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1、2.2动物细胞工程 2.2.1动物细胞培养和动物细胞核移植技术问境：大面积烧伤的病人，怎样才能获得大量的自体健康皮肤呢? 单个细胞产生的蛋白质量是很少的，怎样才能获大量的分泌蛋白呢?1.动物细胞培养1.1动物细胞培养的过程1、问：细胞培养时，要先将组织分散成许多单个细胞，为什么？2、问：如何将组织细胞块分散成单个细胞？3、用 将分散的细胞稀释制成细胞悬液，再将 放入培养瓶内，置于适宜环境中培养。4、悬液中分散的细胞很快贴附在瓶壁上，称为 。5、（ ）培养贴附性细胞时，培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒，易于贴附，利于生长。6、（ ）细胞培养过程中，细胞进行有丝分裂。7、问：什么是细胞的接触抑制？
2、8、问：什么是原代培养？什么是传代培养？9、（ ）传代培养的细胞一般传至10代后就不能传下去了。10、（ ）一般来说，细胞在传至1050代左右时，增殖会逐渐缓慢，以至于完全停止。11、（ ）细胞在传至1050代左右时，这时部分细胞的细胞核型可能会发生变化。12、（ ）细胞在传至1050代左右时，当继续传代培养时，少部分细胞会发生突变，正在朝着类似于癌细胞的方向发展。13、目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为 代以内，以保持细胞正常的 核型。14、问：细胞培养的定义和过程？1.2动物细胞培养的条件1、问：一般来说，动物细胞体外培养需要满足什么条件？2、通常还要在细胞培养液中添加一定量的 ，以防培
3、养过程中的污染。此外，应定期更换 ，以便清除 ，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害。3、（ ）细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同。4、细胞体外培养所需营养物质需要有糖、氨基酸、 、 、微量元素等。5、将细胞所需的上述营养物质按其 和所需 严格配制而成的培养基，称为合成培养基。6、在使用合成培养基时，通常需加入 、 等一些天然成分。7、细胞体外培养的时，哺乳动物多以 为宜。多数细胞生存的适宜pH为 。8、细胞培养所需气体主要有 和 ，02是 所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的 。进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95空气加5CO2的混合气体的培养箱中进行培养。1
4、.3动物细胞培养技术的应用1、 动物细胞培养技术有很多用途。许多有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、 、单克隆 等。2、 （ ）基因工程的动物受体细胞常借助动物细胞培养来得到。3、 （ ）培养的动物细胞可以用于检测物质的是否有毒。4、 （ ）动物细胞培养，可以得到各种病变细胞，用于生理、病理、药理研究。2.动物体细胞核移植技术和克隆动物（定义、种类、过程、应用）问境：能不能用高产奶牛的一个体细胞，培育出一头高产奶牛呢?1、动物细胞的全能性会随着动物细胞分化程度的 而逐渐受到限制，分化潜能逐渐变弱。2、目前还不能用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体。用动物体细胞克隆的动物，实际是通过 移植来
5、实现的。3、问：什么是动物核移植？4、问：哺乳动物核移植的类型？及难易度？ 遗传物质与 一样的新个体2.1体细胞核移植的过程注 入胚胎移入 细胞 胚胎 细胞融合体体细胞供体细胞培养 体细胞体外培养到减中期去核卵母细胞 去核卵母细胞 2.2体细胞核移植技术的应用前景1、 （ ）体细胞核移植技术在畜牧业、医药卫生，以及其他领域有着广泛的应用前景。2、 在畜牧生产中，利用体细胞克隆技术可以加速家畜 进程，促进优良畜群繁育。3、在保护 方面，可望利用体细胞核移植技术增加这些动物的存活数量。4、在医药卫生领域， 克隆动物可以作为生物反应器，生产许多珍贵的医用蛋白。5、在治疗人类疾病时，转基因克隆动物 、
6、 、 可以作为异种移植的供体。6、（ ）人的核移植胚胎干细胞经过诱导分化，形成相应的组织、器官后，可以用于组织器官的移植。7、克隆动物和克隆细胞可以更深入了解 及 过程。8、克隆动物做 ，使人们更好的研究和治疗疾病。2.3体细胞核移植技术存在的问题胞核移植成功率 ，克隆动物多有 。克隆动物食品 问题也有争议。动物细胞工程常用的技术手段有动物细胞 、动物细胞 、动物细胞 、生产 抗体等，其中司物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。基因记忆1、成块的组织中，细胞相互靠在一起，彼此限制了细胞的生长和增殖。2、先剪碎组织块，再用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，可分散成单个细胞。3、细胞贴壁分裂生长到表
