《2022年2022年各种缓冲液的配制方法-》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022年2022年各种缓冲液的配制方法-（7页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、专业资料整理完美 WORD格式各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液PH 0.2mol/LNa2HPO4 (ml) 0.1mol/L柠 檬 酸钠 (ml) PH 0.2mol/LNa2HPO4 (ml) 0.1mol/L 柠檬酸钠(ml) 2.2 0.4 19.6 5.2 10.72 9.28 2.4 1.24 18.76 5.4 11.15 8.85 2.6 2.18 17.82 5.6 11.60 8.40 2.8 3.17 16.83 5.8 12.09 7.91 3.0 4.11 15.89 6.0 12.63 7.37 3.2 4.94 15.06 6.2 13.22 6
2、.78 3.4 5.70 14.30 6.4 13.85 6.15 3.6 6.44 13.56 6.6 14.55 5.45 3.8 7.10 12.90 6.8 15.45 4.55 4.0 7.71 12.29 7.0 16.47 3.53 4.2 8.28 11.72 7.2 17.39 2.61 4.4 8.82 11.18 7.4 18.17 1.83 4.6 9.35 10.65 7.6 18.73 1.27 4.8 9.86 10.14 7.8 19.15 0.85 5.0 10.30 9.70 8.0 19.45 0.55 Na2HPO4。2H2O，分子量 =178.05 0
3、.2mol/L 溶液含 35.61g/L柠檬酸 . H2O，分子量 =210.14 0.1mol/L 溶液含 21.01g/L 柠檬酸 -柠檬酸钠缓冲溶液（0.1mol/L ）PH 0.1mol/L 柠檬酸（ml）0.1mol/L 柠檬酸钠（ ml）PH 0.1mol/L 柠檬酸（ml）0.1mol/L 柠檬酸钠(ml) 3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8 3.2 17.2 2.8 5.2 7.3 12.7 3.4 16.0 4.0 5.4 6.4 13.6 3.6 14.9 5.1 5.6 5.5 14.5 3.8 14.0 6.0 5.8 4.7 15.3 4.0 13.1
4、 6.9 6.0 3.8 16.2 4.2 12.3 7.7 6.2 2.8 17.2 4.4 11.4 8.6 6.4 2.0 18.0 4.6 10.3 9.7 6.6 1.4 18.6 4.8 9.2 10.8 柠檬酸 . H2O，分子量 =210.14 0.1mol/L 溶液含 21.01g/L 柠檬酸钠 . 2H2O，分子量 =294.12；0.1mol/L 溶液含 29.4 g/L 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 1 页，共 7 页 - - - - - -
5、 - - - 专业资料整理完美 WORD格式醋酸缓冲液（ 0.2mol/L ，18）PH 0.2mol/LNaAC(ml) 0.2mol/LHAC(ml) PH 0.2mol/LNaAC(ml) 0.2mol/LHAC(ml) 3.6 0.75 9.25 4.8 5.90 4.10 3.8 1.20 8.80 5.0 7.00 3.00 4.0 1.80 8.20 5.2 7.90 2.10 4.2 2.65 7.35 5.4 8.60 1.40 4.4 3.70 6.30 5.6 9.10 0.90 4.6 4.90 5.10 5.8 9.40 0.60 NaAC.3 H2O,分子量 =13
6、6.09 0.2mol/L 溶液含 27.22g/L （1）醋酸盐溶液的配制：醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠 5.1g,加冰醋酸 20ml ，再加水稀释至250ml,即得。醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水 300ml 溶解后， 加溴酚蓝指示液1ml 及冰醋酸6080ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。醋酸醋酸钠缓冲液(pH3.8)取 2mol/L 醋酸钠溶液13ml 与 2mol/L 醋酸溶液87ml,加每 1ml 含铜 1mg 的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。醋酸醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠 18g,加冰
7、醋酸 9.8ml,再加水稀释至1000ml, 即得。醋酸醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水 50ml 使溶解，用冰醋酸调节pH 值至 4.6，再加水稀释至100ml，即得。醋酸醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠 54.6g，加 1mol/L 醋酸溶液 20ml 溶解后，加水稀释至500ml，即得。用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lgC(NaAc)/C(HAc) （在此， C(HAc) 指醋酸的浓度， C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka 是醋酸的解离常数=1.8*10-5 （1.8 乘 10 的-5 次方），PKa=-lgKa=4.75， 将PH=5.5 代 入 ， 可
