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1、心肌酶谱的检测方法1 检验目的规范检测“肌酸激酶（CK）”的过程。2 适用范围适用于正常人和病人血清“肌酸激酶（CK）”的测定。3 职责3.1 责任人：生化室当班工作人员。 3.2 质量要求：按照临床化检验室内质量控制作业指导书进行室内质控，合格后可发报告。3.3 完成时间：门诊检验结果当天下午2:30发报告；病房检验结果当天下午4:00发报告。4 检验原理：酶偶联法CK磷酸肌酸ADP葡萄糖6磷酸ADPG6PDH葡萄糖6磷酸NADP6磷酸葡萄糖酸NADPHH，NADPH的生成。引起在340nm吸光度上升，上升的速率与CK的活力成正比，可以用（340nm和405nm）速率法测量 。5 样本要求：
2、5.1 样本类型样本量:空腹取静脉血3ml(血清或肝素抗凝血浆),按顺序将申请单和样本一一对应编号。认真检查检验材料、检验目的、病人姓名、性别、科室、床号、血液量等。5.2 容器和抗凝剂种类: 黄色胶头试管，含促凝剂；红色胶头普通生化管；肝素钠、肝素锂抗凝试管。5.3 样本处理方法将已编号的样本放入37的水温箱中，待血液自动凝固后，取出配平离心，3000r/min5min。将血清分离放入DADE BEHRING RXL专用样本杯后，仔细观察是否符合要求，否则申请重新采集样本; 上雅培AEROSET全自动生化分析仪直接将试管放入样本架上。 5.4 样本的稳定性:血清、血浆肌酸激酶（CK在20-2
3、5放置可保存1天，2-8贮存最多7天；冷冻保存可超过1个月。已检测标本28保存3天。6 仪器：杜邦RXL全自动生化分析仪 雅培AEROSET全自动生化分析仪7 试剂:7.1 杜邦RXL全自动生化分析仪配套试剂；雅培AEROSET全自动生化分析仪配套试剂。7.2 杜邦RXL全自动生化分析仪配套试剂准备:将肌酸激酶（CK）试剂船按仪器操作说明书加入仪器试剂仓内。避光，2-8保存24hr，15-25保存5hr。 7.3 雅培AEROSET全自动生化分析仪配套试剂准备: 按仪器作业指导书准备试剂,未开封试剂在贮存于1530下时，稳定性可保持到有效期截止时为止,开封后试剂上机的稳定期为42天。8 校准8
4、.1 来源：杜邦RXL、雅培AEROSET配套校准液。8.2 贮存条件：原校准物在04以下可保存至有效期8.3 准备：直接用注射器抽取原液0.3ml备用。8.4 校准条件：A：质控失控；B：定期校准；C：试剂更换批号。8.5 校准后的稳定期可保持约41天（984小时），每次更换批次时都应进行校准。按照您的实验室所建立的质控要求，使用至少1个水平的质控品进行校准曲线验证。如果质控结果不在可接受范围值内，则需要进行重新校准。9 程序步骤 9.1 样本编号样本分离检验仪器准备、试剂准备室内质控测定、样本测定、资料录入分析室内质控、分析测定结果打印报告单结果审核签发 9.2 上机操作：见仪器作业指导书
5、.10 质量控制10.1 来源：朗道质控物。10.2 1个数：1个水平10.3 贮存条件：质控物存放于2-8可保存至有效期，溶解后25可保存12小时，4可保存5天，分装存放于-20，可稳定一个月。10.4 准备：每瓶加3.00ml相配稀释液充分溶解后分装。溶解质控血清时间为30分钟,分装存放于-20。10.5 程序：10.5.1 每隔24小时运行至少1个质控水平（正常值）。10.5.2 如果质控结果不在实验室所规定的可接受范围值内，则患者值可疑。需使用新鲜质控品重复质控。10.5.3 如果质控结果仍不在可接受标准范围内，则需重新校准。10.5.4 每次更换试剂批次后，都要检查质控结果和可接受标
6、准。10.5.5 操作:详见质量控制作业指导书10.6分析参数10.6.1 杜邦RXL全自动生化分析仪分析参数样本量(l)：14试剂量(l)：R1：95 R2:255 稀释液量：方法：RATE预设系数：C0：8.85C1：8.044主波长（nm）：340次波长（nm）：405温度()：37 反应时间（min）：3反应方向：正反应（+） 线性范围：0800U/L10.6.2 雅培AEROSET全自动生化分析仪分析参数Reaction mode: rate up Read time 24-33Blank read time:14-16Flex :22-25样本量(l)：8试剂量(l)：R1：160
7、 R2:40主波长（nm）：340次波长（nm）：412温度()：37 Calibration mode factor 4127线性范围：0800U/L11 结果计算以复合校准品校准值校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以U/L报告。12 生物参考区间：24170U/L13 可报告区间: 20-1600U/L14 危急值：暂无规定15 性能参数15.1 本法线性范围为20-1600U/L，不准确度允许范围 30%，不精密度CV=1.4%。15.2 实验的干扰因素: 胆红素达到40mg/dL时影响小于4%；溶血时血红蛋白达到350mg/dL时影响小于10%；抗坏血酸（
8、Vc）含量达到20mg/dL时影响小于1%。16 注意事项：16.1 不能使用钙螯合物作抗凝剂，如草酸、枸椽酸和EDTA。16.2 红细胞及所有组织中含有腺苷酸激酶（AK），反应产生的ATP导致表观CK活力增加。16.3 为了缩短预温时间或者当冷冻空间有限时，未开封的试剂盒在28下也可以冷藏4周。16.4 如果是脂血标本或肌酸激酶的活性超出系统的测定线性范围，用7%BSA（小牛血清）进行稀释，重新测试，测试结果乘以稀释倍数就得到原始样品中肌酸激酶的活性。16.3 安全注意16.3.1 此试剂为体外诊断用，不要吞服。16.3.2 避免与皮肤粘膜接触。接触到眼睛或吞服，立即用大量的水冲洗受损害的部
9、位15分钟，并立即寻找医疗保护。17 临床意义17.1 CK主要存在骨骼肌和心肌,在脑组织中也有。各种类型进行性肌萎缩时，血清CK活性均可增高。神经因素引起的肌萎缩如脊髓灰白质炎时活力正常，皮肌炎时CK活性可有轻度或中度增高。急性心肌梗塞后24H就开始增高，可高达正常上限的1012倍。CK对诊断心肌梗塞较AST、LDH的特异性高，但此酶增高持续时间短，24天就恢复正常。病毒性心肌炎时也明显升高，对诊断及预后有参考价值。17.2 CK增高还见于脑血管意外、脑膜炎、甲状腺机能低下等患者。还应注意到一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素等也可能引起CK活性增高。18 引用文件18.1 美国雅培制药有限公司试剂说明书18.2 杜邦RXL全自动生化分析仪配套试剂说明书18.3 全国临床检验操作规程 第三版18.4 杜邦RXL全自动生化分析仪操作作业指导书18.5 雅培AEROSET全自动生化分析仪操作作业指导书18.6 临床化学检验室内质量控制作业指导书
