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1、一、梅毒螺旋体抗体（TP-Ab）检验原理 本检测试剂采用胶体金标记技术，应用免疫层析法来检测全血、血清、血浆中的梅毒螺旋体 抗体。该试剂检测线（T）上包被梅毒螺旋体抗体重组抗原，质控线（C）包被抗鼠IgG多 克隆抗体，金标结合物伟胶体金标记的梅毒螺旋体重组抗原和胶体金标记的鼠IgG。检测时， 在试剂加样区中滴加样本，当样本中含有TP抗体浓度等于或高于最低检出限时，则TP抗 体与标记抗原蛋白反应形成复合物，在毛细效应下沿着硝酸纤维膜向前移动至检测区，被预 先包被在膜上的梅毒螺旋体重组抗原捕获，在检测区（T）内形成一条红色反应线，表示阳 性结果。当样本中含有TP抗体浓度低于最低检出限时，则在检测区
2、（T）内未形成红色的 反应线，表示阴性结果。无论TP抗体是否存在于样本中，胶体金标记的鼠IgG抗体都会在 层析作用下到达质控区（C）与预包被的鼠IgG多克隆抗体反应形成一条红色反应线。检验方法1）沿铝箔袋切口部位撕开，取出试卡平放在台面上，并做好标记。2）用吸管吸取全血、血清、血浆标本，然后垂直加入3-4滴（80ul-100u 1）于加样孔中.若样 本量少于80u1或血液粘稠爬不上膜，可在加样孔加一滴稀释液。3）10-15min观察显示结果，15min后显示的结果无效。检验结果的解释阳性：检测区及质控区均出现一条红色反应线，表示样本中含有TP抗体且含量高于或等于 最低检出限。建议确诊后积极对症
3、治疗。阴性：仅在质控区出现一条红色反应线，表示样本中TP抗体含量低于最低检出限或者含量 为零，建议有高危行为者不定期检测。无效：质控区无红色反应线出现，表示检测无效，建议此时用新试卡重测，尤其注意加样量 是否足够。二、人类免疫缺陷病毒（HIV）检验原理本品利用胶体金免疫层析技术，采用双抗体夹心法检测 HIV1/2 抗体。当待测样本中含有 HIV1/2抗体等于或高于最低检出限时，HIV1/2抗体先和金标抗原（Ag-Au）形成反应复合 物Ab- Ag-Au。由于层析作用反应复合物沿着硝酸纤维膜向前移动。当遇到检测区包被 HIV1/2重组抗原时，形成Ag-Ab- Ag-Au复合物，在检测区上最终形成
4、一条红色反应线，此 时结果为阳性；相反，当样本中不含HIV1/2抗体或者抗体浓度低于最低检出限时，则检测 区无红色反应线，此时结果为阴性。质控区包被鼠IgG多克隆抗体，与胶体金标记的鼠IgG 抗体反应形成红色反应线作为质控。检验方法1）沿铝箔袋切口部位撕开，取出试卡平放在台面上，并做好标记2）用吸管吸取血清、血浆标本，然后垂直加入3-4滴（80ul-100ul）于加样孔中.若样本量 少于80ul或血液粘稠爬不上膜，可在加样孔加一滴稀释液；若为全血标本，则用吸管吸 取标本，垂直加入2滴（约50ul）于加样孔中，同时滴加1-2滴稀释液3）10-15min观察显示结果；30min后显示的结果无临床意
5、义。检验结果的解释 阳性：两条红色反应线，检测区及质控区各出现一条红色反应线 阴性：仅在质控区出现一条红色反应线。无效：质控区无红色反应线出现，表示检测无效，建议此时用新试卡重测。三、乙肝五项检测检验原理乙肝五项检测卡 （胶体金法） 采用胶体金免疫层析技术，将五个诊断意义相关的试剂通 过一个包装组合在一起。同时进行乙型肝炎病毒五项标志物的检测，在不影响各自性能的情 况下，便于客户的储存和使用HBSAG金标试条利用双抗本夹心法原理，在玻璃纤维膜上预包被金标鼠抗HBSAg单 抗（Au-sAbl），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被鼠抗HBSAg单抗（sAb2）和羊 抗鼠1gG。检测阳性样本时
