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1、学习必备欢迎下载高三生物实验专题复习第一部分知识梳理：一、常用仪器、试剂或药品的用途1、NaOH：用于吸收CO2或改变溶液的pH 2、Ca(OH)2：鉴定 CO2 3、CaCl2：提高细菌细胞壁的通透性4、HCl ：解离（ 15%+95% 酒精 1 : 1 混合）或改变溶液的pH 5、NaHCO3：提供 CO2、作为酸碱缓冲剂6、酸碱缓冲剂（Na2CO3/NaHCO3，Na2HPO4/NaH2PO4） ：用于调节溶液pH 7、NaCl：配制生理盐水（0.9%）或用于提取DNA （0.14M 或 2M) 8、琼脂：激素或其他物质的载体或培养基，用于激素的转移或培养基9、酒精：用于消毒(75%)、
2、提纯 DNA （ 95%） 、叶片脱色、配制解离液（95%的冷酒精）及洗去浮色（50%）10、蔗糖：配制蔗糖溶液，测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原11、二苯胺：用于DNA 的鉴定（沸水浴，蓝色）12、甲基绿：检测DNA ，呈绿色13、吡罗红：检测RNA ，呈红色14、斐林试剂（甲液0.1g/mL NaOH 、乙液 0.05g/mLCuSO4 ）/班氏试剂：鉴定可溶性还原性糖（沸水浴，砖红色沉淀）15、双缩脲试剂（A 液： 0.1g/mL 的 NaOH 溶液， B 液： 0.01g/mL的 CuSO4 溶液） ：先加 A 摇匀再加B，用于蛋白质的鉴定（紫色）16、苏丹染液(橘黄色）和苏丹染
3、液(红色） ：用于脂肪鉴定17、碘液：用于鉴定淀粉（变蓝色）18、龙胆紫溶液或醋酸洋红（碱性染料）：染色体染色时，前者呈深蓝色，后者呈红色19、健那绿：检测活的线粒体，专一性让线粒体染色呈蓝绿色20、重铬酸钾溶液：检测酒精，呈灰绿色21、溴麝香酚蓝水溶液：检测CO2，由蓝变绿再变黄22、伊红美蓝：鉴定有无大肠杆菌的存在23、卡诺氏固定液：用于细胞有丝分裂根尖的固定24、解离液（ 5%盐酸和 95%酒精按 1：1 的比例配成）：有丝分裂中根尖的分离与固定25、层析液：用于叶绿素的分离，主要类型：由20 份石油醚（在6090下分馏出来的） 、2 份丙酮和1 份苯混合而成；95%的酒精； 93 号汽
4、油； 9 份体积分数为95%的酒精和1 份苯混合；汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。26、柠檬酸钠：血液抗凝剂二、实验结果的显示（实验现象的观测指标）1、光合作用： O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。例：水生植物可依气泡的产生量或产生速率；离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目；植物体上的叶片可依指示剂（如碘液）处理后叶片颜色深浅。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 8 页学习必备欢迎下载2、呼吸作用： O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量3、原子或分子转移途径：同位素标记法或元素示踪法4、细胞液浓度大小或
5、植物细胞活性：质壁分离与复原5、甲状腺激素作用：动物耗氧量、发育速度等6、生长激素作用：生长速度(体重、体长变化) 7、胰岛素作用：动物活动状态（是否出现低血糖症状 昏迷）8、胰高血糖素作用：尿糖的检测（在尿液中加班氏试剂进行沸水浴，看是否出现砖红色沉淀）9、菌量的多少：菌落数、亚甲基蓝褪色程度10、生长素作用及浓度高低的显示：可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断（弯曲、高度）11、淀粉：碘液（变蓝色）12、还原性糖：斐林试剂/班氏试剂（沸水浴后生成砖红色沉淀）13、CO2：Ca(OH)2溶液（澄清石灰水变浑浊) 14、乳酸： pH 试纸15、O2：余烬复燃16、蛋白质：双缩脲试
6、剂（紫色）17、脂肪：苏丹染液(橘黄色）；苏丹染液(红色）18、DNA ：二苯胺（沸水浴，蓝色）、甲基绿（染色后，呈绿色）19、RNA ：吡罗红（呈红色） 、苔黑酚乙醇溶液三、实验原则1、对照原则：空白对照，自身对照，相互对照，条件对照2、单一变量原则：实验变量（也称自变量，须以实验目的和假设为依据，应具有可变性和可操作性） 与反应变量 （又称因变量或应变量：随自变量变化而产生反应或发生变化的变量， 反应变量是研究是否成功的证据，应具可测性和客观性。 ） ，无关变量与额外变量，无关变量（无关变量又称干扰变量、控制变量）与额外变量（实验中由于无关变量所引起的变化和结果）3、科学原则：即实验方案的
