色物无色物质质EMAE称称N-乙乙基基-N- 3-甲甲基基 -N-乙乙酰酰乙乙二二胺胺。是是一一种种复复原原剂剂,灵灵敏敏度度比比酚酚高高。第第二二步步测测定定甘甘油油三脂水解三脂水解释释放的甘油:放的甘油:TGH2O甘油甘油FA甘油甘油O2甘油甘油醛醛H2O2H2O24-AAPEMAE有色化合物有色化合物PODGlyODLPLPOD【参考范围】【参考范围】0.561.70mmol/L【临临床床意意义义】血血清清TG普普通通随随年年龄龄增长而
19、升高,体重超标者往往偏高。增长而升高,体重超标者往往偏高。1.病病理理性性增增高高原原发发性性高高脂脂蛋蛋白白血血症症、肥肥胖胖症症、糖糖尿尿病病、肾肾病病综综合合症症、脂脂肪肝、妊娠后期。肪肝、妊娠后期。2.病病理理性性降降低低甲甲亢亢、肾肾上上腺腺皮皮质质功能减退、严重肝功能损伤。功能减退、严重肝功能损伤。四、血清浆脂蛋白测定四、血清浆脂蛋白测定一血清脂蛋白电泳一血清脂蛋白电泳临床实验室常用的支持介质有醋酸纤临床实验室常用的支持介质有醋酸纤维薄膜和琼脂糖凝胶。维薄膜和琼脂糖凝胶。1.血清脂蛋白醋酸纤维薄膜电泳血清脂蛋白醋酸纤维薄膜电泳以醋以醋酸纤维薄膜为支持介质,血清脂蛋白经电酸纤维薄膜为
20、支持介质,血清脂蛋白经电泳分别,然后用臭氧氧化,使脂蛋白中的泳分别,然后用臭氧氧化,使脂蛋白中的不饱和脂肪酸的双键断裂生成醛,再用亚不饱和脂肪酸的双键断裂生成醛,再用亚硫酸品红染色,即生成紫红色区带。硫酸品红染色,即生成紫红色区带。2.血血清清脂脂蛋蛋白白预染染琼脂脂糖糖电泳泳血血清清脂脂蛋蛋白白经饱和和苏丹丹黑黑B预染染后后,以以琼脂脂糖糖凝凝胶胶为支支持持介介质,进展展电泳泳分分别,即即可可得得到到明明晰晰的的兰色区色区带。凝凝胶胶浓度度普普通通为0.5%,超超越越1%,-Lp与与pre-Lp不不易易分分开开,0.5%,凝凝胶胶机机械械强度太低。度太低。血血清清:染染料料为9:1,染染料料
21、过多多稀稀释标本本,而而且且染染料料中中乙乙醇醇会会引引起起蛋蛋白白量量变性性,影影响分响分别效果。效果。结果果判判别,直直观区区带的的着着色色深深浅浅,宽窄窄,用用浅浅染染,稍稍浅浅染染,深深染染及及消消逝逝加加以以描描画画;或或用用光光密密度度扫描描仪测定。定。【参考范【参考范围】-Lp30%40%pre-Lp13%25%-Lp50%60%CM二血清高密度脂蛋白二血清高密度脂蛋白测定定常常以以测定定HDL-C含含量量代代表表HDL程程度度。测定定步步骤包包括括HDL的的分分别;测定定HDL中胆固醇。中胆固醇。HDL的的分分别方方法法有有:超超速速离离心心法法、凝凝胶胶过滤法法、免免疫疫化化
22、学学法法、电泳泳法法、沉沉淀淀法法。临床床实验室室常常用用沉沉淀淀法法。沉沉淀淀剂普普通通为二二价价阴阴离离子子和和多多价价阴阴离离子子。如如:肝肝素素-Mg2+、硫硫酸酸葡葡聚聚糖糖-Mg2+、磷磷钨酸酸-Mg2+、聚聚乙乙二醇二醇PEG等。等。如如:磷磷钨酸酸-Mg2+选择性性地地沉沉淀淀血血清清中中的的LDL和和VLDL,经离离心心上上清清液液中中保保管管HDL,然然后后用用酶法法测定定上上清清液液中中的的胆胆固固醇醇含含量量,即即代代表表HDL中中的的胆胆固醇。固醇。【参考范【参考范围】男】男1.280.33mmol/L女女1.370.33mmol/L【临床床意意义】HDL-C与与冠冠
