Q-PCR Array服务介绍

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1、Q-PCR array是信号通路基础生物学研究和临床疾病研究的重要工具。这种功能分类芯片运用成熟的SYBR Green荧光定量PCR技术,专注于一个信号通路中基因的表达水平检测。与传统的高密度表达谱芯片相比,Q-PCR array具有针对性强、灵敏度高、准确可靠等优点。芯片上的基因包括了与研究对象有确定关系的基因,或至少是与研究对象的关系有待考证的基因。如果研究对象是某一生物学通路的基因,则使用针对该类基因的功能分类基因芯片比使用高密度表搭配芯片更加有效便利。美国SABioscience公司是Qiagen旗下子公司,在Q-PCR array领域具有国际领先地位。目前SABioscience公司

2、针对不同的信号通路和疾病相关基因设计了150多款功能分类芯片,种属包括人、小鼠、大鼠、果蝇、猪、兔、鸡等,格式分为96孔和4 x 96孔两种。针对客户的需求,还有个性化定制芯片服务。BioTNT是SABioscience公司的合作伙伴,能为您提供完善的功能分类基因芯片技术服务,您只需提供保存完好的组织或细胞样品,我们就可为您完成实验操作和数据分析。 BioTNT 同时提供自产QPCR Array 产品,并提供定制QPCR Array 产品。BioTNT QPCR芯片特点:l 灵敏度高,样本使用量低;l 线性范围广,可同时检测表达水平差异大的基因;l 每个基因的检测引物优化后保证高扩增率和产物单

3、一;l 重复性高,Ct值的平均差异只有0.25个循环;BioTNT QPCR Array芯片技术服务流程:1、选择您要检测的基因;或者联系Biotnt提供基因名称(发送到);2、确定是采用目录QPCR Array还是定制QPCR Array;确定PCR Array 产品号,确定样本数量,确定是做单孔还是重复;与BioTNT 签订产品合同和服务合同,付定金;3、客户提供样本;4、BioTNT 对客户提供的样本进行干冰取样,RNA 抽提5、客户样本RNA抽提:a) 若实验对象为组织样本,取适量(50-100mg)新鲜组织或正确保存的样本,加1mL的Trizol,匀浆后抽提RNA,采用Qiagen

4、RNeasy Mini Kit (50) 74104,RNase-Free DNase Set (50),79254进行抽提RNA,在抽提的过程中加入DNase,去除基因组DNA。b)若实验对象为细胞样本,每份样本取1*106-107细胞,完全吸去培养液后加 1mL的Trizol,裂解后提取RNA,采用Qiagen RNeasy Mini Kit (50) 74104,RNase-Free DNase Set (50),79254进行抽提RNA,在抽提的过程中加入DNase,去除基因组DNA。6、RNA质量检测a) 采用NanoDrop测定RNA浓度,OD比值(260nm和280nm处的OD值

5、),并评测RNA质量。质量符合要求的可进行下一步实验;RNA质量如需进一步评估,可以采用Agilent 2100 Bioanalyzer进行分析(选测)。不符合要求的需要重新提供样品送检;7、cDNA模板制备均一化RNA 浓度,按照cDNA第一链合成试剂盒将样本RNA逆转录为cDNA。8、实时定量PCR实验前先采用CDNA 选测内参基因进行第二次质检;质检合格的进行正式QPCR Array 实验;根据说明将cDNA模板适当稀释后加入到实时定量PCR反应混合液中,然后QPCR Array板上(预包被了特异性引物)加入等量反应液,采用ABI ViiA7进行实时定量PCR反应。9、数据处理:利用仪器

6、配套软件计算PCR芯片中的每个基因的Ct值。按照BioTNT QPCR Array 分析软件,分别copy test sample和control sample 的CT值到excel 表中。根据excel 表软件,计算是否符合质量控制,选择内参基因,计算基因的表达上调或者下调,筛选出有价值的基因。10、提供实验报告:包括详细的实验方法及实时定量PCR芯片实验结果及相关图表。具体包括:包括原始数据CT 值;原始数据文件;包括实验结果;3D-Profile 图表;scatter plot 图表;volcano plot图表;BioTNT 实时定量PCR 检测使用的仪器进行检测使用的主要仪器为QPC

7、R, BioTNT 使用life technology最新款的ViiA 7实时荧光定量PCR系统进行microRNA的QPCR 检测。ViiA 7实时荧光定量PCR系统在单一的高性能仪器上融合了您需要的所有实时荧光定量PCR特性,从而帮助您优化研究效率。ViiA7系统具有简单的工作流 程、直观的软件、触控屏界面以及使误操作降至最少的单键实验方案,可提供出众的重复性和最小的孔间和仪器间差异。产率ViiA 7系统适用于中等至高通量实时荧光定量PCR,可提升您的实验室效率。快速的加热块更换前开门设计使热循环加热模块的更换变得更容易,无需移动旁边的设备,如机械臂或计算机简单的触摸屏界面仪器触摸屏提供了

