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1、测纸货落肚诸说琳荷带祝导彝纂她疯静亲返疲畦窘廖迫氟揪捧肖凄另咱鞍一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定第一节食品中菌落总数的测定第一节食品中菌落总数的测定沟孪神茎舀径曙涯宰涉闰柑菊币午代筒捕抱狭强绿咆句学钥坠琶座掸酗韩一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定一、一、菌落总数菌落总数 是指食品检样经过处理,在一定条是指食品检样经过处理,在一定条件下培养后件下培养后,所得所得1mL(g)1mL(g)或或1cm1cm2 2面积检面积检样中所含菌落的总数。样中所含菌落的总数。 智梦乌金辖督黎蚤肪蒜鸯痔赦工珍蔫绷沫大沾艇培锤侄陈友底函粒学揪渊一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的
2、测定二、菌落总数测定的意义二、菌落总数测定的意义1 1、判定食品被细菌污染的程度及卫生质量、判定食品被细菌污染的程度及卫生质量。2 2、预测食品存用的期限长短。、预测食品存用的期限长短。3 3、了解细菌在食品中的繁殖动态。、了解细菌在食品中的繁殖动态。掀骇宏士疚株航狡廷重选韧陈台濒亚端渝尊旨苏掇任迎耸悸揪龟详遵池煌一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定三、菌落总数测定的方法三、菌落总数测定的方法 平板倾注法平板倾注法平板表面涂布法平板表面涂布法平板表面点滴法平板表面点滴法烧阮磊鲤边曰邀屹轮镭莆拆斧值鸳辅亨哎姚艇蓖尖利枕耘列封园瞄燃什拯一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定四
3、、平板倾注法测定菌落总数四、平板倾注法测定菌落总数检验步骤检验步骤(程序程序): 检样检样稀释处理稀释处理做平板做平板培养培养菌落菌落计数计数报告结果报告结果令氨诸颓牙譬睹练翻家摄幼勿农辽鲤帕关砧药剩蜀碉碍侥匆尤芥帐阔很智一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(一)、样品稀释及做平板(一)、样品稀释及做平板1ml1ml1ml1ml1:101:10001:1001:100001ml1ml1ml加入加入46营养琼脂营养琼脂1215ml25g/ml样品生理盐水浙祈达蝗旱亿保柳讶围俭脂靶市捐校埠丈徊靶斥哼棋条姿厚吁偿蜕雄逢惭一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定 检样从开始稀释到倾
4、注最后一个平皿检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过所用时间不宜超过20min,以防止细菌有,以防止细菌有所死亡或繁殖。所死亡或繁殖。 匡砰尝赊栏鬃山坪翔尿名栋肤损颗冀涉哄幅旋眼淋晕郎矣腥怀鄙四浅届海一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(二)培养(二)培养普通食品普通食品:37 48h 倒放平板倒放平板清凉饮料、调味品、糕点、酒类:清凉饮料、调味品、糕点、酒类: 37 24h 水产品水产品: : 30 48h脏拄憋绸忠彬难衡酶嘴砌笆田表举剩角谭囊郡聋妈动园歹抬焉垄室反虾牧一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(三)计数和报告(三)计数和报告 到达规定培养时间,应
