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1、附溶液配制方法： pH7.2 0.01mol/L PBS KH2PO4 Na2HPO4 NaCl 蒸馏水加至pH7.4 PBS/T NaCl KH2PO4Na2HPO412H2O(或 Na2HPO47H2O) KCl 吐温20 蒸馏水加至pH9.6 碳酸盐缓冲液 Na2CO3NaHCO30.38g1.02g(或 Na2HPO412H2O2.58g)8.0g1000mL8.0g0.2g2.89g (或 2.16g)0.2g0.5mL1000mL1.59g2.93g 蒸馏水加至1000mL0.075mol/L 氯化钾低渗液氯化钾0.559g，蒸馏水100ml甲醇冰醋酸( 3:1)固定液 甲醇 3
2、份冰醋(乙)酸 1 份姬姆萨染液Giemsa 原液 1ml1/15mol/L 磷酸缓冲液(pH6.8 或 7.4) 10ml2.3% 柠檬酸钠溶液柠檬酸钠(Na C H O2H O) 2.3g 蒸馏水 100ml明胶显影液明胶粉 0.2g三蒸水 10ml甲酸 0.1ml1% 醋酸冰醋(乙)酸 1ml蒸馏水 99mlHo33342-若丹明123染液Ho33342 (Hoechst 33342) 0.25聘若丹明 123 (Rhodamine 123) l.Oyg PBS 1mlDPH 贮备液DPH( 1.6-Dipnenyl-1,3, 5hexatriene, 4.65mg)四氢呋喃 10mlD
3、PH 工作液(2x10-6nol/L)DPH 贮备液 0.1mlPBS 100mlFDA 贮备液二醋酸脂荧光素(Fl uorescein diacetate,FDA) 5.0mg 丙酮 1mlFDA 工作液FDA 贮备液 0.1mlPBS 100mlM-缓冲液(pH7.2)咪唑 50mmol/L 3.404g氯化钾 50mmol/L 3.7g氯化镁(MgCl 6H O)0.5mol/L 101.65mgEGTA (乙二醇双(a-氨基乙基)醚四乙酸)1mmol/L 380.35mgEDTA (乙二胺四乙酸)0.1mmol/L 29.22mg疏基乙醇 1mmol 0.07ml4mol/L 甘油 2
4、92ml蒸馏水 加至 1000ml1% TritonX-100 液Triton X-100 (聚乙二醇辛基苯基醚)1mlM-缓冲液99ml 3% 戊二醛液戊二醛25% 3mlPBS 液(pH7.2) 97ml 0.2%考马斯亮蓝R250染液考马斯亮蓝 R250（Coomassie brilliant blue R250） 0.2g 甲醇 46.5ml冰醋（乙）酸 7ml蒸馏水 46.5ml生理盐水（0.85%氯化钠）氯化钠 8.5g三蒸水 1000ml0.25mol/L 蔗糖水溶液(含 0.003mol/L 氯华钙) 蔗糖 85.5g无水氯华钙 0.33g蒸馏水 1000ml0.17mol/L
5、 氯化铵液氯化铵 4.574g蒸馏水 500ml0.17mol/L 硝酸钠液 硝酸钠 7.224g 蒸馏水 500ml0.12mol/L 硫酸钠液硫酸钠(Na SO H O)19.333g蒸馏水 500ml0.12mol/L 草酸铵液草酸铵(NH ) C o H O)8.527g蒸馏水 500ml0.17mol/L 醋酸铵液醋酸铵 6.552g蒸馏水 500ml0.32mol/L 葡萄糖液葡萄糖 28.83g蒸馏水 500ml0.32mol/L 甘油液甘油(C H (OH) 1.26g/ml) 11.7ml蒸馏水 500ml0.32mol/L 乙醇液无水乙醇 9.33ml蒸馏水 500ml0.
6、32mol/L 丙醇液正丙醇(比重 0.803) 11.976ml蒸馏水 500ml化学名：2-4-(2-Hydroxyethyl)-1-piperazinylethanesulfonic acid 中文名：羟乙基哌嗪乙硫磺酸分子式： C8H18N2O4SHEPES是一种非离子两性缓冲液，其在pH 7.2 - 7.4范围内具有较好的缓冲能 力。其最大优点是在开放式培养或细胞观察时能维持较恒定的PH值在这种培 养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气 中大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈 深红色.HEPES有些昂贵,在高浓度时对
7、一些细胞可能有毒.原则上,HEPES作 为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐，以解除需要高浓度CO2培养环境的限制实际操 作中并非如此简单.溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长也是很重要的。HEPES 使用方法有两种：（1）HEPES 可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每 1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用IN NaOH调pH至7.2，滤过除 菌后使用此时HEPES的使用浓度为10 mmoI/L.（2）亦可配成100 x贮存液（l mol/L），使用前取99ml培养液加入lml贮 存液，最终应用浓度仍为 10mmol/L。 l mol/L（100 x） HEPES 贮存液配制方法: 取23.8g HEPES溶于90ml双蒸水中，用lN NaOH调pH至7.5 一 8.0,然后用水 定容至100ml,过滤除菌，分装小瓶（2ml/瓶），4C或-20C保存.