8、一键式实验方案,可快速简单地完成各种应用Assay的设置自动化兼容性ViiA 7系统结合了Applied Biosystems Twister II 机器人,使您在自动化环境下实现效率最大化整合可与TaqMan Array微流体芯片和 Applied Biosystems TaqMan Assay完全兼容:实时荧光定量PCR分析的金标准,具有高灵敏度、高特异性和宽动态范围。384 孔通量且无需机器辅助采用TaqMan Array微流体芯片,无需移液机器人或复杂的移液装置;只需加入您的样本和预混液,即可在ViiA 7系统上运行与全套 TaqMan Assay 兼容ViiA 7系统已经过优化,可用

9、于所有TaqMan Assay(包括 MicroRNA、蛋白质、非编码 RNA 和Pri-miRNA Assay),从而获得清晰简洁的数据性能ViiA 7系统具有下列特点:OptiFlex 系统增强型荧光检测,可实现准确且灵敏的数据分析最大程度的多重分析能力6 个可自由组合的激发和发射滤光片通道,可实现最多的染料组合和最大的多重反应能力灵活的数据采集多种升降温方法检测形式为升降温阶段的荧光数据采集提供了更多的灵活性精确定量在单色反应中可检测出低至1.5倍的拷贝数差异ViiA 7软件具有:直观的界面和创新的设计便捷的自动化操作更强大的数据分析与高通量完全兼容可扩展的软件构架提供可选的附加性能,可

10、升级至现有软件。遵循美国联邦法规第21章第11节(21 CFR Part 11)可选的SAE模块,提供记录安全、审计和电子签名信息,从而实现全方位的数据可追溯性高分辨率熔解曲线(HRM)采用内置的MeltDoctor 实验方案和校准,您可以缩短优化运行的时间,从而将更多的时间用于分析您的结果。通过方便的软件设置即可根据需要设置基因型种类的数目。仪器您仅需要提供您要检测的基因和样本;BioTNT 为您提供QPCR Array 技术服务!更高效!更快捷!BioTNT qPCR Array专为检测不同组织或细胞中特定基因的表达量而设计,这些基因按照预制或定制要求成套设置。检测结果所显示的表达差异可帮

11、助研究者鉴定或验证这些基因的生物学意义,以及与其研究的重要相关性。对于目录(预制)产 品,每块384孔板包含84对PCR引物,可以进行4个样本单孔或者两个样本双复的实验。这些引物全部经过预先验证,并包被于指定的板 孔中。在同一块96孔板上,有12个(384孔板有48个)反应孔包被了不同类型的对照,用以检测从反转录到qPCR整个过程的反应效率。逆转录试剂和以荧光染料SYBR Green为基础的BioTNT定量检测试剂作为被推荐的RT-qPCR试剂产品可与qPCR Array配套使用。该系列试剂均经过优化,具有高的灵敏度、效率和特异性。以下每个系列均有人/大鼠/小鼠三个种属,预制的500+PCR

12、Array产品。定制PCR Array可以根据客户提供的基因信息进行定制。定制更灵活方便,适应客户的要求。定制流程可以向进行咨询。定制价格为4760元/384板(84个基因及以下);1块板起订,更灵活;性价比更高!一块384板,BioTNT为您提供以下各种形式的设计:84个基因*4个样本;56个基因*6个样本;40个基因*8个样本;26个基因*12个样本;18个基因*16个样本;10个基因*24个样本的定制;定制价格为4760元/板;检测芯片服务价格为8760元/板;最低仅需:100元/基因(4个样本);而且不设最低板数!您只要有一板都可以定制噢!目录芯片价格为4360元/384板(84个基因

13、);1块板起订;检测芯片服务价格为8760元/板(您不需要再购买PCR Array板,抽提mRNA需要的高品质的提取试剂,去除DNA污染的DNAse,进行扩增的PCR Premix,特别的逆转录试剂盒);您仅需要准备好样本,然后交给Biotnt技术服务中心来为您提供专业的实验服务!中文品名系列名货号human粘附连接系列PCR ArrayPCR Array of Adherens JunctionsHU-AJ-084human脂肪细胞分化系列PCR ArrayPCR Array of AdipogenesisHU-ADI-084humanAging系列PCR ArrayPCR Array of

14、 AgingHU-AG-084human过敏与气喘系列PCR ArrayPCR Array of Allergy & AsthmaHU-AA-084human阿尔茨海默氏病系列PCR ArrayPCR Array of Alzheimers DiseaseHU-AD-084human氨基酸代谢系列PCR ArrayPCR Array of Amino Acid Metabolism IHU-AAM1-084human氨基酸代谢系列PCR ArrayPCR Array of Amino Acid Metabolism IIHU-AAM2-084humanAMPK信号通路系列PCR ArrayPC

15、R Array of AMPK SignalingHU-AMS-084human雄激素受体信号转导目标系列PCR ArrayPCR Array of Androgen Receptor Signaling TargetsHU-ARST-084human血管生成系列PCR ArrayPCR Array of AngiogenesisHU-ANG-084human血管生长因子系列PCR ArrayPCR Array of Angiogenic Growth FactorsHU-AGF-084human抗菌响应系列PCR ArrayPCR Array of Antibacterial ResponseHU-ABR-084human抗真菌响应系列PCR ArrayPCR Array

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