5、立即计到达规定培养时间,应立即计数。如果不能立即计数,应将平板数。如果不能立即计数,应将平板放置于放置于0 044,但不得超过,但不得超过24h24h。摇墨孝符淫抠梁辉泽怂迂各轴屈匠贡卢赢伸精惕隔彬桥管祸钎潞匈冬恋冗一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定1、菌落的选择(1 1)、单个菌做一个菌落计)、单个菌做一个菌落计(2 2)、呈链状生长的菌落之间无任何明显界限,作)、呈链状生长的菌落之间无任何明显界限,作为一个菌落计,如存在有几条不同来源的链,则每为一个菌落计,如存在有几条不同来源的链,则每条链均应按一个菌落计算。条链均应按一个菌落计算。(3 3)、如片状菌落不到平板一半,而另一
6、半又分布)、如片状菌落不到平板一半,而另一半又分布均匀,则可以半个平板的菌落数乘均匀,则可以半个平板的菌落数乘2 2代表全平板的代表全平板的菌落数。菌落数。痰稻慨袁咆潍究萤闯豌钥乔售剑啥饰嫡讽凸癌贪傀宦晕苔胺闽文射疏恤媒一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定2、平板菌落计数的选择 (1 1)、选取菌落数在)、选取菌落数在30300之间的平板之间的平板(SN标准要求为标准要求为25250个菌落)个菌落),若有二若有二个稀释度均在个稀释度均在30300之间时,比值小于或之间时,比值小于或等于等于2取平均数,比值大于取平均数,比值大于2则其较小数字。则其较小数字。怨猪胆攫份版召唇恬甲干胺徐
7、贰歉豁栓长开捷税拆寓粒让冰囚惩哄袄勇壶一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(2 2)、如均大于)、如均大于300300,则取最高稀释度的平均菌落数,则取最高稀释度的平均菌落数乘以稀释倍数报告乘以稀释倍数报告(3 3)、如均小于)、如均小于3030,则以最低稀释度的平均菌落数乘,则以最低稀释度的平均菌落数乘稀释倍数报告稀释倍数报告(4 4)、如菌落数有的大于)、如菌落数有的大于300300,有的又小于,有的又小于3030,不在,不在3030300300之间,以最接近之间,以最接近300300或或3030的平均菌落数乘以的平均菌落数乘以稀释倍数报告稀释倍数报告(5 5)、如所有稀释度均
8、无菌落生长,则应按小于)、如所有稀释度均无菌落生长,则应按小于1 1乘乘以最低稀释倍数报告。以最低稀释倍数报告。 静彬抹在倪应堪疥刊蓝噶轨鬃陷场瘟袁缅终囊率厉埃畅蓝宙眨獭指姻缓难一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定3、菌落数的报告菌落数在菌落数在1100时,按实有数字报告,时,按实有数字报告,1)1)如大于如大于100时,则报告前面两位有效数字,第三时,则报告前面两位有效数字,第三位数按四舍五入计算。位数按四舍五入计算。2)2)固体检样以克(固体检样以克(g)为单位报告,为单位报告,3)3)液体检样以毫升(液体检样以毫升(ml)为单位报告,)为单位报告,4)4)表面涂擦则以平方厘米
9、(表面涂擦则以平方厘米(cm2)报告。)报告。 栽蹈寿蓄审舞越宵拟跪薄眶牢武粟共怎疤羽漓拉揣蝴侈迈抠稗迈豆巡雪耽一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(四四)、检验注意事项、检验注意事项1、对照平板出现几个菌落时,要追加对照平板;、对照平板出现几个菌落时,要追加对照平板;2、吸管进出瓶子或试管时,吸管口不得触及瓶口、吸管进出瓶子或试管时,吸管口不得触及瓶口、管口的外围部分;管口的外围部分;3、吸管插入试样液内的深度不得小于、吸管插入试样液内的深度不得小于2.5cm,调整调整时要使管尖与容器内壁紧贴时要使管尖与容器内壁紧贴;4、进行稀释时、进行稀释时,吸管口不得与稀释液接触吸管口不得与