7、面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。4、人们通常将动物组织消化后的初次培养称为原代培养。贴满壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖。这样的培养过程通常被称为传代培养。5、定义：动物细胞培养：就是从动物体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。6、过程：动物组织单个细胞细胞悬液原代培养接触抑制传代培养。7、动物细胞体外培养需要满足无菌和无毒、营养、温度和PH、气体环境等条件。8、动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最
8、终发育为动物个体。用核移植的方法得到的动物称为克隆动物。9、哺乳动物核移植可以分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植。10、动物胚胎细胞分化程度低，恢复其全能性容易，胚胎细胞核移植易成功。基础试题训练一、选择题1下列与动物细胞培养有关的表述中，不正确的是 （ ）A培养液通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清B原代培养的细胞一般传至10代左右便会出现生长停滞C动物细胞培养一般能够传到4050代，但其遗传物质发生了改变D动物细胞培养可用于检测有毒物质和获得大量自身健康细胞2生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是
9、（ ）A将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中，经孕育培养成新个体D将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体3一只羊的卵细胞核被另一只羊的体细胞核置换后，这个卵细胞经过多次分裂，再植入第三只羊的子宫内发育，结果产下一只羊羔。这种克隆技术具有多种用途，但是不能 （ ）A有选择地繁殖某一性别的家畜 B繁殖家畜中的优秀个体C用于保存物种 D改变动物的基因型4下列哪项属于克隆（ ）A将鸡的某个DNA片段整合到小鼠的DNA分子中 B将抗药菌的某基因引入草履虫的细胞内C将鼠骨髓
10、瘤细胞与经过免疫的脾细胞融合成杂交瘤细胞 D将某肿瘤细胞在体外培养繁殖成一个细胞系5有关全能性的叙述，不正确的是（ ）A受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高 B生物体内细胞由于分化全能性不能表达C卵细胞与受精卵一样，细胞未分化，全能性很高 D植物细胞离体培养在一定条件下能表现出全能性6下列属于组织培养但不是克隆的是（ ） A将花粉离体培养成单倍体植株 B芽发育成枝条C根尖分生区发育成成熟区 D上皮细胞无性繁殖产生的细胞群7动物细胞培养液和植物组织培养液的共有成分是 （ ） A葡萄糖 B蔗糖 C动物血清 D维生素8单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用
11、特定培养基筛选出杂交瘤细胞。在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是（ ）B淋巴细胞 小鼠骨髓瘤细胞 B淋巴细胞自身融合细胞小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 杂交瘤细胞 A B C D9动物细胞培养的细胞来自于（ ） A任何个体的细胞B只能取自动物胚胎细胞 C只能取自幼龄动物的组织细胞D胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞10（2005，广东）关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是（ ）A、可以制成诊断盒用于疾病的珍断 B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗 C、可以利用基因工程技术生产 D、可以在生物体内生产，不能体外生产11动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 （ ）A.动物细胞培养B动物细胞融合 C
12、单克隆杭体 D胚胎、核移植12细胞株的特点是 （ ）A.遗传物质没有改变，可以无限传代B.遗传物质发生改变，不可无限传代C.遗传物质没有改变，不可无限传代D.遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代13关于杂交瘤细胞的不正确叙述是 （ ）A有双亲细胞的遗传物质B不能无限增殖C.可分泌特异性抗体 D体外培养条件下可大量增殖14.动物细胞融合技术最重要的用途是 （ ）A.克服远源杂交不亲和 B.制各单克隆抗体 C.培育新品种 D.生产杂种细胞15.“生物导弹”是指 （ ）A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单抗上连接抗癌药物16.在动物细胞培养中有部分细胞可能在培养条件下无限制地传代下去，这种传代细胞称之为: A原代培养 B传代培养 C细胞株 D细胞系17.如果用动物的细胞进行克隆实验应该选择的细胞核不能是（ ） A、乳腺细胞的 B、卵细胞的 C、胃腺细胞的 D、囊胚时期的胚胎细胞的18（多选）美国杜克大学医疗中心的一个研究小组利用成年猪的动脉血管细胞和模拟胚胎环境的新型生物反应器,成功地在实验室里培育出新的动脉血管.这种
