口腔白斑患者黏膜上皮组织中骨桥蛋白的表达

《口腔白斑患者黏膜上皮组织中骨桥蛋白的表达》由会员分享，可在线阅读，更多相关《口腔白斑患者黏膜上皮组织中骨桥蛋白的表达（6页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。

1、 推荐 口腔白斑患者黏膜上皮组织中骨桥蛋白的表达口腔白斑(oral leukoplakia , OLK)H一种公认且常见的黏膜癌前病变，也是口腔上皮鳞癌的重要来源之一( 占 17, ,35,)? ，其癌变率为 10, 一 30, 。一般认为慢性炎症与肿瘤的发生关系较为密切，白斑癌变过程中持续高表达的炎症相关基因，尤其是Janus 激酶和核转录因子KB(nuclearranscription factor KB， NF-KB)可能是联系炎症与月中瘤的重要“桥梁”。另外，也有研究 表明，骨桥蛋白 (osteopontin , OPN参与慢性炎症中的NKB路径并在其中发挥重要作用。本研 究选择经病理

2、学检查明确诊断的 OLK患者作为研究对象，采用免疫组织化学染色法 检测病损局部黏膜上皮细胞OPN勺表达情况，初步探讨OPNf OL磔病及癌变的可 能关系。1 对象与方法1(1 病例选择和分组选取 2006 年 2 月一 2007 年 2 月就诊于上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔黏膜科的OLK患者作为研究对象。入选标准：具有OLK的典型临床表现；经病理 学检查排除其他可定义的白色病损; 患者无可能的刺激因素或去除可能的刺激因素后(如调磨牙尖、戒烟后 ) 白色斑块不消失; 剔除标准 :全身严重感染性疾病或系统性疾病患者 ; 伴有其他部位癌前病损或肿瘤患者; 其他口腔黏膜疾患或中、重度牙周炎患

3、者。共人选OLK患者20例(OLK组)，年龄23,68岁，平均(47?11)岁；男性12例，女性8 例 ; 病理学检查显示病损组织伴有不同程度的上皮异常增生，轻、中、重度分别为9、 8、 3 例。选择同期在本院口腔颌面外科因外伤或美容需要接受口内黏膜手术的20例非OLK患者作为对！I影&,年龄22,65岁；男性l2例，女性8例；无全身严重感染性疾病或系统性疾病，无口腔黏膜疾患、活动性龋病或牙周病。人选者均对相关研究知情并签署知情同意书。1(2 口腔黏膜上皮细胞OPNS达检测1(2(1 标本采集和制备根据组织活检标准切取患者典型病变区域的黏膜组织，直径不小于 1(0 cm ， 4, 中性甲醛溶液

4、固定，4?逐级脱水后石蜡包埋，切片厚度4 Ixm。用已知阳性乳腺癌作为阳性对照；以PBS弋替一抗作为阴性对照。1(2(2 免疫组织化学染色采用免疫组织化学染色 sP 法。切片脱蜡、入水、0(05,胰蛋白酶抗原修复。将石蜡切片放入甲醇液中浸泡，用PBS洗，加入封闭液于组织切片上，孵育；切片滴加兔抗人OPNI；克隆一抗(R&D), 4?湿盒孵育过夜;PBS漂洗。滴加抗兔生物素化二抗，室温下孵育，PBSS洗，DAB色，苏木精衬染，常规梯度乙醇脱水，中性树胶封片。1(2(3 结果判定 由两名病理科医师分别对结果进行判定和复核。每张切片随机选择 5 个高倍视野(x400) 观察染色结果，胞质中出现褐色颗

5、粒物质视为阳性着色根据 Fromowitz 综合计分法 评估结果 ( 由阳性细胞所占百分比结合细胞着色强度进行综合评估) 。 ? 阳性细胞百分数:75, 计4分。 ? 细胞着色强度: 不着色计 0分;淡黄色计 1 分;棕黄色计 2 分; 棕褐色计 3 分。?综合评分(? +? ):2 分为阴性(一);?2 分为阳性，其中2,3分为弱阳性(+) , 4,5分为中度阳性(+) , 6,7分为强阳性(+)。？OPNg达阳性率：表达阳性率邛日性标本数，总标本数X 100,。1(3 统计学方法应用SPSS 13(0软件进行统计学处理。OPNg达阳性率白比较采用x检验，P0(05 表明差异有统计学意义。2

6、 结果2(1 免疫组织化学染色观察对照组口腔黏膜组织未见或仅见极少量上皮细胞胞质内呈现OP2日性染色。OLK&多数病损局部黏膜组织可见基膜上方上皮细胞胞质 OPNfe色阳性，伴有上皮异常增生者 OPNfe色增强，其中重度异常增生标本 OPNffi 性细胞数量明显增多且分布于细胞全层，同时可见细胞间质OPNfe色阳性(图1)。2(2 OPN表达阳性率与对照组相比，OLK&病损局部OPNS达阳性率，以及伴不同程度上皮异常增 生的OLK病损局部OPNS达阳性率均显着增强，差异均有统计学意义(P0(05) 。3 讨论OLKg公认的且最常见的口腔癌前病变之一，与口腔癌关系密切。OPNS达与上皮来源的肿瘤

