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1、葡萄糖测定方法原理3,5-二硝基水杨酸（DNS）与还原性糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，该物质在 520 nm处有最大吸收峰，且在一定范围内吸收峰的强度0D值）与还原糖浓度成线性关系, 利用比色法可测得样品的含糖量。该方法是半微量定糖法，操作简便，快速，杂质干扰少试剂1）3, 5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂）甲液:溶解6.9 g苯酚于mL 10% NaOH中，并稀释至69 mL,在此溶液中加入6.9 g NaHSO 乙液：称取255 g酒石酸钾钠，加到300 mL 10% NaOH中，再加入880 mL 1%的3,5- 二硝基水杨酸。甲、乙液混合得黄色试剂,贮存于棕色瓶中,室温放置7-1
2、0天后备用。2）%葡萄糖标准液（1 g/L）准确称取100 mg分析纯的葡萄糖（预先在105C干燥至恒重），加少量的蒸馏水溶解后 定容至100 ml,冰箱中保存备用。操作步骤2 mL样品（稀释）+ mL DNS T沸水浴5 min T流水立即冷却至室温T定容至25 mL T 520 nm处检测OD值浓度范围0 0.5 g/L标准曲线葡萄糖母液1 g/L:称取g葡萄糖，溶于1000 mL去离子水。DNS（mL）葡萄糖母液（mL）01水（mL）21注意事项1）考虑葡萄糖的结晶水；2）可以根据稀释倍数计算加入反应体系的样品量，不足的补水。3）0D52在之间时，葡萄糖的浓度基本上与吸光值呈线性关系，超过该范围，则应当适当稀 释。参考文献1 Miller G L. Use of dinitrosalicylic acid reagent for determination of reducing sugars J. Anal. Chem., 1959, 31: 426-428
