光合菌的检验方法

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1、光合菌活菌数的检验方法 取样:先清洗一个容量为3050毫升的取样瓶或烧杯。由于光合细菌在培 养液中的分布是不均匀的,尤其是具有强烈运动能力的种类更明显,所以在取样 前必须充气或搅拌,待分布均匀后,立即用移液管(移液管应预先进行消毒处理, 以免造成污染)取样,取样的量为 1015毫升。如果取样的密度太大,计数困 难,必须加水稀释到适宜浓度后方可计数。 样品放于计数板:放置前必须将血球计数板和盖玻片清洗干净、擦干,不 能有油污染和杂质。将血球计数板平放在桌子上,盖好盖玻片;然后把样品瓶轻 轻摇动几下,使光合细菌分布均匀,并立即用干净的微吸管取样品,迅速把微细 吸管放到盖玻片的边缘处,轻压微细吸管的

2、橡皮帽,使样品流入计数板内。注意 控制样品流入量,不能过多,过多则流入到沟内;也不能过少,过少则计数时不 准确(计数后的数量一般偏少),应充满画线方格及其周边部分。还应注意盖玻 片下不能有气泡存在,否则会造成计数不准确。不符合操作要求时,应立即重新 开始。样品吸入血球计数板后,稍停 1分钟,待细菌沉降在玻片表面上再在显微 镜下进行计数。 计数:光合细菌的计数,必须使用油镜才能观察清楚。可以计数中央大格 的4个角的中格,每个中格有25个小格,逐一计数, 4个中格相加共计数100 个小格。计数时应从计数框一角开始,在计数框边缘的标本应按计上不计下、 计左不计右的原则,计数出细菌的总量后,按下式计算

3、出每毫升菌液中的细菌 数量:细菌数量= 100个小格的细菌数x4x10000x稀释倍数。注意每个样品最少重复计数两次,然后取其平均值,计算细菌的数量,两次 计数结果和平均数之差应不大于其平均数偏差的 10才有效。因为盖玻片下每个大方格上的空间为 0.1 立方毫米,故 1 个大方格内的细菌 数量若为n则细菌密度为每立毫米10n个,将此换算为每毫升的细菌数量,则 需乘以 10000,因此1 个大方格内细菌平均数是多少,则细菌的密度就是每毫升 多少万个。如果计数前经过稀释,则需乘以稀释倍数。例如:吸取待测的光合细菌菌液1 毫升,加水19毫升稀释,计数100个小格 内的细菌数量为 500个,则每毫升菌液的光合细菌数量为:细菌数量=500x4x10000x (19+1)=4x108=4 亿(个)。

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