6、，样本中HBSAG与胶体金标记抗体结合形成复合物，在层析作 用下复合物沿膜带向前移动， 经过检测线时与预包被的抗体结合形成 “Au-sBb1-HBSAG-sAb2 ”夹心物而凝聚显色，游离金标抗体则在对照线处与羊抗鼠1gG结 合而富集显色。阴性样本则仅在对照线处显色。抗一 HBS 金标试条利用双抗原夹心法原理，在玻璃纤维纸上预包被金标表面抗原 （纯 化抗原）（AU SAg），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包装（纯化抗原）HBSAG 和羊抗HBSAG。检测阳性样本时，样本中的HBSAB与胶体金标记表岵面抗原结合形成复 合钩，在层析作用下复合物沿膜带向前移动，经过检测线时与预包被的表面抗原结
7、合形成 “Au-sAg-HBSAb-sAg ”夹心物而凝聚显色，游离金标抗原则在对照线处与羊抗HBSAg结合 而富集显色。阴性样本则仅在对照线处显色。HBEAG金标条利用双抗体夹心法原理，在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗HBeAg单 抗（AueAbl），在硝酸纤维素膜上的检测线和对照线处分别包被鼠抗e单抗（eAb2）和羊抗鼠 1gG。检测时，样本中的eAg可与胶体金标记抗体结合形成免疫复合物，在层析作用下复合 物沿膜带移动，经过检测线时与预包被的抗体形成 “eAb2-eAg-eAb1-Au ”夹心物而凝聚显 色；阴性样本仅在对照线处显色。抗-HBe金标试条是采用竞争法，在破璃纤维素膜上预包被e抗
8、原（大肠杆菌表达）及金 标鼠抗一 eAb2-AU，在硝酸纤维素膜上的检测线包被鼠抗e单抗（eAb1），在对照线包被羊 抗鼠IgGo检测时，样本中的eAb可与e抗原及金标抗体一 eAb2-Au结合，形成免疫复合 物，在层析作用下复合物沿膜带移动，经过检测线时，金标记的 eAb2-Au 不能与检测线结 合，则只在对照线处形成一条色带。如为阴性样本，则在检测线处形成夹心物 “eAbl-eAg-eAb2-Au 而凝聚显色。抗-HBC金标试条是采用竞争法，在玻璃纤维素膜上预包被金标记重组核心抗原（大肠 杆菌表达）（cAg），在硝酸纤维素膜上的检测线和对照线处分别包被鼠抗核心单抗（cAb1）和 羊抗重组核
9、心抗原。检测时，样本中的cAb与检测线处鼠抗cAb1竞争的结合金标记核心抗 原cAgo如果为阳性标本金标记的cAg不能与检测线处鼠抗cAb1结合，则检测线处不出现 任何可见条带，如为阴性样本，则金标记的cAg与检测线处抗cAb1结合形成一条色带，金 标记的cAg可以照线处被羊抗重组核心抗原捕获而形成一条色带，检验方法 在使用前请仔细阅读本说明书，并严格按照说明书执行，以保任测试结果的准确性。1）将待测样品从储存条件下取出，平衡至室温18 一 25“C并编号；2）将所需数量的试卡从包装盒子中取出，打开铝箔包装袋将试卡取出平放于台面，编号（与 样品相对应）3）用加样枪在试卡的五个加祥孔中分别加入6
10、0ul血清（浆），或用所配吸管在每个加样孔 中滴入三滴4）加样20分钟后最终观察并判断结果， 30分钟后试验结果无效。检验结果HBSAG、抗抗-HBS、HBEAG 阳性：在检测线及对照线各出现一条紫红色反应线。阴性：仅在对照线出现一条紫红包反应线。 无效：试卡无紫红色反应线出现，或仅在检测线出现一条反应线，表明买验失败或测试卡失 效，请用新的检测卡重新测试。如果问题仍然存在请停止使用本批产品，并与当地经 销商联系。抗-HBE、抗-HBC阳性： 1 、仅在对照线出现一条紫红色反应线。2、若对照线出现一条紫红色带，在检测非常弱的紫红色带出现，应判为弱阳性 阴性： 在检测线及对照线各出现一条紫红色反
