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1、硫酸亚铁对溃疡性结肠炎模子大鼠氧化应激状态的影响张道权，吴正祥，吴强，杨枫，吴正升【摘要】目的观察口服硫酸亚铁FeS4对三硝基苯磺酸TNBS诱导的溃疡性结肠炎U模子大鼠氧化应激状态的影响。要领接纳TNBS乙醇溶液复制U大鼠模子，雄性SD大鼠60只，随机分为6组，每组10只，别离为正常比拟组、模子比拟组、FeS4比拟组100gkg-1d-1和FeS4低剂量组50gkg-1d-1、中剂量组100gkg-1d-1和高剂量组300gkg-1d-1，给药2周后别离不雅察大鼠的一样平常状态、构造病理学变革、构造及血清超氧化物歧化酶SD与丙二醛DA程度。效果FeS4中、高剂量组大鼠体质量减轻，腹泻动物数增长
2、，结肠构造损伤加重，血清与结肠构造SD活性低落、DA程度升高P0.05。结论U模子大鼠体内存在氧化应激，口服增补FeS4大概会进一步加剧其体内氧化应激状态及结肠构造病理学损伤。【关键词】硫酸亚铁;溃疡性结肠炎;三硝基苯磺酸;氧化应激;大鼠溃疡性结肠炎ulerativelitis，U是一种病因不明的直肠和结肠慢性非特异性炎症，临床重要表现为重复爆发的腹痛、腹泻及黏液脓血便，重症或病情一连运动的患者可出现缺铁性血虚。临床不雅察创造，赐与U患者口服铁剂不克不及很好地被耐受，乃至会加重胃肠道病症或促进疾病运动1。硫酸亚铁ferrussulfate，FeS4是临床最为常用的铁剂之一，同时也是一种强氧化剂
3、，大概会因产生自由基xygen-derivedfreeradials，FR而加重构造损伤2。本实行使用三硝基苯磺酸2，4，6-trinitrbenzenesulfniaid，TN-BS复制U模子，不雅察FeS4对U模子大鼠氧化应激状态的影响，为临床治疗提供根据。1质料和要领1.1药物和试剂TNBS购于Siga公司，5%/V水溶液，批号为P2297;FeS4，上海黄浦制药有限责任公司消费，批号为050606，轻轻把FeS4片研碎，称取必然量的粉末，参加蒸馏水配成100gl-1的混悬液备用;丙二醛DA、超氧化物歧化酶SD、考马斯亮兰卵白检测试剂盒均为南京建成生物工程研究所产物，批号为2022032
4、3。1.2动物雄性SD大鼠60只，体质量200220g，由安徽医科大学实行动物中央提供，平凡级。1.3仪器756紫外分光光度计上海细密科学仪器，TGL-16H高速离心机珠海黑马医学仪器，可控式硅恒温水浴锅上海锦屏仪器仪表，QL-901漩涡混淆器江苏海门麒麟医用仪表厂，电子阐发天平上海天平仪器厂，DIAX-900内切式构造匀浆机德国HEidlph公司。1.4大鼠U模子制备3康健大鼠60只，随机分为6组。留2组作正常比拟组与FeS4比拟组，余4组均制备模子，禁食不禁水24h后，腹腔注射3%戊巴比妥钠1lkg-1使大鼠略微麻醉后，将直径2的乳胶管经肛门轻轻插入大鼠体内约莫8处，将TNBS125gkg
5、-1的50%乙醇溶液徐徐注入到大鼠肠腔内，提起大鼠尾部，倒置30s，使造模剂充实渗入大鼠肠腔。1.5分组及给药将正常大鼠随机分为正常比拟组与FeS4比拟组，每组10只;将造模大鼠随机分为模子比拟组，Fe-S4给药高、中、低剂量组，每组10只。FeS4比拟组大鼠，根据100gkg-1d-1灌胃FeS4混悬液;Fe-S4高、中、低剂量组大鼠，别离根据300gkg-1d-1、100gkg-1d-1、50gkg-1d-1灌胃FeS4混悬液;正常比拟组及模子比拟组大鼠天天灌胃同体积生理盐水，各组大鼠均在造模后6h开始给药，一连给药2周。1.6病症不雅察天天对各组大鼠举行称重，不雅察体质量变革并记载;不雅
6、察大鼠粪便外形，记载大鼠产生腹泻、血便的数目。1.7结肠黏膜构造损伤评分各组大鼠给药2周后，3%戊巴比妥钠过量麻醉，腹自动脉取血2l，离心后置-80冰箱保存备用。将肛门以上10肠段取出，沿肠系膜纵行切开，用冰生理盐水冲洗，并称量。将黏膜向上睁开，不雅察黏膜损伤并根据allae和Keenan1990年的评分尺度4举行评分:0分为无炎症和溃疡;1分为局部充血但无溃疡;2分为有溃疡但无充血;3分为有1处溃疡及炎症;4分为有2处或2处以上溃疡及炎症;5分为溃疡延伸凌驾2。同时取少量炎症肠构造，敏捷安排液氮罐中备用。1.8病理构造切片不雅察取肛门以上8肠段卷起，置10%中性甲醛液中结实，白腊包埋，行4厚
7、一连切片，HE染色不雅察构造学变革。1.9生化指标测定血清及结肠构造DA、SD均根据检测试剂盒说明书举行操纵。1.10统计学处置惩罚计量指标以x-s表现，多组间比力行方差阐发，各组间两两比力行LSD查验，接纳SPSS12.0软件举行统计阐发。2效果2.1一样平常状态及大便性状的变革见表1。正常组与FeS4比拟组大鼠运动如常，反响机灵，毛发有光芒，饮食正常，体质量增长较多，无腹泻及便血;制模大鼠精力萎靡，毛发无光芒，饮食淘汰，均出现差异程度的腹泻、便血。正常比拟组与FeS4比拟组大鼠体质量增长、腹泻及便血无明显性差异;与正常比拟组比力，模子比拟组大鼠体质量增长显着淘汰P0.01;FeS4中、高剂