7、设计要科学，包括原理、操作、程序、方法等。4、安全原则： 尽量避免危险性操作（如确需使用， 应注明， 防止环境污染和人身伤害）。5、可行原则：实验设计应注意取材方便、药品便宜、装置简单、经济实用、步骤简洁、操作性强、花时经济，在现有实验条件下能够完成。四、操作设计注意事项1、应注意实验选材的合理性 所选材料应有利于实验现象的观察：如可溶性还原糖的鉴定中应选择“ 白色或近白色” 的材料； 所选材料应容易获得：尽可能选择无明显季节性、地域性的材料； 所选材料应价格便宜2、应注意操作细节的合理性3、应注意操作顺序的合理性4、应注意实验方案的可操作性五、实验设计的基本思路精选学习资料 - - - -
8、- - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页，共 8 页学习必备欢迎下载1、准确把握实验目的：看清题意是要求设计实验方案、步骤还是分析实验结果，是探究性实验还是验证性实验。2、明确实验原理：要解决题目所给的问题，要用到生物学上什么原理。3、确定实验思路：根据原理对实验作出假设，并充分利用实验材料设计实验思路。4、精心设计实验步骤：根据实验目的、原理和思路，设计合理的实验装置和实验操作步骤。并设置好实验组和对照组，遵循实验设计的原则。并将观察到的现象如实进行记录。5、准确预期实验结果并分析得出结论：实验步骤一般不连续描述，要分段叙述；试管、烧杯等要给予编号。在叙述实验步
9、骤及预期结果时结论时，语言文字要简明扼要，准确科学。五、实验材料的选择1、材料容易获得且经济实惠。2、材料在实验过程中易于处理且实验结果明显准确（如无颜色等无干扰）第二部分高中生物实验总结：实验原理检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质实验材料用具实验方法步骤实验结果分析实验原理实验结果的分析实验原理探究影响酶活性的因素实验材料用具、实验方法步骤实验结果的分析实验原理叶绿体中色素的提取和分离实验材料用具、实验方法步骤实验结果的分析实验原理探究酵母菌的呼吸方式实验设计实验结果的分析（一）检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质1 还原糖的检测和观察（ 1） 实验原理：还原糖与斐林试剂生成砖红色沉淀，（
10、 2） 选材：富含还原糖，白色或近白色的生物组织。（ 3） 实验步骤：制备样液取样 注入试剂 加热。a. 向试管内注入2mL 待测组织样液。b. 向试管内注入1mL 斐林试剂 (甲乙液等量混合均匀后再注入)。c. 将试管放入盛有5065温水的大烧杯中加热约2min（沸水浴加热）。d. 观察试管中出现的颜色变化。（ 4） 实验结果：试管中出现了砖红色沉淀现象说明待测的组织样液中存在还原糖（ 5） 注意事项：斐林试剂甲、乙两种液体混合后使用；必修现配现用 制好的生物组织样液不能放置太久以免影响结果。观察植物细胞的质壁分离和复原实验精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 -
11、- - - - - -第 3 页，共 8 页学习必备欢迎下载模拟尿糖的检测1、取样：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液2、检测方法：斐林试剂（水浴加热）或班氏试剂（由硫酸铜、柠檬酸钠和无水碳酸钠配置成的蓝色溶液，可以存放备用）或尿糖试纸3、结果：（用斐林试剂检测）试管内发生出现砖红色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出现砖红色沉淀的是正常人的尿液。4、 分析：因为糖尿病患者的尿液中含有还原糖，与斐林试剂发生反应产生砖红色沉淀，而正常人尿液中无还原糖，所以没有发生反应。2. 脂肪的检测和观察（ 1） 实验原理：脂肪被苏丹染液染成橘黄色，脂肪被苏丹染液成红色。（ 2） 实验步骤：制备样液取样 苏丹染液或苏丹