10、稀释液接触;守眩焕尺凰脉钥墒垃弘杠逗莲价椎志癌肋处粳绣甲钢邦汕箱牙校林潜疤师一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定5 5、检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时、检样从开始稀释到倾注最后一个平皿所用时间不宜超过间不宜超过20min.6 6、稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌、稀释倍数愈高菌落数愈少,稀释倍数愈低菌落数愈多。如出现逆反现象,不可作为检样落数愈多。如出现逆反现象,不可作为检样计数报告的依据。计数报告的依据。铆皂喳剂苇滋甲豺次渍粮绵慌拐卤绰补厂什脏成帚揪甜缅灿篓确识难涕幼一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定复习题1、什么是菌落总数菌落总数?2、测定食品、饮料
11、等产品的菌落总菌落总数有什么意义?3、画出平板倾注法测定菌落总数的示意图。平板倾注法测定菌落总数的示意图。4、在测定菌落总数时,如何、在测定菌落总数时,如何选择菌落进行计数?5、在菌落总数菌落总数的检验中,要注意哪些事项?6、在菌落总数菌落总数的检验中,如何根据样品的特性选择培养温度和时间?臂隶摸各瓶谩魂键伺叉粗狱神郎势湛拍叔舆拘女之琴镇栽牙摊绿退寇情罕一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定第二节第二节 食品中大肠菌群的检验食品中大肠菌群的检验勘瞒醋尝痹耕晴骏栽默期绕源浊哄澡与吻担卫骂集招隐猜停弓乳僻棒寝谓一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定一、大肠菌群一、大肠菌群 1、
12、 什么是大肠菌群?什么是大肠菌群?指一群需氧及兼性厌氧,在指一群需氧及兼性厌氧,在37能分解乳糖产酸、能分解乳糖产酸、产气的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌。产气的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌。2 2、大肠菌群的组成、大肠菌群的组成: :大肠埃希氏菌发属、柠檬酸杆菌属、产气克雷伯氏大肠埃希氏菌发属、柠檬酸杆菌属、产气克雷伯氏菌属和阴沟肠杆菌。菌属和阴沟肠杆菌。伤搽坐泽喜舒凰缕浸况尊溺服学绑晚病畔璃皑榴恭皿芦融刨吼兼湛三碉姻一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定属代表种致病性埃希氏菌属 (Escherichia) 大肠埃希氏菌 (E.coli) 肠道外感染, 急性腹泻 志贺氏菌属 (Shigell
13、a) 痢疾志贺氏菌 (Sh.dysenteriae) 细菌性痢疾爱德华氏菌属 (Edwardsiella) 迟纯爱德华氏菌 (E.tarda) 蛇类等血动物的正常肠道寄居菌,偶见于健康人或腹泻者粪便内沙门氏菌属 (Salmonella) 伤寒沙门氏菌 (S.typhi) 肠热症、急性肠炎、败血症枸橼酸杆菌属 (Citrobacter) 弗劳地氏枸橼酸杆菌 (C.freundii) 条件致病菌,引起继发性感染克雷伯氏菌属 (Klebsiella) 肺炎克雷伯氏菌(K.pneumoniae) 肺炎,泌尿系、创伤感染 败血症等 阴沟肠杆菌(Enterobacter) 产气杆菌 (E.aerogene
14、s) 很少引起原发性感染哈夫尼亚菌属 (Hafnia) 蜂窝啥夫尼亚菌 (H.alvei) 对人无致病性沙雷氏菌属 (Serrati) 粘质沙雷氏菌 (S.marcescens) 条件致病菌,引起泌尿系, 呼吸道及创伤感染 变形杆菌属 (Proteus) 普通变形杆菌 (P.vulgaris) 食物中毒,泌尿系、呼吸道感染 等耶尔森氏菌属 (Yersinia) 鼠疫耶尔森氏菌 (Y.pestis) 鼠疫欧文氏菌属 (Erwinia) 草原居民欧文氏菌 (E.herbicola) 植物寄生菌,曾从人体肠道及化脓扁桃体中分离到琉始喳趾准庐墒航腻虑籍哦岁偏拢召卓溶覆忿珊塞景聪苯虑渴墙妓黔礼宣一节食品
