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1、西南民族大学西南民族大学抗原抗体反应抗原抗体反应抗原抗体反应抗原抗体反应免疫学免疫学1西南民族大学西南民族大学抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原与相应抗体的特异性结合反应称为抗原抗体反应抗原抗体反应(antigen-antibody (antigen-antibody reaction)reaction)。 抗原抗体反应抗原抗体反应2西南民族大学西南民族大学抗原抗体反应原理抗原抗体反应原理 抗原抗体结合反应是抗原决定簇抗原决定簇和抗体分子抗体分子超变区超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力。这些弱结合力只能在极短距离内才能发生效应。3西南民族大学西南民族大学抗原抗体结合
2、力抗原抗体结合力 抗原和抗体的结合虽然是互补性，非共价键，特异性结合，抗原与抗体这种弱的结合力涉及下列几种分子间的作用力。 l. 静电引力静电引力2.2.范德华引力范德华引力3.3.氢键结合力氢键结合力4.4.疏水作用力疏水作用力4西南民族大学西南民族大学5西南民族大学西南民族大学 亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体转化为疏水胶体示意图亲水胶体亲水胶体疏水胶体疏水胶体转化转化NaClNaCl可见反应可见反应6西南民族大学西南民族大学抗原抗体反特点抗原抗体反特点 比例性比例性可逆性可逆性敏感性敏感性特异性特异性7西南民族大学西南民族大学 特异性示意图特异性示意图 8西南民族大学西南民族大学 比
3、例性示意图比例性示意图抗体过量抗体过量比例合适比例合适抗原的量抗原的量抗原过量抗原过量抗抗体体沉沉淀淀的的量量前带前带等价带等价带后带后带9西南民族大学西南民族大学 抗原抗体反应比例性的机制，可用网格学说加以说明。因为天然抗原大多是多价的，抗体至少为两价，当抗原与抗体在等价带结合时，相互交叉连接成具有立体结构的网格状复合体，形成肉眼可见的沉淀物。当抗原或抗体过剩时，由于过剩方的结合价得不到饱和，只能形成小网格复合物。 但是，当抗原或抗体为单价，不管抗原与抗体的量比关系是否合适，均不能出现可见反应现象。 10西南民族大学西南民族大学11西南民族大学西南民族大学抗体抗体混混有有S SP PA Ag
4、 g抗体抗体-SPAg-SPAg抗体抗体-SPAg-SPAg分分离离剂剂一一、抗抗原原抗抗体体结结合合二二、分分离离抗抗体体 可逆性示意图可逆性示意图抗体抗体12西南民族大学西南民族大学抗原抗体反应影响因素抗原抗体反应影响因素 1.抗原、抗体的自身因素的影响;2.电解质、酸碱度、温度及时间等实验环境因素的影响。13西南民族大学西南民族大学第四节第四节 抗原抗体类型抗原抗体类型1.可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应沉淀反应2.颗粒性抗原与相应抗体结合所发生的凝集反应凝集反应 3.抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应细胞溶解反应 4.细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应中和反应
5、5.免疫标记免疫标记的抗原抗体反应。14西南民族大学西南民族大学凝集反应凝集反应 类型：类型： 直接凝集反应直接凝集反应间接凝集反应间接凝集反应 间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验协同凝集试验协同凝集试验15西南民族大学西南民族大学1.凝集反应凝集反应直接凝集试验：直接凝集试验：颗粒性抗原在有电解颗粒性抗原在有电解质的参与下，直接与相应抗体结合出质的参与下，直接与相应抗体结合出现的凝集现象。现的凝集现象。16西南民族大学西南民族大学间接凝集试验：间接凝集试验：用人工方法将可溶性抗原用人工方法将可溶性抗原(或或 抗体）吸附或偶联于载体上，使之成为致敏抗体）吸附或偶联于载体上，使之成为致敏 载体颗粒
6、，再与相应抗体（或抗原）作用，载体颗粒，再与相应抗体（或抗原）作用， 在适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。在适宜电解质的参与下，出现的凝集现象。17西南民族大学西南民族大学载体载体可溶性抗原可溶性抗原致敏致敏致致敏敏颗颗粒粒NSNS凝凝集集颗颗粒粒 （正向）间接凝集试验（正向）间接凝集试验用特异性抗用特异性抗原致敏载体，原致敏载体，检测标本中检测标本中的相应的相应抗体抗体的方法。的方法。待测抗体待测抗体18西南民族大学西南民族大学 反向间接凝集试验反向间接凝集试验用特异性抗用特异性抗体致敏载体，体致敏载体，检测标本中检测标本中的相应的相应抗原抗原的方法。的方法。载体载体已知抗体已知抗体致敏致
7、敏致致敏敏颗颗粒粒NSNS凝凝集集颗颗粒粒待测抗原待测抗原19西南民族大学西南民族大学 间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验待测抗原待测抗原已知抗体已知抗体特异特异结合结合抗抗原原抗抗体体复复合合物物NSNS致敏颗粒致敏颗粒用抗原致敏载体及用抗原致敏载体及相应抗体作为诊断相应抗体作为诊断试剂，用于检测标试剂，用于检测标本中是否存在与致本中是否存在与致敏载体相同的抗原。敏载体相同的抗原。无凝集颗无凝集颗粒为粒为阳性阳性20西南民族大学西南民族大学 间接凝集抑制试验间接凝集抑制试验待测抗原待测抗原已知抗体已知抗体无结合无结合抗抗原原抗抗体体分分散散NSNS致敏颗粒致敏颗粒有凝集颗有凝集颗粒为粒为阴性阴
8、性21西南民族大学西南民族大学 原理原理抗球蛋白试验抗球蛋白试验(Coombs(Coombs试验试验) ) 机体受某些抗原刺激后产生机体受某些抗原刺激后产生“不完全抗体不完全抗体”，其与相应抗原结合后不出现可见的凝集现象，其与相应抗原结合后不出现可见的凝集现象，但能封闭抗原决定簇，使其不能再与完全抗体但能封闭抗原决定簇，使其不能再与完全抗体结合。结合。类型类型22西南民族大学西南民族大学 原理原理协同凝集试验协同凝集试验 SPA能与血清中的能与血清中的IgG类抗体的类抗体的Fc段非特异段非特异性结合，而两个性结合，而两个Fab段暴露在葡萄球菌菌体表段暴露在葡萄球菌菌体表面，仍然保持正常的抗体活性，与特异性抗面，仍然保持正常的抗体活性，与特异性抗原相遇时，能出现特异的凝集现象。原相遇时，能出现特异的凝集现象。23西南民族大学西南民族大学 原理图原理图IgGSPASPA- IgG 待测抗原待测抗原SPA- IgG-待测抗原待测抗原凝集颗粒凝集颗粒混混合合 加入加入24西南民族大学西南民族大学实验材料1.待测血清样品2.CRP乳胶试剂3.反应玻片4.50ul加样枪25西南民族大学西南民族大学实验方法 1.反应玻片上滴加稀释血清样品50ul2.滴加CRP乳胶试剂一滴，轻轻摇动5分钟26