12、染液 观察颜色反应。a 向待测组织样液中滴加3 滴苏丹染液，观察样液被染色的情况。（ 3）实验结果：试管中出现了橘黄色现象说明待测的组织样液中存在脂肪3. 蛋白质的检测和观察（ 1） 实验原理：蛋白质与双缩脲试剂发生作用，产生紫色反应。（ 2） 实验步骤：制备样液取样 先注入试剂A 摇匀 再注入试剂B 摇匀 观察颜色反应。a. 向试管内注入待测组织样液2mL。b. 向试管内注入双缩脲试剂A 液 1mL，摇匀。c. 向试管内注入双缩脲试剂B 液 4 滴，摇匀。d. 观察试管中出现的颜色变化（ 3） 实验结果：试管中出现了紫色现象说明待测的组织样液中存在蛋白质（二）观察植物细胞的质壁分离和复原（1
13、） 实验原理： a. 植物细胞的原生质层相当于一层半透膜。b. 由于原生质层比细胞壁的伸缩性大，当细胞不断失水时，原生质层就会与细胞壁逐渐分离开来，也就是逐渐发生了质壁分离。c. 当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时，外界溶液中的水分就透过原生质层进入细胞液中，整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态，使植物细胞逐渐发生质壁分离的复原。（2） 选材：紫色洋葱鳞片外表皮。（3） 实验步骤：制作临时装片原生质层的观察质壁分离的观察质壁分离复原的观察。a. 制作洋葱鳞片叶外表皮的临时装片。b. 用低倍显微镜观察洋葱鳞片叶外表皮细胞中紫色的中央液泡的大小，以及原生质层的位置。c. 从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶
14、液，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，盖玻片下面的洋葱鳞片叶表皮就浸润在蔗糖溶液中。d. 用低倍显微镜观察，看细胞的中央液泡是否逐渐变小，原生质层在什么位置，细胞大小是否变化。e. 在盖玻片的一侧滴入清水，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。这样重复几次，洋葱鳞片叶表皮又浸润在清水中。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 8 页学习必备欢迎下载f. 用低倍显微镜观察，看中央液泡是否逐渐变大，原生质层的位置有没有变化，细胞的大小有没有变化。（4） 实验结果：细胞外溶液浓度细胞内溶液浓度，细胞失水质壁分离细胞外溶液浓度细胞内溶
15、液浓度，细胞吸水质壁分离复原（5） 注意事项：选择紫色洋葱鳞片外表皮的好处：易于获得单层细胞制片方便，有成熟大液泡现象明显且液泡富含色素便宜观察。 应快速做几次质壁分离与复原实验操作以免细胞死亡。 蔗糖溶液浓度要适中以无法观察的免实验现象（浓度小不会分离太多则细胞容易死亡）。（三）探究影响酶活性的因素（ 1） 实验原理： a. 细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化的。b. 酶对化学反应的催化效率称为酶活性。c. pH 值对酶活性有影响。（2） 实验步骤：等量分组编号变量处理 结果检验 结果观察。a. 取 6 支试管，分别向6 支试管中加入质量分数为3%的可溶性淀粉溶液；b. 向 6 支试管加
16、入不同pH 的溶液；c. 分别向 6 支试管加入等量的淀粉酶溶液；d. 向 6 支试管滴加碘液；e. 观察 6 支试管变篮的程度。（3） 实验结果：酶在最适宜的条件下，酶的活性最高；温度和PH 偏高或偏低，酶的活性都会明显降低。因而各试管变蓝的程度不同。（ 1） 实验原理： a. 细胞中几乎所有的化学反应都是由酶来催化的。b. 酶对化学反应的催化效率称为酶活性。c. 温度对酶活性有影响。（2） 实验步骤：等量分组编号变量处理 结果检验 结果观察。a. 取 6 支试管，分别向6 支试管中加入质量分数为3%的可溶性淀粉溶液；再分别放入不同温度梯度的水浴中保温；再取6 支试管，分别向6 支试管中加入
17、质量的淀粉酶溶液，分别放入与前6 支试管相同温度梯度的水浴中保温相同时间。b. 分别向 6支试管加入相同温度梯度下保温过的等量的淀粉酶溶液；c. 向 6 支试管滴加碘液；d. 观察 6 支试管变篮的程度。（3） 实验结果：酶在最适宜的条件下，酶的活性最高；温度偏高或偏低，酶的活性都会明显降低。因而各试管变蓝的程度不同。（4） 注意事项：酶（淀粉酶）和底物（淀粉）要先在相同的温度条件下同时保温后再混合以保证变量唯一。（四）叶绿体色素提取和分离（1） 实验原理： a. 绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中，所以可以用无水乙醇提取绿叶中的色素。b. 它们在层析液中的溶解度不同；溶解度高的随层析液
