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1、源生素源 高效液相色谱仪验证方案源生素源检验仪器OQ&PQ文件 高效液相色谱仪验证验证或使用设备设备名称：高效液相色谱仪出厂编号：设备型号： 设备/计量编号：设备厂商： 使用部门：质量检验部配套设备：色谱工作站计划开始实施日期计划完成日期 高效液相色谱仪验证方案审批部门/姓名签名日期验证小组负责人相关/接收部门确认人负责部门经理审批相关部门经理审批 质量保证部审批管理者代表审批-文件页码 共 页文件编号： 注：以上人员签字后方可实施本草案 高效液相色谱仪验证方案目录1.0再确认目的2.0再确认项目及结果 2.1 仪器各单元开机性能确认 2.2 四元泵的确认 2.2.1 泵流量的确认2.2.2
2、梯度准确度的确认 2.3自动进样器确认2.3.1进样器精密度的确认2.3.2进样器线性的确认 2.4检测器确认2.4.1波长准确度测试2.4.2 检测器线性的确认 2.4.3 最小检测浓度的确认第1页 共5页 高效液相色谱仪再确认方案1.0再确认目的 通过验证来确认此台仪器各项性能是否符合要求。2.0再确认项目 2.1仪器各单元开机性能确认项目开关功能键泵及进样器打开电源开关，泵及进样器进行自检，并显示置主画面。检测器打开电源开关，检测器灯打开，并进行自检约6min，氘灯在三个内置波长257、521、656处的校准，若偏差小于1nm，自检通过，若大于1nm，出现自检错误提示。 2.2 四元泵的
3、确认 2.2.1 泵流量的确认2.2.1.1 测试条件：流动相：超纯水 色谱柱：4.6mm250mm温度：室温2.2.1.2 测试方法：启动仪器，以水为流动相，待压力稳定后，在流动相出口处用称重过的10ml容量瓶收集流动相，同时用秒表计时，收集5分钟流出的流动相，精密称定，每个流速测定3次，记录测试温度，按下式计算流量设定值误差Ss和流量稳定性误差SR。 式中：FmFm=（W2W1）/（t），流量实测值，ml/min； W2容量瓶流动相的质量，g；W1容量瓶的质量，g；试验温度下水的密度，g/ml；t 收集流动相的时间，min；同一组测量值的算术平均值，ml/min；Fs流量设定值，ml/mi
4、n；Fmax同一组测量中流量最大值，ml/min；第2页 共5页Fmin同一组测量中流量最小值，ml/min。2.2.1.3 测试标准：Fs（ml/min）0.5001.0001.500允许误差Ss5%3%3%SR3%2%2%2.2.2 梯度准确度的确认2.2.2.1测试条件：流动相：0.3%丙酮-水 检测波长：254nm流速：1.000ml/min 柱温：302.2.2.2 测试方法：按下表设置梯度洗脱程序，以两通代替色谱柱连接管路，先用超纯水冲洗系统，待基线平稳后开始执行梯度程序，画出梯度变化曲线。测定三次，取各梯度级高度的平均值，由曲线图测量100%B（C）梯度级平均高度计算各梯级实际体
5、积%，每个梯级的理论体积%和实际体积%之差即为梯度准确度，以最大差值为梯度准确度误差。梯度洗脱表时间A通道（C通道）：超纯水B通道（D通道）：0.3%丙酮水溶液0.00min100%0%3.00min100%0%6.00min0%100%9.00min0%100%9.01min20%80%12.00min20%80%12.01min40%60%15.00min40%60%15.01min60%40%18.00min60%40%18.01min80%20%21.00min80%20%21.01min100%0%24min100%0%2.2.2.3 测试标准：梯度准确度误差1%2.3 自动进样器的
6、确认2.3.1 进样器精密度的确认第3页 共5页2.3.1.1 测试条件：流动相：乙腈-水（20:80） 对照品：25g/ml咖啡因对照溶液色谱柱：C18色谱柱 检测波长：273nm进样量：10l 流速：1.000ml/min柱温：402.3.1.2 测试方法：对照品置于进样瓶中，共进样6针，记录峰面积，求6针RSD。2.3.1.3 测试标准：RSD1.5%2.3.2 进样器线性的确认2.3.2.1 测试条件：流动相：乙腈-水（20:80） 对照品：25g/ml咖啡因对照溶液色谱柱：C18色谱柱 检测波长：273nm进样量：（1、5、10、15、20）l 流速：1.000ml/min柱温：40
7、2.3.2.2 测试方法：对照品置于进样瓶中，不同进样量各进一针，记录峰面积，求进样浓度与峰面积的相关系数。2.3.2.3 测试标准：相关系数r0.9992.4 检测器的确认 2.4.1波长准确度测试 以水流过流通池时作一空白扫描，然后，以手动方式将咖啡因标样5)用水稀释10倍后注入流通池，扫描200nm300nm范围内的紫外吸收图谱。记录咖啡因最大吸收和最小吸收处的波长，其205nm处的最大吸收波长与205nm比较，其273nm处的最大吸收波长与273nm比较， 最小吸收波长与245nm比较，三波长处的差值|均应2nm。波长检查表（表 35）选择波长（nm） 205 (max.) 245 (
8、min.) 273(max.) 实测波长（nm） 误差（nm） 第4页 共5页2.4.2 检测器线性的确认2.4.2.1测试条件：流动相：乙腈-水（20:80） 对照品：（5、10、25、50、100）g/ml咖啡因对照溶液色谱柱：C18色谱柱 检测波长：273nm进样量：10l 流速：1.000ml/min柱温：402.4.2.2 测试方法：5个浓度对照品置于不同进样瓶中，各进一针，记录峰面积，求样品浓度与峰面积的相关系数。2.4.4.3 测试标准：相关系数r0.999 2.4.3 最小检测浓度的确认2.4.3.1 测试条件：流动相：乙腈-水（20:80） 对照品：110-7/ml咖啡因对照溶液色谱柱：C18色谱柱 检测波长：273nm进样量： 5l 流速1.000ml/min柱温：402.4.3.2 测试方法：以流动相冲洗系统至基线平稳，进样，记录色谱图，由色谱图峰高及基线噪音，按下式计算最小检测浓度CL式中：CL最小检测浓度，g/ml；Nd基线噪音峰高，mAU；C标准溶液浓度，g/ml；H标准溶液色谱峰高，mAU。2.4.3.3 测试标准：110-7 g/ml咖啡因溶液第5页 共5页
