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1、精选文档人用疫苗总论1归纳疫苗是以病原微生物或其构成成分、代谢产物为开端资料，采纳生物技术制备而成，于预防、治疗人类相应疾病的生物制品。疫苗接种人体后可刺激免疫系统产生特异性体液免疫和（或）细胞免疫应答，令人体获取对相应病原微生物的免疫力。本总论所述疫苗系指用于传得病预防的人用疫苗，按其构成成分和生产工艺可分为以下种类。用1.1灭活疫苗是指病原微生物经培育、增殖，用理化方法灭活后制成的疫苗，如百日咳疫苗、甲型肝炎灭活疫苗等。1.2减毒活疫苗是指采纳病原微生物的自然弱毒株或经培育传代等方法减毒办理后获取致病力减弱、疫原性优异的病原微生物减毒株制成的疫苗，如皮内注射用卡介苗、麻疹减毒活疫苗等。免1
2、.3亚单位疫苗是指病原微生物经培育后，提取、纯化其主要保护性抗原成分制成的疫苗，如膜炎球菌多糖疫苗、流感亚单位疫苗等。A群脑1.4基因工程重组蛋白疫苗是指采纳基因重组技术将编码病原微生物保护性抗原的基因重组到细菌（如大肠杆菌）、酵母或细胞，经培育、增殖后，提取、纯化所表达的保护性抗原制成的疫苗，如重组乙型肝炎疫苗等。1.5其余类疫苗由不一样病原徼生物抗原混杂制成的疫苗为联合疫苗，如吸附百白破联合疫苗、麻腮风联合减毒活疫苗；由同种病原微生物不一样血清型的抗原混杂制成的疫苗为多价疫苗，如A群C群脑膜炎球菌多糖疫苗、双价肾综合征出血热灭活疫苗；由病原微生物的保护性抗原组分与蛋白质载体联合制成的疫苗为
3、联合疫苗，如A群C群脑膜炎球菌多糖联合疫苗。本总论是对人用疫苗生产及质量控制的通用性要求，详细品种还应吻合本版药典各论的要求。2过程控制的基本要求2.1全过程质量控制疫苗是由拥有免疫活性的成分构成，生产过程使用的各种资料本源及种类各异，生产工艺复杂且易受多种要素影响，对付生产过程中的每一个工艺环节以及使用的每一种资料进行质量控制，并拟定其可用于生产的质量控制标准；应拟定工艺过程各中间产物可进人后续工序加工办理的质量要求，对付生产过程拟定偏差控制和办理程序。2.2批间一致性的控制对付要点工艺步骤的中间产物的要点参数进行测定，并拟定可接受的批间一致性范围。对半成品配制点的控制应选择与有效性相关的参
4、数进行测定，半成品配制时应依占有效成分测定方法的偏差、不一样操作者之间及同一操作者不一样次操作之间的偏差综合确定配制点。成品或疫苗原液，应选择多个要点指标进行批间一致性的控制。对用于批间一致性控制的测定方法应依照相关要求进行考据，于批间一致性的议论。使检测结果可正确有效地用2.3目标成分及非目标成分的控制疫苗的目标成分系指疫苗有效成分。应依据最少能达到临床有效保护的最低含量或活性确定疫苗中有效成分的含量及（或）活性；增添疫苗佐剂、类型及用量应经充分评估。疫苗的非目标成分包含工艺相关杂质和制品相关物质/杂质。工艺相关杂质包含本源于细胞基质、培育基成分以及灭活和提取、纯化工艺使用的生物、化学资料残
5、留物等；制品相3 关物质/杂质包含与生产用菌毒种相关的除疫苗有效抗原成分之外的其余成分以及抗原成分的降解产物等。生产过程中应尽可能减少使用对人体有毒、有害的资料，一定使用时，应验征后续工艺的去除成效。除非考据结果提示工艺相关杂质的残留量远低于规定要求，且低于检测方法的检测限，平时应在成品检定或适合的中间产物控制阶段设定该残留物的检定项。应经过工艺研究确定纯化疫苗的制品相关物质/杂质，并采纳适合的解析方法予以判定。应在成品检定或适合的中间产物控制阶段进行制品相关物质/杂质的检测并设定可接受的限度要求。疫苗生产用种子批系统疫苗生产用种子批系统包含生产用菌毒种及基因工程疫苗生产用细胞株，典的相关要求
