《实验四尿肌酐的定量测定（碱性苦味酸法）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验四尿肌酐的定量测定（碱性苦味酸法）（9页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 实验四实验四 尿肌酐的定量测定尿肌酐的定量测定 ( (碱性苦味酸法碱性苦味酸法) )运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 复习和巩固尿肌酐的生成机理及其生化评定的意义复习和巩固尿肌酐的生成机理及其生化评定的意义复习和巩固尿肌酐的生成机理及其生化评定的意义复习和巩固尿
2、肌酐的生成机理及其生化评定的意义学习学习学习学习尿肌酐测定方法尿肌酐测定方法尿肌酐测定方法尿肌酐测定方法 掌握尿肌酐系数指标的计算及其在运动实践中的应用掌握尿肌酐系数指标的计算及其在运动实践中的应用掌握尿肌酐系数指标的计算及其在运动实践中的应用掌握尿肌酐系数指标的计算及其在运动实践中的应用。 一、一、 实验目的实验目的 运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 无蛋白尿液中的肌酐与碱性苦味酸盐反应，经无蛋白尿液中的肌酐与碱性苦味酸盐反应，经无蛋白尿液中
3、的肌酐与碱性苦味酸盐反应，经无蛋白尿液中的肌酐与碱性苦味酸盐反应，经“ “JaffeJaffe” ”氏反应生成红色的苦味酸肌酐，其生成量与肌酐含量成正氏反应生成红色的苦味酸肌酐，其生成量与肌酐含量成正氏反应生成红色的苦味酸肌酐，其生成量与肌酐含量成正氏反应生成红色的苦味酸肌酐，其生成量与肌酐含量成正比，用比色法即可求出尿中肌酐含量。比，用比色法即可求出尿中肌酐含量。比，用比色法即可求出尿中肌酐含量。比，用比色法即可求出尿中肌酐含量。 二、实验原理二、实验原理 肌酐肌酐肌酐肌酐 + + 碱性苦味酸碱性苦味酸碱性苦味酸碱性苦味酸 Jaffe氏反应 苦味酸肌酐（红色复合物）苦味酸肌酐（红色复合物）苦
4、味酸肌酐（红色复合物）苦味酸肌酐（红色复合物） （520nm处有一吸收峰） 运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 三、试剂三、试剂饱和苦味酸溶液：称取苦味酸饱和苦味酸溶液：称取苦味酸饱和苦味酸溶液：称取苦味酸饱和苦味酸溶液：称取苦味酸15g15g置于大烧杯中，加蒸馏水至置于大烧杯中，加蒸馏水至置于大烧杯中，加蒸馏水至置于大烧杯中，加蒸馏水至1000ml1000ml，加热助溶，加热助溶，加热助溶，加热助溶，冷却至室温，瓶底若有结晶析出，表示已饱和，取
5、上层清夜备用，储存在棕色瓶冷却至室温，瓶底若有结晶析出，表示已饱和，取上层清夜备用，储存在棕色瓶冷却至室温，瓶底若有结晶析出，表示已饱和，取上层清夜备用，储存在棕色瓶冷却至室温，瓶底若有结晶析出，表示已饱和，取上层清夜备用，储存在棕色瓶中。中。中。中。10%10%氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液氢氧化钠溶液碱性苦味酸试剂：将饱和苦味酸和碱性苦味酸试剂：将饱和苦味酸和碱性苦味酸试剂：将饱和苦味酸和碱性苦味酸试剂：将饱和苦味酸和10%10%氢氧化钠溶液按氢氧化钠溶液按氢氧化钠溶液按氢氧化钠溶液按5:15:1体积比混合，临用时配体积比混合，临用时配体积比混合，临用时配体积比混合，临用时配制。制。
6、制。制。肌酐标准贮存液（肌酐标准贮存液（肌酐标准贮存液（肌酐标准贮存液（1ml=1mg1ml=1mg）：称取纯肌酐）：称取纯肌酐）：称取纯肌酐）：称取纯肌酐0.1g0.1g置于置于置于置于100ml100ml容量瓶中，加容量瓶中，加容量瓶中，加容量瓶中，加10%10%盐盐盐盐酸溶解稀释至刻度。此溶液在酸溶解稀释至刻度。此溶液在酸溶解稀释至刻度。此溶液在酸溶解稀释至刻度。此溶液在4 4冰箱内可以长期保存。冰箱内可以长期保存。冰箱内可以长期保存。冰箱内可以长期保存。肌酐标准应用液（肌酐标准应用液（肌酐标准应用液（肌酐标准应用液（1ml=0.1mg1ml=0.1mg）：准确量取贮存液）：准确量取贮存
7、液）：准确量取贮存液）：准确量取贮存液10ml10ml于于于于100ml100ml的容量瓶中，加的容量瓶中，加的容量瓶中，加的容量瓶中，加入入入入10%10%盐酸盐酸盐酸盐酸10ml10ml，再加蒸馏水至刻度。，再加蒸馏水至刻度。，再加蒸馏水至刻度。，再加蒸馏水至刻度。 此溶液可以在此溶液可以在此溶液可以在此溶液可以在4 4冰箱内保存冰箱内保存冰箱内保存冰箱内保存1 1周。周。周。周。运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 收集受试者收集受试者收集受
8、试者收集受试者24h24h24h24h尿液，混匀后取尿液，混匀后取尿液，混匀后取尿液，混匀后取0.1ml0.1ml0.1ml0.1ml置大试管中，加置大试管中，加置大试管中，加置大试管中，加9.9ml9.9ml9.9ml9.9ml蒸馏水，摇匀。蒸馏水，摇匀。蒸馏水，摇匀。蒸馏水，摇匀。四、实验操作四、实验操作 1 1、制备稀释尿液（、制备稀释尿液（、制备稀释尿液（、制备稀释尿液（1:1001:100） 2 2、尿肌酐浓度的测定、尿肌酐浓度的测定、尿肌酐浓度的测定、尿肌酐浓度的测定 取取取取3 3 3 3只大试管，编号，按表只大试管，编号，按表只大试管，编号，按表只大试管，编号，按表1 1 1
