《TPPA试剂盒说明书》由会员分享，可在线阅读，更多相关《TPPA试剂盒说明书（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、梅毒TPPA试书剂盒说明书1、试验原理:梅毒抗体检测是采用抗原抗体凝集反应中的抗原抗体凝集反应。其原理如 下：将梅毒（Nichols株）的精制菌体成分包被在人载体明胶粒子上。这种致敏粒 子和样品中的梅毒螺旋体（TP）抗体进行反应发生凝集，产生粒子凝集反应（TP） 抗体，并且可用来测定抗体效价。2、样本收集和贮存：血清或血浆1ml,标本应无溶血，无脂血，无微生物污染。不满足上述要求 的标本拒收，标本的采集应使用清洁，无菌的一次性的干燥管。标本用量最少50ul，七天内检测的标本应在2-8C保存，贮存在-20C可保存 4W，同时避免反复冻融血清。3、安全防范：3. 1此试剂盒内含人血成分。尽管所有的
2、对照及定点对照都已经过试验验证并 且发现对于乙型肝炎表面抗原，丙型肝炎抗体，HIV抗体均为阴性；但仍认为它 们具有潜在的感染性。3. 2移液过程禁止用口。3. 3在处理试剂和标本的地方禁止吸烟，饮食。3. 4使用试剂盒和标本时，必须戴一次性手套，穿试验服。使用后请彻底洗手 清洁。3. 5患者样本及其他潜在感染材料试验后应放入医用垃圾桶内。3. 6试剂的溶解液，血清稀释液和阳性对照血清含有叠氮钠作为防腐剂,叠氮钠 可以和铅铜反应形成爆炸的金属叠氮化合物.为防止金属叠氮化合物的形成，应用 大量的水冲洗以免其堆积.4、试剂：4. 1储存与稳定性：试剂应在2-10C保存。冻干试剂必须在复溶后的当天使用
3、，如果保存在2-10C最多可使用7天。4. 2试剂盒组成：（由富士瑞士欧公司出产）（1） 溶解液（液体）8mLX1瓶用于调制致敏粒子和未致敏粒子。（2）血清稀释液 29mL X 1瓶用于样品的稀释。（3） 致敏粒子 （冷冻干燥）调制浓度为1%的Treponema Pallidum（Nichols株）致敏明胶粒子。（4）未致敏粒子（冷冻干燥）经单宁酸处理调制浓度为1%的明胶粒子。（5）阳性对照（液体）0.5 mLX 1瓶用抗Treponema Pallidum（Nichols株）家兔免疫血清调制成抗体效价为 1:320 （最终稀释倍数）。5、操作步骤：5. 1试剂稀释液的配制：致敏粒子：每瓶+加
4、0.6ML血清稀释液溶解，平衡30分钟后使用。未致敏作粒 子：每瓶+加0.6ML血清稀释液溶解，平衡30分钟后使用。填写免疫记录表 NJKM-SOP030118O15. 2血清处理干燥管离心，充分将血清与红细胞分离。5. 3实验过程：孔号123456789101112血清稀释液(ul) 10025 25252525252525 252525标本（ul）2525 25252525252525 252525弃去25血清稀释度1/51/201/101/401/801/3201/12801/1601/6401/2560L/51201/10240未感作粒子25感作粒子25 2525252525 2525
5、25最终稀释度1/401/801/320 1/12801/51201/1601/6401/25601/204801/10240震荡混匀，加盖，室温孵育2小时。每批试验，同时做阳性对照操作同上表。6、正常参考范围:阴性（与年龄，性别，种族无关）7、结果解释：模式判定a.反应物集中于孔底，成纽扣状聚集，边缘光滑的圆形。b.颗粒在管底形成一个小环状，呈现出外周均匀且光滑的圆形。+c.粒子环明显变大，其外周边缘不均匀且杂乱地凝集在周围。+d.产生均一的凝集，颗粒铺满整个孔底，边缘成齿状不齐，整体上呈膜 状延展。+7. 1阳性：标本与非致敏颗粒（最终稀释为1 : 40）反应，显示为（-）；但与致 敏颗粒
6、（最终稀释为1 : 80）反应，显示为（+）或以上，最终抗体稀释度为（+） 的模式。7. 2阴性：无论未致敏粒子呈现何种反应，只要标本与致敏颗粒（最终稀释度 为1 : 80）反应图象显示为（-），最终判定为阴性。7. 3可疑：标本与未致敏颗粒（最终稀释度为1 : 40）反应，显示为（-）； 标本与致敏颗粒（最终稀释度为1 : 80）反应，显示为（）。7. 4把结果记录于表格NJKM-SOP0301*18*1中。8、质量控制：8. 1只有全部使用本试剂盒内的试剂才能保证检测效果，因为所有试剂都是有 关联的，不能混用其他制造商的产品。试剂各组成，必须使用试剂盒配备的，不 要使用生产批号不同的试剂混
7、合使用。8. 2未开封的情况下，如果保存于2-8C，试剂盒内所有试剂均在标定的有效期 内有效。8. 3每一种试剂都是经过校准以保证最佳的检测结果。这些试剂如果经过稀释 或改动都会导致检测的敏感度的降低。8. 4开始试验前，将所有试剂置于室温。8. 5试验结果的可重复性依赖于充分混合试剂。使用前振荡装有对照血清的小 管和所有稀释过的溶液。8. 6为避免干扰结果，高血脂的，溶血的，或污染的血清不要用于检测，样品 不应加热灭活。9、方法学特性：9. 1敏感性：9. 2特异性：9. 3精密度：10、临床意义：TPPA是梅毒血清学检查的梅毒特异性抗体反应，在判定阳性的情况下，需 结合其它的检查结果以及临床症状来进行综合判断。在梅毒TP感染初期，有可 能不产生抗体，或虽然产生抗体但数量很少，如果怀疑感染梅毒，但检测为阴性， 也要经过一段时间再进行检查并与其它的检查（如TRUST，FTS-ABS，ELISA 等试验），结果进行综合判断。通过检测患者血清中有无抗梅毒螺旋体抗原的特 异性抗体，对梅毒进行确诊。