6、。应吻合本版药种子批系统平时包含原始种子/细胞种子、主种子批/主细胞库和工作种子批/工作细胞库，成立种子批系统的目的旨在保证疫苗生产的一致性和连续性。应成立主种子批/主细胞库和工作种子批/工作细胞库并规定使用的限制代次。3.1三级种子系统原始种子/细胞种子是指经培育、传代及遗传稳固性等研究并经判定可用于疫苗生产的菌毒种或许细胞株，可以是一个代次的，也可以是多代次菌毒种或许细胞株，是主种子批/主细胞库前各代次种子的总称；原始种子/细胞种子用于主种子批/主细胞库的制备。外购或经技术转让获取的生产用种子，应按规定成立主种子批/主细胞库，主种子批/主细胞库前的种子应依照原始种子/细胞种子管理。主种子批
7、/主细胞库是指由原始种子/细胞种子经传代，并经同次操作制备获取的构成均一的悬液。主种子批/主细胞库应为一个固定代次，用于工作种子批/工作细胞库的制备。工作种子批/工作细胞库是指由主种子批/主细胞库经传代，并经同次操作制备获取的组成均一的悬液。工作种子批/工作细胞库应为一个固定代次，用于疫苗的生产。种子批系统各种子批/细胞库应在吻合中国现行药品生产质量管理规范的条件下建立和制备，并应有详细的记录。主种子批/主细胞库确定无外源因子污染时，来自该主种子批/主细胞库的工作种子批/工作细胞库只要清除制备工作种子批/工作细胞库所需的资料和过程可能存在的外源因子污染的风险；如因主种子批/主细胞库数目限制而没
8、法进行全面的外源因子检查时，对付工作种子批/工作细胞库进行全面检定。3.2细菌性疫苗种子批系统应详细记录细菌的本源、传代及其所使用的所有原资料的状况。对种子批的成立，应确定菌种制备、扩增方式以及次数。应依据菌种的储蓄特色及生产规模，尽可能制备批量足够大的工作种子批，以满足必定生产周期的使用。种子批的收藏应依照不一样细菌的特征可采纳在培育基上保留培育物、冷冻干燥、液体超低温冷藏等方式收藏菌种以保证其稳固性。生产用菌各种子批的检定应吻合相关各论的要求。检定内容应包含菌种形态特征、培育特征、增殖能力、分子遗传表记、免疫学特色、毒力、毒性、毒性逆转、免疫原性、免疫力等试验；同时应采纳相对敏感的方法检测
9、种子的菌株纯度，以保证菌株没有外源因子和杂菌污染。3.3病毒性疫苗种子批系统应详细记录病毒的本源、传代历史以及传代过程中任何可能对病毒表型产生影响的操作（如冷适应、不一样物种动物体内或细胞传代，或有目的的基因操作等）。种子批的收藏应吻合相关各论的要求；冻干收藏有益于种子批的稳固。种子批检定项目的确定应依据每个病毒株种子批成立的特定状况，以及对病毒种子相关特色的评估，包含在生产细胞基质、禽胚或动物体内的生长特色、组织嗜性、遗传标记、鉴别（对重组载体目的蛋白基因或目的蛋白的鉴识）、储存时期的活力、生产过程中的遗传稳定性、减毒特征、纯度以及无外源因子污染。假如毒种的减毒或驯化是经过不一样物种间传代获
10、取的，则对付该病毒种子进行评估，以证明无相关物种的外源性因子污染。种子批遗传稳定性的评估，平时应自主种子批代次起最少超出疫苗中病毒代次5代以上。生产用毒种的检定应吻合相关各论的要求。种子批的检定项目最少应包含鉴识（血清学、全病毒或部分特色性序列测序）、外源因子、病毒表型、遗传稳固性等。外源因子检测如需进行病毒中和，应防止抗血清中存在中和潜伏外源因子的抗体，使用特异性单克隆抗体可最大限度防止这类有时性；如使用动物免疫血清中和病毒，应使用非疫苗生产株病毒免疫SPF动物制备的血清。人类血清抗体谱较广，不宜用作外源因子检测时中和用抗体。为增添外源因子检测的敏感性，可增添聚合酶链反响（PCR），基因测序
11、技术等敏感检测技术清除外源因子。对已知拥有神经嗜性的病毒，应选择合适的动物模型、方法及评分系统进行神经毒力评估。对于拥有神经毒力的病毒或可能拥有神经毒力回复的病毒（如脊髓灰质炎病毒），必需时对付超出主种子代次的毒种进行神经毒力评估。在病毒分别和种子批系统的成立过程中，应防止使用人血白蛋白和抗生素等增添物。3.4基因工程疫苗种子批系统应按规定成立工程细胞库系统，平时可采纳有限稀释法以达到生产用细胞库同质性目的。应经过传代稳固性解析确定工程细胞的传代限度，应采纳适合控制措施保证成立细胞库时细胞不被外源因子污染。种子库收藏一般可采纳液体超低温冷藏或液氮等方式收藏，以保证其稳固性。种子库检准时应证明表