8、量组大鼠体质量增长明显低于模子比拟组P0.05，产生腹泻、便血动物只数显着增多。表1各组大鼠产生腹泻数及体质量变革略2.2结肠损伤评分及生化指标改变见表2。不雅察大鼠结肠外不雅及黏膜外貌创造，正常比拟组与FeS4比拟组大鼠结肠黏膜无显着充血水肿，未见腐败及溃疡灶;模子比拟组大鼠的结肠多数与相邻脏器有轻度的粘连，结肠充血水肿，在距肛门8的肠段有较大的溃疡病灶，病灶处结肠壁增厚，肠黏膜外貌产生溃疡腐败坏死，与正常比拟组大鼠比拟，结肠显着变短，结肠质量增长;FeS4各剂量组大鼠结肠水肿、腐败等炎性病症显着加重，溃疡面积增大。模子组结肠病理损伤评分、结肠构造和血清DA水均匀高于正常比拟组P0.01，结
9、肠构造和血清SD水均匀低于正常比拟组P0.01;与模子比拟组比力，Fe-S4中、高剂量组结肠构造损伤评分、结肠和血清DA程度明显升高P0.05，结肠和血清SD程度明显低落P0.05，中、高剂量组之间无显着差异;上述指标在FeS4比拟组与正常比拟组未见统计学差异P0.05。表2各组大鼠结肠损伤以及生化指标的影响略2.3结肠构造病理学变革见图1。正常大鼠结肠构造布局清楚，黏膜完备，肠腺富厚，摆列细密图1A;TNBS造模后，大鼠结肠构造黏膜坏死脱落，溃疡形成，大量中性粒细胞浸润，腺体消散图1B;FeS4比拟组大鼠结肠构造粘膜布局完备，未见溃疡形成图1;FeS4低、中、高剂量组大鼠结肠构造肠黏膜上皮脱
10、落缺损加重、溃疡地区显着增大，黏膜四周上皮增生修复减慢，炎细胞增长图1DF。3讨论TNBS是一种半抗原，其诱导产生的大鼠模子除产生腹泻、便血、体质量减轻等临床病症外，还可以诱发大鼠肠道炎症，肠黏膜产生溃疡、水肿、腐败、大量炎性细胞浸润等构造病理学改变，雷同于人类的U，由于制备简朴省时而被普及应用。研究创造，氧自由基在U的发病中起紧张作用，氧自由基对自身构造产生打击作用，到场并通过脂质过氧化反响产生炎症介质白三烯、前线腺素等活化炎症反响5。DA是氧自由基触发细胞膜上的不饱和脂肪酸产生脂质过氧化反响的产物，其含量反响了构造过氧化损伤程度，它能使肠粘膜构造损害进一步加重。DA程度的凹凸又间接反响机体
11、细胞受自由基打击的严峻程度。SD是紧张的过氧化物剖析酶，能有用扫除氧自由基从而按捺脂质过氧化反响，并能不变细胞膜，SD程度的凹凸间接反响了机体抗氧化本领。Aghdassi等6报道，赐与U模子大鼠腹腔注射右旋糖苷铁，可以加重其结肠损伤，加剧其粘膜氧化应激状态。本研究中，FeS4中、高剂量组给药均可以恶化TN-BS造模导致大鼠的腹泻、体质量减轻等病症，加重U模子大鼠结肠的构造学损伤，低落结肠构造及血清SD的活力，升高结肠构造及血清DA程度，对U模子大鼠的氧化应激状态表现出显着的加剧作用;但在赐与正常大鼠划一剂量FeS4时未见上述环境产生。综上所述，U大鼠机体抗氧化本领削弱，处于氧化应激状态;当赐与
12、口服必然剂量FeS4时，大概通过Fe2+作用产生大量氧自由基，导致机体的氧化应激进一步恶化，从而加剧机体的氧化损伤。因此，对付U归并血虚补铁治疗时，应选择准确的补铁方法如非离子铁，公正的营养干预，进步机体抗氧化本领，对付防范口服补铁引起的氧化应激，减轻氧化损伤，淘汰并发症的产生有紧张意义。【参考文献】1ldenburgB，KningsbergerJ，VanBergeHeneguenGP，etal.IrnandinflaatrybeldiseaseJ.AlientPharalTher，2001，154:429-438.2AustSD，rehuseLA，ThasE.Rlefetalsinxygen
13、radialreatinsJ.JFreeRadiBiled，1985，11:3-25.3HibiT，gataH，SakurabaA.Anialdelsfinflaat-rybeldiseaseJ.JGastrenterl，2002，376:409-417.4allaeJL，Keenan.Anrallyativeinhibitrfleu-ktrienesynthesisaelerateshealinginaratdelflitisJ.AJPhysil，1990，2584Pt1:G527-534.5KruidenierL，VerspagetH.xidativestressasapath-genifatrininflae-atrybeldisease-radialsrri-diulus?J.AlientPharalTher，2002，1612:1997-2022.6AghdassiE，arrierJ，ullenJ，etal.Effetfirnsupple-entatinnxidativestressandintestinalinflaatininratsithautelitisJ.DigDisSi，2001，465:1088-1094.