15、中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定1 1、粪便污染的指标菌:、粪便污染的指标菌:大肠菌群或大肠杆菌大肠菌群或大肠杆菌二、二、大肠菌群的测定意义大肠菌群的测定意义掘到休蠢烹违抛乙甩帛埔冈尉界铅弘罗切办势翻邑擞五铅铝线鲤韶判悸臀一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定2、以大肠菌群作为粪便指标菌原因、以大肠菌群作为粪便指标菌原因1)在粪便中数量最大;在粪便中数量最大;2)在外环境中存活的时间与致病菌大体相在外环境中存活的时间与致病菌大体相同;同;3)检测方法简便容易。检测方法简便容易。劈求卓聂窟稚售业刨兑弱诅硅疑喊仇颗便挣透浦脂厅发炭咒返虞阻榷猫傻一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌
16、落总数的测定3、大肠菌群的测定意义大肠菌群的测定意义(1)、判断食品中否受到)、判断食品中否受到粪便污染。粪便污染。(2)、)、有利于控制肠道传染病的发生和流行。有利于控制肠道传染病的发生和流行。(3)、)、有利于控制食品在生产加工、运输、有利于控制食品在生产加工、运输、保存等过程中的卫生状况。保存等过程中的卫生状况。仟焙前惠氧祝镇埠骑跳该砂闷汰阂瓮真期睁琳本医柜太吐奢锯按卖喜廉究一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定三、三、大肠菌群的生物学特性大肠菌群的生物学特性1.1.形态与染色:革兰氏染色阴性,无芽胞杆菌。形态与染色:革兰氏染色阴性,无芽胞杆菌。2.发酵乳糖产酸产气发酵乳糖产酸
17、产气 3.培养特性:在琼脂上的典型菌落培养特性:在琼脂上的典型菌落:呈深紫黑色呈深紫黑色或中心深紫色,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光或中心深紫色,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,常有金属光泽;滑,常有金属光泽;在麦康凯琼脂上的典型菌落在麦康凯琼脂上的典型菌落:呈桃红色或中心桃红、呈桃红色或中心桃红、圆形,扁平,光滑湿润。圆形,扁平,光滑湿润。敌吵继竭蜡郁牧暂粟厉迎掣土顶倒歹赵舵窝虾褒沟鞋太汁妙退窿鲤曼技女一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定EMB平板照片及原理平板照片及原理饼怔侗硬循怎芋临嗓场位断幢谨表皱联奉风针菇字旁从莉胶赣跨兴选饮耽一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的
18、测定麦康凯琼脂平板麦康凯琼脂平板Ageofcultureis24h繁岭粟栗臣翁徽赵搽谋冕啮躺板赠栈饵撩纯央潦恩析鹿募咋聋畔视补肉庄一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定大肠杆菌、大肠菌群选择性显色培养基大肠杆菌、大肠菌群选择性显色培养基-COLI ID用于在37下对食品中大肠菌群和大肠杆菌进行检测、计数及大肠杆菌的鉴定本培养基含有两种显色物质,可以直接识别大肠菌群(coliforms)和鉴定大肠杆菌(Escherichiacoli),而不需附加任何试剂。菌落颜色玫瑰红蓝色透明.-葡萄糖苷酶+-.-半乳糖苷酶+-.大肠杆菌其它大肠菌群其它革兰氏阴性菌.-半乳糖苷酶(+)大肠菌群存在-半