7、发生有关，其机制可能在肿瘤发生期和发展期有所不同。本课题组以往研究发现OPNf口腔癌前状态的进展关系密切。月中瘤发生期OPNM能参与了细胞的异常增殖和凋亡抑制。OPNa一种分泌性的含有甘氨酸一精氨酸一甘氨酸一天门冬氨酸的糖蛋白，由骨和多种腺上皮及其他细胞合成。头颈部鳞状细胞癌的 H(ras癌基因过度表达与病变发展过程中的 OPNS达 有关 J 。而 ras 基因在口腔鳞癌和癌前病变中的过度表达是参与头颈部癌症早期进展的因素。野生型、OPN除细胞系及反义实验 均证明月中瘤细胞产生OPNiffi 月中瘤细胞生长及细胞系的迁移，提示 OPN&激活月中瘤细胞生长方面具有重要作用。在月中瘤的发展期，OP

8、NT能参与了细胞白黏附和转移，OPN乍为一种黏附和迁移因子可能在肿瘤发生、发展中发挥更重要的作用。研究表明，多数细胞是通过整合素与OPNKiWi的;OPN与细胞表面的整合素B结合，增强甘氨酸一精氨酸一甘 氨酸一天门冬氨酸依赖的细胞黏附，刺激细胞迁移，激活细胞内信号转导通路。OPNM CD4曜田胞表面受体的配体，可刺激表达 CD4曜田胞的趋化作用；细胞通过某 种拼接形式与OPN吉合。CD44变异体与OPN勺结合是精氨酰一甘氨酰一天冬氨酸 (Arg GlyAsp , RGD井依赖性的，但可能需要含有 B(的整合素的参与。单核细胞 , 巨噬细胞、 T 淋巴细胞、平滑肌细胞、内皮细胞、上皮细胞及许多癌

9、细胞的迁移均证实了 OPN勺趋化特性。与正常细胞相比，癌细胞对OPNM敏感。关于OLK的癌变机制涉及许多分子事件。维甲酸能够通过维甲酸受体(retinoic acidreceptors , RARs调控细胞增殖、分化和凋亡，从而抑制口腔白斑恶变；研究？表明，RUNX1 RUNX建口 RUNX的转录由维甲酸调控，其中 RUNX肥被证实是由转化 生长因子一 pransforming growth factor- B, TGF-p)超家族调控的一种重要的月中瘤抑制基因，OPN动子区有与RUNXC族的结合位点，表明OPNW上皮来源的月中 瘤是有内在关系的，但其具体调节机制尚不清楚。本研究显示，伴随OL

10、KW变局部上皮异常增生程度的加重，OPNft达亦增强。OLK患者黏膜上皮细胞表达OPNt要集中于上皮的中上2,3区上皮细胞的细胞质 内，而在OLK伴有重度上皮异常增生组织中可见 OPNS上皮全层均表达阳性，且在 细胞间质区也出现特异性染色。提示 OPNtg在OLKS变不同时期发挥的作用略有 不同，即在癌变初期主要与细胞异常增殖有关，而在癌症进展期则参与细胞的黏附和转移。虽然本研究尚不能给予 OLKffi变机制更深入的解释，但提示 OPN能参与 了口腔鳞状细胞癌的发生和发展。参考文献 :1Shibuya H ， Amagasa T， Seto K ， et a1(Leukoplakia asso

11、ciated mu1(tiple carcinomas in patients with togune carcinomaJCaner， 1986， 57(4):843 846(2 Lumerman H ， Freedman P， Kerpels S(Oral epithelial dysplasia and the development of invasive squamous cell carcinomaJ(Oral Surg OralMed Oral Pathol ， 1995， 79(3):321 326(3Rangaswami H ， Bulbule A ， Kundu GC(Nu

12、clear factor inducingkinase plays a crucial role in osteopontin-induced MAPK,IkappaBalpha kinase dependent nuclear factor kappaB-mediated promatrlxmetalloproteinase-9 activationJ(J Biol Chem， 2004， 279(37):3892l 一 38935(4Fromowitz FB ， Viola MV ， Cbao S， et a1(raa p2 】 expressJon in theprogression o

13、f breast cancerJ(Hum Pathol ， 1987， 18(12):1268一 l275(5Zhou ZT ， Wei BJ ， Shi P(Osteopontin expression in oral lichenplanusJ(J Oral Pathol Med ， 2008， 37(2):94 98(6Kim HJ ， Lee HJ ， Jun JI ， et a1(Intracellular cleavage ofosteopontin by caspase-8 modulates hypoxia,reoxygenation cell deaththrough p53

14、J(Proc Natl Acad Sci U S A ， 2009，106(36):15326 一 l5331(7Mareondes MC ， Poling M ， Watry DD， et a1(,n vivoosteopontininduced macrophage cumulation is dependent on CD44expressionJ(CellImmunol ， 2008， 254(1):56 62(8Desai B ， Rogem M，J Chellaiah MA(Mechanisms of osteopontin andCD44 as metastatic princi

15、ples in prostate cancer cellsJ(Mol Cancer2007， 6:18(9Ponta H ， Sherman L， Herrlich PA(CD44:from adhesion moleculesto signaling regulatorsJ(Nat Rev Mol Cell Biol， 2003， 4(1):33 37(10Gao F ， Huang C， Lin M ， et a1(Frequent inactivation of RUNX3 bypromoter hypermethylation and protein mislocalization in oral squamouscell carcinomasJ(J Cancer Res Clin Oncol ，2009， 135(5):739 747(齿科