《HPLC测定颈复康颗粒中葛根素含量》由会员分享，可在线阅读，更多相关《HPLC测定颈复康颗粒中葛根素含量（5页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、文档供参考，可复制、编制，期待您的好评与关注！ HPLC测定颈复康颗粒中葛根素含量任丽娜 赵玉佳（指导教师） 郭强（修改教师）(牡丹江医学院药学院07级制药工程专业 黑龙江 牡丹江 157011)【摘 要】目的：采用HPLC法简便、快速、准确测定颈复康颗粒中葛根素的含量。方法：采用HPLC法测定颈复康颗粒中葛根素的含量测定方法。选择色谱柱、流动相、流速、检测波长等色谱条件建立高效液相色谱法测定颈复康颗粒中葛根素含量。结果：平均回收率为99.90%，RSD为1.29%。理论板数按葛根素峰计算应不低于2000。线性范围为在不小于0.80mg，葛根素的微克数与峰面积积分值成良好的线性关系。结论：结果
2、表明本方法操作简便、准确，可用于颈复康颗粒中葛根素的测定。【关键词】：颈复康颗粒；葛根素；高效液相色谱法Abstract Objective :To establish the determination of puerarin in Jingfukang Granules by HPLC. Methods:In this method ODS C18 column was used , methanol-water(25:75) was used as a mobile phase .The detection wave-length was at 344nm. Result:The det
3、ection range was0.80mg at least . There was a good linear relationship between consistence and apex-area. The regress equation was Y=8146351.67X+15417.27. The recovery of the added sample was 99.90%，And RSD is1.29%. Conclusion :This method was simple and the result was reliable.Key wordsJingfukang G
4、ranules; puerarin; HPLC葛根为豆科植物野葛puerarin lobata(wild) Ohwi或甘葛藤(P.thomsonii Benth)的干燥根。含丰富的异黄酮类化合物，主要成分是葛根素(Puerarin)，化学名为7,4-二羟基-D-葡萄糖基异黄酮。葛根素具有调节心肌功能，抗心肌缺血，扩张血管，抗高血压，降血糖、血脂等功效1。颈复康颗粒为非处方药药品，收载于中华人民共和国药典2005版一部2 。颈复康颗粒是纯中药制剂，由葛根、羌活、乳香、没药、地龙、土鳖虫、丹参、川芎、白芍等22味药物组成。具有益气养血，活血通络，祛风止痛之功能，用于颈椎骨质增生引起的脑供血不足，头
5、晕，头痛，颈项僵硬，肩臂酸痛，手臂麻木等症3-5。随着应用的进展，目前已用于治疗多种疾病，并取得了很好效果。颈复康颗粒是在颈复康冲剂主要成分及生药量不变的基础上，对生产工艺进行较大改革，采用喷雾干燥、干法造粒、挥发油等先进技术生产出的复方中药制剂6。颈复康颗粒是在颈复康冲剂的基础上改变剂型而制得的，处方中葛根的有效成分为葛根素、大豆苷和大豆苷元等异黄酮类化合物7。为有效地控制其药品质量，保证临床用药效果，有人对其进行定性与定量分析研究8。葛根药材及其中成药、制剂中葛根素含量的测定方法主要有：紫外分光光度法、荧光薄层扫描法和高效液相色谱法(HPLC)等。其中HPLC法集分离与检测于一体，用于药品
6、中葛根素含量的测定具有快速准确、样品处理简单等优点。本文采用了HPLC法，此方法简便，灵敏，重现性好，准确度高，适用于本品质量控制中的主药含量测定和有关物质检查。本实验结果表明，该方法分离好，灵敏度高，准确、快速，方法简便，可作为质量控制指标之一。1 材料高效液相色谱仪Shimadzu LC2010HT（日本岛津）电子天平FA2004N （上海精密科学仪器有限公司）超声波清洗器HS3120（天津市恒奥科技发展有限公司）色谱甲醇（天津市大茂化学试剂厂）颈复康颗粒（国药准字Z13022204 承德颈复康药业集团有限公司）葛根素对照品（中国药品生物制品检定所）2 方法2.1 含量测定2.1.1最大吸
7、收波长的选择精密吸取葛根素 (0.2mg/mL)对照品溶液1mL，置10mL量瓶中加甲醇稀释至刻度，用紫外可见分光光度计，从200-400nm全波长扫描，葛根素最大吸收波长为250nm。2.1.2色谱条件色谱柱：YMC-C18柱(4.6mm150mm,5um，大连依利特科学仪器有限公司)；柱温：室温；流动相：甲醇水(25：75)；流速为1mL/min；检测波长：250nm；进样量：20uL。理论板数按葛根素峰计算应不低于2000。2.1.3供试品溶液的制备精密称定本品0.5g，研细，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，精密加甲醇25mL，超声（功率30W）提取30min，放冷，再测定体