9、1操作：操作：操作：操作：运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 空白管空白管空白管空白管标准管标准管标准管标准管测定管测定管测定管测定管肌酐标准应用液肌酐标准应用液肌酐标准应用液肌酐标准应用液（mlmlmlml）0.50.50.50.55 5 5 50.20.20.20.20.20.20.20.20.20.20.20.25.05.05.05.04.54.54.54.51 1 1 11 1 1 11 1 1 1充分混匀后，放置充分混匀后，放置充分混匀
10、后，放置充分混匀后，放置10min10min10min10min，以空白管调零，以空白管调零，以空白管调零，以空白管调零，520nm520nm520nm520nm波长比色波长比色波长比色波长比色表表1 1 尿肌酐的测定尿肌酐的测定运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 计算公式： ODOD测测测测 尿肌酐（尿肌酐（尿肌酐（尿肌酐（mg%mg%）= - 200 = - 200 OD OD标（标（标（标（0.120.12） 2424小时尿肌酐量（小时尿肌
11、酐量（小时尿肌酐量（小时尿肌酐量（mgmg） 尿肌酐系数尿肌酐系数尿肌酐系数尿肌酐系数= - = - 体重（体重（体重（体重（KgKg）五、实验结果五、实验结果 运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 显色反应显色反应显色反应显色反应10-1510-1510-1510-15分钟内比色，如果时间过长，尿液中其分钟内比色，如果时间过长，尿液中其分钟内比色，如果时间过长，尿液中其分钟内比色，如果时间过长，尿液中其它物质能与碱性苦味酸起非特异性反应而影响结果
12、。它物质能与碱性苦味酸起非特异性反应而影响结果。它物质能与碱性苦味酸起非特异性反应而影响结果。它物质能与碱性苦味酸起非特异性反应而影响结果。 如测定管显色过深，应再将稀释尿液后测定，其结果如测定管显色过深，应再将稀释尿液后测定，其结果如测定管显色过深，应再将稀释尿液后测定，其结果如测定管显色过深，应再将稀释尿液后测定，其结果乘以稀释倍数。乘以稀释倍数。乘以稀释倍数。乘以稀释倍数。六、注意事项六、注意事项运动生物化学实验课件运动生物化学实验课件陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心陕西师范大学体育学院实验教学示范中心 七、指标
13、应用七、指标应用正常人尿肌酐日排出量：男子正常人尿肌酐日排出量：男子正常人尿肌酐日排出量：男子正常人尿肌酐日排出量：男子1.01.8g1.01.8g，女子，女子，女子，女子0.71.0g0.71.0g。24h24h每千克每千克每千克每千克体重排出的尿肌酐毫克数称尿肌酐系数。正常人尿肌酐系数为：男子体重排出的尿肌酐毫克数称尿肌酐系数。正常人尿肌酐系数为：男子体重排出的尿肌酐毫克数称尿肌酐系数。正常人尿肌酐系数为：男子体重排出的尿肌酐毫克数称尿肌酐系数。正常人尿肌酐系数为：男子1832mg/kg1832mg/kg体重，女子体重，女子体重，女子体重，女子10 25mg/kg10 25mg/kg体重体
14、重体重体重尿肌酐日排出量与肌肉中磷酸肌酸和肌酸的含量有关，运动员尿肌酐尿肌酐日排出量与肌肉中磷酸肌酸和肌酸的含量有关，运动员尿肌酐尿肌酐日排出量与肌肉中磷酸肌酸和肌酸的含量有关，运动员尿肌酐尿肌酐日排出量与肌肉中磷酸肌酸和肌酸的含量有关，运动员尿肌酐系数高于常人，一般为系数高于常人，一般为系数高于常人，一般为系数高于常人，一般为2540mg/kg2540mg/kg体重。不同项目的运动员其系数体重。不同项目的运动员其系数体重。不同项目的运动员其系数体重。不同项目的运动员其系数也不同，力量、速度项目运动员尿肌酐系数可高达也不同，力量、速度项目运动员尿肌酐系数可高达也不同，力量、速度项目运动员尿肌酐
15、系数可高达也不同，力量、速度项目运动员尿肌酐系数可高达3642mg/kg3642mg/kg体重，体重，体重，体重，且尿肌酐的日排出量与运动成绩高度相关。且尿肌酐的日排出量与运动成绩高度相关。且尿肌酐的日排出量与运动成绩高度相关。且尿肌酐的日排出量与运动成绩高度相关。在运动员机能评定中，尿肌酐系数可作为力量素质与速度素质的评定、在运动员机能评定中，尿肌酐系数可作为力量素质与速度素质的评定、在运动员机能评定中，尿肌酐系数可作为力量素质与速度素质的评定、在运动员机能评定中，尿肌酐系数可作为力量素质与速度素质的评定、选材、训练效果的检测指标，尿肌酐系数高是肌肉机能好的反映，反选材、训练效果的检测指标，尿肌酐系数高是肌肉机能好的反映，反选材、训练效果的检测指标，尿肌酐系数高是肌肉机能好的反映，反选材、训练效果的检测指标，尿肌酐系数高是肌肉机能好的反映，反之，可能是肌肉机能下降的表现。之，可能是肌肉机能下降的表现。之，可能是肌肉机能下降的表现。之，可能是肌肉机能下降的表现。