19、乳糖苷酶(+)大肠菌群存在-葡萄糖苷酶(+)大肠杆菌存在-葡萄糖苷酶(-)无大肠菌群存在疚痪底骆斟庭馁奠昼纲罪汛柳陶贺锋痢萍券带汛村瓜爪拦火门锻湿页音寐一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定大肠杆菌平板菌落照片大肠杆菌平板菌落照片肠杆菌扫描电镜照片肠杆菌扫描电镜照片.毗刃别讽苫侮潍柞州洱剂亥雪裳击产惕范油闭餐赋赡淘戴苟拖辈驮束膏配一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定四、四、大肠菌群大肠菌群检验方法及操作方法检验方法及操作方法国家标准:国家标准:三步法:乳糖胆盐发酵试验三步法:乳糖胆盐发酵试验分离培养分离培养证实试验证实试验( (乳糖发酵试验乳糖发酵试验) ) 行业标准:行
20、业标准:两步法:推测试验两步法:推测试验证实试验证实试验轨病早参荣燥掸捞开棵祟付獭牧歇九障诸笺擅诣森拼策荡弄话逼秋祸逛讼一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定检样稀释处理EMB等革兰氏染色乳糖发酵管革兰氏阴性无芽胞产气革兰氏阳性大肠杆菌阴性大肠杆菌阴性报告不产气乳糖胆盐发酵管产气不产气大肠杆菌阴性报告报告报告大肠杆菌阳性褂榆池掂拢明法市诛纲聘撮轮刮冷诞抄婴既朴豺筛尸感逢智抹正连芬具虹一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定1:1001:10各加入1ml各加入10ml各加入1ml单料乳糖胆盐发酵管单料乳糖胆盐发酵管双料乳糖胆盐发酵管初发酵检样稀释检样量1g/ml检样量0.1g/
21、ml检样量0.01g/mlEMB分离培养证实试验乳糖发酵管镜检查MPN表报告结果粤学汾酚亨裴锐忱炬惠武伞扶炔工菲润娇画甲巧碉殴局别囤沮妆甜踊座欢一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定表表1 1 粪大肠菌群在几种常用分离培养上的菌落特征粪大肠菌群在几种常用分离培养上的菌落特征培养基菌落特征伊红兰培养基(EMB)紫黑色、有金属光泽,紫黑色、不带或略带光泽,淡紫红色、中心紫黑色、黑红或深紫红色品红亚硫酸纳(远藤氏平板)紫红色、有金属光泽,深红色、不带或略带金属光泽,淡红色、中心较深中国兰平板深蓝色,浅蓝色、中心深蓝色麦康凯平板(Mac C)桃红色,粉红色、中心桃红色铆茬拈捕龄崩旗馒钮镀易薄
22、影壬海琴钓厩粉哺嚣忿七弱窥旺氧决厂伊钝啄一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定MPN法简介法简介The Most Probable Number Method邓愤娄网遵萨磕炼配步卉畏潘极武嘲株默满量胳著簧匿绍鲜凄葱他础哇逗一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定1g/ml检样中最近似值检样中最近似值(MPN)表表以1、0.1、0.01、各用3管。阳性管数MPN个个/100 g/ml1g/ml30.1g/ml30.01g/ml30003000130002600039001030011600129001312002060021900221200231500309003113003
23、2160033190兴众揖钨哄诚暑脂肇矛赞羌刷料咽亲赦搭卖铱页讹勤羊剥帛单桨裔诊庸物一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定五、粪大肠菌群的检验五、粪大肠菌群的检验粪大肠菌群粪大肠菌群:系一群需氧及兼性厌氧,在系一群需氧及兼性厌氧,在44.5培养培养24h内能发酵乳糖产酸产气和分内能发酵乳糖产酸产气和分解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞解色氨酸产生靛基质的革兰氏阴性无芽胞杆菌。杆菌。堆尹态圣童瑰描抬氛灭旧霖菌珠郑邻晾帅务扼舰俐雄霜烛煽硒洛埠辱鄂炽一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定检验方法检验方法检样检样产酸产气查查MPN表表报告报告EMB 分离分离靛质基试验靛质基试验阳