8、积，用甲醇补足减失的重量，摇匀，取上清液，滤过，取滤液，即得。2.1.4标准曲线制备精密称取葛根素对照品10mg置50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。从上述溶液中依次精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL，分别置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取上述对照品溶液20ul注入液相色谱仪中，按上述条件测定峰面积。以对照品溶液微克数x为横坐标，峰面积积分值Y为纵坐标绘制标准曲线，计算回归方程为：Y=8146351.67X+15417.27 ，r=0.9997。表明葛根素在不小于0.80mg范围内微克数与峰面积积分值成良好的线性关系。标准曲线见图1。图1 葛根素
9、标准曲线2.2方法可行性考察取葛根素对照品溶液，颈复康颗粒供试品溶液在上述色谱条件下进行测定，结果见图2和图3 。由图可知，葛根素的峰形对称，分离效果良好。图2 葛根素对照品图谱0.05.010.015.020.025.030.035.0min250mVDetector A:250nm 1.2162.0085.82212.90122.69138.194图3 颈复康颗粒图谱2.2.1精密度实验 精密吸取同一供试品溶液20uL，重复进样5次，测得葛根素峰面积，RSD为0.65%(n=5)。测定结果表明，精密度良好。2.2.2重复性实验 取同一批已知含量的样品5份，按2.1.3项下操作制备样品溶液，
10、依法测定，测得葛根素峰面积值并计算含量，RSD为0.71%。2.2.3稳定性试验 对于同一批供试品溶液，按含量测定方法，连续6次进样，每次间隔2h ，测定葛根素峰面积，RSD为0.35%。结果表明供试品溶液在12h内稳定性良好。2.2.4样品含量测定 取5批样品，各取0.5g，精密称定，分别按2.1.3项下操作制备样品溶液，分别进样，测定峰面积，计算5批样品中葛根素的含量，结果见表3。批号含量（mg/g）090730 0.8828091078 0.87260910790.8974090619 0.8713090715 0.8826表3 样品中葛根素含量测定结果根据上述测量数据及大生产实际情况综
11、合考虑，我们制定颈复康颗粒中葛根素含量测定限度为：本品每克颈复康颗粒含葛根素，不得少于0.80mg。2.2.5回收率试验 取已知含量的样品5批次，各1g，精密称定，分别加入葛根素对照品溶液(0.2mg/ml)0.10mL，按2.2.3项下操作，各进样20uL，按外标法以峰面积计算含量。结果见表4。样品含量(mg)加入量(mg)测得量(mg)回收率(%)平均回收率(%)RSD(%)0.87720.20001.06899.000.87870.20001.092101.500.86540.20001.06199.5099.901.290.88730.20001.07498.500.88460.200
12、01.093101.00表4 加样回收率测定结果(n=5)由表4可见，当样品中添加葛根素的量在0.0250mg0.3000mg时，样品中葛根素的回收率在98.50%101.50%，RSD为1.29%。符合分析测试要求。3结果 平均回收率为99.90%，RSD为1.29%。理论板数按葛根素峰计算应不低于2000。线性范围为在不小于0.80mg，葛根素的微克数与峰面积积分值成良好的线性关系。4 结论 采用HPLC法测定颈复康颗粒中葛根素的含量，操作简便，结果准确可靠，重现性好，此法可用于颈复康颗粒的质量控制、稳定性考察和有效期，可为颈复康颗粒质量标准的建立提供依据。参考文献1 王本祥.现代中药药理
13、与临床M.天津科技翻译出版公司，2004:1503-1504.2 国家药典委员会.中华人民共和国药典S.北京：化学工业出版社，2005年版一部，143.3 贺云，潘娓婕，张尊昕等高效薄层色谱双波长扫描法测定颈复康冲剂中葛根素的含量J陕西师范大学学报(自然科学版)，2000，28(2)：123124.4 Lu H,Xing DM,Sun H,Jin W and Du LJ.Pharmacokinetics of puerarin in normal and cerebral ischemia reperfusion ratsJ.The Chinese Pharmaceutical Journal
14、 ,2002,37:4144.5 Ma JJ,Li HM,Dong ZY and Pei JM.The pharmaceutical effects and clinic applications on Puerarin.Journal of the Fourth Military Medical University 2002,23:6466.6 梁振东颈复康颗粒喷雾干燥工艺研究J中成药，2001，23.7 李守拙，李云霞颈复康冲剂中葛根素的含量测定J中国中药杂志，1996，21(2)：101102.8 Xue Na Hao ,Shun Wan Chan ,Shi Lin Chen. Detection of puerarin and danshensu in Traditional Chinese Medicinal preparation containing Pueraria Lobata and Salvia Miltiorrhiza by HPLC J. Journal of Liquid Chromatography&Related Technologiesw, 2007,30:27792787. /