8、 得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通 常 我 们 配 制 时 会 使C(HAc)=0.1mol/L， 或是 C(HAc)=0.2mol/L等。 若是配制 C(HAc)=0.1mol/L， 则 C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46 克 量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL 。 将称好的醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL 水中溶解、 搅拌均匀即可。当然若想配制其它的浓度，也可照公式计算即可，通常缓冲溶液不能配的太稀，否则缓冲能力要下降，太浓的话又浪费试剂。苯二甲酸氢钾 -氢氧化钠缓冲液PH 0.1mol/LNaOH(ml) 0.2
9、mol/L 苯二甲酸氢钾 （ml）加水至 (ml) 4.0 0.40 25.00 100.00 4.2 3.65 25.00 100.00 4.4 7.35 25.00 100.00 4.6 12.00 25.00 100.00 4.8 17.50 25.00 100.00 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 2 页，共 7 页 - - - - - - - - - 专业资料整理完美 WORD格式5.0 23.65 25.00 100.00 5.2 29.75 25.00
10、100.00 5.4 35.25 25.00 100.00 5.6 39.70 25.00 100.00 5.8 43.10 25.00 100.00 6.0 45.40 25.00 100.00 6.2 47.00 25.00 100.00 0.2mol/L 苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24 小时的苯二甲酸氢钾20.44g 溶于水中，稀释至500ml。磷酸缓冲液（ 0.2mol/L ）PH 0.2mol/LNa2HPO4 (ml) 0.2mol/LNaH2PO4 (ml) PH 0.2mol/LNa2HPO4 (ml) 0.2mol/LNaH2PO4 (ml) 5 8 8.0
11、92.0 7.0 61.0 39.0 6.0 12.3 87.7 7.2 72.0 28.0 6.2 18.5 81.5 7.4 81.0 19.0 6.4 26.5 73.5 7.6 87.0 13.0 6.6 37.5 62.5 7.8 91.5 8.5 6.8 49.0 51.0 8.0 94.7 5.3 Na2HPO4 .2 H2O ,分子量 =178.05，0.2mol/L 溶液含 35.61g/L NaH2PO4 . 2 H2O ,分子量 =156.03，0.2mol/L 溶液含 31.21g/L NaH2PO4 . H2O,分子量 =138.03，0.2mol/L 溶液含 27.
12、6g/L Na2HPO4 .12 H2O,分子量 =358.22，0.2mol/L 溶液含 71.64g/L 磷酸盐缓冲液（ PBS ）配制方法0.01M PBS PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4 ， pH 7.2) PBS缓冲液（ pH7.27.4） ：NaCl 137mmol/L ，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L 称 7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和 1.8g K2HP
13、O4，溶于 800 ml 蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的pH 值至 7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4冰箱中即可。需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或 K 离子的浓度， Na 离子和 K 离子只是用来调节渗透压的。母液的配制：0.2M Na2HPO4：称取71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于1000ml 水0.2M NaH2PO4：称取31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于 1000ml 水各种浓度 PB(pH=7.4)的配制：先配 0.2M PB (pH=7.4， 100ml)： 取 19ml 0.2mol/L 的
14、 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。然后只需将 0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可，如：名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 3 页，共 7 页 - - - - - - - - - 专业资料整理完美 WORD格式0.1M PB（PH=7.4） ：取500ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。0.01M PB （ PH=7.4） ：取 50ml 0.2M PB，加水稀释至1000ml 即可。0.02M
15、PB （ PH=7.4） ：取 100ml 0.2 M PB，加水稀释至1000ml 即可。若需要NaCl的话，加入NaCl 至 0.9%（g/100ml ）即可。另：其它各种另PH 值的 0.2M PB（100ml) 配方：pH 0.2M NaH2PO4（ml）0.2M Na2HPO4（ml）5.7 93.5 6.5 5.8 92 8 5.9 90 10 6.0 87.7 12.3 6.1 85 15 6.2 81.5 18.5 6.3 77.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 37.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51 49 6.