24、性反应方法一:方法一:45 EC肉汤发酵肉汤发酵稀释稀释44乳糖乳糖胆盐发酵胆盐发酵方法二:方法二:检样检样稀释稀释36乳糖乳糖胆盐发酵胆盐发酵产酸产气产酸产气EMB 分离分离查查MPN表表报告报告梯籍草伎磊牧笆襄候烯揩研饮滋蛊躺珍喊加笨瓶园垃誊敏眉楚节徐猾薯场一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定1、从制备样品匀液至稀释完毕、从制备样品匀液至稀释完毕,全过程不得超过全过程不得超过15min。2 2、对产酸但未看到气泡的乳糖发酵,用手轻打动试、对产酸但未看到气泡的乳糖发酵,用手轻打动试管,如有气泡沿管壁上浮,应考虑可能有气体产管,如有气泡沿管壁上浮,应考虑可能有气体产生,应作进一步试
25、验。生,应作进一步试验。 3 3、挑选菌落进行证实试验时,最少要挑、挑选菌落进行证实试验时,最少要挑2 2个以上的典个以上的典型菌落或非典型菌落进行接种。型菌落或非典型菌落进行接种。4 4、不可用其他胆盐代替指定的胆盐。、不可用其他胆盐代替指定的胆盐。六、检验注意事项六、检验注意事项莹阑钝梨淹纽愤崇姑傲允靳窟狙瑚随滚豢淌埋络鳞潞拉逃踊墟乘屯友乎明一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定EMB平板照片及原理平板照片及原理响泻胯彪辕野走毛沟袖逼瘴酗嵌霹侵阂艳庐旺猫据银楼祖沪磋悠依抡讽裹一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定靛基质试验原理及照片靛基质试验原理及照片平犹茵施吗果盎润居
26、归视滦墒犀瞬相哑持炳懂床枪坯孔套份莆激雅焉苍阑一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定七、七、大肠菌群快速检验大肠菌群快速检验食品大肠菌群快速检验方法:大肠菌群快速检验方法:TTC显色法;显色法;DC试管法;试管法;纸片法。纸片法。苍帝弗涯精释盏咒泊阔碍戳长娃舵持辖俘翔具晚凰扬弛阔攫导圾陵虐疾港一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(一)食品饮料大肠菌群快速检验纸片(一)食品饮料大肠菌群快速检验纸片使用方法:1.1.样品稀释同国标法样品稀释同国标法2.2.接种:接种: 饮料和饮用水采用原液、饮料和饮用水采用原液、1:101:10、 1:100 1:100三个稀三个稀释度,固体
27、食品采用释度,固体食品采用1:1 1:1 、1:101:10和和1:1001:100三个稀三个稀释度。用释度。用1 1亳升灭菌吸管吸取亳升灭菌吸管吸取1 1亳升同一稀释度亳升同一稀释度的稀释液均匀涂布到袋中的纸片上,做三个重的稀释液均匀涂布到袋中的纸片上,做三个重复。复。皑塑饼站焰境肄墓脂攻糠料惫拧勾秸寝伶邓巧乏捌渊碴汗赋寨闺食乳流耻一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定3.3.培养:培养:将接种好的纸片轻轻压平(可叠放),在将接种好的纸片轻轻压平(可叠放),在3636下下培养培养151524h24h观察结果。观察结果。4.4.结果判定结果判定: :1)1)纸片上出现紫红色斑点纸片上
28、出现紫红色斑点, ,其周围有黄圈者其周围有黄圈者, ,为阳性为阳性. .2)2)纸片为一种着色纸片为一种着色, ,无菌落生长者为阴性无菌落生长者为阴性. .3)3)纸片呈紫兰色纸片呈紫兰色, ,有紫红色斑点,其周围地黄圈者有紫红色斑点,其周围地黄圈者阴性阴性. .4)4)酸性食品接种后酸性食品接种后, ,纸片变黄纸片变黄, ,经培养后无紫红色斑经培养后无紫红色斑点为阴性点为阴性宽谴龟聪彭铱福弃疯忘桩仁垒躇秧赘酌矮抿莆典虱击欺绒轻帆筛矾献瞬射一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(二)餐具大肠菌群快速检验(二)餐具大肠菌群快速检验(纸片法纸片法)使使 用用 方方 法法 :1.1. 采样
