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1、溶菌酶在食品工业中的应用极其发展状况溶菌酶(lysozyme; EC3. 2. 1. 17)是一种专门作用于微生物细胞壁的水解酶,又称细胞壁溶解酶。人们对溶菌酶的研 究始于本世纪初,英国细菌学家弗莱明发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶,并将其命名为溶菌酶。此后, 人们在动物、植物和微生物中都发现了溶菌酶的存在。随着研究的不断深入,人们发现溶菌酶不仅对细菌细胞壁有作用,还可作用于真菌细胞壁。根据来源不同,溶菌酶可以 分为以下三类:1)动物溶菌酶鸡蛋白中约含有3.5的溶菌酶,可分解革兰氏阳性菌,对革兰氏阴性菌不起作用,其分子量为14000。此外,从其他 鸟类蛋白、哺乳动物乳汁及体液中也分
2、离到了溶菌酶。2)植物溶菌酶研究人员对116科410种植物进行普查,发现168种植物中含有溶菌酶。其中木瓜、无花果,大麦等植物中均可分离 出溶菌酶,其分子量较大,约为24000-29000,其对溶壁小球菌的溶菌活性不超过鸡蛋白溶菌酶的13。3)微生物溶菌酶 人们从上世纪60 年代发现微生物也产生溶菌酶,按其作用对象可分为两大类,即细菌溶菌酶和真菌溶 菌酶。溶菌酶的种类1)细菌溶菌酶细菌溶菌酶通常可分为三大类:N-乙酰氨基己糖苷酶,它催化水解肽聚糖中糖骨架中的0(14糖苷键;N-乙酰胞壁酰- 丙氨酸酰胺酶,它催化裂解肽聚糖中糖基与肽基;内肽酶,它催化裂解肽聚糖肽桥中的肽键。研究发现,溶菌酶的抗菌
3、 活性不仅表现在其分解细菌细胞壁方面,当酶受到不可逆抑制后,它仍然显示出抗菌效应,这可能与溶菌酶呈碱性有关。 不同来源的溶菌酶有不同的抗菌范围,并对不同类型的肽聚糖有特异性,特别是它们对0-乙酰化肽聚糖的分解能力不同。 由于革兰氏阳性菌无外膜,所以溶菌酶对它们作用较强。溶菌酶与EDTA并用,可加强对革兰氏阴性菌的抑制作用。用 紫苏醛处理溶菌酶,或将溶菌酶连接到半乳甘露聚糖上,可加强该酶穿过外膜进入靶细胞,从而增强其对革兰氏阴性菌 的作用。此外,溶菌酶与其他抗微生物酶(葡萄糖氧化酶、乳过氧化物酶)或与传统的防腐措施(如山梨酸盐、乙醇、温度 和低PH)联用,可以提高食品微生物安全性。2) 真菌溶菌
4、酶真菌溶菌酶主要包括几丁质酶和-B葡聚糖酶。(1) 几丁质酶虽然一些外几丁质酶(exochitinases; EC3. 2. 1. 30)也表现出抗真菌的特性,但抗真菌的几丁质酶主要是内几丁质酶 (en dochit in ases; EC3. 2. 1. 14)。人们已经研究了许多来自于植物和微生物的几丁质酶,并对有些几丁质酶抑制真 菌生长/裂解真菌细胞的作用进行了研究。科学家们首先在植物中发现了几丁质酶的抗真菌作用,这类几丁质酶可以对抗 侵入植物体的真菌病原体。微生物几丁质酶主要是由链霉菌属、杆菌和大多数真菌产生的。细菌分泌几丁质酶主要用于 真菌细胞壁的降解和重组,但在大多数产几丁质酶的真
5、菌中,此酶主要用于真菌细胞壁的成型过程。只有在一些特定的 寄生霉菌中,如 Trichoderma harzianum、APhanocladium album 和 Gliocladium vixens 中,胞外几丁质酶和 p-葡聚糖 酶用来附着和降解目的菌丝。这些抗真菌的几丁质酶与植物几丁质酶相似,多为内几丁质酶。由于肽聚糖和甲壳质的糖 骨架具有相似的结构,因此,一些几丁质酶也具有溶菌酶活性。(2) p-葡聚糖酶p-葡聚糖酶(p-glucanases; EC 3. 2. 1. 39)具有抗真菌作用主要是因为它能水解p(1-3)糖苷键。研究表明:(3(1-3) 葡聚糖酶对几丁质降解真菌细胞壁具有显
6、著的协同作用。如将纯化的几丁质酶和p-葡聚糖酶合用,抗灰色葡萄抱(Botrytis cin era)的作用提高了 10倍。内葡聚糖酶与外葡聚糖酶、不同内葡聚糖酶间也具有协同抗真菌作用。因为许多植物性食 品中含有p-葡聚糖成分,它对维持产品的组织性、黏度和外观都有重要作用,将3-葡聚糖酶加入这类食品,可能会引起 不良影响。真菌的细胞壁主要组分为几丁质和p-葡聚糖,但一些真菌和大多数酵母细胞壁含有其他类型的多糖(甘露聚糖、 a-葡聚糖和纤维素),因此,甘露聚糖酶、a-葡聚糖酶也可作为抗真菌的酶类应用于食品工业。溶菌酶在食品工业中的应用1)溶菌酶在乳制品中的应用人乳中含有大量的溶菌酶,而牛乳中则很少
7、,将溶菌酶添加到牛乳及其制品中,可使牛乳人乳化;研究还表明,溶菌酶 是双歧杆菌增长因子,有防止肠炎和变态反应的作用,对婴、幼儿的肠道菌群有平衡作用;在干酪生产中添加溶菌酶可 代替硝酸盐等抑制丁酸菌的污染,防止干酪产气,并对干酪的感官质量有明显改善作用。2)溶菌酶在新鲜海产品、肉类制品中的应用研究表明,溶菌酶、氯化钠和亚硝酸盐联合应用到肉制品中可延长肉制品的保质期,其防腐效果比单独使用时效果更好。 对于-些新鲜的海产品和水产品经溶菌酶处理后均可延长储存期。3)溶菌酶在低度酒类和饮料中的应用在低度酒中添加20mg/kg的溶菌酶不仅对酒的风味无任何不良影响,还可防止产酸菌的生长,同时受酒类澄清剂的影响 很小,是低度酒类较好的防腐剂,如日本就把溶菌酶用于清酒的防腐。此外,溶菌酶还可用于pH 6.0-7.5的饮料和果汁 的防腐。4)溶菌酶在其他食品中的应用奶油蛋糕是容易腐败变质的食品之一,在糕点中加入溶菌酶,可防止微生物的繁殖,起到防腐作用。章银良研究了溶菌 酶对草莓的保鲜作用,发现将溶菌酶与甘氨酸联用,保鲜效果更佳。由于处于酵母细胞壁中的蛋白质利用率很低,所以 利用溶菌酶破坏酵母细胞壁,可制成微生物蛋白质,提高酵母蛋白质的利用率。用含放线菌体的溶菌酶处理酵母液可生 产出含有 5-肌苷酸、5-鸟苷酸及其他呈味物质。