18、在滤纸上扩散得快；反之则慢。（2） 选材：新鲜菠菜嫩叶。（3） 实验步骤：提取色素：称量研磨过滤收集分离色素：制备滤纸条画滤液细线分离色素观察和记录a. 提取绿叶中的色素；b. 制备滤纸条；精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页，共 8 页学习必备欢迎下载c. 画滤液细线；d. 分离绿叶中的色素。（4） 实验结果： 叶绿体中色素能溶解在有机溶剂无水乙醇中，可用无水乙醇提取色素，叶绿体中色素有四种可根据它们在层析液中溶解度不同，运用纸层析法将它们分离；其中溶解度最高的在滤纸上扩散得最快的是胡萝卜素（橙黄色），溶解度最低的在滤纸上扩散得
19、最慢的是叶绿素b(黄绿色 )，色素在滤纸上由上而下的排列是胡萝卜素（橙黄色）、叶黄素（黄色） 、叶绿素a(蓝绿色 )、叶绿素b(黄绿色 )；（5） 药品及用途： SiO2 使研磨充分Ca CO3保护叶绿素不被破坏无水乙醇 溶解色素（提取色素）层析液 分离色素（6） 注意事项：材料应富含叶绿体且四种色素含量要适中滤纸条下端要均匀剪去两角以保证层析液在滤纸条上均匀扩散 先用铅笔画线 （不能用蓝黑笔或圆珠笔画线以免颜色干扰）再均匀画滤液细线 层析是滤液不能淹没滤液细线且层析液不能扩散到滤纸条顶端以免色素带不明显。（五） 观察 DNA 和 RNA 在细胞中的分布（1） 实验原理： 甲基绿使DNA 呈现
20、绿色， 吡罗红使 RNA 呈现红色 . 利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色，可以显示 DNA 和 RNA 在细胞中的分布, 盐酸能够改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA 和蛋白质分离，有利于 DNA 与染色剂结合。分布： 真核生物DNA 主要分布在细胞核中， 线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA ；RNA 主要分布在细胞质中。（2） 选材：口腔上皮细胞层或植物叶片下表皮细胞。（2） 实验步骤：制片水解 冲洗 染色 观察a. 将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上滴0.9%的NaCl溶液 , 载玻片烘干b. 8%HCl中 30保温 5 分钟；c. 用蒸馏水缓流冲洗10s
21、（10 秒）；d. 2 滴甲基绿、吡罗红混合染色剂染色5 分钟e. 先低倍镜观察，选择染色均匀、色泽浅的区域，移至视野中央，调节清晰后才换用高倍物镜观察；（3）实验结果 : 细胞核呈绿色 ,细胞质呈红色. （5） 药品及用途： 0.9%的 NaCl 溶液 维持细胞形态8%HCl 改变膜透性而且可以将染色质（体）上的蛋白质破坏便宜染色。（5） 注意事项：材料应无色且易于制作成单层细胞的装片 必修是活细胞（六）探究酵母菌的呼吸方式（1）实验原理：酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸,产生二氧化碳和水：C6H12O6 6O2 6H2O6CO2 12H2O 能量在无氧条件下进行无氧呼吸,产生酒精和少量二氧化
22、碳：C6H12O6 2C2H5OH 2CO2 少量能量（2） 实验步骤：a. 酵母菌培养液的配制；b. 检测 CO2的产生；c. 检测酒精的产生。（3） 实验结果：酵母菌在有氧和无氧条件下分别进行有氧呼吸和无氧呼吸；有氧呼吸精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页，共 8 页学习必备欢迎下载比无氧呼吸产生的二氧化碳多；无氧呼吸时产生酒精.(检测 CO2的产生：使澄清石灰水变浑浊，或使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。检测酒精的产生：橙色的重铬酸钾溶液，在酸性条件下与酒精发生反应，变成灰绿色)。（七）观察有丝分裂1、材料选择：洋葱根尖（