23、心心病病发病病呈呈负相相关关,HDL-C低低于于0.9mmol/L是是冠心病危冠心病危险要素。要素。三血清高密度脂蛋白亚组分测定三血清高密度脂蛋白亚组分测定HDL有三个亚类有三个亚类HDL1、HDL2、HDL3最近的研讨任务阐明,最近的研讨任务阐明,HDL2亚类亚类与冠心病危险度的相关程度比总与冠心病危险度的相关程度比总HDL-C更更亲密。亲密。HDL2d=1.0631.125g/mlHDL3d=1.1251.210g/mlHDL2脂类脂类60%蛋白质蛋白质40%;HDL3脂类脂类45%蛋白质蛋白质55%高密度脂蛋白亚组分的分析方法有超速高密度脂蛋白亚组分的分析方法有超速离心法、柱层析法、聚丙
24、烯酰胺凝胶电泳法、离心法、柱层析法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法、多价阴离子分级沉淀法。多价阴离子分级沉淀法。其中多价阴离子分级沉淀法具有快速、其中多价阴离子分级沉淀法具有快速、经济、简便更为适用,是目前临床实验室最经济、简便更为适用,是目前临床实验室最常用的方法。常用的沉淀剂有硫酸葡聚糖常用的方法。常用的沉淀剂有硫酸葡聚糖-Mg2+、聚乙二醇、聚乙二醇PEG。【原原理理】用用PEG做做沉沉淀淀剂,以以不不同同浓度度的的PEG在在不不同同pH条条件件下下分分别将将VLDL和和LDL沉沉淀淀剂95g/LPEG,pH6.5HDL2沉沉淀淀剂170g/LPEG,pH7.5沉沉淀淀,上上清清液液中中只只含含有
25、有HDL沉沉淀淀剂和和HDL3沉沉淀淀剂,然然后后用用酶法法测定定HDL-C和和HDL3-C,并并以以HDL-C减减去去HDL3-C的的差差即即为HDL2-C的的含量。含量。【参考范【参考范围】HDL2-C男男0.530.17mmol/L女女0.620.22mmol/LHDL3-C男男0.750.17mmol/L女女0.750.16mmol/L四低密度脂蛋白测定四低密度脂蛋白测定低密度脂蛋白程度通常以低密度脂蛋白程度通常以LDL-C含量表含量表示。示。LDL-C测定方法很多,常用的有:测定方法很多,常用的有:1.Friedewald公式法公式法LDL-CTCHDL-C式中的浓度单位是式中的浓度
26、单位是mmol/L,在普通情,在普通情况下能得到可被临床接受的近似结果,但况下能得到可被临床接受的近似结果,但TG4.25mmol/L时不能运用此公式计算,时不能运用此公式计算,否那么结果偏向太大。否那么结果偏向太大。TG2.22.聚乙烯硫酸盐沉淀法聚乙烯硫酸盐沉淀法聚乙烯硫酸聚乙烯硫酸PVS能选择性沉淀血清中能选择性沉淀血清中LDL,再以血清,再以血清TC减去上清液含减去上清液含HDL和和VLDL胆固醇,胆固醇,即得即得LDL-C值。试剂中参与值。试剂中参与EDTA去除两价去除两价阳离子,防止阳离子,防止VLDL共沉,辅以聚乙二醇独共沉,辅以聚乙二醇独甲醚甲醚PEGME可加速沉淀。可加速沉淀
27、。3.直接测定法直接测定法匀相的匀相的LDL-C直接测定直接测定法是以不同的外表活性剂的双试剂使非法是以不同的外表活性剂的双试剂使非LDL-C与与LDL-C分两步水解,因先消除非分两步水解,因先消除非LDL-C,故也称为消除法。,故也称为消除法。【参考范【参考范围】LDL-C3.12mmol/L【临床意床意义】LDL-C增高是增高是动脉粥脉粥样硬硬化化发生开展的主要危生开展的主要危险要素。要素。五脂蛋白五脂蛋白a测定定脂蛋白脂蛋白(a)是由是由载脂蛋白脂蛋白(a)与与载脂蛋白脂蛋白B100经过二硫二硫键衔接所构成的特殊蛋白。接所构成的特殊蛋白。脂蛋白脂蛋白(a)测定的方法目前常用的是定的方法目