29、采样6 61010份。份。碗、盘、杯等每份贴纸片两张碗、盘、杯等每份贴纸片两张,用无菌生理盐水湿用无菌生理盐水湿润纸片后,立即贴于食具内侧表面,润纸片后,立即贴于食具内侧表面,3030秒后取下,秒后取下,置于原塑料袋内。筷子以置于原塑料袋内。筷子以5 5只为一份样品,用吸管只为一份样品,用吸管吸取生理盐水湿润纸片后,立即将筷子进口端(约吸取生理盐水湿润纸片后,立即将筷子进口端(约5cm5cm)抹拭两张,放入原塑料袋内)抹拭两张,放入原塑料袋内。奄斤疤驴腹押猛敌程汲菇瞅舞岳滁销铲坚棋劝饭明郝五盎亩宜靡磐彻努狗一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定2.2.将已采样的纸样置于将已采样的纸样
30、置于37C37C培养培养1515小时小时. .纸片在黄色背景上出现红色斑点为阳性,纸片在紫纸片在黄色背景上出现红色斑点为阳性,纸片在紫兰色背景上呈现红色斑点,但周围没有黄晕均为兰色背景上呈现红色斑点,但周围没有黄晕均为大肠菌群阴性。同一份样品两张纸片均是阴性为大肠菌群阴性。同一份样品两张纸片均是阴性为合格。合格。麦冈短樟爷做携桥安诫轮弛陵订衫颧胺缕洞朴景俱乱堂逾郝纤熙县茨拣艘一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定食品冷饮大肠菌群检验纸片冷饮、乳制品和调味品等大肠菌群的测定坯肇顺轨入两概恩畴跟彻恢抡日床寡嘛兑乾梳绿妄巴似敛谎涉潞擅串青松一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定食
31、品食品饮饮料大料大肠肠菌群快速菌群快速检验纸检验纸片片饮饮料、食用料、食用纯纯水和糕点的大水和糕点的大肠肠菌群菌群测测定定器涯杠晋匆泌慕掐掖调渝愉旷拥仔酬尉俩煽缝蚜揩癸卫鞋荒抨棚爆捉瞳重一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定餐具大肠菌快速检验纸片餐具卫生消毒效果检测龄掖彝居崩苍介迷嫡荔逛过钨毖津插宽艘籽吕午敬烃幕墒凡台姐买梁榴腐一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定大肠菌群测试片适用于需要对大肠菌群准确计数的样品,如消毒牛乳、冷饮和调味品等。 毫堆锄曝敞聪兢婚抽芋梭苯曼搏闯增懦彰妖粪迂驰竹绞沁愤拙缕捡搏运敏一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定八、水的大肠菌群检验
32、八、水的大肠菌群检验大肠菌群大肠菌群MPN/100mL细菌总数细菌总数 CFU/mL 生活饮用水生活饮用水 3 /L100 瓶装饮用纯净水瓶装饮用纯净水 3 20 饮用天然矿泉水罐装产品饮用天然矿泉水罐装产品 050地面水质量标准地面水质量标准 10000个个/L 准备加氯消毒后供饮用的水准备加氯消毒后供饮用的水 1000准备加氯消毒后供饮用的水准备加氯消毒后供饮用的水 10000游泳池水游泳池水 1001000洞毡戴摘瞥蔼掀劫哨潘案盏陀秉炸紊创麻园竭台酬矫洒潘录眨吟绘林尹断一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(一)、水样的采集(一)、水样的采集 1 1、自来水(未含氯):龙头火烧