11、应线 无效：试卡无紫红色反应线出现，或仅在检测线出现一条反应线，表明买验失败或检测卡失 效，请用新的检测卡重新测试。如果问题仍然存在请停止使用本批产品，并与当地经 销商联系。检验结果的解释 乙肝病毒五项标志物常见临床模式对照表HBsAg抗-HBsHBeAg抗HBe抗-HBc临床意义未感染乙肝病毒（HBV+窗口期、急性感染恢复期+感染过HBV,恢复期+E动免疫或感染HBV,己康覆+既往感染后,有免疫力+既往感染，急性HBV感染恢刼期+急性HBV感染、m. HBsAg携带者+急性HBV感染恢刼期，传染性弱+急性HBV感染早期，传染性强+急性或慢性乙肝活动期,传染性极强五项指标的检验结果可与乙肝常见
12、模式进行比较，若出现非常见模式的情况，原因可能 是标本溶血、病毒变异或标志物滴度过低造成，此时需对可疑指标采用酶联试剂或其它试剂 进行确认四、丙型肝炎病毒抗体检测本品采用胶体金免疫层析技术，应用间接法原理定性检测人血清（ 浆） 中 HCV 抗体。 在玻璃纤维素膜上预包被金标小鼠抗人IgG抗体（anti-IgG Ab），在硝酸纤维素膜上检测线 和对照线处分别包被重组丙肝混合抗原（Core、NS3、NS4、NS5，源自大肠杆菌）和人IgG 抗体（丙种球蛋白）。检测阳性样本时，血清样本中HCV-Ab与胶体金标记小鼠抗人IgG抗 体结合形成复台物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与预包被
13、的抗原结 合形成“Au-anti-IgG Ab - HCV Ab -HCV Ag”夹心物而凝聚显色，游离金标小鼠抗人IgG抗 体则在对照线处与人IgG抗体结合而富集显色。阴性标本则仅在对照线处显色。15分钟内 观察结果即可。检测方法1）将待测标本从储存条件下取出 平衡至室温并编号。2）将胶体金试纸条从包装盒中取出 打开铝箔包装袋，平置于台面上。3）用塑料滴管加一滴（10ul ）血清或血浆样本，加到试纸条指示箭头下端的加样处4）随机滴加两滴样本稀释液（约lOOul）5）加样后，阳性标本可在1-15分钟内检出，建议15 分钟后再最终观察并已录实验结果 检验结果的解释）阳性： 试纸卡在检测线（ T
14、） 和对照线（ c ） 位置出现两条紫红色条带。阴性： 试纸卡只在对照线（ c ） 位置出现一条紫红色条带。失效：对照线（c）未出现紫红色条带，表明不正确的操作过程或试剂盒已变质损坏。在此情 况下，应再次仔细阅读说明书，并用新的试剂重新测试。如果问题仍然存在，应立 即停止使用此批号产品，井与当地供应商联系。五、甲型肝炎病毒IgM抗体检测检验原理本试剂盒应用免疫层析式抗体捕获法原理，在硝酸纤维膜上包被抗人-IgMu链抗体和抗 鼠IgG抗体。若标本中含有HAV IgM抗体时，能与抗人-IgMu链抗体及胶体金标记HAV抗 原的复合物相结合，在反应区形成肉眼可见的两条红色反应线，反之则只在对照线位置（
15、C） 出现一条红色反应线。检验方法1）待测样本，检测试剂及其他检测用材料等均平衡至室温后，取出测试卡。2）去待测样本，按照1： 1000倍稀释，例如取待测样本4ul加入到4ml的样本稀释液中， 将稀释后的样本混合液混合均匀。3）将稀释后的样本混合液80-120ul （约2-3滴）滴于测试卡的加样孔中，20分钟观察显示 结果。 30分钟后的显示结果无临床意义。检验结果解释阳性： 在检测线（ T ） 和对照线（ c ） 位置各出现两条一条红色反应线。 阴性： 只在对照线（ c ） 位置出现一条红色反应线 无效：无红色反应线出现，或仅在检测线（ T ）位置出现一条红色反应线，。表示检测无效， 建议此时用新试卡重测。六、HBsAg （胶体金法）检验原理： 采用胶体金免疫层析技术，在玻璃纤维素膜上预包被金标鼠抗乙型肝炎病毒表面抗原单抗（Au-sAb1），在硝酸纤维素膜上检测线和对照线处分别包被鼠抗乙型肝炎病毒表面抗原 单抗（sAb2）和羊抗鼠IgG。当检测阳性血清或血浆样本时，样本中乙型肝炎病毒表面抗 原与胶体金抗体结合形成复合物，由于层析作用复合物沿纸条向前移动，经过检测线时与 包被的抗体结合