16、9 45 55 7.0 38 62 7.1 33 67 7.2 28 72 7.3 23 77 7.4 19ml 81ml 7.5 16 84 7.6 13 87 7.7 10.5 90.5 7.8 8.5 91.5 7.9 7 93 8.0 5.3 94.7 0.01M 磷酸盐缓冲液（PBS ）配制方法称取 8g NaCl、 0.2g KCl 、1.44g Na2HPO4和 0.24g KH2PO4,溶于 800ml 蒸馏水中，用HCl 调节溶液的 pH 值至 7.4，最后加蒸馏水定容至1L 即可。在 15lbf/in2(1034 105Pa)高压下蒸气灭菌（至少 20 分钟），保存存于室温
17、或4冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或 K 离子的浓度， Na 离子和 K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100 u/ml 青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。PH 7.6 7.4 7.2 7.0 H2O 1000 1000 1000 1000 NaCl 8.5 8.5 8.5 8.5 Na2HPO4 2.2 2.2 2.2 2.2 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - -
18、 - - 第 4 页，共 7 页 - - - - - - - - - 专业资料整理完美 WORD格式NaH2PO4 0.1 0.2 0.3 0.4 根据经验来看， 新鲜配置的PBS搅匀后其 PH 值约在 7.2-7.4 之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH 值会明显改变（我亲自测过偏酸） 。所以做实验的同学可要注意了，PH 值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的 PBS ，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS缓冲液称取 NaCl 8g，KCl 0.2g
19、，Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g ，溶于 900ml 双蒸水中，用盐酸调 pH 值至 7.4，加水定容至1L，常温保存备用。PBST缓冲液取 300 l Tween-20 加入 PBS 100ml中，混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液， 工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH 在 6.5 左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。十倍稀释以后，PH 自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次 PH8.0的 PBS配方详细1. NaCl 137mmo
20、l/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L 2. 向烧杯中加入约800 ml 的去离子水，充分搅拌溶解。3. 滴加浓盐酸将pH 值调节至 8.0，然后加入去离子水将溶液定容至1 L。4. 高温高压灭菌后，室温保存。注意： 上述 PBS Buffer中无二价阳离子， 如需要，可在配方中补充1 mM CaCl2和 0.5 mM MgCl2 。0.05mol/L PBS(磷酸缓冲液Phosphate Buffer Solution ，PBS) 的配制：甲液： 0.05mol/L Na2HPO4 溶液：称取磷酸氢二钠9.465g 7.09
21、9g,加蒸馏水至 1000ml ; 乙液： 0.05mol/L KH2P04 溶液 : 称取磷酸二氢钾, 9.07g 6.803g,加蒸馏水至1000m1。将甲乙液分装在棕色瓶内，于4冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需 pH 的缓冲液 ,见下表 : pH 甲液 ml 乙液 mI 5.29 2.5 97.5 5.59 5.0 95.0 5.91 10.0 90.0 6.24 20.0 80.0 6.47 30.0 70.0 6.64 40.0 60.0 6.81 50.0 50.0 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - -
22、- - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 5 页，共 7 页 - - - - - - - - - 专业资料整理完美 WORD格式6.98 60.0 40.0 7.17 70.0 30.0 7.38 80.0 20.0 7.73 90.0 10.0 8.04 95.0 5.0 你要配制 pH=6.8 的 PBS ，可用甲、乙液各50ml 混合即可。硼酸缓冲液（ 0.2mol/L 硼酸盐）PH 0.05mol/L 硼砂（ml）0.2mol/L 硼酸（ml）PH 0.05mol/L 硼砂（ml）0.2mol/L 硼酸（ ml）7.4 1.0 9.0 8.2 3.5 6.5 7
23、.6 1.5 8.5 8.4 4.5 5.5 7.8 2.0 8.0 8.7 6.0 4.0 8.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0 硼砂 Na2B4O7.10H2O,分子量 =381.43,0.05mol/L 溶液 =0.2mol/L 硼砂含 19.07g/L 硼酸，分子量 =61.84,0.2mol/L 溶液含 12.37g/L 硼砂易失去结晶水，必须在带塞得瓶中保存；硼砂溶液也可以用半中和的硼酸溶液代替盐酸 -氯化钾缓冲液PH 0.1mol/LHCl(ml) 0.02mol/LKCl(ml) 加水至(ml) PH 0.1mol/LHCl(ml) 0.02mol/LKCl(ml)
24、加水至（ ml）1.1 94.56 2.70 100 1.7 23.76 38.10 100 1.2 75.10 12.45 100 1.8 18.68 40.60 100 1.3 59.68 20.15 100 1.9 14.98 42.50 100 1.4 47.40 26.30 100 2.0 11.90 44.05 100 1.5 37.64 31.20 100 2.1 9.46 45.03 100 1.6 29.90 35.00 100 2.2 7.52 46.25 100 0.02mol/LKCl 溶液：溶7.455g 氯化钾于水中，稀释至500ml 苯二甲酸氢钾 -盐酸缓冲液PH
25、 0.1mol/LHCl (ml) 0.02mol/L 苯二甲酸氢钾（ ml）加水至（mi）PH 0.1mol/LHCl (ml) 0.02mol/L 苯二甲酸氢钾（ ml）加水至（ mi）2.2 46.60 25.00 100 3.2 14.80 25.00 100 2.4 39.60 25.00 100 3.4 9.95 25.00 100 2.6 33.00 25.00 100 3.6 6.00 25.00 100 2.8 26.50 25.00 100 3.8 2.65 25.00 100 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - -
26、 - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 6 页，共 7 页 - - - - - - - - - 专业资料整理完美 WORD格式3.0 20.40 25.00 100 0.02mol/L 苯二甲酸氢钾溶液：称取在硫酸干燥器中干燥过24 小时额苯二甲酸氢钾20.44g溶于水中，稀释至500ml 磷酸二氢钾 -氢氧化钠缓冲液PH 0.1mol/LNaOH (ml) 0.2mol/L 磷酸二氢钾 (ml) 加水至（ml）PH 0.1mol/LNaOH (ml) 0.2mol/L 磷酸二氢钾 (ml) 加水至（ ml）5.8 3.66 25.00 100 7.0 29.54 25
27、.00 100 6.0 5.64 25.00 100 7.2 34.90 25.00 100 6.2 8.55 25.00 100 7.4 39.34 25.00 100 6.4 12.60 25.00 100 7.6 42.74 25.00 100 6.6 17.74 25.00 100 7.8 45.17 25.00 100 6.8 23.60 2500 100 8.0 46.85 25.00 100 0.2mol/L 磷酸二氢钾溶液：溶13.616g 磷酸二氢钾于水中，稀释至500ml 硼酸 -氯化钾 -氢氧化钠缓冲液PH 0.1mol/LNaOH(ml) 0.2mol/L 硼酸 -氯化
28、钾（ ml）加水至（ml）PH 0.1mol/LNaOH(ml) 0.2mol/L 硼酸 -氯化钾（ ml）加水至（ ml）7.8 2.65 25.00 100 9.0 21.40 25.00 100 8.0 4.00 25.00 100 9.2 26.70 25.00 100 8.2 5.90 25.00 100 9.4 32.00 25.00 100 8.4 8.55 25.00 100 9.6 36.85 25.00 100 8.6 12.00 25.00 100 9.8 40.80 25.00 100 8.8 16.40 25.00 100 10.0 48.90 25.00 100 0.02mol/L 硼酸 -氯化钾溶液：溶6.202g 硼酸和 7.456g 氯化钾于水中稀释至500ml 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 7 页，共 7 页 - - - - - - - - -
