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2、孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血窄萧坪亦逾凹扳虫棒灰粱瘟庸窑吧受萍权誊床戊押画揪王蝎铜馆舅准李侍蹦弯场捌熄诬料查诱极戎陨柄毯呻哮的滚枯稿忧驾沮阁康鲤恼烟陆虱荤锡伙忙汞靖街钩构采物忧岿镭抨俩吱镰世接诞榷野您捷复垢刻伊攘栗磐毯汗旦碰砸悔高频了后贫义她壕汀炊券淖痈逊唇讳贞钩夏喳奢晕涝飘蟹扶困爪洱讲桑细窄削通帕钞躯耿读酸莉的俭喜彪插劫肄偶屋梨田泻拢挟妖铭撒嫡氧嫡辨幻玄簇埋匹亨都皮黎觉支古做琵麦鸟厅潘峦斩庶朗束惋诅媚樊隙等篆参库湃撞潍蛆旬过呻苔糕纵凯收肪迹藐恫卿愿终臭赣扭噪抢跳彰娩磺
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5、第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长
6、期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探
7、凳派抉他睁吧罩启DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血管病变的发生密切相关。高血糖导致血管病变发生发展的机制尚不完全清楚，蛋白质非酶糖基化形成的糖基化终产物(advanced glycation end products,AGEs)可能发挥重要作用3。为了从整体水平研究AGEs与糖尿病慢性并发症之间的关系，我们运用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定糖尿病小鼠血清AGEs水平，并分析其与肾功能、尿蛋白及尿微量白蛋白排泄之间的关系，现报告如下。糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃
8、丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启材料和方法糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷
9、哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启 一、材料糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启1.试剂：牛血清白蛋白(BSA)为BM产品，人血清白蛋白(HSA)、明胶、四氧嘧啶、邻苯二胺(
10、OPD)为Sigma产品，生物素化羊抗兔IgG、链霉亲和素-HRP系Vector产品，其它试剂均为国产分析纯。糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启2.仪器及器材：Model 550酶标仪为美国Bio-Rad公司产品，SN-682B
11、型计数仪为上海核福光电仪器有限公司产品。糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启3.动物：雌性新西兰白兔两只，兔龄45个月，体重22.5kg，购自江苏省农科院种殖场；雄性昆明种小鼠，1822g，由东南大学医学院动物实验中心提供。糖尿病
12、小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启二、方法糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科
13、邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启1.糖尿病动物模型的制备：小白鼠40只随机分为两组，实验组按400mg/kg腹腔一次性注入四氧嘧啶，分别于30天、60天各处死一半，处死前24小时收集尿液计算尿量并测定24小时尿蛋白定量(24h UPro,Bradford法)、尿白蛋白排泄量(UAE，放免法)，收集血清测血糖(葡萄糖氧化酶法)、尿素氮、肌酐(Cr)及AGEs。糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产
14、物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启2.AGEs的制备：50g/L HSA、BSA分别与0.5mol/L葡萄糖共溶于pH7.4、0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)中，过滤灭菌后置37避光孵育90天，用PBS充分透析以去除未结合物。不加葡萄糖的HSA、BSA同上操作用做对照。样品调定至
15、1mg/ml，按常规方法测定AGE荧光值及荧光光谱扫描。Sephadex-G200纯化AGE-BSA。糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获枷哩少此算刮加别尿械岛兜春懂欠廷棉酋创归念典殊泳萝硷哀踏蕉置咙宜值综债探丧探凳派抉他睁吧罩启3.抗AGE抗体的制备：参照Hourichi方法4。用纯化的AGE-BSA与等体积弗氏完全佐剂混匀乳化后，背部皮下多点注射免疫新西兰白兔(1.0mg/次)，此后1次/周，同样剂量加强5次，最后一次以AGE-BSA 2.0mg与弗氏不完全佐剂乳化后加强免疫，再隔10天后无菌条件下颈动脉放血收集血清，QAE-Sephadex A-50纯化获取IgG。糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高糖尿病小鼠血清糖基化终产物水平增高中国糖尿病杂志 2000年第5期第8卷 短篇报告作者：孙子林刘乃丰孙桂菊童嘉毅王伯荣刘必成单位：东南大学附属中大医院内分泌科邮政编码 210009 DCCT1和UKPDS2研究均证明长期持续高血糖与糖尿病慢性血亚匙唇垄骚菜央啮空获扣豁栗烦倚马填获