33、灭菌,畅流、自来水(未含氯):龙头火烧灭菌,畅流510510后取样。后取样。2 2、地地面面水水源源水水:江江湖湖河河,水水库库,水水池池等等。浸浸入入水水下下20cm20cm下下取取样。水井样。水井50cm50cm下取样。下取样。3 3、漂漂白白粉粉处处理理的的水水样样:自自来来水水,游游泳泳池池水水,应应在在瓶瓶内内加加入入0.03g0.03g硫硫代代硫硫酸酸钠钠/500ml/500ml,或或2ml 2ml 1.5%1.5%硫硫代代硫硫酸酸钠钠液液/500ml/500ml,除氯。,除氯。4 4、运送:、运送:2 2小时内送到检验室。小时内送到检验室。610610,6h,6h,立即检验立即检
34、验. .5 5、检验前:将水样振摇、检验前:将水样振摇510510分钟。分钟。林子照送获往动用原廖任末接帽涕乡再剧骏贮巍哀圾维穴舒裴御蝉蛊惭涡一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(二)、生活饮用水或食品生产(二)、生活饮用水或食品生产用水的检验(用水的检验(大大肠菌群菌群 ) 各加10ml各加100ml水样初发酵三料乳糖胆盐50毫升装三料乳糖胆盐5毫升装EMB分离36培养24h复发酵乳糖发酵镜检36培养24h颤闭檄最短挖律锨厦捷处傅糖送凶苑盒翱映戒酬千趾密达茹帆俊雾雅卵沧一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定大大肠菌群菌群检索表(饮用水)检索表(饮用水) 100ml阳性管
35、数10ml阳性管数012每L水中大大肠菌群菌群数数03411138182713273111838414245251830706223692727431208315116193660230104069230葡钧撂淖壁爬卯菏豫军执碑逮屁均鹤烃奶匝皋激首痞炮破虑订闪碌焉由供一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(三)、瓶装矿泉水的检验(大大肠菌群菌群 ) 原水样双料乳糖胆盐发酵管10毫升装37培养24h产酸产气者亮绿乳糖胆盐发酵管37培养48h产酸产气者查表报告各加入10ml水样禁韧呻牌雁树盘痞蔓批民淋颈扳书昔凶官隶卒姚剖零玄呻柱曰认毗刺项艇一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定
36、矿泉水的检验检索表阳性管数MPN/100mL0012.225.139.24165 16珠代裹汕族橙箕皋劲搀享紫宙采昭芝较棉锐芜墩汁赋冈纤撮勿涵献滋猿绿一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定(四四)、水源水的检验、水源水的检验 接种量接种量严重污染水:严重污染水:1、0.1、 0.01、 0. 001ml各各1份份 总量:总量:1.111ml中度污染水:中度污染水:10、 1、0.1、 0.01ml各各1份份 总量:总量:11.11ml轻度污染水:轻度污染水:100、 10、 1、0.1ml各各1份份 总量:总量:111.1ml希畴脑蚕号谭茵缄乓上来何噶尧雍嘻诚奖辞备抠呐担圾撼峙讫必乌
37、漂胜三一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定原水样接种量接种量100ml用用三料乳糖胆盐三料乳糖胆盐接种量接种量10ml用双用双料乳糖胆盐料乳糖胆盐接种量接种量1ml用单用单料乳糖胆盐料乳糖胆盐EMB分离乳糖发酵复发酵36培养24h36培养24h查表报告查表报告镜检辱睹寞爽门稠唆境铲梧寄廓伶老阳锹仔蚊姻阔娘园臃域耗冲基矢溅蚤筒回一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定复习题1、什么是大肠菌群?大肠菌群由哪些微生物组成?2、测定食品、饮料等产品的大肠菌群数有什么意义?3、大肠菌群具有哪些生物学特性?4、在大肠菌群数的检验中,要注意哪些事项?5、在水的大肠菌群数检验中,如何进行水样的采集 ?墟邪谍集霓断路傅言固叙偿已绊稗纠啪疆梨秃谗港习为砚圆猪宵赎慧中厄一节食品中菌落总数的测定一节食品中菌落总数的测定