28、前常用的是ELISA法。法。血清中的脂蛋白血清中的脂蛋白(a)与与单克隆抗克隆抗Lp(a)抗抗体体结合,再与合,再与过氧化物氧化物酶结合,构成合,构成Lp(a)-单克隆抗体克隆抗体-酶复合物,然后与底物孵育复合物,然后与底物孵育显色。色。【参考范围】【参考范围】120180mg/L【临临床床意意义义】Lpa动动脉脉粥粥样样硬硬化化、冠冠心心病病的的独独立立危危险险要要素素,与与动动脉脉粥粥样样硬硬化化成成正正相相关关,血血清清Lpa浓浓度度300mg/L时时,其其冠冠心心病病的的发发病病率率高高于于安安康康人人的的25倍倍。血血清清Lpa程程度度主主要要决决议议于于遗遗传传,个个体体间间Lpa
29、程程度度差差别别很很大大,但但同同一一个个体体血血浆浆Lpa程程度度的的变变化化较较小小,环环境境、饮饮食食、药物对它的影响不明显。药物对它的影响不明显。五、血清五、血清载脂蛋白脂蛋白A及及B测定定脂蛋白中的蛋白脂蛋白中的蛋白质部分称部分称为载脂蛋白脂蛋白apolipoprotein,Apo,可分,可分为A、B、C、D、E、F、G、H八八类,其中,其中ApoA,B,C还有有亚类。ApoA是是HDL的主要蛋白的主要蛋白质,占,占HDL蛋白蛋白质的的85%左右,它的血清左右,它的血清浓度可代表度可代表HDL程度,程度,ApoB是是LDL的主要蛋白的主要蛋白质,占,占LDL蛋白蛋白质的的97%左右,
30、左右,ApoB浓度主要反度主要反映映LDL程度。程度。Apo的的测定方法主要有三定方法主要有三类:层析分析分别,然后再按普通蛋白,然后再按普通蛋白质定量;定量;电泳分泳分别后后经染色光密度染色光密度扫描定量;描定量;各种免疫分析法。各种免疫分析法。层析法操作析法操作费事,普通只用于研事,普通只用于研讨;电泳法泳法简便灵敏,但各便灵敏,但各类Apo染染色性能不一致,反复性不好;免疫法色性能不一致,反复性不好;免疫法特异性好,灵敏度高,不需特异性好,灵敏度高,不需预先分先分别脂蛋白,适宜脂蛋白,适宜临床床实验室的运用,但室的运用,但需特异抗血清。需特异抗血清。目前常用的免疫学方法有:目前常用的免疫
31、学方法有:1.单单向向免免疫疫分分散散法法RID方方法法简简单单,但需时间长,灵敏度较低。但需时间长,灵敏度较低。2.火火箭箭免免疫疫电电泳泳法法IE比比RID快快速速、灵敏,抗血清用量少。灵敏,抗血清用量少。3.免免疫疫比比浊浊法法测测定定抗抗原原抗抗体体复复合合物物构构成成而而产产生生的的混混浊浊,方方法法简简便便、快快速速,适适宜宜于于自自动动分分析析仪仪,灵灵敏敏度度高高于于火火箭箭电电泳泳法法,免免疫疫比比浊浊法法又又分分为为:散散射射比比浊浊法法和和透透射射比比浊法。浊法。4.酶联免免疫疫吸吸附附法法ELISA需需制制备指指示示酶与与Apo或或其其抗抗体体的的交交联物物现有商品化有
32、商品化试剂盒和盒和酶标仪。5.放放射射免免疫疫法法RIA用用核核素素标志志抗抗原原作作为示示踪踪物物,灵灵敏敏度度可可达达35g。6.荧光免疫分析法光免疫分析法FIA7.化学化学发光免疫法光免疫法CLIA【 参参 考考 范范 围 】 Apo A 1.001.50g/LApo B 0.801.00g/L【临床床意意义】ApoA是是HDL的的主主要要构构造造蛋蛋白白,ApoB是是LDL的的主主要要构构造造蛋蛋白白,因因此此,ApoA和和ApoB可可直直接接反反映映HDL和和LDL的的含含量量。但但在在某某些些病病理理情情况况下下,ApoA与与HDL和和ApoB与与LDL并并非非成成正正相相关关,临床床上上常常将将ApoA和和ApoB比比值作作为冠冠心心病病的的危危险目的。目的。