23、葱，蒜）2、实验步骤：（一）洋葱根尖的培养（二）装片的制作制作流程：解离 漂洗 染色 制片1. 解离 : 用解离液（质量分数为15%的盐酸 ,体积分数为95%的酒精 1 : 1 混合液 ). 解离 35min。目的：使组织中的细胞相互分离开来便宜压片。2. 漂洗 : 用清水漂洗约10min. 目的：洗去解离液，防止解离过度，并有利于染色。3. 染色 : 用质量浓度为0.01g / mL 或 0.02g / mL 的龙胆紫溶液 (或醋酸洋红液 )染色3 5min 目的：使染色体着色，利于观察。4. 制片 : 将根尖放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上，再加一片载玻
24、片，然后用拇指轻轻地按压载玻片。目的：使细胞分散开来，有利于观察。（三）观察a、先在低倍镜下找到根尖分生区细胞：细胞呈正方形， 排列紧密 ,有的细胞正在分裂。b、换高倍镜下观察：分裂中期分裂前、后、末期分裂间期。（注意各时期细胞内染色体形态和分布的特点）。其中，处于分裂间期的细胞数目最多。（八） DNA 的粗提取与鉴定1（1）实验原理： 血细胞在蒸馏水中易吸水而导致细胞膜和细胞核膜的破裂。利用此特性可得到含有核DNA 的溶液。 NaCl 溶液： DNA 在不同浓度的NaCl 溶液的溶解度不同。当NaCl 的质量浓度为0.14mol/L 时， DNA 的溶解度最低。利用这一原理，可以使溶解在Na
25、Cl 溶液中的DNA 析出。 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度曲线如右图所示：酒精（体积分数为95） ：DNA 不溶于酒精溶液，可是细胞中的多数物质可溶于酒精溶液，因而可进一步提取含杂质较少的DNA 。洗涤剂： 能溶解细胞膜，有利于细胞内DNA 的释放。二苯胺试剂：DNA 遇二苯胺（沸水浴）被染成蓝色，所以二苯胺可用作鉴定DNA 存在的试剂。（1）实验步骤：破碎细胞溶解 DNA DNA 的析出 DNA 的初提纯 DNA 的再提纯 DNA 的鉴定 破碎细胞释放DNA ：加入 20 mL 蒸馏水，搅拌5 min，用 12 层纱布过滤备用使细胞吸水胀破 溶解细胞核中的DNA ：加入 2 mol/
26、L 的氯化钠溶液40 mL ，搅拌 1 min DNA在高浓度氯化钠溶液中，溶解度最大 DNA 的析出：加入蒸馏水约300 mL，不停地进行均匀搅拌，然后用34 层纱布过滤混合液降低氯化钠浓度，使DNA 的溶解度降到最低 DNA 的初步提纯：加入2 mol/L 的氯化钠溶液20 mL，不停地搅拌，然后用2层纱布过滤混合液 DNA 的再次提纯：加入95%冷酒精 50 mL ，然后进行搅拌浓缩沉淀 DNA DNA 的鉴定：向两支试管中分别加入4 mL 二苯胺试剂，然后将试管在沸水浴精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页，共 8 页学习必
27、备欢迎下载中加热5 min，比较试管中的颜色变化。注：二苯胺溶液要现用现配，否则会影响鉴定效果2方法步骤ADNA 的粗提取（1）准备材料：将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室，至少24小时。（2）取材：称取30 g 菜花，去梗取花，切碎。（3）研磨：将碎菜花放入研钵中，倒入10 mL 研磨液，充分研磨10 min。（4）过滤：在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨液滤入烧杯中（有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心，用1000 r/min 的旋转频率，离心25 min；取上清液放入烧杯中） 。在 4冰箱中放置几分钟后，再取上清液。（5）加冷酒精：将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的酒精溶液中，并且玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液（玻璃棒不要直插烧杯底部）。沉淀 35 min 后，可见白色的DNA 絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，絮状物会缠在玻璃棒上。BDNA 的鉴定（1）配制二苯胺试剂：取0.1 mL B 液；滴入到10 mL A 液中，混匀。（2）鉴定：取4 mL DNA 提取液放入试管中，加入4 mL 二苯胺试剂，混匀后观察溶液颜色（不变蓝） 。用沸水浴（ 100）加热 10 min。在加热过程中，随时注意试管中溶液颜色的变化（逐渐出现浅蓝色）。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 8 页，共 8 页