12、达系统的遗传稳固性、目的基因表达稳固性和生产稳固性等。细胞库需进行全面检定，工作细胞库要点检测外源因子污染。4病毒性疫苗生产用细胞基质4.1疫苗生产用细胞基质的选择主选择疫苗生产用细胞基质应基于风险效益的综合评估，包含细胞的种属及组织本源、细胞对病毒的敏感性、扩增病毒的稳固性、细胞的特征及全面检定的可行性、细胞对制品的安全性、生产工艺的便利性以及下游纯化工艺可以去除风险要素的可能性和达到的安全水同等。平时状况下应选择风险较低的细胞用于生产，如人二倍体细胞等。4.2细胞基质的类型疫苗生产用细胞基质平时包含原代细胞、二倍体细胞和连续传代细胞。原代细胞是指直接取自健康动物的组织或器官，经过采纳拥有高
13、度可重复性的组织分别、细胞办理及原代细胞培育工艺制备成细胞悬液并马上培育的细胞。原代细胞保持了本源组织或器官原有细胞的基天性质。疫苗生产时应只限于使用原始培育的细胞或有限传代的细胞（原始细胞传代一般不超出5代）。二倍体细胞是指在体外拥有有限生命周期的细胞，经过原代细胞体外传代培育获取（如MRC-5、2BS、KMB17及WI-38细胞），其染色体拥有二倍体性且拥有与本源物种一致的染色体核型特色。细胞体外倍增必定水平后会进入衰老期，即细胞复制停止，但仍存活且有代谢活动。连续传代细胞是指体外拥有无穷增殖能力的细胞，但不拥有本源组织的细胞核型特色和细胞接触克制特征。有些传代细胞系是经过原代细胞在体外传
14、代过程中自觉突变产生的，如Vero细胞。4.3细胞使用代次的确定疫苗生产用细胞应在与生产条件同样的培育条件下进行连续细胞传代，确定细胞可使用的传代水平。每次传代时应采纳固定的培育时间、接种量或传代比率，经过细胞倍增时间的变化或传代水平，确定细胞在该条件下的最高传代水平；并联合细胞的生长特征、成瘤性/致瘤性及对病毒的敏感性、生产工艺及生产能力等参数，分别确定主细胞库、工作细胞库、生产代次及生产限制代次。平时，二倍体细胞应最少传代至衰老期，并计算其最高群体倍增水平，其最高使用代次应限制在该细胞在该培育条件下细胞集体倍增水平的前2/3内。传代细胞（如Vero细胞），用于疫苗生产的细胞代次应限制在细胞
15、未出现致瘤性的安全代次内。4.4细胞库的管理细胞库依照三级管理，即细胞种子、主细胞库及工作细胞库。细胞种子可以是自建的或经过克隆化挑选或经改造的，并证明可用于疫苗生产的细胞，也可以是引进的或引进后少许冻存的证明可用于生产的细胞，细胞种子用于成立主细胞库，主细胞库用于成立工作细胞库。生产用培育基/培育液培育基的成分应明确且能满足其使用目的，并吻合本版药典的相关要求。严禁使用来自牛海绵状脑病疫区的牛源性原资料。5.1细菌用培育基培育基中供细菌生长所需的营养成分包含蛋白质、糖类、无机盐、微量元素、氨基酸以及维生素等物质。应尽可能防止使用可惹起人体过敏反响或动物本源的原资料，任何动物源性的成分均应溯源并进行外源因子检测。5.2细胞用培育液病毒疫苗生产用细胞培育液应采纳成分明确的资料制备，并考据生产用细胞的适应性。对使用无动物源性血清培育基的，应详细记录所有代替物及增添物质的本源、属性和数目比率等信息。疫苗生产用培育基中不得使用人血清。使用生物源性资料，应检测外源性因子污染，包含细菌和真菌、支原体、分枝杆菌以及病毒。对生产过程中增添的拥有潜伏毒性的外源物质，对付后续工艺去除成效进行考据，残留物检测及限度应吻合相关规定。5.3常用增添成分牛血清牛血清应本源于无疯牛病地区的健康牛群，并应吻合本版药典的要求。经过灭活程序的牛血清更具安全性，但使用经灭活的牛血清时，其检测应
